本發明涉及一種高效解酒護肝的組合物。尤其涉及顯齒蛇葡萄葉、枳椇子、玉米低聚肽粉和阿薩伊果速溶粉的配伍組合物及其制備方法和應用。

技術背景

少量飲酒能活血、通絡、散寒，過量飲酒則會產生“酒精中毒”(俗稱醉酒)。醫學上將酒精中毒分為急性酒精中毒和慢性酒精中毒兩種。其中，急性酒精中毒是指過量飲酒后，在較短時間給患者帶來惡心、嘔吐、頭暈、譫語、躁動、昏迷、大小便失禁、呼吸抑制甚至死亡的臨床癥狀；慢性酒精中毒指由于長期過量飲酒，進入人體的乙醇不能被消化吸收，隨血液進入大腦，破壞神經元細胞膜，削弱中樞神經系統，并通過激活抑制性神經原和抑制激活性神經原造成大腦活動遲緩、神經細胞壞死、嚴重者造成酒精性肝硬化和某些癌癥(如口腔癌、舌癌、肝癌)。近年來，我國酒精消費群體與日俱增，已成為社會不安定因素而備受關注。目前，市場出現的解酒產品多以化學藥品、中成藥制劑為主，在解酒的同時，會不同程度加重肝臟、腎臟代謝負擔而產生不同程度的傷害。

顯齒蛇葡萄葉為國家衛計委(原衛生部)批準的新資源食品(公告號：2013年第16號)；玉米低聚肽粉為國家衛計委(原衛生部)批準的新資源食品(公告號：2010年第15號)；阿薩伊果為國家衛計委(原衛生部)批準的新資源食品(公告號：2013年第1號)。枳椇子作為傳統藥食同源藥材，其解酒功能始載于我國《千金方》、《本草綱目》等醫學巨著。現代藥學、藥理學、藥效學、臨床醫學對枳椇子解酒作用的研究文獻較多，作為解酒原料開發上市的產品也屢見不鮮。

“一種具有解酒、護肝功效的保健食品(專利授權公告號：cn101731630b)”公開了一種具有解酒、護肝功效的保健食品，該保健食品重量百分比包括以下組分：玉米低聚肽粉1.0％～100.0％、牛磺酸0.0％～40.0％、丙氨酸0.0％～30.0％、半胱氨酸0.0～50.0％、亮氨酸0.0％～30.0％、谷胱甘肽0.0％～30.0％、枳椇子提取物0.0％～30.0％、糙米胚芽0.0％～30.0％、葛根提取物0.0％～30.0％、輔料0.0％～95.5％。

本發明旨在采用新資源食品原料顯齒蛇葡萄葉、玉米低聚肽粉、阿薩伊果與傳統藥食同源物質枳椇子組方，通過本發明特定比例、特定工藝及特定質量控制技術方案，制備高效解酒護肝組合物，為研究開發解酒護肝藥品、保健食品、功能性普通食品、特殊醫學用食品、特殊膳食食品提供組合原料或制劑。

技術實現要素：

本發明的第一目的在于提供一種高效解酒護肝組合物及其制備方法。第二目的在于提供該組合物的應用。

本發明的第一目的是采用以下技術方案來實現的：

首先，本發明提供一種高效解酒護肝組合物，所述組合物以重量份數280～390份的脫水顯齒蛇葡萄葉、重量份數210～580份的枳椇子、重量份數140～300份的玉米低聚肽粉和重量份數90～130份的阿薩伊果速溶粉組成。

優選地，所述組合物以重量份數300～390份的脫水顯齒蛇葡萄葉、重量份數240～500份的枳椇子、重量份數140～250份的玉米低聚肽粉和重量份數100～130份的阿薩伊果速溶粉組成。

進一步優選，所述組合物以重量份數350～390份的脫水顯齒蛇葡萄葉、重量份數250～350份的枳椇子、重量份數160～200份的玉米低聚肽粉和重量份數110～130份的阿薩伊果速溶粉組成。

最優選，所述組合物以重量份數370～380份的脫水顯齒蛇葡萄葉、重量份數305～315份的枳椇子、重量份數185～195份的玉米低聚肽粉和重量份數120～130份的阿薩伊果速溶粉組成。

首先，本發明所述組合物中，脫水顯齒蛇葡萄葉系采用超聲法進行提取。具體為：將脫水顯齒蛇葡萄葉粉碎過24目篩，按液料比(v/m)30:1加入70％的乙醇浸泡30min后進行超聲提取3次，每次20min，收集提取液經減壓濃縮、干燥、粉碎過80目篩得提取物。提取物中總黃酮質量百分含量≥35％，二氫楊梅素質量百分含量25～32％。其中，二氫楊梅素質量百分含量優選為26～31％，再優選為27～30％，最優選為28～29％。

其次，本發明所述組合物中，枳椇子系采用乙醇熱回流法進行提取。具體為：將枳椇子粉碎過24目篩，按料液比(m/v)1:8加入70％乙醇，于80℃熱回流提取1.5h。連續提取3次，合并提取液，減壓濃縮至干，于105℃干燥3h，冷卻至室溫，粉碎過80目篩得提取物。提取物中總黃酮含量≥8％。

再其次，本發明組合物所述的阿薩伊果速溶粉，系將阿薩伊果鮮果洗凈，挑選出劣質果，打漿，過濾除渣，濾液濃縮至相對密度1.20(20℃)，濃縮濾液按質量百分比(m/m)為85～90％:10～15％添加木糖醇、羧甲基纖維素、甲基纖維素、聚維酮k30中的一種或幾種，混合、干燥、粉碎過80-100目篩制成。其中，濃縮濾液與輔料質量百分比(m/m)為85～90％:10～15％，優選為86～89％：11～14％，最優選為87～88％：12～13％。

最后，本發明組合物所述的玉米低聚肽粉，系采用食品級或藥品級原料。

按本發明所述重量份數稱取脫水顯齒蛇葡萄葉、枳椇子，按上述方法制備提取物。將所得提取物轉移至干燥潔凈容器，按本發明所述重量份數添加上述阿薩伊果速溶粉、玉米低聚肽粉，充分攪拌使混合均勻，即得本發明所述組合物。

本發明的第二目的是采用下述技術方案實現的：

首先，本發明所述組合物，具有解酒、保肝、護肝功能/功效，可應用于藥品、保健食品、功能性普通食品、特殊醫學食品、特殊膳食食品研究開發。

其次，本發明所述組合物，根據需要可添加或不添加藥品、保健食品、功能性普通食品、特殊醫學食品、特殊膳食食品可接受的輔料，進一步制成粉劑、顆粒劑、片劑、硬膠囊劑、滴丸等固體口服制劑。

具體實施方式

下面通過具體實施例對本發明作進一步說明，但不以任何方式對本發明加以限制，基于本發明教導所作的任何變化或替換，均屬本發明保護范圍。

實施例1：顯齒蛇葡萄葉提取物的制備

將脫水顯齒蛇葡萄葉粉碎過24目篩。稱取粗粉5.8kg，按液料比(v/m)30:1加入70％乙醇浸泡30min后，超聲提取3次，每次20min，收集提取液經減壓濃縮、干燥、粉碎過80目篩得提取物2000g。經檢測：提取物總黃酮質量百分含量為36.2％，二氫楊梅素質量百分含量為28.2％。

實施例2：枳椇子提取物的制備

將枳椇子粉碎過24目篩。稱取粗粉16.5kg，按料液比(m/v)1:8加入70％乙醇，于80℃熱回流提取3次，每次1.5h。合并3次提取液，減壓濃縮至干，于105℃干燥3h，冷卻至室溫，粉碎過80目篩得提取物1600g。經檢測：提取物總黃酮質量百分含量為8.3％。

實施例3：阿薩伊果速溶粉的制備

將阿薩伊果鮮果洗凈，挑出劣質果。稱取優質鮮果4100g置于打漿機中打漿，過濾除渣，濾液濃縮至相對密度1.20(20℃)。濃縮濾液按質量百分比(m/m)88％:12％添加木糖醇、甲基纖維素，充分攪拌混合、干燥、粉碎過80目篩，得阿薩伊果速溶粉1200g。

實施例4：玉米低聚肽粉的準備

直接購置食品級玉米低聚肽粉1100g。

實施例5：組合物制備1

稱取實施例1制備的顯齒蛇葡萄葉提取物9.8g、實施例2制備的枳椇子提取物2.2g、實施例3制備的阿薩伊果速溶粉9g、實施例4準備的玉米低聚肽粉14g。將上述顯齒蛇葡萄葉提取物、枳椇子提取物、阿薩伊果速溶粉、玉米低聚肽粉置于干燥潔凈的容器中，充分攪拌使混合均勻，過80目篩，得組合物33g。

實施例6：組合物制備2

稱取實施例1制備的顯齒蛇葡萄葉提取物11.2g、實施例2制備的枳椇子提取物2.5g、實施例3制備的阿薩伊果速溶粉10g、實施例4準備的玉米低聚肽粉15g。將上述顯齒蛇葡萄葉提取物、枳椇子提取物、阿薩伊果速溶粉、玉米低聚肽粉置于干燥潔凈的容器中，充分攪拌使混合均勻，過80目篩，得組合物37g。

實施例7：組合物制備3

稱取實施例1制備的顯齒蛇葡萄葉提取物1395g、實施例2制備的枳椇子提取物1138g、實施例3制備的阿薩伊果速溶粉441g、實施例4準備的玉米低聚肽粉698g。將上述顯齒蛇葡萄葉提取物、枳椇子提取物、阿薩伊果速溶粉、玉米低聚肽粉置于干燥潔凈的容器中，充分攪拌使混合均勻，過80目篩，得組合物3670g。

實施例8：組合物制備4

稱取實施例1制備的顯齒蛇葡萄葉提取物12.3g、實施例2制備的枳椇子提取物2.8g、實施例3制備的阿薩伊果速溶粉11g、實施例4準備的玉米低聚肽粉16g。將上述顯齒蛇葡萄葉提取物、枳椇子提取物、阿薩伊果速溶粉、玉米低聚肽粉置于干燥潔凈的容器中，充分攪拌使混合均勻，過80目篩，得組合物40.5g。

實施例9：粉劑的制備

稱取實施例7制備的組合物1000g置干壓機內，調節適合的滾筒壓力干壓、過篩、包裝成8克/袋，即得具有解酒護肝活性的粉劑。

實施例10：顆粒劑的制備

稱取實施例7制備的組合物900g,添加糖粉、糊精、乳糖、甘露醇等輔料適量，經制粒、干燥、包裝，即得具有解酒護肝活性的顆粒劑。

實施例11：片劑的制備

稱取實施例7制備的組合物400g,添加淀粉、糖粉、β-環糊精、聚維酮等輔料適量，經混合、制粒、壓片、包裝，即得具有解酒護肝活性的片劑。

實施例12：硬膠囊劑的制備

稱取實施例7制備的組合物350g,添加蔗糖、乳糖、微晶纖維素、二氧化硅、硬脂酸鎂等輔料適量，經混合、制粒、充填、包裝，即得具有解酒護肝活性的硬膠囊。

實施例13：滴丸劑的制備

稱取實施例7制備的組合物600g，添加peg6000適量,經混合、制丸、冷卻、洗丸、干燥，即得具有解酒護肝活性的滴丸。

為了更進一步對本發明組合物技術效果進行說明，本發明選取實施例1制備的顯齒蛇葡萄葉提取物、實施例2制備的枳椇子提取物、實施例3制備的阿薩伊果速溶粉、實施例4準備的玉米低聚肽粉以及四者非本發明組合比例按實施例7的制備方法制備的組合物(由顯齒蛇葡萄葉提取物140g、枳椇子提取物20g、阿薩伊果速溶粉160g、玉米低聚肽粉100g混合制成)作為對照樣品，編號為①、②、③、④、⑤；選取實施例7制備的組合物作為試驗樣品，編號為⑥，開展對急性酒精中毒大鼠血液中乙醇濃度的影響、對小鼠酒后體內乙醇脫氫酶活性影響、對大鼠酒精性肝損傷的保護作用試驗。具體如下：

1、對急性酒精中毒大鼠血液中乙醇濃度的影響試驗

試驗動物及器材：昆明種雄性健康大鼠(200±20g)；52°紅星二鍋頭白酒(北京紅星釀酒廠)；生理鹽水；酒精干片試劑；全自動生化檢測儀。

給樣劑量：本發明所述組合物(試驗樣品⑥)60kg成年人給樣劑量確定為7.6g/天，據此折算每天大鼠給樣劑量為0.798g/kgbw。依據等劑量給樣可比原則確定對照樣品⑤每天大鼠給樣劑量為0.798g/kgbw。依據等劑量給樣可比原則，結合國家藥典或相關行業標準推薦的顯齒蛇葡萄葉提取物、枳椇子提取物、阿薩伊果速溶粉最高日推薦劑量確定對照樣品①～③每天大鼠給樣劑量均為0.798g/kgbw，樣品④每天大鼠給樣劑量為0.473g/kgbw。

試驗方案設計：選取昆明種雄性大鼠70只，正常情況下喂養一周后隨機選取10只作為模型組，其余隨機分為樣品①～⑥組，每組10只。禁食12小時，空腹眼眶靜脈叢取血。樣品①～⑥組按給樣量給樣，模型對照組給予等量生理鹽水，給藥半小時后按0.015ml/g量的白酒同時給7組大鼠灌胃處理，每組均抽取眼眶靜脈血待測，分別在灌酒后1小時、2小時、3小時、4小時準時取血，測定血中酒精濃度。(酒精濃度采用酒精干片試劑進行測定。儀器為美國柯達公司vttros250干化學全自動生化分析儀。)結果均用統計學處理，采用t檢驗。結果見表1。

表1各樣品對大鼠血液中乙醇濃度的影響試驗結果(單位mmol/ml)(n＝10)

(樣品⑥相較于模型對照組及樣品①～⑤各組，其血液乙醇濃度p值均小于0.01，具有高度的統計學意義)

試驗結論：從表1可以看出，酒后4h內，樣品⑥相較于模型對照組及樣品①～⑤各組，其血液乙醇濃度p值均小于0.01，具有高度的統計學意義，說明本發明所述的組合物(樣品⑥)對大鼠血液中的乙醇有顯著的降解作用。

2、對小鼠酒后體內乙醇脫氫酶活性影響試驗

試驗動物及器材：昆明種健康雄性小鼠(20±2g)；生理鹽水；電子天平、uv752n紫外可見分光光度計、離心機、離心管。

給樣劑量：本發明所述組合物(試驗樣品⑥)60kg成年人給樣劑量確定為7.6g/天，據此折算每天小鼠給樣劑量為0.988g/kgbw。依據等劑量給樣可比原則確定對照樣品⑤每天小鼠給樣劑量為0.988g/kgbw。依據等劑量給樣可比原則，結合國家藥典或相關行業標準推薦的顯齒蛇葡萄葉提取物、枳椇子提取物、阿薩伊果速溶粉最高日推薦劑量確定對照樣品①～③小鼠每天給樣劑量均為0.988g/kgbw，樣品④小鼠每天給樣劑量為0.585g/kgbw。

試驗方案設計：選取健康昆明種雄性小鼠80只,自由進食、進水喂養一周后，隨機分為空白對照、模型對照、樣品①～⑥組共計8組，每組各10只。樣品組每日按規定劑量灌胃給予對應樣品、空白對照組和模型組每日給予等量0.9％生理鹽水喂養，連續喂養四周，于四周末次給樣30min后，一次性給予模型組和樣品組50％乙醇(12ml/kgbw)，空白對照組給等量0.9％生理鹽水。分別在灌酒后0.5h、1h、2h和3h取左肝葉邊緣肝臟組織，大小為2mm×2mm×2mm(空白對照組小鼠只摘取肝臟組織)。用生理鹽水沖洗取出的肝臟，濾紙吸凈后稱重，在冰浴中用玻璃勻漿器制備勻漿，3000r/min低溫離心5min，上清液備檢測。在1cm比色杯內加0.0021mol/l的nad2.8ml，空白管加蒸餾水0.2ml，樣品管加0.3mol/l乙醇和上清液各0.1ml，混勻后于340nm測上述各管吸光度，觀測其5min內變化率△a/min。

adh活性計算：

式中，e為摩爾消光系數，e＝6.22×10³；l為比色杯厚度；3.1為反應液總體積/ml；0.1為加入反應體系的adh提取液體積；m為肝質量；v為勻漿體積。

試驗結果如表2所示：

表2不同組急性酒精中毒小鼠肝中乙醇脫氫酶活性(單位：u·g-1)(n＝10)

試驗結論：表2看出，酒后3h內，與空白組比較，模型組肝中adh活性升高(p<0.05)；與模型組比較，樣品⑤和樣品⑥組肝中adh活性升高(p<0.01)、樣品①和樣品④樣品組肝中adh活性也有所升高(p<0.05)、樣品②和樣品③中組肝中adh活性也有所升高，但無顯著差異(p＞0.05)；樣品⑥相較于樣品⑤組肝中adh活性升高(p＜0.05)。說明，本發明所述組合物(樣品6)對小鼠肝臟中adh活性不僅有較好的增強作用，而且還有良好的持續增強作用。

3、對大鼠酒精性肝損傷的保護作用

試驗動物及器材：昆明種雄性健康大鼠(200±20g)；52°紅星二鍋頭白酒(北京紅星釀酒廠)；生理鹽水；分光光度計、離心機、離心管、組織勻漿器。

給樣劑量：本發明所述組合物(試驗樣品⑥)60kg成年人給樣劑量確定為7.6g/天，據此折算每天大鼠給樣劑量為0.798g/kgbw。依據等劑量給樣可比原則確定對照樣品⑤每天大鼠給樣劑量為0.798g/kgbw。依據等劑量給樣可比原則，結合國家藥典或相關行業標準推薦的顯齒蛇葡萄葉提取物、枳椇子提取物、阿薩伊果速溶粉最高日推薦劑量確定對照樣品①～③每天大鼠給樣劑量均為0.788g/kgbw，樣品④每天大鼠給樣劑量為0.473g/kgbw。

試驗方案設計：選取健康昆明種雌性大鼠80只,自由進食、進水喂養一周后，隨機分為空白對照、模型對照、樣品①～⑥組共計8組，每組各10只。樣品組每日按規定劑量灌胃給予對應樣品、空白對照組和模型組每日給予等量0.9％生理鹽水喂養，連續喂養四周，于四周末次給樣30min后，一次性給予模型組和樣品組50％乙醇(12ml/kgbw)，空白對照組給等量0.9％生理鹽水，禁食不禁水16h將小鼠處死，解刨取出完整肝臟，預冷生理鹽水清洗至洗液無血色后，吸干肝臟表面水分。剪取0.1g肝臟組織置于小燒杯中，準備9倍于肝臟重量的生理鹽水，轉移總量2/3的生理鹽水于燒杯中，盡快剪碎肝臟，倒入玻璃勻漿器，剩下的1/3沖洗后一起倒入進行勻漿，制成10％的組織勻漿，于離心機中以2000r/min離心15min,取上清液檢測gsh、mda和tg等指標。結果見表3。

表3各樣品對肝勻漿中各指標的影響(單位μmol/g肝)(n＝10)

試驗結論：從表3可知，肝損傷模型對照組小鼠與空白對照組比較：mda含量明顯升高(p<0.01)、gsh含量明顯降低(p<0.01)、tg含量明顯升高(p<0.01)，說明肝損傷模型成立；樣品⑥組較模型對照組及樣品①～④組mda含量明顯降低(p<0.01)、gsh含量明顯升高(p<0.01)、tg含量明顯降低(p<0.o1)，樣品⑤組較樣品⑥組mda含量升高(p<0.05)、gsh含量降低(p<0.05)、tg含量升高(p<0.o5)。說明本發明所述的組合物(樣品⑥)能有效地阻止酒精導致的肝臟gsh耗竭和mda升高，降低tg含量，具有較好的預防和治療乙醇性肝損傷功效。