本公開涉及用于核酸治療的脂質納米顆粒(lnp)組合物或制劑。

背景技術：

1、幾十年來，基于小分子和蛋白質的藥物或治療已經被使用。近年來，基于核酸的治療正在成為一類有前景的藥物。這些藥物包含一段脫氧核糖核酸(dna)或核糖核酸(rna)。由于缺乏合適的核酸遞送載體，將核酸遞送至靶細胞一直是一個挑戰。病毒載體已被用于此目的，但對這些載體及其轉基因產物的先天性和適應性免疫反應對其更廣泛的用途構成了重大障礙(shirley,jamie?l.等人molecular?therapy(2020)28:709-722)。

2、近年來，脂質納米顆粒(lnp)作為核酸治療的遞送媒介物已受到了很多關注。patisiran是第一個fda批準的封裝在脂質納米顆粒中的短干擾rna(sirna)治療劑(kulkarni,jayesh?a.等人nature?nanotechnology(2021)16:630-643)。脂質納米顆粒在將基于核酸的治療劑遞送至靶細胞方面具有巨大的前景。至少兩種基于信使rna(mrna)的針對covid-19疾病的疫苗已經被商業化，所述疫苗使用脂質納米顆粒作為遞送媒介物，并且它們中的幾種正處于臨床試驗的不同階段(vu,mai?n.等人ebiomedicine(2021)74:103699)。

3、moderna商業化的mrna疫苗在-20℃下運輸和遞送，而來自pfizer的mrna疫苗在-70℃下運輸和遞送(fahrni,m.l.等人journalof?pharmaceutical?policy?and?practice(2022)15:16)。

4、在衛生緊急情況中，可能無法在不同地區成功大量施用此類產品，因為這些基于脂質納米顆粒的核酸治療劑必須在冷凍溫度下儲存，這給許多國家，特別是發展中國家在儲存、運輸和最后一英里遞送方面帶來了問題，因為缺乏可用冷鏈設施。

5、wo2022101469描述了一種凍干制劑，其包含蔗糖和/或海藻糖作為脂質納米顆粒制劑的附加組分以改善穩定性。然而，凍干制劑在施用前需要額外的復溶步驟，并且可能容易出現用藥錯誤(lee,young?hwa等人vaccines(basel)(2021)9(2):117)。

6、因此，需要新的脂質納米顆粒組合物用于基于核酸的治療。

技術實現思路

1、因此，本公開涉及一種脂質納米顆粒組合物，所述脂質納米顆粒組合物包含核酸、可離子化聚合物、陽離子脂質、磷脂、固醇和peg-脂質。

2、本公開通常涉及一種脂質納米顆粒組合物，所述脂質納米顆粒組合物包含核酸、可離子化聚合物、可離子化脂質、磷脂、固醇和peg-脂質。在一些實施方案中，核酸是dna、rna或其組合。rna可以是信使rna(mrna)、非編碼rna(ncrna)或其組合。非編碼rna(ncrna)可以是長非編碼rna(lncrna)、微小rna(mirna)、小干擾rna(sirna)、小核仁rna(snorna)、小核rna(snrna)、piwi相互作用rna(pirna)、轉移rna(trna)或核糖體rna(rrna)或其組合。

3、在一些實施方案中，可離子化聚合物以1mol百分比至25mol百分比的量存在?？呻x子化聚合物可包括生物相容性聚合物?？呻x子化聚合物可以是殼聚糖、纖維素衍生物、聚-l-賴氨酸、聚-l-谷氨酸，和/或它們的衍生物或其組合。殼聚糖、殼聚糖衍生物或其組合可以1mol百分比至25mol百分比的量存在。在一些實施方案中，纖維素衍生物以1mol百分比至25mol百分比的量存在。在一些實施方案中，殼聚糖或其衍生物或它們的組合以1mol百分比至25mol百分比、1mol百分比至20mol百分比或1mol百分比至15mol百分比的量存在。

4、在一些實施方案中，陽離子脂質以25mol百分比至50mol百分比的量存在。陽離子脂質可選自n,n-二油基-n,n二甲基氯化銨(dodac)；n-(2,3-二油基氧基)丙基)-n,n,n三甲基氯化銨(dotma)；n,n-二硬脂基-n,n-二甲基溴化銨(ddab)；n-(2,3二油?；趸?丙基)-n,n,n-三甲基氯化銨(dotap)；3-(n-(n',n'二甲基氨基乙烷)-氨基甲?；?膽固醇(dc-chol)、n-(1-(2,3-二油?；趸?丙基)n-2-(精胺甲酰胺基)乙基)-n,n-二甲基三氟乙酸銨(dospa)、雙十八烷基酰胺基甘氨?；然?dogs)、1,2-二油?；?3-二甲基銨丙烷(dodap)、n,n-二甲基-2,3-二油?；趸?丙胺(dodma)、n-(1,2-二肉豆蔻基氧基丙-3-基)-n,n-二甲基-n-羥乙基溴化銨(dmrie)、1,2-二亞油基氧基-n,n-二甲基氨基丙烷(dlin-dma)、3-二甲基氨基-2-(膽甾-5-烯-3-β-氧丁烷-4-氧基)-1-(順式,順式-9,12-十八碳二烯氧基)丙烷(clin-dma)、2-[5'-(膽甾-5-烯-3-β-氧基)-3'-氧雜戊氧基)-3-二甲基-1-(順式,順式-9',12'-十八碳二烯氧基)丙烷(cplin-dma)、2,3-二亞油?；趸?n,n-二甲基丙胺(dlin-dap)、1,2-n,n'-二亞油基氨基甲?；?3-二甲基氨基丙烷(dlincarb-dap)、1,2-二亞油?；被柞；?3-二甲基氨基丙烷(dlin-cdap)、2,2-二亞油基-4-二甲基氨基甲基-[1,3]-二氧戊環(dlin-k-dma)、4-(二甲基氨基)丁酸三十七烷-6,9,28,31-四烯-19-基酯(dlin-mc3-dma)、8-[2-羥乙基-(6-氧代-6-十一烷氧基己基)氨基]辛酸十七烷-9-基酯(sm-102)、2-己基癸酸6-[6-(2-己基癸?；趸?己基-(4-羥丁基)氨基]己酯(alc-0315)和8-[(8-十七烷-9-基氧基-8-氧代辛基)-(2-羥乙基)氨基]辛酸壬酯(slp-0001)。

5、在一些實施方案中，陽離子脂質包括可離子化脂質?？呻x子化脂質可以25mol百分比至50mol百分比的量存在。

6、在一些實施方案中，磷脂以2mol百分比至約20mol百分比的量存在。磷脂可選自1,2-二亞油?；?sn-甘油-3-磷酸膽堿(dlpc)、1,2-二肉豆蔻?；?sn-甘油-磷酸膽堿(dmpc)、1,2-二油?；?sn-甘油-3-磷酸膽堿(dopc)、1,2-二棕櫚?；?sn-甘油-3-磷酸膽堿(dppc)、1,2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸膽堿(dspc)、1,2-雙十一?；?sn-甘油-磷酸膽堿(dupc)、1-棕櫚酰基-2-油?；?sn-甘油-3-磷酸膽堿(popc)、1,2-二-o-十八烯基-sn-甘油-3-磷酸膽堿(18:0二醚pc)、1-油?；?2-膽固醇基半琥珀?；?sn-甘油-3-磷酸膽堿(ochemspc)、1-十六烷基-sn-甘油-3-磷酸膽堿(c16?lyso?pc)、1,2-二亞麻?；?sn-甘油-3-磷酸膽堿、1,2-二花生四烯?；?sn-甘油-3-磷酸膽堿、1,2-雙二十二碳六烯酸?；?sn-甘油-3-磷酸膽堿、1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(dope)、1,2-二植?；?sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(me?16.0pe)、1,2-二硬脂?；?sn-甘油-3-磷酸乙醇胺、1,2-二亞油酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺、1,2-二亞麻?；?sn-甘油-3-磷酸乙醇胺、1,2-二花生四烯?；?sn-甘油-3-磷酸乙醇胺、1,2-雙二十二碳六烯酸?；?sn-甘油-3-磷酸乙醇胺、1,2-二油?；?sn-甘油-3-磷酸-rac-(1-甘油)鈉鹽(dopg)、1-肉豆蔻酰基-2-硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸膽堿(mspc)、1-棕櫚酰基-2-肉豆蔻酰基-sn-甘油-3-磷酸膽堿(pmpc)、1-棕櫚?；?2-硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸膽堿(pspc)、1-硬脂?；?2-肉豆蔻?；?sn-甘油-3-磷酸膽堿(smpc)、1-硬脂酰基-2-棕櫚?；?sn-甘油-3-磷酸膽堿(sppc)、1-硬脂酰基-2-油?；?sn-甘油-3-磷酸膽堿(sopc)、1-硬脂酰基-2-二十二碳六烯酸酰基-sn-甘油-3-磷酸膽堿(sdpc)、鞘磷脂及其組合。

7、在一些實施方案中，固醇以30mol百分比至約65mol百分比的量存在。固醇可以是膽固醇、谷固醇、糞固醇、麥角固醇、菜油固醇、豆固醇、5α-膽固烷醇、5β-糞固烷醇、膽固醇基-(2'-羥基)-乙醚、膽固醇基-(4'-羥基)-丁醚、6-酮膽固烷醇、5α-膽固烷、膽固烯酮、5α-膽固烷酮、5β-膽固烷酮、癸酸膽固醇酯或其衍生物。

8、在一些實施方案中，peg-脂質以0.2mol百分比至約2.0mol百分比的量存在。peg-脂質可以是mpeg-二肉豆蔻?；视?mpeg-dmg)、mpeg-n,n-雙十四烷基乙酰胺(mpeg-dta或alc0159)、mpeg-膽固醇(mpeg-cls)、mpeg-dspe、mpeg-dmpe、mpeg-dppe、mpeg-dlpe、mpeg-dope、mpeg-dppc、mpeg-dspc、1,2-二硬脂?；?sn-甘油-3-磷酸乙醇胺與綴合的甲氧基聚(乙二醇)(mpeg-dspe)、1,2-二肉豆蔻?；?rac-甘油-3-甲氧基聚乙二醇-2000(dmg-peg?2000)或其混合物。

9、在一些實施方案中，核酸編碼抗原多肽?？乖嚯目裳苌詡魅驹?，諸如病毒株或細菌株。

10、在一些實施方案中，核酸調節或調制細胞功能。

11、在一些實施方案中，核酸包含至少一種化學修飾。

12、在一些方面，本文提供了一種核酸疫苗或治療劑，所述核酸疫苗或治療劑包含本文描述的脂質納米顆粒組合物。

13、在一些方面，本文提供了一種治療或預防疾病的方法，所述方法包括向有需要的受試者施用本文描述的脂質納米顆粒組合物或本文描述的核酸疫苗或治療劑。在一些實施方案中，所述疾病是癌癥、傳染病或通過體液和/或細胞免疫反應改善的疾病和/或病癥。

14、在一些方面，本文提供了一種制備本文描述的脂質納米顆粒組合物的方法，所述方法包括混合包含核酸和可離子化聚合物的水相與包含陽離子脂質、磷脂、固醇和peg-脂質的有機相。