具有昆蟲(chóng)拒食活性和生長(zhǎng)抑制活性的化合物及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于醫(yī)藥【技術(shù)領(lǐng)域】，公開(kāi)了從植物肉桂中分離提取的多種瑞諾烷二萜類化合物的活性及結(jié)構(gòu)，提供了新瑞諾烷二萜化合物的分離制備方法。本發(fā)明揭示了該類化合物具有免疫抑制活性、昆蟲(chóng)拒食活性和生長(zhǎng)抑制活性，其中具有免疫抑制活性的化合物表現(xiàn)為對(duì)ConA誘導(dǎo)的T細(xì)胞增殖有顯著抑制作用，昆蟲(chóng)拒食活性和生長(zhǎng)抑制活性表現(xiàn)為對(duì)甜菜夜蛾幼蟲(chóng)有拒食活性、對(duì)棉鈴蟲(chóng)幼蟲(chóng)有拒食活性和對(duì)棉鈴蟲(chóng)幼蟲(chóng)有生長(zhǎng)抑制作用。這些化合物可用于制備免疫抑制、對(duì)昆蟲(chóng)有拒食活性和生長(zhǎng)抑制活性的藥物。
【專利說(shuō)明】具有昆蟲(chóng)拒食活性和生長(zhǎng)抑制活性的化合物及其制備方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)藥【技術(shù)領(lǐng)域】，涉及瑞諾烷二萜化合物1-11的分離制備方法及用途。 具體涉及分離純化過(guò)程，結(jié)構(gòu)確證，免疫抑制、昆蟲(chóng)拒食和生長(zhǎng)抑制作用等。

【背景技術(shù)】
[0002] 自身免疫性疾病是僅次于心血管疾病和癌癥的第三大疾病，目前已開(kāi)發(fā)了大量的 免疫抑制藥物，主要用于防止器官移植中的排斥反應(yīng)和抑制某些自身免疫性疾病的進(jìn)展 等。其中不少藥物雖具有免疫抑制作用，但毒副作用強(qiáng)，容易造成全身性免疫抑制。尋找并 開(kāi)發(fā)出高效低毒的免疫抑制先導(dǎo)化合物是世界醫(yī)藥學(xué)界的一項(xiàng)重大課題。最新的研究發(fā) 現(xiàn)，自身免疫性疾病和T細(xì)胞關(guān)系尤其密切。ConA能在體外刺激T細(xì)胞表面的受體，選擇性 激活T細(xì)胞過(guò)度增殖，因此，利用ConA建立的脾T細(xì)胞的增殖模型可快速、高效的篩選免疫 抑制的化合物。
[0003] 甜菜夜蛾和棉鈴蟲(chóng)都是世界范圍內(nèi)廣泛分布的雜食性農(nóng)業(yè)害蟲(chóng)，主要危害棉花、 玉米、大豆和蔬菜等作物。目前防治甜菜夜蛾和棉鈴蟲(chóng)仍然主要依賴于化學(xué)農(nóng)藥，但大量不 合理地使用化學(xué)農(nóng)藥造成了土地、水、空氣的污染，植物抗藥性產(chǎn)生以及危害人體牲畜健康 等災(zāi)害性弊端。因而植物性農(nóng)藥的開(kāi)發(fā)成為近年來(lái)的研究熱點(diǎn)，植物中的殺蟲(chóng)物質(zhì)主要是 次生代謝物質(zhì)，不會(huì)污染環(huán)境，對(duì)農(nóng)作物和生態(tài)環(huán)境相對(duì)安全，且昆蟲(chóng)也不易產(chǎn)生抗藥性， 因此植物性農(nóng)藥的開(kāi)發(fā)應(yīng)用在當(dāng)前"綠色食品"生產(chǎn)中發(fā)揮著越來(lái)越重要的作用。
[0004] 肉桂皮是樟科植物肉桂樹(shù)（Cinnamomum cassia Presl (Lauraceae))的干燥樹(shù)皮， 肉桂葉即為肉桂的干燥樹(shù)葉。肉桂能調(diào)節(jié)人體免疫力，肉桂及其異瑞諾烷二萜具有抗補(bǔ)體 的活性，肉桂具能驅(qū)蟲(chóng)、凈化空氣，肉桂中有能使昆蟲(chóng)拒食的活性成分。


【發(fā)明內(nèi)容】
：
[0005] 本發(fā)明的任務(wù)是提供肉桂中具有生物活性的化合物及其分離制備方法和應(yīng)用。
[0006] 實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的技術(shù)方案是：
[0007] 從肉桂中分離得到瑞諾烷二萜類化合物的方法包括以下步驟：
[0008] 將干燥肉桂皮粉碎，用乙醇室溫提取，合并乙醇提取液并減壓回收濃縮成浸膏，得 到總膏，熱水將總膏分散至混懸狀，依次用極性遞增的石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃 取，回收萃取液減壓濃縮得乙酸乙酯部位，正丁醇部位，石油醚及氯仿部位去除。
[0009] 將乙酸乙酯部位進(jìn)行硅膠柱層析，氯仿至甲醇梯度洗脫（氯仿/甲醇10:1-3:1)， 氯仿/甲醇6:1時(shí)得一段Fr. l，F(xiàn)r. 1經(jīng)過(guò)反相硅膠柱色譜（水/甲醇9:1)得一部位，此部 位再經(jīng)凝膠、制備液相純化得到化合物1 ;
[0010] 將正丁醇部位進(jìn)行硅膠柱層析，氯仿至甲醇梯度洗脫（氯仿/甲醇1〇: 1-3:1)，氯 仿/甲醇8:1時(shí)得Fr. 2,氯仿/甲醇6:1時(shí)得Fr. 3,氯仿/甲醇5:1時(shí)得Fr. 4,氯仿/甲 醇4:1時(shí)得Fr.5 ;Fr.2經(jīng)過(guò)反相硅膠柱色譜（水/甲醇9:1)得一部位，此部位再經(jīng)凝膠、 制備液相純化得到化合物4、5 ;Fr. 3經(jīng)過(guò)反相硅膠柱色譜（水/甲醇9:1-7:3)得二部位分 別為Fr. 3. l、Fr. 3. 2。Fr. 3. 1經(jīng)硅膠、凝膠、制備液相純化得到化合物2、6、7 ;Fr. 3. 2經(jīng)凝 膠、制備液相純化得到化合物8、9 ;Fr. 4經(jīng)過(guò)反相硅膠柱色譜（水/甲醇9:1)，再經(jīng)硅膠、凝 膠、制備液相純化得到化合物3、11 ;Fr. 5經(jīng)過(guò)反相硅膠柱色譜（水/甲醇8:2)得一部位， 此部位再經(jīng)硅膠、凝膠、制備液相純化得到化合物10。本發(fā)明分離得到的瑞諾烷二萜類化合 物1-11的結(jié)構(gòu)式及名稱見(jiàn)表1，分離流程見(jiàn)附圖1。
[0011] 表1.本發(fā)明從肉桂中分離得到的瑞諾烷二萜類化合物1-11結(jié)構(gòu)式
[0012]

【權(quán)利要求】
1. 具有以下化合物1、化合物2、化合物3或化合物4所示結(jié)構(gòu)的化合物：
2. 從肉桂中分離得到下列化合物1所示結(jié)構(gòu)化合物的方法，包括以下步驟：
步驟一：將干燥肉桂皮粉碎，用乙醇室溫提取，合并乙醇提取液并減壓回收濃縮成浸 膏，得到總膏，熱水將總膏分散至混懸狀，依次用極性遞增的石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁 醇萃取，回收萃取液減壓濃縮得乙酸乙酯部位，正丁醇部位，石油醚及氯仿部位去除； 步驟二：將乙酸乙酯部位進(jìn)行硅膠柱層析，氯仿至甲醇梯度洗脫（氯仿/甲醇 10:1-3:1)，氯仿/甲醇6:1時(shí)得一段Fr. 1，F(xiàn)r. 1經(jīng)過(guò)反相硅膠柱色譜（水/甲醇9:1)得 一部位，此部位再經(jīng)凝膠、制備液相純化得到化合物1。
3. 從肉桂中分離得到下列瑞諾烷二萜類化合物2至11中的一種或多種的方法，包括以 下步驟：
步驟A :將權(quán)利要求2之步驟一中得到的正丁醇部位進(jìn)行硅膠柱層析，氯仿至甲醇梯度 洗脫（氯仿/甲醇10:1-3:1)，氯仿/甲醇8:1時(shí)得Fr. 2,氯仿/甲醇6:1時(shí)得Fr. 3,氯仿 /甲醇5:1時(shí)得Fr. 4,氯仿/甲醇4:1時(shí)得Fr. 5 ; 步驟B:將Fr.2經(jīng)過(guò)反相硅膠柱色譜（水/甲醇9:1)得一部位，此部位再經(jīng)凝膠、制 備液相純化得到化合物4、5 ;或 將Fr. 3經(jīng)過(guò)反相硅膠柱色譜（水/甲醇9:1-7:3)得二部位分別為Fr. 3. 1、Fr. 3. 2 ; Fr. 3. 1經(jīng)硅膠、凝膠、制備液相純化得到化合物2、6、7 ;或Fr. 3. 2經(jīng)凝膠、制備液相純化得 到化合物8、9 ;或 將Fr. 4經(jīng)過(guò)反相硅膠柱色譜（水/甲醇9:1)，再經(jīng)硅膠、凝膠、制備液相純化得到化合 物3、11 ;或 將Fr. 5經(jīng)過(guò)反相硅膠柱色譜（水/甲醇8:2)得一部位，此部位再經(jīng)硅膠、凝膠、制備 液相純化得到化合物10。
4. 具有以下化合物2所示結(jié)構(gòu)的化合物在制備免疫抑制中的應(yīng)用，
5. 具有以下化合物11所示結(jié)構(gòu)式的化合物在制備免疫抑制中的應(yīng)用，
6. 下列化合物1至化合物7中的任一種化合物在制備對(duì)昆蟲(chóng)有拒食活性和/或生長(zhǎng)抑 制活性藥物中的應(yīng)用：

R 丨=0H，R，=H，R-;=H，R4=OH·R;=OH，R(1=OH， R1=H, R2= O-p-D-Glc； - R7=OH,R8=H； 化合物3
仆人物I /i Ri=OH,R2=H,R;;=H, R4=OH. Κ!=Η,Κ2=ΟΗ,Κ3=Η, R5=OH,R(1=OH,R7=H,Rs=H； R4=H,R5=H,R(1=H,R7=H,Rs=OH； 化合物5 化合物6
Ri=H,R2=0H,R：=H.R4=H,R5=H,R6=H,R7=H,Rs=0-G1c; 化合物7。
7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的昆蟲(chóng)是棉鈴蟲(chóng)或甜菜夜蛾。
8. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的昆蟲(chóng)是棉鈴蟲(chóng)幼蟲(chóng)或甜菜夜蛾幼 蟲(chóng)。
9. 下列化合物1 (肉桂廠 F)、化合物2 (肉桂廠 G)和化合物4 (18-hydroxyperseanol) 中的一種在制備對(duì)甜菜夜蛾幼蟲(chóng)有拒食活性藥物中的應(yīng)用，
化合物2
R|=0H,R2=H,R：,=H, r4=oh,r5=oh,r(1=oh, R7=OH,Rs=H； 化合物4。
10.下列化合物1(肉桂廠 F)和化合物4(18-hydroxyperseanol)中的一種在制備對(duì)棉 鈴蟲(chóng)幼蟲(chóng)有拒食活性藥物中的應(yīng)用，
【文檔編號(hào)】C07H17/04GK104151323SQ201410369539
【公開(kāi)日】2014年11月19日 申請(qǐng)日期:2014年7月30日 優(yōu)先權(quán)日:2014年7月30日
【發(fā)明者】張勇慧, 姚廣民, 曾俊芬, 張錦文 申請(qǐng)人:華中科技大學(xué)