技術總結
一種Cas9表達載體,屬于基因工程技術領域,本發明的目的在于提供一種可在哺乳動物細胞中穩定表達Cas9基因的質粒DNA載體。通過使用內切酶AgeⅠ、EcoRⅠ、SacⅡ三酶切pX330載體得Cas9編碼區,在兩側添加合適的酶切位點后,構建到pUC?EIN載體中序列如SEQ?ID?NO.2所示,得Cas9表達載體pUC?CIN,其序列如SEQ?ID?NO.11所示。使用pUC?CIN載體穩定轉染豬細胞系,經單克隆篩選可以獲得穩定表達Cas9基因的細胞株。
技術研發人員:李和剛;楊培培;張寶珣;李培培;郝小靜;劉開東;包漢勛;孟德坤;房志遠;苗剛;張明;郭成玉
受保護的技術使用者:青島市畜牧獸醫研究所
文檔號碼:201611018714
技術研發日:2016.11.18
技術公布日:2017.02.15