本發明涉及龍眼核的綜合利用領域，特別涉及一種提取龍眼核多糖的方法。

背景技術：

龍眼為無患子科的果實，又名桂圓，為我國著名的亞熱帶水果。龍眼原產于我國南部和越南北部的南亞熱帶區域，在我國已有2000多年栽培歷史，是重要的南亞熱帶常綠長壽果樹，歷史上南方“桂圓”北“人參”之稱。龍眼果品暢銷海內外在國際市場上享有較高的聲譽，我國龍眼栽培面積和產量均居世界首位，我國福建、廣東、廣西及臺灣等省是主產區，海南云南四川和貴州等省也有栽培。

龍眼核系龍眼的種仁，重量占龍眼果實鮮重的17％，但近年來，由于龍眼種植面積的擴大，其產量不斷增加，已出現供過于求的局面，價格一直下降。龍眼保鮮技術還不成熟，隨著龍眼酒、龍眼罐頭、桂圓干及龍眼其他深加工產品的出現，龍眼核、肉分離，作為加工廢棄物的龍眼核目前的利用率幾乎為零，每年廢棄的龍眼核重量達幾十萬頓，除龍眼果肉具有很高的營養價值外，龍眼核中含有6％的粗纖維，14％的還原糖，2.5％的脂肪，1.5％的單寧，61％淀粉，5.6％蛋白質以及1％的果膠，具有顯著的功效。龍眼核含皂草素及脂肪，具有止血、定痛、理氣、化濕的功效，可治療創傷出血、疝氣等。龍眼核中含有豐富的多酚類物質，其抗氧化活性僅次于芒果核，且龍眼核抗氧化活性與其多酚含量呈正相關性。龍眼核還可用于提取色素，制成保健品和食品著色添加劑，顯示著龍眼核有著廣大的加工前景。

多糖是由單糖通過糖苷鍵結合的糖鏈，至少要超過10個的單糖組成的聚合糖高分子碳水化合物，分子量從幾千到幾百萬不等，廣泛分布于植物、動物和微生物中。多糖不是一種純粹的化學物質，而是聚合程度不同的物質的混合物。近年來，隨著細胞生物學和分子生物學的發展，人們認識到多糖不僅是參與構成生命的基本物質，具有作為細胞骨架、傳遞細胞間信號等功能，更重要的是發現多糖在機體免疫調節、增強抗病毒及抗癌活性、降血糖、清除體內自由基、延緩衰老、美白祛斑等方面具有重要的生物活性和功效。

龍眼核多糖干品一般為棕褐色無定形固體，極易吸潮，經過分離純化后得到白色粉末，不溶于乙醇、丙酮、正丁醇等有機溶劑，較難溶于冷水。目前，目前，國內外針對龍眼核多糖提取工藝的研究多采用傳統熱水浸提法，多糖物質難以從龍眼果肉細胞內釋放出來，導致得率較低；此外，熱水浸提法要求提取時間長，提取溫度高，易造成多糖水解，降低多糖物質生物活性。酶解法是最大限度從植物體內提取有效成分的方法之一，酶解反應既可以較溫和地將植物組織分解，較大幅度提高得率；同時還不易破壞多糖的立體結構和生物活性，已逐漸成為近年來植物活性成分提取工藝研究的熱點。但龍眼核細胞壁阻礙了對細胞內多糖等活性物質的提取，該細胞壁的主要組成成分是果膠和纖維素類物質，現有方法一般通過超聲波震蕩-酶協法提高多糖的溶出率以及多糖的純度，但超聲波處理需要較長的時間，分離制備的成本高、效率低。因此，如何提高龍眼核多糖的提取率、產品得率和制品純度已成為龍眼核多糖產業化亟需解決的瓶頸問題。

高壓爆破法是指將高壓狀態下的物料，瞬間爆破于大氣中，爆破過程存在類似酸水解、熱降解、類機械斷裂、氫鍵破壞和結構重排等協同作用。原料經汽爆處理后在物理結構和化學組分上發生較大的變化。高壓爆破技術提出已有80年的歷史，但多用于造紙行業。近年來，由于能源的緊缺，高壓爆破技術被廣泛用于纖維素乙醇的制備中，其目的是破壞纖維素緊密結構，增強纖維素酶的水解效率，提高多聚己糖(纖維素)和多聚戊糖(半纖維素)的單糖轉化率以提高乙醇的發酵速度，但是，將高壓技術應用于龍眼核的預處理、以獲取高的多糖得率為目標的研究尚未見公開報道。

超濾膜分離技術是一種高效的純物理的分離手段，利用其不同的孔徑截留不同分子量物質，具有設備簡單、可常溫操作、無相變及化學變化、選擇性高及能耗低等優點，尤為適用于熱敏性物料和生物活性物質的分離制備。

技術實現要素：

本發明目的在于提供一種提取龍眼核多糖的方法，該技術將高壓爆破技術、三元復合酶酶解以及超濾膜分離濃縮技術引入龍眼核多糖的分離制備過程，使目標產物的得率和純度相比常規技術均有明顯提高，同時具有高效、快速、便捷、低成本的特點，適合于大規模工業化生產。

為達到上述目的，本發明所采用的技術方案是：一種提取龍眼核多糖的方法，包括以下步驟：

(1)制漿和漿液處理：將新鮮龍眼核和去離子水相混合，倒入均質機中制漿，然后采用高壓爆破法、絮凝法對漿液進行處理，接著用0.5μm的陶瓷膜分離設備進行過濾，收集濾液備用；

(2)酶解和濃縮處理：調節濾液的pH值，然后在濾液中加入草藥提取物和三元復合酶進行酶解，控制酶解的反應溫度和反應時間，接著將酶解后得到的酶解液進行超濾濃縮，得到濃縮液；

(3)離心處理：將濃縮液和混合醇溶液相混合，攪拌均勻，靜置2-4h后采用離心機收集析出物；

(4)噴霧干燥處理：將析出物用60-80℃的去離子熱水溶解，冷卻后重復步驟(3)，將最后得到的析出物放入旋轉甩盤轉速為15000-25000r/min的旋轉式霧化干燥器中干燥5-30s，得到龍眼核多糖。

在本發明中，作為進一步說明，步驟(2)所述的草藥提取物由下述方法制備：按重量份數計，將20-35份青蒿、23-45份松針、34-50份黃芪和40-60份水葫蘆混合，粉碎，加入500-800份摩爾濃度為0.05-0.08mol/L的磷酸緩沖液，接著進行超聲波處理20-30min后，在50-70℃下浸提10-14h，抽濾后收集濾液，在濾液中加入20-30份氯酸鈣，邊攪拌邊以0.1-0.2L/min的速度通入氨氣15-20min，靜止放置30-60min后，離心沉淀，收集沉淀物，干燥后得到草藥提取物。

在本發明中，作為進一步說明，步驟(1)所述的高壓爆破法為將漿液在6.0-8.0MPa下保壓15-25s后瞬間爆破，爆破時間為0.001-0.003s，循環加壓、爆破處理2-4次。

在本發明中，作為進一步說明，步驟(1)所述的絮凝法為將漿液和淀粉枝聚丙烯酰胺絮凝劑相混合，以200-500r/min的速度攪拌5-10min，靜置15min后，得到絮凝后的漿液。

在本發明中，作為進一步說明，步驟(2)所述的三元復合酶為按重量比50-65：25-30：25-40的酸性纖維素酶、木聚糖酶和木瓜蛋白酶混合而成。

在本發明中，作為進一步說明，步驟(2)所述的pH值為5-5.8，所述的反應溫度為30-45℃，所述的反應時間為30-60min。

在本發明中，作為進一步說明，步驟(2)所述的超濾濃縮為采用超濾膜截留5-50KD分子量的酶解液，在溫度為40-55℃，壓力為-0.09MPa的條件下減壓蒸餾至固形物含量為50-70％。

在本發明中，作為進一步說明，步驟(3)所述的混合醇溶液由按重量比為6-9：1的質量分數為95％的乙醇水溶液和質量分數為70-80％的丙三醇水溶液混合而成。

在本發明中，作為進一步說明，所述的新鮮龍眼核、去離子水、淀粉枝聚丙烯酰胺絮凝劑、草藥提取物和混合醇溶液的重量比為100：150-200：1-2：6-9：10-15：500-700。

部分原料的功能介紹如下：

淀粉枝聚丙烯酰胺絮凝劑，為淀粉接枝聚丙烯酰胺的共聚物，分為凝膠型和線型接枝鏈兩種，是一種新型的高分子絮凝劑，它結合了淀粉和聚丙烯酰胺的特性，具有良好的絮凝性能。

青蒿，一年生草本。莖直立，上部多分枝，具縱棱線。葉子互生，莖中部的葉子二回羽狀分裂，線形小裂片。夏季開花，頭狀花序半球形，多數，成圓錐狀，花管狀，外面為雌花，內層為兩性花。含揮發油，也含艾蒿堿及苦味素等。入藥，但非中藥“青蒿”之正品。據報道，本種有清熱、涼血、退蒸、解暑、祛風、止癢之效，作陰虛潮熱的退熱劑，也止盜汗、中暑等，但本種不含“青蒿素”，無抗瘧作用。清熱解暑，除蒸，截瘧。用于暑邪發熱，陰虛發熱，夜熱早涼，骨蒸勞熱，瘧疾寒熱，濕熱黃疸。是一種廉價的抗瘧疾藥。

松針，松樹的針形葉，葉狀似針，故稱“松針”，松針提取物富含糖類、粗蛋白、粗脂肪、多種氨基酸和多種微量礦元素、多種維生素、生物黃酮類物質、精油、葉綠素、不飽和脂肪酸、酶與輔酶等活性物質。松樹藥用的代表部位是松針，松針的藥用成分高于松樹的其他部位，不但含有大量生物黃酮類物質、前花青素，還富含葉綠素、多種維生素。松針提取物可用于擴張動脈血管，增加紅血球攜氧能力，促進血液循環，改善毛細血管的機能，提高免疫力，增加荷爾蒙的分泌，強精，使身體的組織年輕化。

酸性纖維素酶，是由康氏木霉菌經過液態深層發酵精制提取制得。產品廣泛應用于紡織、飼料、酒精、燃料乙醇、啤酒釀造、中藥提取等行業。

木聚糖酶，又名內1,4-β-木聚糖酶，是采用液體深層發酵、超濾及噴霧干燥等工藝制得，用于啤酒釀造，可以有效分解麥芽汁中的木聚糖和戊聚糖，降低麥芽汁中的粘度，改善其過濾性能，防止非碳水化合物混濁的產生。木聚糖酶可以分解釀造或飼料工業中的原料細胞壁以及β-葡聚糖，降低釀造中物料的粘度，促進有效物質的釋放，以及降低飼料用糧中的非淀粉多糖，促進營養物質的吸收利用，并因而更易取可溶性脂類成分。

木瓜蛋白酶，又稱木瓜酶，是一種蛋白水解酶。木瓜蛋白酶是番木瓜中含有的一種低特異性蛋白水解酶，廣泛地存在于番木瓜的根、莖、葉和果實內，其中在未成熟的乳汁中含量最豐富。木瓜蛋白酶的活性中心含半胱氨酸，屬于巰基蛋白酶，它具有酶活高、熱穩定性好、天然衛生安全等特點，因此在食品、醫藥、飼料、日化、皮革及紡織等行業得到廣泛應用。

乙醇，俗稱酒精，它在常溫、常壓下是一種易燃、易揮發的無色透明液體，它的水溶液具有特殊的、令人愉快的香味，并略帶刺激性。乙醇的用途很廣，可用乙醇來制造醋酸、飲料、香精、染料、燃料等。醫療上也常用體積分數為70％—75％的乙醇作消毒劑等。

丙三醇，俗稱甘油，是無色味甜澄明黏稠液體，無臭，有暖甜味。能從空氣中吸收潮氣，也能吸收硫化氫、氰化氫和二氧化硫。對石蕊呈中性。長期放在0℃的低溫處，能形成熔點為17.8℃有光澤的斜方晶體。遇強氧化劑如三氧化鉻、氯酸鉀、高錳酸鉀能引起燃燒和爆炸。能與水、乙醇任意混溶，不溶于苯、氯仿、四氯化碳、二硫化碳、石油醚和油類。適用于水溶液的分析、溶劑、氣量計及水壓機緩震液、軟化劑、抗生素發酵用營養劑、干燥劑、潤滑劑、制藥工業、化妝品配制、有機合成、塑化劑。可與水以任何比例溶解，低濃度丙三混合醇溶液可做潤滑油對皮膚進行滋潤(開塞露)。

磷酸緩沖液，即磷酸鹽緩沖液，簡稱PB或者PB緩沖液，是生物化學研究中使用最為廣泛的一種緩沖液，通常使用的有磷酸鈉緩沖液和磷酸鉀緩沖液，由于它們有二級解離，緩沖的pH值范圍很廣。

本發明具有以下有益效果：

1.本發明采用浸提技術對青蒿、松針、黃芪和水葫蘆混合后的粉碎物經過超聲波處理，使粉碎物能充分分散在緩沖液中，利于后續進行浸提處理步驟，然后采用通氨氣的技術方法進行沉淀草藥提取物，制備出來的草藥提取物能激活三元復合酶的活性，提高三元復合酶的酶解效率。青蒿的低聚前花青素和黃芪中的核黃素均為強氧化劑，可將漿液中難生物降解物質氧化成易生物降解物質，使后續的酶解步驟易于進行，降低處理難度，提高酶解效率；黃芪中的生物大分子和酶結構中的大環分子之間的相互堆積作用，增強了溶液的穩定性，進而促進了酶解的效率；松針、水葫蘆和青蒿中含量豐富的鈣、鐵、錳、鋅、鉀和鎂等金屬離子能和酸性纖維素酶、木聚糖酶和木瓜蛋白酶中的金屬離子發生置換反應，使這三種酶的穩定性增強，從而促進了酶的活性；這幾者從不同角度和不同機理促進酶的活性，共同提高酶解效率，進而大幅提高了龍眼肉多糖的產量。

2.本發明采用酸性纖維素酶、木聚糖酶和木瓜蛋白酶組成的草藥提取物能提高酶解效率，縮短酶解時間，進一步增加龍眼核多糖的得率和純度。酸性纖維素酶在酸性條件下，能夠高效的酶解纖維素；木聚糖酶能夠分解細胞壁結構，使細胞內的淀粉顆粒完全暴露，從而使淀粉顆粒被酶解；木瓜蛋白酶在能夠促進龍眼核里的蛋白質核酸多糖酶解的同時，還能輔助促進多縮戊糖、纖維素的酶解；本發明通過科學配比，使各種酶相互作用，相互配合，針對不同的多糖進行酶解，其產生的酶解效率遠遠高于單個酶組分對于多糖的酶解效率總和，從而縮短了多糖的酶解時間，提高了生產效率。

3.本發明采用超濾膜分離技術，選擇截留分子量為5-50KD的酶解液，在有效截留龍眼核多糖的同時，除去了未發生酶解的纖維素、木聚糖、提取物中的小分子雜質以及生產中額外添加的草藥提取物，顯著提高了龍眼核多糖的純度。

4.本發明采用淀粉接枝聚丙烯酰胺絮凝劑、微孔陶瓷膜對高于爆破后的漿液進行處理，可以提高高壓爆破后漿液顆粒的沉降速度和減少草藥提取物的使用量，節約生產成本，更有利于產業化推廣。

5.本發明采用旋轉式霧化干燥法對龍眼核多糖進行干燥處理，較常規的鼓風干燥、真空干燥以及冷凍干燥法更為快捷，在能夠保證龍眼核多糖品質的情況下，大大縮短龍眼核多糖的生產時間，實現瞬間蒸發水分，提高了生產效率。

【具體實施方式】

實施例1：

1.前期準備：

草藥提取物的制備：將20g青蒿、23g松針、34份黃芪和40g水葫蘆混合，粉碎，加入500g摩爾濃度為0.05mol/L的磷酸緩沖液，接著在頻率為800W的條件下超聲波處理20min后，在50℃下浸提10h，抽濾后收集濾液，在濾液中加入20g氯酸鈣，邊攪拌邊以0.1L/min的速度通入氨氣15min，靜止放置30min后，離心沉淀，收集沉淀物，干燥后得到草藥提取物。

三元復合酶的制備：將50g的酸性纖維素酶、25g木聚糖酶和25g的木瓜蛋白酶混合，攪拌均勻，得到三元復合酶。

混合醇溶液的制備：將600g質量分數為95％的乙醇水溶液和100g質量分數為70％的丙三醇水溶液相混合，得到混合醇溶液。

將上述制得的物質用于下述提取龍眼核多糖的方法上。

2.一種提取龍眼核多糖的方法，包括以下步驟：

(1)制漿和漿液處理：將100g新鮮龍眼核和150g去離子水相混合，倒入均質機中制漿，然后采用高壓爆破法將漿液在6.0MPa下保壓15s后瞬間爆破，爆破時間為0.001s，循環加壓、爆破處理2次、然后用絮凝法將漿液和1g淀粉枝聚丙烯酰胺絮凝劑相混合，以200r/min的速度攪拌5min，靜置15min后，得到絮凝后的漿液，采用0.5μm的陶瓷膜分離設備進行過濾，收集濾液待用；

(2)酶解和濃縮處理：調節濾液的pH值為5，然后在濾液中加入6g草藥提取物和10g三元復合酶進行酶解，在溫度為30℃的條件下酶解反應30min，接著將酶解后得到的酶解液采用超濾膜截留5-50KD分子量的酶解液，在溫度為40℃，壓力為-0.09MPa的條件下減壓蒸餾至固形物含量為50％超濾濃縮，得到濃縮液；

(3)離心處理：將濃縮液和500g混合醇溶液相混合，攪拌均勻，靜置2h后采用離心機收集析出物；

(4)噴霧干燥處理：將析出物用60℃的去離子熱水溶解，冷卻后重復步驟(3)，將最后得到的析出物放入旋轉甩盤轉速為15000r/min的旋轉式霧化干燥器中干燥5s，得到龍眼核多糖。

實施例2：

1.前期準備：

草藥提取物的制備：將25g青蒿、30g松針、40份黃芪和45g水葫蘆混合，粉碎，加入550g摩爾濃度為0.06mol/L的磷酸緩沖液，接著在頻率為800W的條件下進行超聲波處理25min后，在62℃下浸提13h，抽濾后收集濾液，在濾液中加入25g氯酸鈣，邊攪拌邊以0.11L/min的速度通入氨氣19min，靜止放置40min后，離心沉淀，收集沉淀物，干燥后得到草藥提取物。

三元復合酶的制備：將55g的酸性纖維素酶、27g木聚糖酶和29g的木瓜蛋白酶混合，攪拌均勻，得到三元復合酶。

混合醇溶液的制備：將3200g質量分數為95％的乙醇水溶液和400g質量分數為72％的丙三醇水溶液相混合，得到混合醇溶液。

將上述制得的物質用于下述提取龍眼核多糖的方法上。

2.一種提取龍眼核多糖的方法，包括以下步驟：

(1)制漿和漿液處理：將100g新鮮龍眼核和165g去離子水相混合，倒入均質機中制漿，然后采用高壓爆破法將漿液在6.5MPa下保壓18s后瞬間爆破，爆破時間為0.002s，循環加壓、爆破處理3次，然后采用絮凝法將漿液和1.5g淀粉枝聚丙烯酰胺絮凝劑相混合，以350r/min的速度攪拌7min，靜置15min后，得到絮凝后的漿液，采用0.5μm的陶瓷膜分離設備進行過濾，收集濾液待用；

(2)酶解和濃縮處理：調節濾液的pH值為5.3，然后在濾液中加入7g草藥提取物和11g三元復合酶進行酶解，在溫度為37℃的條件下酶解反應42min，接著將酶解后得到的酶解液采用超濾膜截留5-50KD分子量的酶解液，在溫度為47℃，壓力為-0.09MPa的條件下減壓蒸餾至固形物含量為59％，超濾濃縮，得到濃縮液；

(3)離心處理：將濃縮液和650g混合醇溶液相混合，攪拌均勻，靜置2.5h后采用離心機收集析出物；

(4)噴霧干燥處理：將析出物用65℃的去離子熱水溶解，冷卻后重復步驟(3)，將最后得到的析出物放入旋轉甩盤轉速為20000r/min的旋轉式霧化干燥器中干燥20s，得到龍眼核多糖。

實施例3：

1.前期準備：

草藥提取物的制備：將28g青蒿、33g松針、44份黃芪和55g水葫蘆混合，粉碎，加入660g摩爾濃度為0.06mol/L的磷酸緩沖液，接著在頻率為800W的條件下進行超聲波處理22min后，在66℃下浸提12h，抽濾后收集濾液，在濾液中加入26g氯酸鈣，邊攪拌邊以0.15L/min的速度通入氨氣17min，靜止放置45min后，離心沉淀，收集沉淀物，干燥后得到草藥提取物。

三元復合酶的制備：將63g的酸性纖維素酶、29g木聚糖酶和33g的木瓜蛋白酶混合，攪拌均勻，得到三元復合酶。

混合醇溶液的制備：將4000g質量分數為95％的乙醇水溶液和600g質量分數為73％的丙三醇水溶液相混合，得到混合醇溶液。

將上述制得的物質用于下述提取龍眼核多糖的方法上。

2.一種提取龍眼核多糖的方法，包括以下步驟：

(1)制漿和漿液處理：將100g新鮮龍眼核和180g去離子水相混合，倒入均質機中制漿，然后采用高壓爆破法將漿液在7.2MPa下保壓21s后瞬間爆破，爆破時間為0.001s，循環加壓、爆破處理4次，然后采用絮凝法將漿液和1.4g淀粉枝聚丙烯酰胺絮凝劑相混合，以450r/min的速度攪拌8min，靜置15min后，得到絮凝后的漿液，采用0.5μm的陶瓷膜分離設備進行過濾，收集濾液待用；

(2)酶解和濃縮處理：調節濾液的pH值為5.4，然后在濾液中加入8g草藥提取物和12g三元復合酶進行酶解，在溫度為44℃的條件下酶解反應50min，接著將酶解后得到的酶解液采用超濾膜截留5-50KD分子量的酶解液，在溫度為50℃，壓力為-0.09MPa的條件下減壓蒸餾至固形物含量為65％，得到濃縮液；

(3)離心處理：將濃縮液和600g混合醇溶液相混合，攪拌均勻，靜置3h后采用離心機收集析出物；

(4)噴霧干燥處理：將析出物用67℃的去離子熱水溶解，冷卻后重復步驟(3)，將最后得到的析出物放入旋轉甩盤轉速為22000r/min的旋轉式霧化干燥器中干燥27s，得到龍眼核多糖。

實施例4：

1.前期準備：

草藥提取物的制備：將32g青蒿、35g松針、39份黃芪和48g水葫蘆混合，粉碎，加入590g摩爾濃度為0.07mol/L的磷酸緩沖液，接著在頻率為800W的條件下進行超聲波處理27min后，在68℃下浸提11h，抽濾后收集濾液，在濾液中加入24g氯酸鈣，邊攪拌邊以0.13L/min的速度通入氨氣16min，靜止放置50min后，離心沉淀，收集沉淀物，干燥后得到草藥提取物。

三元復合酶的制備：將64g的酸性纖維素酶、28g木聚糖酶和36g的木瓜蛋白酶混合，攪拌均勻，得到三元復合酶。

混合醇溶液的制備：將4200g質量分數為95％的乙醇水溶液和700g質量分數為74％的丙三醇水溶液相混合，得到混合醇溶液。

將上述制得的物質用于下述提取龍眼核多糖的方法上。

2.一種提取龍眼核多糖的方法，包括以下步驟：

(1)制漿和漿液處理：將100g新鮮龍眼核和165g去離子水相混合，倒入均質機中制漿，然后采用高壓爆破法將漿液在7.5MPa下保壓19s后瞬間爆破，爆破時間為0.002s，循環加壓、爆破處理3次，然后采用絮凝法將漿液和1.6g淀粉枝聚丙烯酰胺絮凝劑相混合，以440r/min的速度攪拌9min，靜置15min后，得到絮凝后的漿液，采用0.5μm的陶瓷膜分離設備進行過濾，收集濾液待用；

(2)酶解和濃縮處理：調節濾液的pH值為5.2，然后在濾液中加入7g草藥提取物和13g三元復合酶進行酶解，在溫度為39℃的條件下酶解反應47min，接著將酶解后得到的酶解液采用超濾膜截留5-50KD分子量的酶解液，在溫度為51℃，壓力為-0.09MPa的條件下減壓蒸餾至固形物含量為66％，得到濃縮液；

(3)離心處理：將濃縮液和680g混合醇溶液相混合，攪拌均勻，靜置3.5h后采用離心機收集析出物；

(4)噴霧干燥處理：將析出物用78℃的去離子熱水溶解，冷卻后重復步驟(3)，將最后得到的析出物放入旋轉甩盤轉速為22000r/min的旋轉式霧化干燥器中干燥26s，得到龍眼核多糖。

實施例5：

1.前期準備：

草藥提取物的制備：將28g青蒿、38g松針、48份黃芪和52g水葫蘆混合，粉碎，加入750g摩爾濃度為0.06mol/L的磷酸緩沖液，接著在頻率為800W的條件下進行超聲波處理29min后，在60℃下浸提12h，抽濾后收集濾液，在濾液中加入21g氯酸鈣，邊攪拌邊以0.17L/min的速度通入氨氣16min，靜止放置55min后，離心沉淀，收集沉淀物，干燥后得到草藥提取物。

三元復合酶的制備：將60g的酸性纖維素酶、27g木聚糖酶和34g的木瓜蛋白酶混合，攪拌均勻，得到三元復合酶。

混合醇溶液的制備：將3000g質量分數為95％的乙醇水溶液和500g質量分數為77％的丙三醇水溶液相混合，得到混合醇溶液。

將上述制得的物質用于下述提取龍眼核多糖的方法上。

2.一種提取龍眼核多糖的方法，包括以下步驟：

(1)制漿和漿液處理：將100g新鮮龍眼核和185g去離子水相混合，倒入均質機中制漿，然后采用高壓爆破法將漿液在7.6MPa下保壓21s后瞬間爆破，爆破時間為0.001s，循環加壓、爆破處理2次，然后采用絮凝法將漿液和1.3g淀粉枝聚丙烯酰胺絮凝劑相混合，以400r/min的速度攪拌9min，靜置15min后，得到絮凝后的漿液，采用0.5μm的陶瓷膜分離設備進行過濾，收集濾液待用；

(2)酶解和濃縮處理：調節濾液的pH值為5.5，然后在濾液中加入6g草藥提取物和14g三元復合酶進行酶解，在溫度為41℃的條件下酶解反應55min，接著將酶解后得到的酶解液采用超濾膜截留5-50KD分子量的酶解液，在溫度為51℃，壓力為-0.09MPa的條件下減壓蒸餾至固形物含量為62％，得到濃縮液；

(3)離心處理：將濃縮液和630g混合醇溶液相混合，攪拌均勻，靜置3.5h后采用離心機收集析出物；

(4)噴霧干燥處理：將析出物用77℃的去離子熱水溶解，冷卻后重復步驟(3)，將最后得到的析出物放入旋轉甩盤轉速為24000r/min的旋轉式霧化干燥器中干燥26s，得到龍眼核多糖。

實施例6：

1.前期準備：

草藥提取物的制備：將35g青蒿、45g松針、50份黃芪和60g水葫蘆混合，粉碎，加入800g摩爾濃度為0.08mol/L的磷酸緩沖液，接著在頻率為800W的條件下進行超聲波處理30min后，在70℃下浸提14h，抽濾后收集濾液，在濾液中加入30g氯酸鈣，邊攪拌邊以0.2L/min的速度通入氨氣20min，靜止放置60min后，離心沉淀，收集沉淀物，干燥后得到草藥提取物。

三元復合酶的制備：將65g的酸性纖維素酶、30g木聚糖酶和40g的木瓜蛋白酶混合，攪拌均勻，得到三元復合酶。

混合醇溶液的制備：將900g質量分數為95％的乙醇水溶液和100g質量分數為80％的丙三醇水溶液相混合，得到混合醇溶液。

將上述制得的物質用于下述提取龍眼核多糖的方法上。

2.一種提取龍眼核多糖的方法，包括以下步驟：

(1)制漿和漿液處理：將100g新鮮龍眼核和200g去離子水相混合，倒入均質機中制漿，然后采用高壓爆破法將漿液在8.0MPa下保壓25s后瞬間爆破，爆破時間為0.003s，循環加壓、爆破處理4次，然后采用絮凝法為將漿液和2g淀粉枝聚丙烯酰胺絮凝劑相混合，以500r/min的速度攪拌10min，靜置15min后，得到絮凝后的漿液，采用0.5μm的陶瓷膜分離設備進行過濾，收集濾液待用；

(2)酶解和濃縮處理：調節濾液的pH值為5.8，然后在濾液中加入9g草藥提取物和15g三元復合酶進行酶解，在溫度為45℃的條件下酶解反應60min，接著將酶解后得到的酶解液采用超濾膜截留5-50KD分子量的酶解液，在溫度為55℃，壓力為-0.09MPa的條件下減壓蒸餾至固形物含量為70％，得到濃縮液；

(3)離心處理：將濃縮液和700g混合醇溶液相混合，攪拌均勻，靜置4h后采用離心機收集析出物；

(4)噴霧干燥處理：將析出物用80℃的去離子熱水溶解，冷卻后重復步驟(3)，將最后得到的析出物放入旋轉甩盤轉速為25000r/min的旋轉式霧化干燥器中干燥30s，得到龍眼核多糖。

對比例1：提取龍眼核多糖方法的具體步驟、原料與實施例1基本相同，不同點在于：步驟(1)中沒有加入草藥提取物。

對比例2：提取龍眼核多糖方法的具體步驟、原料與實施例1基本相同，不同點在于：步驟(2)中沒有采用三元復合酶，而是采用木聚糖酶進行酶解。

對比例3：提取龍眼核多糖方法的具體步驟、原料與實施例1基本相同，不同點在于：步驟(2)中沒有采用超濾濃縮技術，而是采用旋轉蒸發儀濃縮。

對比試驗1：

按對比例1-3與實施例1-6的技術方法各提取100g新鮮龍眼核的龍眼核多糖，檢測龍眼核多糖得率和龍眼核多糖的純度，檢測結果見表1。

表1：

表1的結果表明：龍眼核多糖的得率越高，說明該技術方法的生產效率越高，龍眼核多糖得率從高到低排列為：實施例2>實施例3>實施例4>實施例1>實施例6>實施例5>對比例2>對比例1>對比例3；

龍眼核多糖的純度越高，說明該技術方法的生產效率越高，龍眼核多糖的純度從高到低排列為：實施例2>實施例4>實施例5>實施例1>實施例3>實施例6>對比例2>對比例3>對比例1。

上述說明是針對本發明較佳可行實施例的詳細說明，但實施例并非用以限定本發明的專利申請范圍，凡本發明所提示的技術精神下所完成的同等變化或修飾變更，均應屬于本發明所涵蓋專利范圍。