本發明涉及一種復合菌劑及其在污水處理中的應用，屬于工業微生物技術領域。
背景技術：
在我國，水污染仍是一個嚴峻的問題。工業廢水、城市生活廢水排量都很大。全國地下水受到點狀或面狀的污染。油脂廢水主要來源工業、農業、運輸和生活廢水排放。油脂覆蓋在水體表面，阻斷空氣中的氧向水體擴散，從而使水體自凈能力下降，水中生態平衡遭到破壞。目前。處理油脂廢水的方法主要有物理法、化學法和生物法。物理法主要是根據水和油互不相容，密度不同，利用重力和離心力將兩者分散，如重力分離法、粗粒化法、過濾吸附法、膜分離法等等。化學法主要是利用化學物質對廢水中的有機物進行化學分解，對有用有機物質造成損失，也容易造成二次污染。常用方法有化學破乳除油和化學氧化等。生物法處理油脂廢水主要是利用微生物將油脂水解成甘油、脂肪酸，最終分解氧化成水喝二氧化碳等產物。生物法處理廢水中的油脂具有投入小，效率高，無二次污染等優點。
技術實現要素：
本發明的第一個目的是提供一種用于污水處理的復合菌劑，所述菌劑為活性生物制品，其活性成分包括沼澤紅假單胞菌、短小芽孢桿菌和解脂耶氏酵母。
在本發明的一種實施方式中，所述菌劑按如下方法制備獲得：將沼澤紅假單胞菌、短小芽孢桿菌和解脂耶氏酵母分別培養至OD600＝1.2～1.5，按照1:1.5～2:1.5～2的比例、10～15％體積比的總接種量共同接種于發酵培養基中，接種后將培養基密封置于37℃，靜置發酵3～5天；所述發酵培養基成分為玉米漿50～70g/L、尿素1.0％～1.5％、氯化鈣0.5～1.5g/L、磷酸吡哆醛0.3～0.6g/L。
在本發明的一種實施方式中，所述菌劑中的解脂耶氏酵母為解脂耶氏酵母CGMCC2.1405。
本發明的第二個目的是提供所述菌劑的制備方法，是將沼澤紅假單胞菌、短小芽孢桿菌和解脂耶氏酵母分別分別培養至OD600＝1.2～1.5，按照1:1.5～2:1.5～2的比例、10～15％體積比的總接種量共同接種于發酵培養基中，接種后將培養基密封置于37℃，靜置發酵3～5天.
在本發明的一種實施方式中，所述發酵培養基成分為玉米漿50～70g/L、尿素10～15g/L、氯化鈣0.5～1.5g/L、磷酸吡哆醛0.3～0.6g/L。
本發明的第三個目的是提供一種污水處理方法，是將所述的復合菌劑以5～10％體積比投入至污水中，35～37℃反應24～72h。
本發明還提供所述菌劑在污水處理中的應用。
有益效果：本發明提供了一種復合菌劑，能夠有效降解油脂廢水中的油脂。將本發明的菌劑接種至油脂廢水中反應72h后，油脂降解率達96.8％，在1m3的中試放大中也取得了理想的效果，具備大規模工業應用的潛力。
具體實施方式
培養基：
沼澤紅假單胞菌培養基：酵母膏l.5g/L、蛋白胨2.0g/L、NaCl 0.5g/L、KH2PO40.6g/L,K2HPO4 0.9g/L。
解脂耶氏酵母培養基：蔗糖1g/L、蛋白胨25g/L、尿素1g/L、硫酸鎂1g/L、氯化鈉15g/L、吐溫-801ml/L。
短小芽孢桿菌培養基：大豆蛋白15g/L、紅糖20g/L、硫酸銨10g/L。
油脂降解率的測定：
采用UV-2450型紫外-可見光分光光度計對反應液中油脂含量進行測定。取反應液10mL，加1.5mL硫酸酸化后轉入分液漏斗，取5mL甲苯加入分液漏斗，震蕩后靜置分層萃取。將萃取過后的水樣到回原分液漏斗中，加5mL甲苯重復萃取一次。將萃取液混勻用甲苯稀釋，在324nm波長下測定萃取液的吸光值。根據油脂與吸光值的標準曲線可計算出油脂的濃度。
實施例1
(1)菌劑的制備：將沼澤紅假單胞菌、短小芽孢桿菌和解脂耶氏酵母分別在各自的培養基中培養至OD600＝1.2，按照1：1：1的比例、15％體積比的接種量共同接種于發酵培養基(玉米漿50g/L、尿素15g/L、氯化鎂1.0g/L)中，接種后將培養基密封置于37℃，靜置發酵3～5天。
(2)降解污水油脂：將步驟(1)制備的復合菌劑以10％體積比投入至500mL油脂廢水(含油脂40％～50％)中，37℃培養箱中反應72h。
對反應初始及反應72h后的污水中油脂含量進行檢測，結果顯示，反應72h后油脂降解率為69.7％。
實施例2
(1)菌劑的制備：將沼澤紅假單胞菌、短小芽孢桿菌和解脂耶氏酵母分別在各自的培養基中培養至OD600＝1.2，按照1：1：1的比例、15％體積比的接種量共同接種于發酵培養基(玉米漿50g/L、尿素15g/L、氯化鈣1.0g/L)中，接種后將培養基密封置于37℃，靜置發酵3～5天。
(2)降解污水油脂：將步驟(1)制備的復合菌劑以10％體積比投入至500mL油脂廢水(含油脂40％～50％)中，37℃培養箱中反應72h。
對反應初始及反應72h后的污水中油脂含量進行檢測，結果顯示，反應72h后油脂降解率為75.3％。
實施例3
(1)菌劑的制備：將沼澤紅假單胞菌、短小芽孢桿菌和解脂耶氏酵母分別在各自的培養基中培養至OD600＝1.2，按照1：1：1的比例、15％體積比的接種量共同接種于發酵培養基(玉米漿50g/L、尿素15g/L、磷酸吡哆醛0.6g/L)中，接種后將培養基密封置于37℃，靜置發酵3～5天。
(2)降解污水油脂：將步驟(1)制備的復合菌劑以10％體積比投入至500mL油脂廢水(含油脂40％～50％)中，37℃培養箱中反應72h。
對反應初始及反應72h后的污水中油脂含量進行檢測，結果顯示，反應72h后油脂降解率為72.6％。
實施例4
(1)菌劑的制備：將沼澤紅假單胞菌、短小芽孢桿菌和解脂耶氏酵母分別在各自的培養基中培養至OD600＝1.2，按照1：1：1的比例、15％體積比的接種量共同接種于發酵培養基(玉米漿50、尿素15g/L、氯化鈣1.0g/L、磷酸吡哆醛0.6g/L。)中，接種后將培養基密封置于37℃，靜置發酵3～5天。
(2)降解污水油脂：將步驟(1)制備的復合菌劑以10％體積比投入至500mL油脂廢水(含油脂40％～50％)中，37℃培養箱中反應72h。
對反應初始及反應72h后的污水中油脂含量進行檢測，結果顯示，反應72h后油脂降解率為90.3％。
實施例5
(1)菌劑的制備：將沼澤紅假單胞菌、短小芽孢桿菌和解脂耶氏酵母分別在各自的培養基中培養至OD600＝1.2，按照1：1.5：1.5的比例、15％體積比的接種量共同接種于發酵培養基(玉米漿50、尿素15g/L、氯化鈣1.0g/L、磷酸吡哆醛0.6g/L。)中，接種后將培養基密封置于37℃，靜置發酵3～5天。
(2)降解污水油脂：將步驟(1)制備的復合菌劑以10％體積比投入至500mL油脂廢水(含油脂40％～50％)中，37℃培養箱中反應72h。
對反應初始及反應72h后的污水中油脂含量進行檢測，結果顯示，反應72h后油脂降解率為95.4％。
實施例6
(1)菌劑的制備：將沼澤紅假單胞菌、短小芽孢桿菌和解脂耶氏酵母分別在各自的培養基中培養至OD600＝1.2，按照1：2：2的比例、15％體積比的接種量共同接種于發酵培養基(玉米漿50、尿素15g/L、氯化鈣1.0g/L、磷酸吡哆醛0.6g/L。)中，接種后將培養基密封置于37℃，靜置發酵3～5天。
(2)降解污水油脂：將步驟(1)制備的復合菌劑以10％體積比投入至500mL油脂廢水(含油脂40％～50％)中，37℃培養箱中反應72h。
對反應初始及反應72h后的污水中油脂含量進行檢測，結果顯示，反應72h后油脂降解率為96.8％。
實施例7
(1)菌劑的制備：將沼澤紅假單胞菌、短小芽孢桿菌和解脂耶氏酵母分別在各自的培養基中培養至OD600＝1.2，按照1：1.5：2的比例、15％體積比的接種量共同接種于發酵培養基(玉米漿50、尿素15g/L、氯化鈣1.0g/L、磷酸吡哆醛0.6g/L。)中，接種后將培養基密封置于37℃，靜置發酵3～5天。
(2)降解污水油脂：將步驟(1)制備的復合菌劑以10％體積比投入至500mL油脂廢水(含油脂40％～50％)中，37℃培養箱中反應72h。
對反應初始及反應72h后的污水中油脂含量進行檢測，結果顯示，反應72h后油脂降解率為95.2％。
實施例8
按實施例6的方法制備菌劑，將菌劑按10％體積比投入至1m3規模的污水處理池中，37℃反應72h，結果顯示，反應72h后油脂降解率為95.8％。
雖然本發明已以較佳實施例公開如上，但其并非用以限定本發明，任何熟悉此技術的人，在不脫離本發明的精神和范圍內，都可做各種的改動與修飾，因此本發明的保護范圍應該以權利要求書所界定的為準。