本發明涉及一種低聚糖的制備方法，特別涉及一種亞臨界水制備低聚糖的方法。

背景技術：

亞臨界水就是在適度的壓力下，把水加熱到100℃以上，臨界溫度374℃以下的高溫時，使其仍然保持在液體狀態的高溫高壓水。水的性質會發生很大的變化，一方面其極性降低，對有機物的溶解能力增加，類似于有機溶劑。另一方面，隨著溫度接近臨界點，水的酸堿催化能力大大增強，在一定程度上可以代替傳統酸堿催化劑用于酸堿催化反應，減少污染，是一種綠色技術。另外由于其的性質隨溫度和壓力可調，可以根據需要設計反應所需要的條件，控制反應朝期望的方向進行，非常適用于工業的大規模生產。

低聚糖是一類分子量較低的碳水化合物，水果蔬菜甚至糧食中都含有，單糖通過糖昔鍵(2-10)連接形成支鏈或直鏈的低度聚合糖。功能性低聚糖是指對人、動物、植物等具有特殊生理作用的一類寡糖，它的甜度一般只有蔗糖的30％-50％，具有低熱量、抗齲齒、防治糖尿病、改善腸道菌落結構等生理作用，因此越來越多的做為功能性食品添加劑應用于功能性食品中，正日益受到消費者的青睞。低聚糖可以通過多糖的降解制備。目前的制備方法主要有酸降解法、氧化降解法和酶降解法。前兩種方法反應劇烈，降解程度難以控制，酶降解法成本較高，而亞臨界水法降解多糖價廉、無污染且效率高，是一種綠色技術，目前尚未見報道。

技術實現要素：

本發明是為了克服上述現有技術中缺陷，通過。

一種亞臨界水制備低聚糖的方法，按照如下步驟進行：

(1)將蔬菜或水果清洗，除去泥沙和灰塵，切塊，破碎；按固液比1:10-20kg/l加入去離子水，提取溫度60-80℃，提取時間6-12h，紗布過濾，濾液再用離心法將懸浮物除去，得到蔬菜或水果提取液；

(2)將步驟(1)中得到的蔬菜或水果提取液加入乙醇使溶液中乙醇含量達到70-90％，將溶液0-8℃冷藏10-14h，得沉淀物；

(3)將步驟(2)中得到的沉淀物抽濾收集，凍干得到蔬菜或水果粗多糖粉末；

(4)將步驟(3)中得到的蔬菜或水果粗多糖粉末以1:10-20g/ml的比例溶于去離子水，加入亞臨界反應釜，反應溫度160-220℃，反應壓力10-20mpa，反應時間30-60min，得反應液；

(5)將步驟(4)中得到的反應液用超濾膜超濾，得到超濾液；再將超濾液用大孔樹脂吸附，再用30-60％乙醇水溶液解吸，得到解析液，解析液通過減壓濃縮，凍干后得到蔬菜或水果低聚糖。

所述蔬菜為南瓜、胡蘿卜、青椒、土豆、白菜、花椰菜、四季豆、蘑菇、茄子中的一種或一種以上。

所述的南瓜品種為中國南瓜、印度南瓜、美洲南瓜和墨西哥南瓜中的一種或一種以上。

所述水果為蘋果、梨、香蕉、橙子、芒果、桃、荔枝中的一種或一種以上。

所述超濾膜為2000da的超濾膜。

所述大孔樹脂為ab-8或d101，樹脂用量與濾液的固液比為1:10-20g/ml,吸附時間為10-20h。

得到的終產品蔬菜或水果低聚糖，由2-8個單糖組成，純度為80-95％。

與現有技術相比，本發明具有如下有益效果：(1)本發明提出的一種亞臨界水制備低聚糖的方法，采用亞臨界水制備低聚糖，工藝流程簡單，綠色無污染，設備要求低，易實現工業應用。(2)本發明制備低聚糖，為低聚糖的開發提供了新的資源，同時為低聚糖功能性研究，以及功能性食品、藥品的開發奠定了基礎。(3)本發明的產品中低聚糖純度高達90％以上，有利于產品在市場中的應用。

具體實施方式

下面對本發明的具體實施方式進行詳細描述，但應當理解本發明的保護范圍并不受具體實施方式的限制。

實施例1

一種亞臨界水制備低聚糖的方法，按照如下步驟進行：

(1)南瓜洗凈，經過去皮、切塊、破碎等步驟后，得到南瓜果肉；1kg南瓜果肉，加入去離子水10l，在溫度60℃下攪拌6h，提取結束后用紗布過濾，濾液6000rpm離心10min得上清液。

(2)上清液加入乙醇使溶液中乙醇含量達到80％，將溶液4℃冷藏12h，得沉淀物。

(3)沉淀物抽濾收集，凍干得到南瓜粗多糖粉末60g。

(4)將60g南瓜粗多糖粉末，溶于600ml去離子水，加入亞臨界反應釜，反應溫度180℃，反應壓力10mpa，反應時間60min，得反應液。

(5)反應液用2000da的超濾膜超濾，得到超濾液；再將超濾液用50gab-8大孔樹脂吸附12h，再用500ml體積分數60％乙醇水溶液解吸，得到解析液，解析液通過40℃減壓濃縮，凍干后得到南瓜低聚糖31g。

(6)通過hplc法測定產品中2-8個單糖組成的低聚糖含量為89％。

實施例2

一種亞臨界水制備低聚糖的方法，按照如下步驟進行：

(1)桃洗凈，經過去皮、切塊、破碎等步驟后，得到桃果肉；1kg桃果肉，加入去離子水15l，在溫度70℃下攪拌9h，提取結束后用紗布過濾，濾液6000rpm離心10min得上清液。

(2)上清液加入乙醇使溶液中乙醇含量達到80％，將溶液4℃冷藏12h，得沉淀物。

(3)沉淀物抽濾收集，凍干得到桃粗多糖粉末65g。

(4)將65g桃粗多糖粉末，溶于1l去離子水，加入亞臨界反應釜，反應溫度200℃，反應壓力15mpa，反應時間45min，得反應液。

(5)反應液用2000da的超濾膜超濾，得到超濾液；再將超濾液用100gd101大孔樹脂吸附18h，再用800ml體積分數50％乙醇水溶液解吸，得到解析液，解析液通過40℃減壓濃縮，凍干后得到桃低聚糖35g。

(6)通過hplc法測定產品中2-8個單糖組成的低聚糖含量為93％。

實施例3

一種亞臨界水制備低聚糖的方法，按照如下步驟進行：

(1)土豆洗凈，經過去皮、切塊、破碎等步驟后，得到土豆果肉；1kg土豆果肉，加入去離子水20l，在溫度80℃下攪拌12h，提取結束后用紗布過濾，濾液6000rpm離心10min得上清液。

(2)上清液加入乙醇使溶液中乙醇含量達到80％，將溶液4℃冷藏12h，得沉淀物。

(3)沉淀物抽濾收集，凍干得到土豆粗多糖粉末70g。

(4)將70g土豆粗多糖粉末，溶于1.4l去離子水，加入亞臨界反應釜，反應溫度220℃，反應壓力20mpa，反應時間40min，得反應液。

(5)反應液用2000da的超濾膜超濾，得到超濾液；再將超濾液用120gab-8大孔樹脂吸附24h，再用1l體積分數55％乙醇水溶液解吸，得到解析液，解析液通過40℃減壓濃縮，凍干后得到土豆低聚糖38g。

(6)通過hplc法測定產品中2-8個單糖組成的低聚糖含量為92％。

實施例4

一種亞臨界水制備低聚糖的方法，按照如下步驟進行：

(1)胡蘿卜洗凈，經過去皮、切塊、破碎等步驟后，得到胡蘿卜果肉；1kg胡蘿卜果肉，加入去離子水15l，在溫度70℃下攪拌9h，提取結束后用紗布過濾，濾液6000rpm離心10min得上清液。

(2)上清液加入乙醇使溶液中乙醇含量達到80％，將溶液4℃冷藏12h，得沉淀物。

(3)沉淀物抽濾收集，凍干得到胡蘿卜粗多糖粉末65g。

(4)將65g胡蘿卜粗多糖粉末，溶于1l去離子水，加入亞臨界反應釜，反應溫度200℃，反應壓力15mpa，反應時間45min，得反應液。

(5)反應液用2000da的超濾膜超濾，得到超濾液；再將超濾液用100gd101大孔樹脂吸附18h，再用800ml體積分數50％乙醇水溶液解吸，得到解析液，解析液通過40℃減壓濃縮，凍干后得到胡蘿卜低聚糖35g。

(6)通過hplc法測定產品中2-8個單糖組成的低聚糖含量為93％。

實施例5

一種亞臨界水制備低聚糖的方法，按照如下步驟進行：

(1)蘋果洗凈，經過去皮、切塊、破碎等步驟后，得到蘋果果肉；1kg蘋果果肉，加入去離子水20l，在溫度80℃下攪拌12h，提取結束后用紗布過濾，濾液6000rpm離心10min得上清液。

(2)上清液加入乙醇使溶液中乙醇含量達到80％，將溶液4℃冷藏12h，得沉淀物。

(3)沉淀物抽濾收集，凍干得到蘋果粗多糖粉末70g。

(4)將70g蘋果粗多糖粉末，溶于1.4l去離子水，加入亞臨界反應釜，反應溫度220℃，反應壓力20mpa，反應時間40min，得反應液。

(5)反應液用2000da的超濾膜超濾，得到超濾液；再將超濾液用120gab-8大孔樹脂吸附24h，再用1l體積分數55％乙醇水溶液解吸，得到解析液，解析液通過40℃減壓濃縮，凍干后得到蘋果低聚糖38g。

(6)通過hplc法測定產品中2-8個單糖組成的低聚糖含量為92％。

實施例6

一種亞臨界水制備低聚糖的方法，按照如下步驟進行：

(1)南瓜洗凈，經過去皮、切塊、破碎等步驟后，得到南瓜果肉；毛果草的種子磨碎；取1kg南瓜果肉和50g磨碎的毛果草的種子，加入去離子水10l，在溫度60℃下攪拌6h，提取結束后用紗布過濾，濾液6000rpm離心10min得上清液。

(2)上清液加入乙醇使溶液中乙醇含量達到80％，將溶液4℃冷藏12h，得沉淀物。

(3)沉淀物抽濾收集，凍干得到粗多糖粉末60g。

(4)將60g粗多糖粉末，溶于600ml去離子水，加入亞臨界反應釜，反應溫度180℃，反應壓力10mpa，反應時間60min，得反應液。

(5)反應液用2000da的超濾膜超濾，得到超濾液；再將超濾液用50gab-8大孔樹脂吸附12h，再用500ml體積分數60％乙醇水溶液解吸，得到解析液，解析液通過40℃減壓濃縮，凍干后得到低聚糖33g。

(6)通過hplc法測定產品中2-8個單糖組成的低聚糖含量為99％。

實施例7

一種亞臨界水制備低聚糖的方法，按照如下步驟進行：

(1)南瓜洗凈，經過去皮、切塊、破碎等步驟后，得到南瓜果肉；取1kg南瓜果肉，加入去離子水10l，芫花素0.1g,在溫度60℃下攪拌6h，提取結束后用紗布過濾，濾液6000rpm離心10min得上清液。

(2)上清液加入乙醇使溶液中乙醇含量達到80％，將溶液4℃冷藏12h，得沉淀物。

(3)沉淀物抽濾收集，凍干得到南瓜粗多糖粉末60g。

(4)將60g南瓜粗多糖粉末，溶于600ml去離子水，加入亞臨界反應釜，反應溫度180℃，反

(5)反應液用2000da的超應壓力10mpa，反應時間60min，得反應液。濾膜超濾，得到超濾液；再將超濾液用50gab-8大孔樹脂吸附12h，再用500ml體積分數60％乙醇水溶液解吸，得到解析液，解析液通過40℃減壓濃縮，凍干后得到南瓜低聚糖32g。

(6)通過hplc法測定產品中2-8個單糖組成的低聚糖含量為99％。

以上公開的僅為本發明的具體實施例，但是，本發明并非局限于此，任何本領域的技術人員能思之的變化都應落入本發明的保護范圍。