本發明涉及蛋白質用運載體和蛋白質導入方法。

背景技術：

1、在生物化學領域中，用于將目標物質傳遞至靶細胞的dds（藥物傳遞系統）的平臺非常受到重視。

2、例如，在農業、畜產、水產、醫療等各種領域中廣泛利用的基因組編輯中，通過使具有核酸酶活性的cas9蛋白質和作為rna分子的向導rna與靶序列接觸，切斷上述靶序列，進行基因的敲除、外來基因的敲入。這樣，在上述基因組編輯中，例如需要遞送分子量相對較大的蛋白質。另外，如果向作為食品材料的動植物導入、為了治療而向人導入，則擔心例如人工dds對生物體產生影響。

技術實現思路

1、發明要解決的技術問題

2、因此，本發明的目的在于提供一種作為蛋白質的dds平臺的新運載體。

3、用于解決技術問題的技術方案

4、為了實現上述目的，本發明的蛋白質用運載體（carrier）的特征在于，包含金虎尾科（malpighiaceae）植物的果實的囊泡，保持對象為蛋白質或上述蛋白質的編碼核酸。

5、本發明的蛋白質傳遞試劑的制造方法的特征在于，包括如下工序：通過使上述本發明的包含囊泡的蛋白質用運載體與作為傳遞目標的蛋白質或上述蛋白質的編碼核酸在溶劑中共存，形成上述蛋白質用運載體的囊泡與上述蛋白質或上述蛋白質的編碼核酸的復合體。

6、本發明的向細胞導入蛋白質的方法的特征在于，包括使上述本發明的包含囊泡的蛋白質用運載體和作為傳遞目標的蛋白質或上述蛋白質的編碼核酸的復合體與細胞接觸的接觸工序。

7、發明效果

8、本發明的蛋白質用運載體包含針葉櫻桃等金虎尾科植物的果實的囊泡，通過上述囊泡，能夠保持蛋白質或上述蛋白質的編碼核酸。因此，根據本發明的蛋白質用運載體，例如可以用作基因組編輯等中使用的核酸酶等蛋白質的dds工具。

技術特征：

1.一種蛋白質用運載體，其特征在于，包含金虎尾科植物的果實的囊泡，

2.根據權利要求1所述的蛋白質用運載體，其中，所述金虎尾科植物為針葉櫻桃種植物。

3.根據權利要求1或2所述的蛋白質用運載體，其中，所述囊泡的平均粒徑為30～400nm。

4.根據權利要求1～3中任一項所述的蛋白質用運載體，其中，所述囊泡是細胞外囊泡。

5.根據權利要求1～4中任一項所述的蛋白質用運載體，其中，所述編碼核酸為在載體中插入有所述蛋白質的編碼序列的表達載體。

6.根據權利要求1～5中任一項所述的蛋白質用運載體，其中，所述蛋白質為序列特異性核酸酶。

7.根據權利要求6所述的蛋白質用運載體，其中，所述序列特異性核酸酶為cas蛋白質。

8.根據權利要求7所述的蛋白質用運載體，其中，所述cas蛋白質為cas9蛋白質。

9.根據權利要求1～8中任一項所述的蛋白質用運載體，其中，所述保持對象還包含針對所述蛋白質或所述蛋白質的編碼核酸的并用成分。

10.根據權利要求9所述的蛋白質用運載體，其中，所述并用成分為核酸物質，所述核酸物質為向導rna。

11.根據權利要求1～10中任一項所述的蛋白質用運載體，其中，所述蛋白質用運載體還包含所述蛋白質或所述蛋白質的編碼核酸。

12.一種蛋白質傳遞試劑的制造方法，其特征在于，包括以下工序：通過使權利要求1～10中任一項所述的包含囊泡的蛋白質用運載體與作為傳遞目標的蛋白質或所述蛋白質的編碼核酸在溶劑中共存，形成所述蛋白質用運載體的囊泡與所述蛋白質或所述蛋白質的編碼核酸的復合體。

13.根據權利要求12所述的蛋白質傳遞試劑的制造方法，其中，所述制造方法包括以下工序：將所述蛋白質用運載體與所述蛋白質或所述蛋白質的編碼核酸在所述溶劑中混合并進行孵育。

14.根據權利要求12或13所述的蛋白質傳遞試劑的制造方法，其中，進一步使針對所述蛋白質或所述蛋白質的編碼核酸的并用成分與所述蛋白質用運載體在所述溶劑中共存。

15.一種向細胞導入蛋白質的蛋白質導入方法，其特征在于，包括使權利要求1～10中任一項所述的包含囊泡的蛋白質用運載體和作為傳遞目標的蛋白質或所述蛋白質的編碼核酸的復合體與細胞接觸的接觸工序。

16.根據權利要求15所述的蛋白質導入方法，其中，所述復合體為進一步包含針對所述蛋白質或所述蛋白質的編碼核酸的并用成分的復合體。

17.根據權利要求15或16所述的蛋白質導入方法，其中，在所述接觸工序之前，進一步包括：

18.根據權利要求15～17中任一項所述的蛋白質導入方法，其中，所述接觸工序是使所述復合體與細胞在體內、離體或體外接觸的工序。

19.根據權利要求15～18中任一項所述的蛋白質導入方法，其中，所述接觸工序是對人或非人動物給藥所述復合體的工序。

技術總結
本發明提供用于將Cas蛋白質等蛋白質導入細胞的新運載體。本發明的蛋白質用運載體的特征在于，包含金虎尾科（Malpighiaceae）植物果實的囊泡，保持對象為蛋白質或上述蛋白質的編碼核酸。上述金虎尾科（Malpighiaceae）植物例如為針葉櫻桃種（Malpighia?sp.）植物。本發明的蛋白質用運載體例如可以用作基因組編輯的工具。

技術研發人員：黑田雅彥,梅津知宏
受保護的技術使用者：學校法人東京醫科大學
技術研發日：
技術公布日：2025/4/28