本發(fā)明涉及糖尿病創(chuàng)面愈合藥物，尤其涉及干細胞和光敏劑的藥物。

背景技術：

1、糖尿病性傷口發(fā)病率高，給全球家庭和社會帶來越來越大的負擔。糖尿病創(chuàng)面的高血糖微環(huán)境增加了細菌感染的易感性。更重要的是，細菌感染常加重持續(xù)性慢性炎癥，加重創(chuàng)面缺氧和血管生成障礙，進一步延緩創(chuàng)面愈合。因此，對慢性糖尿病創(chuàng)面進行有效抗菌和調(diào)節(jié)創(chuàng)面微環(huán)境是理想的治療策略。在抗菌治療中，抗生素已被廣泛用于消除慢性傷口中的病原微生物。然而，細菌耐藥性與抗生素濫用相關的局限性使研發(fā)新的替代策略成為現(xiàn)今迫切的需求。

2、抗菌光動力療法(apdt)因其廣譜抗菌活性和不易產(chǎn)生耐藥性而被認為是一種很有前途的替代方法。然而，傳統(tǒng)光敏劑缺乏靶向性導致嚴重的毒副作用。并且傷口感染部位的缺氧微環(huán)境嚴重限制了耗氧光敏劑的光動力效率。此外，在臨床實踐中，準確評估慢性傷口感染程度有助于患者制定及時有效的治療策略。為此，各種復合納米材料已被廣泛開發(fā)用于診斷和靶向感染性傷口的pdt，但復雜成分的不確定毒性和不可復制性限制了其臨床應用。因此，迫切需要開發(fā)具有選擇性活化和不依賴氧的i型促光敏劑，以精確診斷和有效治療糖尿病性慢性傷口感染。另一方面，通過調(diào)節(jié)傷口微環(huán)境來加速傷口愈合的策略也在不斷發(fā)展。

技術實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的在于提供一種基于臍帶間充質(zhì)干細胞囊泡負載i型光敏前藥的納米囊泡及其制備方法與應用，以解決現(xiàn)有技術中糖尿病創(chuàng)面缺乏有效抗菌促愈合藥物的問題。

2、為了達到上述目的本發(fā)明采用如下技術方案：

3、一種i型光敏前藥，結構式如下所示：

4、

5、本發(fā)明還提供一種所述的i型光敏前藥的制備方法，過程包括：n-苯并吩噻嗪溶液中加入碳酸氫鈉和連二亞硫酸鈉攪拌混合，混合物變黃后，去除混合物中的水，然后加入三乙胺中，加入三光氣溶液攪拌，再加入4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)氯甲酸芐酯和三乙胺，充分混合反應，提純得到i型光敏前藥nbs-pb。

6、進一步地，具體過程包括：將n-苯并吩噻嗪390mg溶于50％去離子水/二氯甲烷的溶液中，加入碳酸氫鈉168mg和連二亞硫酸鈉526mg攪拌2h，待混合物變黃后，去除混合物中的水，加入三乙胺170μl中；在1ml二氯甲烷中緩慢加入三光氣120mg，并將其加入到上一步得到的混合體系中，室溫攪拌0.5h；在上述溶液中加入4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)氯甲酸芐酯296mg和三乙胺140μl，一夜反應后收集混合物，提純得到i型光敏前藥nbs-pb。

7、本發(fā)明還提供一種所述i型光敏前藥在制備治療糖尿病性創(chuàng)面的藥物中的應用。

8、本發(fā)明還提供一種應用所述i型光敏前藥的納米囊泡，其包括來源于人臍間充質(zhì)干細胞的囊泡及其負載的所述i型光敏前藥，為納米囊泡evs@nbs-pb。

9、本發(fā)明還提供一種所述的應用所述i型光敏前藥的納米囊泡的制備方法，過程包括：裂解人臍間充質(zhì)干細胞，反復研磨后離心取上清液，將上清液依次通過脂質(zhì)體擠出器中800nm和400nm聚碳酸酯膜反復擠壓得到細胞囊泡，在細胞囊泡溶液中加入i型光敏前藥，再用脂質(zhì)體擠出器的200nm聚碳酸酯膜反復擠壓后得到納米囊泡evs@nbs-pb。

10、進一步地，詳細過程如下：將107個/ml人臍間充質(zhì)干細胞用1ml低滲裂解液在4℃下過夜裂解，將所得裂解液反復研磨20次，用3200g、4℃條件離心5min，取上清液；將上清液依次通過脂質(zhì)體擠出器中800nm和400nm聚碳酸酯膜反復擠壓20次得到細胞囊泡uc-evs；在1ml?uc-evs溶液中加入10μl?100mm?i型光敏前藥nbs-pb后渦旋混勻，再用脂質(zhì)體擠出器的200nm聚碳酸酯膜反復擠壓20次后得到納米囊泡evs@nbs-pb。

11、本發(fā)明還提供一種所述的應用所述i型光敏前藥的納米囊泡在制備治療糖尿病性創(chuàng)面的藥物中的應用。

12、本發(fā)明還提供一種所述的應用所述i型光敏前藥的納米囊泡在制備水凝膠微針貼片中的應用。臨床應用中可將臍帶間充質(zhì)干細胞囊泡負載i型光敏前藥用水凝膠微針貼片裝載后敷于創(chuàng)面，用近紅外激光照射治療。

13、本發(fā)明的優(yōu)點在于：如圖1所示，納米囊泡evs@nbs-pb的i型光敏前藥可與糖尿病慢性傷口微環(huán)境中高水平的h2o2響應釋放i型光敏劑，再通過激光激發(fā)后產(chǎn)生pdt效應釋放活性氧達到抗菌的目的，實現(xiàn)對糖尿病慢性創(chuàng)面的靶向抗感染作用，結合來源于人臍間充質(zhì)干細胞的囊泡調(diào)節(jié)傷口微環(huán)境來協(xié)同治療慢性創(chuàng)面；干細胞囊泡不僅能夠提高光敏前藥的生物相容性，同時還具有促細胞增殖、遷移及血管生成的作用；用水凝膠微針貼片裝載給藥的方式不僅具有高藥物遞送效率和微創(chuàng)性，同時也能提高患者的依從性。

技術特征：

1.一種i型光敏前藥，其特征在于：

2.一種根據(jù)權利要求1所述的i型光敏前藥的制備方法，其特征在于：

3.根據(jù)權利要求1或2所述的一種i型光敏前藥的制備方法，其特征在于：

4.一種如權利要求1所述i型光敏前藥在制備治療糖尿病性創(chuàng)面的藥物中的應用。

5.一種應用權利要求1所述i型光敏前藥的納米囊泡，其特征在于：

6.一種如權利要求5所述的應用所述i型光敏前藥的納米囊泡的制備方法，其特征在于：

7.根據(jù)權利要求6所述的一種應用所述i型光敏前藥的納米囊泡的制備方法，其特征在于：

8.一種如權利要求5所述的應用所述i型光敏前藥的納米囊泡在制備治療糖尿病性創(chuàng)面的藥物中的應用。

9.一種如權利要求8所述的應用所述i型光敏前藥的納米囊泡在制備水凝膠微針貼片中的應用。

技術總結
本發(fā)明公開了一種基于臍帶間充質(zhì)干細胞囊泡負載I型光敏前藥的納米囊泡及其制備方法與應用，其包括來源于人臍間充質(zhì)干細胞的囊泡及其負載的所述I型光敏前藥。本發(fā)明的優(yōu)點包括：納米囊泡EVs@NBS?PB的I型光敏前藥可與糖尿病慢性傷口微環(huán)境中高水平的H<subgt;2</subgt;O<subgt;2</subgt;響應釋放I型光敏劑，再通過激光激發(fā)后產(chǎn)生PDT效應釋放活性氧達到抗菌的目的，實現(xiàn)對糖尿病慢性創(chuàng)面的靶向抗感染作用，結合來源于人臍間充質(zhì)干細胞的囊泡調(diào)節(jié)傷口微環(huán)境來協(xié)同治療慢性創(chuàng)面；干細胞囊泡不僅能夠提高光敏前藥的生物相容性，同時還具有促細胞增殖、遷移及血管生成的作用；用水凝膠微針貼片裝載給藥的方式不僅具有高藥物遞送效率和微創(chuàng)性，同時也能提高患者的依從性。

技術研發(fā)人員：鄒小明,廖玉輝,曾琴,涂星強,鄭舉敦,張英
受保護的技術使用者：南方醫(yī)科大學第七附屬醫(yī)院（佛山市南海區(qū)第三人民醫(yī)院）
技術研發(fā)日：
技術公布日：2025/4/28