本發明涉及生物工程，具體涉及蠋蝽多巴胺d2受體acdd2r基因及其激活劑與應用。

背景技術：

1、蠋蝽(arma?chinensis)廣泛分布于我國各地，是典型的捕食性農業害蟲天敵，在綠色生物防控中具有重要的意義。作為生物防治中優良的捕食性天敵昆蟲，蠋蝽a.chinensis產卵量大，定殖性強，存活時間長，分布范圍廣，成蟲和若蟲均能捕食鱗翅目、鞘翅目、膜翅目及半翅目等40余種農林常見多發害蟲。在國內外已被廣泛應用與農業生產中，并實現其大規模商品化擴繁。滯育是昆蟲應對不利環境條件時生長發育受到抑制的一種生理狀態，最明顯的特征就是一旦進入滯育，發育極其緩慢、生殖受到抑制、代謝活性下調和抗逆性增強。利用昆蟲滯育可以讓蠋蝽抵御不良的環境條件，延長存活時間，解決蠋蝽產品長時間貯存和貨架期的延長問題。

2、rna干擾(rna?interference,rnai)是一種能夠精確調控基因表達的機制，該技術通過雙鏈rna(dsrna,double-stranded?rna,雙鏈核糖核酸)特異性地降解目標mrna分子，從而抑制特定基因的活性。此技術可以特異性抑制特定基因的表達，故該技術已被廣泛用于探索基因功能和基因治療領域。rnai能夠高效的篩選生物防控所需靶向基因，為害蟲生物防控和天敵昆蟲等經濟昆蟲產品的開發與應用奠定了堅實的基礎。目前該技術在植保領域已成為新的害蟲防治手段，該技術利用昆蟲自身基因片段，通過rnai抑制昆蟲體內生長發育或生化代謝中關鍵基因的表達，進而控制害蟲危害或調控經濟昆蟲的發育進度以適應生產應用的需求。rnai技術在農業植保防治領域具有廣闊的發展前景。而實現基于rnai害蟲有效控制的關鍵問題是篩選害蟲特異性及對其生長發育有明顯抑制作用的靶標基因。

3、多巴胺及其受體在昆蟲體內起著調節生理和發育過程的關鍵作用，能夠影響昆蟲的生長、發育、蛻皮和繁殖等重要生命活動。基于這種調控特性，多巴胺及其受體已被廣泛研究用于調節昆蟲的生理過程，作為一種潛在的生物控制手段。

技術實現思路

1、本發明旨在提供一種蠋蝽多巴胺d2受體(acdd2r)基因及其編碼的蛋白，以及acdd2r基因的調控劑，其中該調控劑可用于調節昆蟲的滯育狀態。

2、為了實現上述目的，本發明采用了如下技術方案：

3、本發明首先提供一種蠋蝽多巴胺d2受體基因，其包含以下任意一種核苷酸序列：

4、(1)seq?id?no.1所示的核苷酸序列；

5、(2)seq?id?no.1所示的核苷酸序列經過一個或多個核苷酸的替換、缺失或插入獲得的具有相同功能蛋白的編碼核苷酸序列。

6、更加的，本發明提供編碼上述蠋蝽多巴胺d2受體基因的蛋白，具有如seq?id?no.2所示的氨基酸序列，或者具有與seq?id?no.2所示的氨基酸序列具有至少95％同源性的氨基酸序列。以此說明，本領域技術人員可根據本發明公開的氨基酸序列，在不影響其活性的前提下，取代、缺失和/或增加一個或幾個氨基酸，得到所述蛋白的突變序列。

7、更加的，本發明提供兩種acdd2r基因的調控方式：

8、(1)抑制劑：通過rna干擾技術用于抑制acdd2r基因的表達；

9、(2)激活劑：使用特異性激動劑quinpirole，用于激活acdd2r受體。

10、更加的，所述的dsrna可由seq?id?no.3所示的正向引物和seq?id?no.4所示的反向引物擴增獲得。

11、更加的，本發明提供上述acdd2r基因調控劑在調節昆蟲滯育中的應用。本發明通過實驗證明：

12、(1)通過rna干擾技術抑制acdd2r基因表達后，可顯著：增加滯育期脂質積累、提高滯育后期存活率、縮短產卵前期、增加產卵量。

13、(2)通過特異性激動劑quinpirole激活acdd2r可抑制滯育期脂質積累。

14、本發明的acdd2r基因及其調控劑可用于調控蠋蝽滯育過程中的脂質代謝和繁殖力，在天敵昆蟲保存與應用方面具有重要的應用價值。

技術特征：

1.一種蠋蝽多巴胺d2受體acdd2r基因，其特征在于，具有如下任一種核苷酸序列：

2.編碼權利要求1所述的acdd2r基因的蛋白。

3.根據權利要求?2所述的蛋白，其特征在于，具有如?seq?id?no?.2?所示的氨基酸序列，?或者具有與?seq?id?no?.2?所示的氨基酸序列具有至少95％同源性的氨基酸序列。

4.一種acdd2r基因的調控劑，其特征在于，包括：

5.根據權利要求4所述的acdd2r基因抑制劑，其特征在于，所述抑制劑為dsrna。

6.根據權利要求5所述的抑制劑，其特征在于，所述dsrna為seq?id?no.3所示的正向引物和seq?id?no.4所示的反向引物擴增獲得的雙鏈rna。

7.根據權利要求4所述的acdd2r基因激活劑，其特征在于，所述激活劑為quinpirole。

8.權利要求4-7任一項所述的acdd2r基因調控劑在調節昆蟲滯育中的應用。

9.根據權利要求8所述的應用，其特征在于，通過注射方式將所述調控劑導入昆蟲體內。

技術總結
本發明涉及生物工程技術領域，具體涉及蠋蝽多巴胺D2受體(AcDD2R)基因及其應用。本發明提供了SEQ?ID?NO.1所示的蠋蝽多巴胺D2受體基因的核苷酸序列及SEQ?ID?NO.2所示的氨基酸序列；本發明還提供了AcDD2R基因的激活劑及其在調節昆蟲滯育中的應用。本發明所述AcDD2R基因，經RNA干擾技術抑制表達后，可顯著增加滯育期脂質積累，促進滯育解除后存活率和繁殖力，其dsRNA可作為調控蠋蝽滯育的相關制劑及產品。此外，通過特異性激動劑quinpirole激活AcDD2R可抑制滯育期脂質積累。本發明對于理解昆蟲滯育調控機制具有重要意義，在天敵昆蟲保存與應用方面具有廣闊的應用前景。

技術研發人員：張茂森,張禮生,李智永,芶劍渝,申忠健,陳俊杰,劉照涵
受保護的技術使用者：貴州省煙草公司遵義市公司
技術研發日：
技術公布日：2025/4/24