本發明涉及生物醫藥,特別是涉及一種具有緩解結直腸癌功效的松杉靈芝多糖及其制備方法和應用。
背景技術:
1、結直腸癌是全球癌癥相關死亡的第二大原因。據估計,到2040年,癌癥的負擔將增加到每年320萬例新增病例(增長63%)和每年160萬例死亡病例(增長73%)(世界衛生組織,2022年)。除人口老齡化和飲食習慣外,肥胖、缺乏體育鍛煉和吸煙等不利風險因素也增加了患癌癥的風險。近年來隨著經濟發展、人口老齡化和生活方式的變化,其發病率和死亡率呈上升趨勢。據國家癌癥中心最新報告顯示,我國結直腸癌發病率和死亡率在全部惡性腫瘤中分別位居第2位和第5位。早期癌癥的存活率高于晚期癌癥,然而結直腸癌通常在晚期被診斷,這導致死亡率增加。手術、放射治療和化療目前用于治療結直腸癌,接受頻繁化療的患者容易產生耐藥性,這可能會導致不良的治療結果,并對正常細胞產生有害的副作用。因此,有必要開發更有效、更安全的治療結直腸癌的方法。
2、在傳統中醫中,松杉靈芝經常被用來改善健康、增加活力和延長壽命。《中國藥用真菌圖志》記載松杉靈芝扶正固體、滋補健體,民間將其泡酒后服用,具有益心氣、安驚魂、補肝益氣、堅筋骨、養顏等功效。多糖是最被認可的食藥用菌衍生物質,具有一系列重要的生物學特性。松杉靈芝多糖,安全無害,毒副作用小,越來越多的科研人員開始致力于利用靈芝多糖開發安全、經濟、有效的天然藥物。
技術實現思路
1、本發明的目的是提供一種具有緩解結直腸癌功效的松杉靈芝多糖及其制備方法和應用,以解決上述現有技術存在的問題,本發明提取純化出一種新的松杉靈芝多糖,該松杉靈芝多糖在緩解結直腸癌方面具有突出的作用效果,本發明為開發具有有效性和生物安全性的結直腸癌藥物提供理論支撐。
2、為實現上述目的,本發明提供了如下方案:
3、本發明提供一種具有緩解結直腸癌功效的松杉靈芝多糖,所述松杉靈芝多糖由甘露糖、葡萄糖、半乳糖和巖藻糖組成;所述甘露糖、葡萄糖、半乳糖和巖藻糖的摩爾比為3.221:1.414:80.539:14.826;
4、所述松杉靈芝多糖的結構為:
5、
6、可選的是,所述松杉靈芝多糖的制備方法包括以下步驟:
7、松杉靈芝子實體經干燥、超微粉碎、過篩后加入去離子水,超聲提取,離心取上清,濃縮、去除蛋白后取上清液再次濃縮,使用乙醇水溶液進行沉淀,收集沉淀,進行凍干,獲得松杉靈芝粗多糖;
8、將所述松杉靈芝粗多糖溶解,通過二乙胺基乙基瓊脂糖凝膠洗脫,收集多糖溶液濃縮、透析、凍干,再通過色譜柱進行純化即得所述松杉靈芝多糖。
9、可選的是,所述二乙胺基乙基瓊脂糖凝膠的洗脫液為水和氯化鈉溶液,流速為1ml/min。可選的是,所述純化包括通過hiprep?26/60sephacryl?s-400hr制備級色譜柱進行第一次純化,再通過hiload?16/600superdex?200pg制備級色譜柱進行第二次純化。
10、可選的是,所述hiprep?26/60sephacryl?s-400hr制備級色譜柱的洗脫液為0.15mol/l氯化鈉溶液;所述hiload?16/600superdex?200pg制備級色譜柱的洗脫液為0.15mol/l氯化鈉溶液。
11、可選的是,所述超聲的功率為300w,時間為1h。
12、本發明還提供所述的松杉靈芝多糖在制備治療結直腸癌的藥物中的應用。
13、本發明還提供一種治療結直腸癌的藥物,所述藥物的有效成分包括所述的松杉靈芝多糖。
14、可選的是,所述藥物還包括藥學上可接受的載體物質和/或輔劑。
15、可選的是,所述輔料包括促吸收劑、稀釋劑、填充劑、賦形劑、粘合劑、濕潤劑、崩釋劑、表面活性劑、吸附載體、潤滑劑和香味劑中的至少一種。
16、本發明公開了以下技術效果:
17、本發明提取純化出一種新的松杉靈芝多糖,由甘露糖、葡萄糖、半乳糖和巖藻糖組成,甘露糖、葡萄糖、半乳糖和巖藻糖的摩爾比為3.221:1.414:80.539:14.826,松杉靈芝多糖的分子量為7.056kda。通過細胞實驗和動物實驗證實,松杉靈芝多糖對結直腸癌具有顯著的抑制效果:顯著減少結腸腫瘤的數量和大小;緩解結腸重量指數、出血、隱窩出芽、發育不良和增生等病理學癥狀;還顯著抑制了結腸中ifn-γ(18.46%,p<0.05)、tgf-β(20.80%,p<0.01)和il-17a(24.98%,p<0.01)的水平,同時提高了il-4的水平,可見,本發明提供的松杉靈芝多糖在緩解結直腸癌方面具有突出的作用效果,本發明為進一步開發具有有效性和生物安全性的結直腸癌藥物提供了理論支撐。
1.一種具有緩解結直腸癌功效的松杉靈芝多糖,其特征在于,所述松杉靈芝多糖由甘露糖、葡萄糖、半乳糖和巖藻糖組成;所述甘露糖、葡萄糖、半乳糖和巖藻糖的摩爾比為3.221:1.414:80.539:14.826;
2.如權利要求1所述的松杉靈芝多糖,其特征在于,所述松杉靈芝多糖的制備方法包括以下步驟:
3.如權利要求2所述的松杉靈芝多糖,其特征在于,所述二乙胺基乙基瓊脂糖凝膠的洗脫液為水和氯化鈉溶液,流速為1ml/min。
4.如權利要求2所述的松杉靈芝多糖,其特征在于,所述純化包括通過hiprep?26/60sephacryl?s-400hr制備級色譜柱進行第一次純化,再通過hiload?16/600superdex200pg制備級色譜柱進行第二次純化。
5.如權利要求4所述的松杉靈芝多糖,其特征在于,所述hiprep?26/60sephacryl?s-400hr制備級色譜柱的洗脫液為0.15mol/l氯化鈉溶液;所述hiload?16/600superdex200pg制備級色譜柱的洗脫液為0.15mol/l氯化鈉溶液。
6.如權利要求2所述的松杉靈芝多糖,其特征在于,所述超聲的功率為300w,時間為1h。
7.如權利要求1~6任一項所述的松杉靈芝多糖在制備治療結直腸癌的藥物中的應用。
8.一種治療結直腸癌的藥物,其特征在于,所述藥物的有效成分包括權利要求1~6任一項所述的松杉靈芝多糖。
9.如權利要求8所述的藥物,其特征在于,所述藥物還包括藥學上可接受的輔料。
10.如權利要求9所述的藥物,其特征在于,所述輔料包括促吸收劑、稀釋劑、填充劑、賦形劑、粘合劑、濕潤劑、崩釋劑、表面活性劑、吸附載體、潤滑劑和香味劑中的至少一種。