本技術屬于抗體，具體涉及一種抗nkp46的納米抗體及其應用。

背景技術：

1、nk是先天免疫系統的重要組成部分，能夠在不依賴與先前抗原刺激的情況下殺死癌癥和病毒感染的細胞，發揮著關鍵的抗病毒和抗腫瘤作用。nk細胞表面表達多種激活性受體，如nkp46、nkp30、nkg2d等。這些激活受體的配體(如b7h6、mica/b等)在細胞惡性轉化(腫瘤)、自身免疫性炎癥、感染性炎癥等情況下上調表達。nk細胞通過與配體結合，識別并殺傷異常細胞。

2、nkp46是免疫球蛋白超家族的成員，具有兩個外部c2型ig樣結構域。其跨膜(tm)結構域通過與cd3ζ或fcrγ的跨膜結構域結合，傳遞激活信號。nk細胞在腫瘤、自身免疫性疾病、移植排斥反應以及炎癥的發生和發展中發揮著重要作用。作為nk細胞介導免疫反應的關鍵激活受體，nkp46不僅參與腫瘤免疫監視，還在自身免疫疾病、移植排斥反應和炎癥反應中扮演著核心角色。鑒于其在調節免疫反應中的獨特功能，調控nkp46活性已成為新型免疫治療和藥物研發的重點方向，尤其在增強抗腫瘤免疫反應和抑制過度免疫反應方面，展現出顯著的臨床應用潛力。

3、目前，innate?pharma公司在基于nkp46抗體的藥物研發方面取得了顯著進展。iph6101/sar443579在臨床前模型中展示了優異抗腫瘤活性，并且在急性髓系白血病、b細胞急性淋巴細胞白血病、高危骨髓增生異常的適應癥已經進入了ii期臨床試驗階段。

4、然而，目前全球公開的nkp46抗體專利中，部分抗體存在無法結合猴類nkp46和nk細胞活化能力較弱的問題。因此，開發新型靶向nkp46的納米抗體，能夠精確調控nk細胞活性，并構建靶向nkp46的nk細胞治療平臺(nkce)，成為疾病療法研發的關鍵，進而為疾病治療提供有效方案。

技術實現思路

1、因此，本技術開發新型靶向nkp46的納米抗體，其能夠精確調控nk細胞活性，并構建靶向nkp46的nk細胞治療平臺(nkce)，其技術方案如下：

2、1.一種納米抗體，其特征在于，所述納米抗體包含三個重鏈互補決定區(cdr-h1、cdr-h2、cdr-h3),其中：

3、cdr-h1具有序列seq?id?no?2：grtfsnya的氨基酸序列，

4、cdr-h2具有序列seq?id?no?3：isrsgdt的氨基酸序列，

5、cdr-h3具有序列seq?id?no?4：aagpslyatniftagrwydy的氨基酸序列。

6、2.根據項1所述的納米抗體，其特征在于，所述納米抗體包含抗體重鏈可變區vhh，其中：

7、vhh具有序列seq?id?no：1：

8、evqlvesggglvqagasltlsclvpgrtfsnyamgwfrqapgkdrdvvaaisrsgdtfyidsvkgrftisrddakntvylqmnslkpedkalyycaagps?lyatniftagrwydywgqgtqvtvss的氨基酸序列，或為與seqid?no：1具有90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％以上同一性的氨基酸序列。

9、3.根據項1所述的納米抗體，其特征在于，所述納米抗體包含重鏈，其中：

10、所述重鏈氨基酸序列具有序列seq?id?no：5：

11、evqlvesggglvqagasltlsclvpgrtfsnyamgwfrqapgkdrdvvaaisrsgdtfyidsvkgrftisrddakntvylqmnslkpedkalyycaagpslyatniftagrwydywgqgtqvtvssepkssdkthtcppcpapeaaggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvvvdvshedpevkfnwyvdgvevhnaktkpreeqynstyrvvsvltvlhqdwlngkeykckvsnkalpapiektiskakgqprepqvytlppsrdeltknqvsltclvkgfypsdiavewesngqpennykttppvldsdgsfflyskltvdksrwqqgnvfscsvmhealhnhytqkslslspgk的氨基酸序列，或為與seq?id?no：5具有90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％以上同一性的氨基酸序列。

12、4.一種核酸分子，其包含編碼項1-3中任一項所述的納米抗體。

13、5.一種載體，其包含項4所述的核酸。

14、6.一種宿主細胞，其包含項4所述的核酸或項5所述的載體。

15、7.一種藥物組合物，其中，所述藥物組合物包含：

16、項1-3中任一項所述的納米抗體、或項4所述核酸表達的抗體、或項5所述的載體制備的抗體、或項6所述的宿主細胞生產的抗體，以及藥學上可接受的載體。

17、8.根據項7所述的藥物組合物，其中，所述藥物組合物用于治療或預防nkp46介導的相關疾病。

18、9.根據項8所述的藥物組合物，其中，所述nkp46介導的相關疾病選自乳腺癌、肺癌、肝癌、胃癌、結腸癌、直腸癌、食管癌、胰腺癌、鼻咽癌、膀胱癌、宮頸癌、前列腺癌、卵巢癌、腎癌、甲狀腺癌、淋巴瘤、白血病、子宮內膜癌、黑色素瘤、骨肉瘤、濾泡性淋巴瘤、復發/難治性多發性骨髓瘤、復發/難治性輕鏈淀粉樣變性、類風濕性關節炎、系統性紅斑狼瘡中的一種或兩種以上。

19、10.一種檢測nkp46的制品或試劑盒，其中，包括項1-3任一項所述的納米抗體或其抗原結合片段。

20、11.一種偶聯物，其中，所述偶聯物包括：

21、項1-3中任一項所述的納米抗體，或項4所述核酸表達的抗體，或項5所述的載體制備的抗體，或項6所述的宿主細胞生產的抗體。

22、12.根據項11所述的偶聯物，其中，所述偶聯物還包括與所述抗體連接的藥物、細胞因子、放射性核素或酶。

23、13.一種治療或預防nkp46介導的相關疾病的方法，其中包括對有治療或預防需要的使用者施用治療有效量的項7-9任一項所述的藥物組合物。

24、14.根據項3所述的方法，其中，所述nkp46介導的相關疾病選自乳腺癌、肺癌、肝癌、胃癌、結腸癌、直腸癌、食管癌、胰腺癌、鼻咽癌、膀胱癌、宮頸癌、前列腺癌、卵巢癌、腎癌、甲狀腺癌、淋巴瘤、白血病、子宮內膜癌、黑色素瘤、骨肉瘤、濾泡性淋巴瘤、復發/難治性多發性骨髓瘤、復發/難治性輕鏈淀粉樣變性、類風濕性關節炎、系統性紅斑狼瘡中的一種或兩種以上。

25、15.項1-3任一項所述的納米抗體或其抗原結合片段在制備檢測nkp46的制品或試劑盒中的用途。

26、16.根據項1-3中任一項所述的納米抗體在制備用于治療或預防nkp46介導的相關疾病的藥物中的用途。

27、17.根據項16所述的用途，其中，所述nkp46介導的相關疾病選自乳腺癌、肺癌、肝癌、胃癌、結腸癌、直腸癌、食管癌、胰腺癌、鼻咽癌、膀胱癌、宮頸癌、前列腺癌、卵巢癌、腎癌、甲狀腺癌、淋巴瘤、白血病、子宮內膜癌、黑色素瘤、骨肉瘤、濾泡性淋巴瘤、復發/難治性多發性骨髓瘤、復發/難治性輕鏈淀粉樣變性、類風濕性關節炎、系統性紅斑狼瘡中的一種或兩種以上。

28、有益效果：本技術提供一種nkp46納米抗體或其抗原結合片段，能夠高效結合人、食蟹猴nkp46，促進nk細胞活化，精確調控nk細胞活性，并構建靶向nkp46的nk細胞治療平臺(nkce)；基于本技術nkp46納米抗體的優異生物學特性及成藥強的特點，能夠進一步推動濾泡性淋巴瘤、復發/難治性多發性骨髓瘤(rrmm)以及復發/難治性輕鏈淀粉樣變性(rrlca)等病癥的治療。