1.一種基于單端測序的多重pcr擴增建庫方法,其特征在于,包括如下步驟:
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述基于單端測序的多重pcr擴增建庫方法,其特征在于,在步驟(2)中,所述引物池包括用于檢測原癌基因和抑癌基因的snv/indel、cnv、fusion、msi突變中任意一種或多種的特異性引物對。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述基于單端測序的多重pcr擴增建庫方法,其特征在于,在步驟(2)中,所述引物池包括用于檢測akt1、alk、araf、braf、cd274、ctnnb1、ddr2、dpyd、egfr、erbb2、esr1、fbxw7、fgfr1、fgfr2、fgfr3、fgfr4、gnas、hras、idh1、idh2、kit、kras、map2k1、met、nras、ntrk1、ntrk3、pdgfra、pik3ca、pold1、pole、pten、ret、ros1、smad4、tert、tp53、ugt1a1中任意一種或多種基因或msi的引物組成的dna引物池或用于檢測alk、braf、cldn18、egfr、fgfr1、fgfr2、fgfr3、fgfr4、met、nrg1、ntrk1、ntrk2、ntrk3、ret、ros1中任意一種或多種基因的引物組成的rna引物池;
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述基于單端測序的多重pcr擴增建庫方法,其特征在于,所述dna引物池中特異性擴增序列包括如下所示序列中的一種或多種:
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述基于單端測序的多重pcr擴增建庫方法,其特征在于,seq?idno.1~seq?id?no.410所示任意一種特異擴增序列可分別與seq?id?no.414、seq?id?no.415所示搭橋序列連接,用于檢測原癌基因和抑癌基因的snv/indel、cnv、fusion、msi突變中任意一種或多種。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述基于單端測序的多重pcr擴增建庫方法,其特征在于,在步驟(4)中,所述index引物序列如下:
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述基于單端測序的多重pcr擴增建庫方法,其特征在于,在步驟(5)中,所述生物學(xué)分析的步驟包括:
8.一種權(quán)利要求1所述基于單端測序的多重pcr擴增建庫方法在篩選腫瘤靶向藥、癌癥診斷或復(fù)發(fā)監(jiān)測上的應(yīng)用。
9.一種可用于實施權(quán)利要求1所述基于單端測序的多重pcr擴增建庫方法的ngs檢測裝置或試劑盒。
10.一種權(quán)利要求9所述可用于實施基于單端測序的多重pcr擴增建庫方法的ngs檢測裝置或試劑盒在篩選腫瘤靶向藥、癌癥診斷或復(fù)發(fā)監(jiān)測上的應(yīng)用。