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利用熒光PCR毛細管電泳技術檢測豬親緣關系及個體識別的檢測試劑盒及其應用的制作方法

文檔序號:41223773發布日期:2025-03-11 14:02閱讀:來源:國知局

技術特征:

1.用于檢測豬親緣關系和/或個體識別的引物組合物,其特征在于,所述引物組合物由擴增如下21個str位點的引物對組成:sw72、sw830、sw122、sw632、nc_010448.4:30771560-30771774、nc_010444.4:79465902-79466147、sw2410、sw857、s0090、s0026、nc_010461.5:125168617-125168844、nc_010448.4:133201992-133202223、sw24、sw951、sw787、s0068、nc_010446.5:111894542-111894769、nc_010456.5:2142411-2142640、nc_010445.4:30015724-30015971、nc_010445.4:61466571-61466802和igf1,其中:

2.根據權利要求1所述的引物組合物,其特征在于,所述引物組合物按照str位點分為四組,所述引物組合物由第一組str位點的擴增引物、第二組str位點的擴增引物、第三組str位點的擴增引物和第四組str位點的擴增引物組成;

3.根據權利要求2所述的引物組合物,其特征在于,所述第一組str位點的擴增引物采用的熒光染料標記物為fam;所述第二組str位點的擴增引物采用的熒光染料標記物為hex;所述第三組str位點的擴增引物采用的熒光染料標記物為tamra;所述第四組str位點的擴增引物采用的熒光染料標記物為rox。

4.用于檢測豬親緣關系和/或個體識別的試劑,其特征在于,所述試劑包括權利要求1-3任一項所述的引物組合物。

5.根據權利要求4所述的試劑,其特征在于,所述試劑為溶液;

6.用于檢測豬親緣關系和/或個體識別的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒包括權利要求1-3任一項所述的引物組合物或權利要求4或5所述的試劑。

7.根據權利要求6所述的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒還包括pcr擴增反應體系;

8.檢測豬親緣關系和/或個體識別的方法,其特征在于,包括如下步驟:

9.根據權利要求8所述的方法,其特征在于,所述pcr反應程序包括:

10.權利要求1-3任一項所述的引物組合物、權利要求4或5所述的試劑、權利要求6或7所述的試劑盒或權利要求8或9所述的方法在如下任一項中的應用:


技術總結
本發明提供了一種利用熒光PCR毛細管電泳技術檢測豬親緣關系及個體識別的檢測試劑盒及其應用,涉及生物技術領域,本發明首次將ISAG公布的STR位點與通過高通量測序數據分析獲得的多態性高的STR位進行組合篩選獲得一組適用于豬親緣關系和/或個體識別的STR位點。本發明還對STR位點進行了優化提高引物的特異性,相互之間不存在連鎖效應,分型豐富且兼容性好,使檢測結果準確可靠;且操作方法簡單,檢測時長短;一次性可以檢測多個位點,成本低;靈敏度高,低至2ng/μL的DNA模板量可以得到準確分型;并且本發明所述的檢測試劑盒具備良好的特異性與穩定性,多次實驗無非特異產生,信號強度穩定。

技術研發人員:劉剛,周榮,李尚桐
受保護的技術使用者:全國畜牧總站
技術研發日:
技術公布日:2025/3/10
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