一種新型苯丙氨酸手性色譜柱固定相的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種基于苯丙氨酸的新型手性色譜柱固定相的制備方法，所述制備方法包括以下步驟：第一步，硅膠球表面處理；第二步，苯丙氨酸手性選擇器單體的制備；第三步，手性色譜柱固定相的制備。本發(fā)明方法具有的有益效果是：1)工藝路線簡(jiǎn)單、成本低廉、操作方便；2)制備的手性色譜柱固定相具有較寬的手性選擇性；3)流動(dòng)相適用范圍廣，固定相結(jié)合力好，不易流失，使用壽命長(zhǎng)；4)分離時(shí)間短，不拖尾，柱效高等。
【專利說(shuō)明】一種新型苯丙氨酸手性色譜柱固定相的制備方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及屬于液相色譜手性分離領(lǐng)域，具體涉及一種基于苯丙氨酸的新型手性 色譜柱固定相的制備方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 手性是人類賴以生存的自然界的本質(zhì)屬性之一。生命現(xiàn)象中的化學(xué)過(guò)程都是在高 度不對(duì)稱的環(huán)境中進(jìn)行的。眾所周知，手性化合物中單一光學(xué)純對(duì)映體表現(xiàn)出不同毒性、藥 理以及生物活性等特性，所以分離和純化對(duì)映體在制藥等很多科學(xué)領(lǐng)域得到越來(lái)越多的重 視。
[0003] 目前市場(chǎng)上出售的處方藥中超過(guò)60%的藥物分子中含有一個(gè)或多個(gè)手性中心，而 這類手性藥物中的絕大多數(shù)是以外消旋的形式在市場(chǎng)銷售。而手性藥物往往只有對(duì)映體 的一種是有效成分，而另一種沒(méi)有治療效果甚至還會(huì)引起毒副作用，例如反應(yīng)停，早在I960 年用作鎮(zhèn)靜和安眠藥，用于治療妊娠期的不良反應(yīng)。但是后來(lái)發(fā)現(xiàn)，換孕早期的婦女服用此 藥會(huì)引起胎兒嚴(yán)重畸形，使該藥停止使用。1979年發(fā)現(xiàn)，僅R- (+)對(duì)映體沙利度胺具有鎮(zhèn)靜 和安眠作用。而S-(_)對(duì)映體對(duì)胎兒有致畸作用。到20世紀(jì)80年代以后人們才逐漸認(rèn)識(shí) 到手性在藥物中的重要性。
[0004] 中國(guó)專利申請(qǐng)?zhí)枮?9117305. 8公開(kāi)了一種手性配體交換色譜固定相及其制備方 法，它以L-苯丙氨酸為原料，制備一類新型手性選擇器，將其于涂敷于固定相上，可實(shí)現(xiàn)對(duì) 氨基酸樣品的直接拆分。其不足之處在于分離所需時(shí)間較長(zhǎng)，后流出組分拖尾較嚴(yán)重，而且 固定相容易流失，限制了它的使用壽命。中國(guó)申請(qǐng)專利（申請(qǐng)?zhí)枮镃N200480043803. X)公開(kāi) 了一種化學(xué)鍵合手性固定相及制備方法，使用脯氨酸作為手性選擇劑，通過(guò)化學(xué)鍵合的方 法將其鍵合于載體上，可對(duì)多種不同類型的手性化合物實(shí)現(xiàn)分離，其不足之處在于制備繁 瑣，柱效不高，穩(wěn)定性不好。本發(fā)明制備固定相工藝路線簡(jiǎn)單、成本低廉、操作方便；制備的 手性色譜柱固定相具有較寬的手性選擇性；流動(dòng)相適用范圍廣，固定相結(jié)合力好不易流失， 使用壽命長(zhǎng)等；且分離時(shí)間短，不拖尾，柱效高。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明涉及一種基于苯丙氨酸酸的新型手性色譜柱固定相的制備方法，以苯丙氨 酸衍生物為母體，設(shè)計(jì)合成了具有下列通式的手性固定相：
[0006] 載體-連接基-多肽基團(tuán)-NH-P
[0007]

【權(quán)利要求】
1. 一種新型苯丙氨酸手性色譜柱固定相的制備方法，其特征是：所述制備方法包括以 下步驟， 1) 載體娃膠球的前處理： 取5. Og娃膠球加入爺形瓶，再加入10mL的12mol/L的濃鹽酸，加熱回流1?24h ;過(guò) 濾除去濃鹽酸，水洗硅膠球至呈中性，依次用丙酮和無(wú)水乙醚沖洗，真空干燥； 2) 苯丙氨酸手性單體的制備： (1) Z-苯丙氨酸的合成： 冰水浴下在裝有1. 0L去離子水的三頸瓶中依次加入0. 1?lOmol氫氧化鈉,0. 1? lOmol苯丙氨酸，攪拌全溶后，向溶液中滴加含有0. 1?lOmol節(jié)氧酰氯和0. 1?lOmol氫 氧化鈉的1.0L去離子水溶液，室溫下攪拌5?20h ;用乙醚萃取，在萃取出的水相中加入濃 鹽酸，至水相呈酸性，加入乙酸乙酯萃取，水洗至呈中性，分出的有機(jī)相用無(wú)水硫酸鈉干燥， 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去乙酸乙酯，濾去硫酸鈉；之后用四氯化碳及石油醚重結(jié)晶，干燥后即得Z-苯 丙氨酸； (2) Z-苯丙氨酸-芳香胺的反應(yīng)： 稱取0. 1?lOmol由步驟（1)制得的Z-苯丙氨酸加入三頸瓶中，再加入50?lOOOmLN， N-二甲基甲酰胺，加熱攪拌溶解，再加入0. 1?10mol苯并三氮唑-N，N，K-四甲 基脲六氟磷酸酯，攪拌1?5h后加入0. 1?lOmol三乙胺，稱取0. 1?lOmol芳香胺溶解 于50?500mL N，N-二甲基甲酰胺中加入到混合液中，常溫?cái)嚢??10h，45°C下攪拌1? 50h，然后向三頸瓶中加入去離子水析出沉淀，過(guò)濾，濾餅真空干燥，用乙醇重結(jié)晶，抽濾，真 空干燥； (3) 脫去節(jié)氧基保護(hù)： 向250mL的三頸瓶中加入0. 1?lOmol步驟（2)產(chǎn)物，加入乙醇溶解，加入少量用乙醇 稀釋的鈀碳，通入氫氣反應(yīng)，當(dāng)溶液冷卻后沒(méi)有固體析出時(shí)，停止反應(yīng)，抽濾除去鈀碳，濾液 濃縮干后，用四氫呋喃和石油醚重結(jié)晶； (4) 與Z-苯丙氨酸反應(yīng)： 稱取0. 1?lOmol的Z-苯丙氨酸在三頸瓶中，加入50?1000mL的N，N-二甲基甲酰 胺加熱攪拌溶解，加入0.1?lOmol苯并三氮唑-Ν，Ν，Ν'，Ν'-四甲基脲六氟磷酸酯，攪 拌1?5h后加入0. 1?lOmol的三乙胺，稱取0. 1?lOmol的步驟（3)產(chǎn)物溶解于50? 500mLN，N-二甲基甲酰胺中加入到混合液中，常溫下攪拌1?10h，45°C下攪拌1?50h，然 后向三頸瓶中加入去離子水析出沉淀，過(guò)濾，濾餅真空干燥，用四氫呋喃重結(jié)晶，抽濾，真空 干燥； (5) Z-苯丙氨酸二肽衍生物的合成： 向250mL的三頸瓶中加入0. 1?lOmol步驟（4)產(chǎn)物，加入四氫呋喃溶解，加入少量用 四氫呋喃稀釋的鈀碳，通入氫氣反應(yīng)，當(dāng)溶液冷卻后沒(méi)有固體析出時(shí)，停止反應(yīng)，抽濾除去 鈀碳，濾液濃縮干后，用四氫呋喃，和石油醚重結(jié)晶； (6) 手性單體的合成： 氮?dú)獗Ｗo(hù)下向反應(yīng)瓶中加入〇· lmol?lOmol步驟（5)產(chǎn)物，然后加入10?1000mL 二氯甲烷，攪拌溶解，在加入用二氯甲烷稀釋的〇. 1?lOmol異氰酸酯基硅氧烷，室溫反應(yīng) 10-24h，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下濾去濾液，濾餅分別用50-500mL重蒸的二氯甲烷，石油醚洗滌，即得 手性單體； 3)手性固定相的制備： 取1?500mg在步驟2)中制得的手性單體加入茄形瓶中，然后加入在步驟1)中制得 的經(jīng)過(guò)前處理載體硅膠球和適量甲苯，加熱回流，用分水器除水1?l〇〇h后過(guò)濾，依次用丙 酮、乙醚沖洗濾出的固體，真空干燥，即得本新型苯丙氨酸手性色譜柱固定相。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的新型苯丙氨酸手性色譜柱固定相的制備方法，其特征是：本 新型苯丙氨酸手性色譜柱固定相的結(jié)構(gòu)通式為，
其中，η為1?10的任意整數(shù)；R1為苯甲基；P為芳基。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的新型苯丙氨酸手性色譜柱固定相的制備方法，其特征是：步 驟（1)中所述的苯丙氨酸為L(zhǎng)-苯丙氨酸或者D-苯丙氨酸。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的新型苯丙氨酸手性色譜柱固定相的制備方法，其特征是：步 驟（2)中所述的芳香胺為苯胺、3, 5-二甲基苯胺、3, 5-二氯苯胺、3, 5-二甲氧基苯胺、3， 5_二氟苯胺、三苯甲基苯胺、α-萘胺和α-甲基萘胺中的一種。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的新型苯丙氨酸手性色譜柱固定相的制備方法，其特征是：步 驟（6)中所述的異氰酸酯基硅氧烷為3-異氰酸酯基丙基三乙氧基硅烷、4-異氰酸酯基丁基 二乙氧基娃燒、5-異氰酸酯基戊基二乙氧基娃燒、6-異氰酸酯基己基二乙氧基娃燒、7-異 氰酸酯基庚基三乙氧基硅烷、8-異氰酸酯基辛基三乙氧基硅烷、9-異氰酸酯基寅基三乙氧 基娃燒和1〇 _異氛酸醋基癸基二乙氧基娃燒中的一種。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1-5任一所述的新型苯丙氨酸手性色譜柱固定相的制備方法，其特 征在于：本新型苯丙氨酸手性色譜柱固定相用標(biāo)準(zhǔn)勻漿填充法裝入4. 6mmX 250mm HPLC柱 中。
【文檔編號(hào)】B01J20/29GK104289210SQ201410320290
【公開(kāi)日】2015年1月21日 申請(qǐng)日期:2014年7月2日 優(yōu)先權(quán)日:2014年7月2日
【發(fā)明者】楊永剛, 李藝, 李寶宗, 王慶峰 申請(qǐng)人:蘇州蘇凱路化學(xué)科技有限公司