一種茯苓新菌種及其高效栽培技術的制作方法
專利名稱：一種茯苓新菌種及其高效栽培技術的制作方法
技術領域：
本發明涉及菌種選育及其栽培技木，尤其涉及茯苓新菌種選育及其高效栽培技術。
背景技術：
茯苓(Poria Cocos (schw)WOLF)為多孔真菌(擔子菌)，味甘、淡，性平，具有滲濕利水、益脾胃、保腎安神、生津等功能，為用途廣泛的藥用真菌和傳統中藥，也是“四君八珍”的組方之一，其市場前景十分廣闊。茯苓的主要成份為茯苓聚糖(又稱“茯苓多糖”)，約占干重的93 %。茯苓多糖為免疫增強劑，具有增強免疫、輔助化療、防治腫瘤、抗腫瘤等作用，已廣泛用作抗癌新藥、 肝炎康復藥，并用于治療支氣管哮喘和慢性支氣管炎等。已有的茯苓保健品包括茯苓平片、茯苓卷筒、茯苓方塊、茯苓多糖原粉、茯苓多糖ロ服液、茯苓多糖復方制劑等。茯苓為喜溫真菌，適產于中國、東南亞、美洲、大洋洲等有松樹的山區地方。中國是茯苓主產國，約占世界茯苓總產量的70%。近年來，我國年茯苓成品需求量在2萬噸以上，年出ロ量約為7000噸，且市場需求量呈現逐年遞增趨勢。但是，國內外有關茯苓新菌種選育及其高效栽培技術的研究尚顯不足。20世紀60年代開始的人工栽培茯苓技木，以茯苓菌種“5. 78”進行肉引栽培，并主要以松樹砍伐后的段木、圓木或樹蔸為栽培基質(又稱“菌材”)，該方法存在栽培技術落后，需消耗大量的松樹資源，且菌種經多年的繼代繁殖，菌株生命力下降，苓體變小，出現自然變異，品種衰老退化，生物學效率顯著下降(已從30% -40%下降到10% -20% )，以及存在接種成活率、結苓率、茯苓產量、茯苓質量、資源利用率均偏低，生產成本過高、產業效益不理想等缺陷。因此，選育質量更優的茯苓新菌種，研究更加高效環保的茯苓栽培技術，以提高茯苓的生物學效率和資源利用率，提高茯苓種植業的產量、質量和產業效益，成為人們迫切需要解決的技術問題。
發明內容
本發明的目的在于提供一種茯苓新菌種(CCTCC NO :Μ2011072)，所述茯苓菌種適合采用袋料高效栽培技術進行栽培。本發明所述的茯苓新菌種(CCTCC NO Μ2011072)具有遺傳性狀穩定，抗雜菌感染能力強，適應性廣，結苓率高(96%以上)，生物學效率高達42% -70%，平均畝產鮮茯苓達8500kg以上，高產地塊達到14624kg，并顯著縮短了茯苓的生長周期，減少了白蟻的危害與雜菌的污染，顯著提高了對松木原料的利用率，具有優質、高產、高抗等優點，還顯著提高和改善了茯苓的接種成活率、生物學效率、結苓率、茯苓產量、茯苓質量、資源利用率等性狀。本發明的優選實施方案中，茯苓新菌種(CCTCC NO M2011072)的主要性狀特征包括1)菌絲體粗壯，白色，鎖狀聯合體明顯；菌絲在種植過程中傳引快；2)結苓早，苓體均勻結實，肉質白色或淺黃色，苓皮薄，呈紫紅色；3)具有遺傳性狀穩定、抗雜菌感染能力強，生物學效率高，產量高，質量好等優點；4)顯著提高了茯苓中的氨基酸和茯苓多糖等有效成分的含量。本發明的另一目的在于提供ー種茯苓菌種(CCTCC NO M2011072)的選育方法，包括如下步驟I)菌絲體的培養選擇苓體均勻結實、苓皮薄、質量好的野生茯苓，在24-28°C條件下進行組織培養，分離菌核和菌絲體，其中，所述組織培養的培養基含水量為55-60%，pH值5-6，組成中包括適宜茯苓生長的碳源，所述的碳源選自蔗糖、可溶性淀粉、葡萄糖、麥芽汁、蛋白胨的任ー種或其組合，優選為蛋白胨；2)菌絲體的提純、復壯將分離的菌絲體接種于多管培養基中，再將其置于無菌箱內，26-28°C培養7-10天，至菌絲長滿培養基，從中選擇生長狀況最優者進行轉種培養，其中，所述菌絲體的提純、復壯培養基組成為，1000毫升的水、200克的馬鈴薯、20克的瓊月旨、20克的葡萄糖、3克的磷酸ニ氫鉀、I. 5克的硫酸鎂、I. 5克的維生素BI和5克的蛋白 胨；3)茯苓新菌種的選擇根據生物遺傳、變異、選育新品種的基本原理和生產實踐，針對性地遴選茯苓新菌種的性狀，從中選育出適宜袋料栽培和不需斷根栽培的茯苓新菌種(CCTCC NO M2011072)；其中，所述菌絲體的培養、提純、復壯的培養基組成為，1000重量份的水、200重量份的馬鈴薯、20重量份的瓊脂、20重量份的葡萄糖、3重量份的磷酸ニ氫鉀、I. 5重量份的硫酸鎂、I. 5重量份的維生素BI和5重量份的蛋白胨。本發明的優選技術方案中，所述菌絲體的培養、提純、復壯培養基的組成為，1000重量份的水、200重量份的馬鈴薯、20重量份的瓊脂、20重量份的葡萄糖、3重量份的磷酸ニ氫鉀、I. 5重量份的硫酸鎂、I. 5重量份的維生素BI和5重量份的蛋白胨，其制備方法包括下述步驟1)將馬鈴薯去皮，清選干凈，切成薄片，放入鍋中煮沸，煮到熟而不爛的程度，篩網過濾，制得馬鈴薯汁，調節其pH值5. 5-6. 5 ；2)在制得的馬鈴薯汁中加入培養基組成中的其它成份，加熱溶解后，分裝入試管后，在O. 15公斤壓カ下高溫滅菌30分鐘，取出，冷卻，將其制成斜面培養基。本發明的另一目的在于提供ー種茯苓菌種(CCTCC NO M2011072)的高效袋裝栽培方法，包括培養料的制備、制袋、接種培養、場地選擇、整地、誘殺白蟻、菌袋下地及其管理、采收的步驟，其特征在于，所述培養料的制備包括下述步驟，選擇新鮮無腐爛霉變的松樹的根、蔸、尾尖、枝條、邊角料或松木屑的任ー種或其組合，將其截斷加工成長度為33-35cm的菌材，削去菌材的粗皮后，將其曬干，再將其扎成捆，備用。本發明的優選實施方案中，所述制袋包括下述步驟，將步驟①中扎成捆的菌材置入清水中浸泡不少于10小時，使其吸收足夠的水份，撈起浙干，將所需加入配料攪拌均勻后，在菌袋底部加入部分配料，再將扎成捆的菌材裝入菌袋后，加入余量配料，扎緊袋ロ，進行高溫滅菌，其中，每袋菌袋裝入約為5公斤的菌材和約為O. 25公斤的配料，所述配料的含水量約為60%，pH值5. 5-6. 5，由77%的干燥松木屑、20%的麥皮或米糠、I %的蔗糖、I %的石膏、O. 5%的過磷酸鈣、O. 5%的硫酸鎂和適量的水制作而成。本發明的優選實施方案中，所述接種培養包括下述步驟，將高溫滅菌后的袋料放入潔凈的操作房間內，待袋料內溫度降至28°C以下時，將袋料搬入接種室內或接種箱內，無菌條件下，接種茯苓菌種(CCTCC NO :M2011072)，其中，每袋料接種100-150g茯苓菌種(CCTCC NO :M2011072)，所述茯苓菌種(CCTCC NO M2011072)分小塊均勻接種到袋料內，接
種好后扎好袋ロ，將其放入培養室內，在26-28 °C進行恒溫培養；待菌絲長滿全袋后，即可下地覆土管理結苓。本發明的優選實施方案中，所述場地選擇包括下述步驟選擇向陽、土壤疏松、pH值4. 5-6. 5、坡度為5-20度、排水良好的果園地、闊葉林地、旱地或房前屋后的空坪隙地的任ー種或其組合作為栽培場地。本發明的優選實施方案中，所述整地包括下述步驟選好栽培場地后，清除場內雜草，深耕30_40cm。
本發明的優選實施方案中，所述誘殺白蟻包括下述步驟整好栽培場地后，在土坑內堆放茶油枯、培養料及菌種(CCTCC NO :M2011072)，噴施殺蟲劑，蓋上新鮮松葉枝，再蓋好土，誘殺白蟻。本發明的優選實施方案中，所述菌袋下地包括下述步驟將長滿菌絲的菌袋劃開一條ロ子，插進ー根小松樹枝或松樹根作引木，與菌袋一起橫放入土中，每排放兩包菌袋，插有引木的菌袋置于兩端，菌袋間的間隔為30-40cm,再蓋土 10-12cm。本發明的優選實施方案中，所述菌袋下地后管理包括下述步驟采取地表覆蓋、澆水、開排水溝的任ー種方法或其組合，以調節菌袋下地后的土壌溫度和濕度，防止菌袋下地后的土壤長期處于高溫、干旱或陰雨的環境，并保持袋料內溫度26-32°C，土壌含水量約60%。本發明的優選實施方案中，所述采收包括下述步驟菌袋下地覆土后，在正常的溫度、濕度條件下，待茯苓生長成熟。本發明的另一目的在于提供一種茯苓的栽培方法，包括如下步驟①培養料的制備所述培養料的制備包括下述步驟，選擇新鮮無腐爛霉變的松樹的根、蔸、尾尖、枝條、邊角料或松木屑的任ー種或其組合，將其截斷加工成長度為33-35cm的菌材，削去菌材的粗皮后，將其曬干，再將其扎成捆，備用；②制袋所述制袋包括下述步驟，將步驟①中扎成捆的菌材置入清水中浸泡不少于10小時，使其吸收足夠的水份，撈起浙干，將所需加入配料攪拌均勻后，在菌袋底部加入部分配料，再將扎成捆的菌材裝入菌袋后，加入余量配料，扎緊袋ロ，進行高溫滅菌，其中，每袋菌袋裝入約為5公斤的菌材和約為O. 25公斤的配料，所述配料的含水量約為60%，pH值5. 5-6. 5，由77%的干燥松木屑、20%的麥皮或米糠、I %的蔗糖、I %的石膏、O. 5%的過磷酸鈣、O. 5%的硫酸鎂和適量的水制作而成；③接種培養所述接種培養包括下述步驟，將高溫滅菌后的袋料放入潔凈的操作房間內，待袋料內溫度降至28°C以下時，將袋料搬入接種室內或接種箱內，無菌條件下，接種茯苓菌種(CCTCC NO :M2011072)，其中，每袋料接種100-150g茯苓菌種(CCTCC NO:M2011072)，所述茯苓菌種(CCTCC NO M2011072)分小塊均勻接種到袋料內，接種好后扎好袋ロ，將其放入培養室內，在26-28 °C進行恒溫培養；待菌絲長滿全袋后，即可下地覆土管理結苓；④場地選擇所述場地選擇包括下述步驟選擇向陽、土壤疏松、pH值4. 5-6. 5、坡度為5-20度、排水良好的果園地、闊葉林地、早地或房前屋后的空坪隙地的任ー種或其組合作為栽培場地；⑤整地所述整地包括下述步驟選好栽培場地后，清除場內雜草，深耕30-40cm ；⑥誘殺白蟻所述誘殺白蟻包括下述步驟整好栽培場地后，在土坑內堆放茶油枯、培養料及菌種(CCTCC NO :M2011072)，噴施殺蟲劑，蓋上新鮮松葉枝，再蓋好土，誘殺白蟻；⑦菌袋下地所述菌袋下地包括下述步驟將長滿菌絲的菌袋劃開一條ロ子，插進ー根小松樹枝或松樹根作引木，與菌袋一起橫放入土中，每排放兩包菌袋，插有引木的菌袋置于兩端，菌袋間的間隔為30-40cm,再蓋土 10-12cm ；⑧菌袋下地后的管理所述菌袋下地后的管理包括下述步驟采取地表覆蓋、澆水、開排水溝的任ー種方法或其組合，以調節菌袋下地后的土壌溫度和濕度，防止菌袋下 地后的土壤長期處于高溫、干旱或陰雨的環境，并保持袋料內溫度26-32°C，土壌含水量約60% ；⑨采收所述采收包括下述步驟菌袋下地覆土后，在正常的溫度、濕度條件下，待茯苓生長成熟。本發明的優選實施方案中，所述的高溫滅菌條件為，在O. 15Kg壓カ下保持4-5小時，常壓滅菌溫度達到100°C后，旺火保持14-16小時，勻火再悶6-8小吋。本發明的優選實施方案中，所述殺蟲劑選自0，O-ニ甲基-(2，2，2_三氯-I-羥基こ基)膦酸酷、0，0_ ニ甲基-0-(2，2_ ニ氯こ烯基)磷酸酯的任ー種或其組合。本發明的優選實施方案中，菌袋下地時間為5-6月。為了清楚地表述本發明的保護范圍，本發明對術語進行如下界定本發明所述的殺蟲劑選自0，O- ニ甲基-(2，2，2-三氯_1_羥基こ基)膦酸酯(又稱“敵百蟲”)、0，0_ ニ甲基-0-(2，2_ ニ氯こ烯基)磷酸酯(又名DDVPdj^iig)的任ー種或其組合。本發明所述的茯苓成熟是指結苓處的土層和茯苓表皮沒有新的裂紋出現，苓蒂與木質易松脫。本發明所述的生物學效率=每窖新鮮茯苓凈重+該袋菌材的實際總干重量 X100%o本發明所述的“茶油枯”為油茶壓榨后殘留的餅或渣。本發明所述的“培養料的制備”包括下述步驟，選擇新鮮無腐爛霉變的松樹的根、蔸、尾尖、枝條、邊角料或松木屑的任ー種或其組合，將其截斷加工成長度為33-35cm的菌材,削去菌材的粗皮后,將其曬干,再將其扎成捆,備用。除非另有說明，本發明涉及液體與液體之間的百分比時，所述的百分比為體積/體積百分比；本發明涉及液體與固體之間的百分比時，所述百分比為體積/重量百分比；本發明涉及固體與液體之間的百分比時，所述百分比為重量/體積百分比；其余為重量/重量百分比。本發明的高效袋裝栽培技術具有下述優點1)利用松樹砍伐后留下的新鮮無腐爛霉變的松樹根、蔸、枝條、尾尖、加工后的邊條、鋸木屑的任ー種或其組合作為菌材(又稱“主要培養料”)，顯著提高資源的綜合利用率；2)本發明采用小松樹枝作引木插入菌袋的栽培技術，即在菌袋開ロ處采用小松樹枝作引木插入菌袋，將菌袋里的菌絲體引出袋ロ，以固定結苓處，以解決茯苓袋料栽培菌袋開ロ處容易形成菌膜而難以結苓或不結苓的技術問題，從而顯著地提高了茯苓的結苓率、生物學效率和產量；3)在栽植場地周圍土坑用茶油枯和培養料及菌種，噴施敵百蟲或敵敵畏進行誘殺白蟻的方法，解決了以前使用劇毒、高毒、高殘留農藥(如“六六六”粉，即六氯環己烷)所致的產品和環境污染等問題，提高了產
品質量。與現有技術相比，本發明具有如下特點①本發明在菌種選育的基礎上，提供了一種產量高、品質好的茯苓新菌種(CCTCCNO M2011072)及其高效袋裝栽培技術，不僅豐富了茯苓種質資源，并且，本發明所述的茯苓新菌種具有遺傳性狀穩定，抗雜菌感染能力強，適應性廣，結苓率高(96%以上)，生物學效率高達42% -70%，平均畝產鮮茯苓達8500kg以上，高產地塊達到14624kg，并顯著縮短了茯苓的生長周期，減少了白蟻的危害與雜菌的污染，顯著提高了對松木原料的利用率，具有優質、高產、高抗等優點，還顯著提高和改善了茯苓的接種成活率、生物學效率、結苓 率、茯苓產量、茯苓質量、資源利用率等性狀，菌袋下地15-20天左右即可結苓，100-120天茯苓陸續成熟；②本發明的茯苓袋料栽培技術簡單，勿需復雜的儀器設備，生物學效率高達42% _70%，利于茯苓的集約化、產業化、規模化生產本發明綜合利用松樹的根、蔸、枝、尾尖、加工后的邊條、鋸木屑的任ー種或其組合作為培養料袋料(又稱“菌材”)栽培茯苓，提高了資源利用率；④本發明大幅度地提高了產業效益，顯著降低了生產成本，例如，按50kg原料和4. 00元/Kg鮮茯苓計，段木栽培只能產鮮茯苓7. 5Kg-15kg，成本位31元/Kg，其投入產出比為I : 1.45 ;按50kg原料和4. 00元/Kg鮮茯苓計，本發明的袋料栽培可產鮮茯苓21kg-35kg，成本29元/Kg，其投入產出比高達I : 3.86 ;⑤本發明的茯苓新菌種(CCTCCNO M2011072)及其高效袋裝栽培技術提高了產品質量，栽培所得苓體均勻整齊，質地緊密，便于加工，產品質量好，深受客戶青睞；⑥茯苓新菌種(CCTCC NO M2011072)及其高效袋裝栽培技術縮短了生產周期，從接種到采收為130-150天，比段木栽培周期(200-240天)縮短了 70-90天(不包括休眠期)，特別是顯著縮短野外生長期，明顯降低茯苓的管理成本和生產成本；⑦茯苓新菌種(CCTCC NO M2011072)及其高效袋裝栽培技術可實現集約化、エ廠化的高效栽培，便于管理，便于標準化、規模化生產茯苓本發明還可將菌絲分解吸收養分后的原料進行發酵處理，將其轉化成有機肥，以提高土壌的有機質、養分含量和培肥地力，進ー步提高了資源的綜合利用率；⑨本發明的高效袋裝栽培方法還可回收和循環利用茯苓采收后的廢棄塑料袋，減少環境污染，進一歩提高資源利用；⑩本發明在誘殺白蟻時添加茶油枯，利用茶油枯的香味吸引白蟻，顯著提高白蟻的誘殺率。
具體實施例方式以下將結合實施例具體說明本發明，本發明的實施例僅用于說明本發明的技術方案，并非限定本發明的實質。實施例I茯苓新菌種(CCTCC N0:M2011072)的選育方法及其性狀分析本發明茯苓新菌種(CCTCC NO M2011072)的選育方法，包括如下步驟I)菌絲體的培養選擇苓體均勻結實、苓皮薄、質量好的野生茯苓，在24_28°C條件下進行組織培養，分離菌核和菌絲體，其中，所述組織培養的培養基組成為，水1000毫升，馬鈴薯200克，葡萄糖20克，瓊脂20克，磷酸ニ氫鉀3克，硫酸鎂I. 5克，I. 5克維生素BI和蛋白胨5克；2)菌絲體的提純、復壯將分離的菌絲體接種于多管培養基中，再將其置于無菌箱內，26-28°C培養7-10天，至菌絲長滿培養基，從中選擇生長狀況最優者進行轉種培養，其中，所述菌絲體的提純、復壯培養基組成為，水1000毫升，馬鈴薯200克，葡萄糖20克，瓊脂20克，磷酸ニ氫鉀3克，硫酸鎂I. 5克，I. 5克維生素BI和蛋白胨5克，其制備方法包括下述步驟①將馬鈴薯去皮，清選干凈，切成薄片，放入鍋中煎煮，致馬鈴薯到熟而不爛的程度，篩網過濾，碾壓制得馬鈴薯汁，調節其PH值5. 5-6. 5 在制得的馬鈴薯汁中加入培養基組成中的其它成份，加熱溶解后，分裝入試管后，在O. 15公斤壓カ下高溫滅菌30分鐘，取出，冷卻，將其制成斜面培養基；3)茯苓新菌種的選擇根據生物遺傳、變異、選育新品種的基本原理和生產實踐，針對性地遴選茯苓新菌種的性狀，從中選育出適宜袋料栽培和不需斷根栽培的茯苓新菌種(CCTCC NO M2011072)，以提高茯苓的接種成活率(高達98% )、生物學效率達、結苓率、茯 苓產量、茯苓質量、資源利用率等性狀。經湖南農大園藝園林學院中藥資源與開發系檢驗，與茯苓菌種5. 78對比，本發明的茯苓新菌種(CCTCC NO M2011072)的主要性狀特征包括1)菌絲體粗壯，白色，鎖狀聯合體明顯，菌絲在種植過程中傳引快；2)結苓早，苓體均勻結實，肉質白色或淺黃色，苓皮薄(I. 6-2. 2mm)，呈紫紅色，結苓率約96%，生物學效率42% -70%,具有生物轉化率高，氨基酸、多糖含量高，抗病蟲害能力強等優點；3)本發明的茯苓菌種具有遺傳性狀穩定、抗雜菌感染能力強，生物學效率高，產量高，質量好等優點；4)茯苓中的氨基酸(15. 12% )和茯苓多糖含量(19. 33% )顯著提高；5)本發明的茯苓菌種(CCTCC NO M2011072)提高了接種成活率，其接種成活率高達98%，具有遺傳性狀穩定，抗雜菌感染能力強，適應性廣，結苓率高(96%以上)，生物學效率高達42% -70%，平均畝產鮮茯苓達8500kg以上，高產地塊達到14624kg，縮短了生長周期，減少了白蟻危害與雜菌污染，提高了對松木原料的利用率，具有優質、聞廣、聞抗等特點。經過DNA檢測和酯酶同エ酶測定，證明本發明的茯苓菌種(CCTCC NO M2011072)與5. 78茯苓的親緣關系較近，但仍為不同菌株。實施例2茯苓新菌種(CCTCC NO :M2011072)的效率研究推廣茯苓新菌種(CCTCC NO M2011072) 52. 3萬包，袋料栽培1150萬袋，共創產值12060. 86萬元，新增利稅7973. I萬元，出ロ創匯19. 22萬美元，總產值達I. 16億元，并產生了良好的生態效益、經濟效益和社會效益，結果見表I。表I
權利要求
1.一種茯苓新菌種(CCTCC NO :M2011072)，所述茯苓菌種適合采用袋料高效栽培技術進行栽培。
2.根據權利要求I所述的茯苓新菌種(CCTCCNO :M2011072)，其主要性狀特征包括I)菌絲體粗壯，白色，鎖狀聯合體明顯；菌絲在種植過程中傳引快；2)結苓早，苓體均勻結實，肉質白色或淺黃色，苓皮薄，呈紫紅色；3)具有遺傳性狀穩定、抗雜菌感染能力強，生物學效率高，產量高，質量好等優點；4)顯著提高了茯苓中的氨基酸和茯苓多糖等有效成分的含量。
3.一種權利要求I或2所述的茯苓新菌種(CCTCC NO M2011072)的選育方法，包括如下步驟 1)菌絲體的培養選擇苓體均勻結實、苓皮薄、質量好的野生茯苓，在24-28°C條件下進行組織培養，分離菌核和菌絲體，其中，所述組織培養的培養基含水量為55-60 %，pH值5-6，組成中包括適宜茯苓生長的碳源，所述的碳源選自蔗糖、可溶性淀粉、葡萄糖、麥芽汁、蛋白胨的任一種或其組合，優選為蛋白胨； 2)菌絲體的提純、復壯將分離的菌絲體接種于多管培養基中，再將其置于無菌箱內，26-28°C培養7-10天，至菌絲長滿培養基，從中選擇生長狀況最優者進行轉種培養； 3)茯苓新菌種的選擇根據生物遺傳、變異、選育新品種的基本原理和生產實踐，針對性地遴選茯苓新菌種的性狀，從中選育出適宜袋料栽培和不需斷根栽培的茯苓新菌種(CCTCC NO M2011072)； 其中，所述菌絲體的培養、提純、復壯的培養基組成為，1000重量份的水、200重量份的馬鈴薯、20重量份的瓊脂、20重量份的葡萄糖、3重量份的磷酸二氫鉀、I. 5重量份的硫酸鎂、I. 5重量份的維生素BI和5重量份的蛋白胨。
4.根據權利要求4所述的選育方法，所述菌絲體的培養、提純、復壯培養基的組成為1000重量份的水、200重量份的馬鈴薯、20重量份的瓊脂、20重量份的葡萄糖、3重量份的磷酸二氫鉀、I. 5重量份的硫酸鎂、I. 5重量份的維生素BI和5重量份的蛋白胨，其制備方法包括下述步驟1)將馬鈴薯去皮，清選干凈，切成薄片，放入鍋中煮沸，煮到熟而不爛的程度，篩網過濾，制得馬鈴薯汁，調節其PH值5. 5-6. 5 ；2)在制得的馬鈴薯汁中加入培養基組成中的其它成份，加熱溶解后，分裝入試管后，在0. 15公斤壓力下高溫滅菌30分鐘，取出，冷卻，將其制成斜面培養基。
5.一種權利要求I或2所述的茯苓菌種(CCTCC NO M2011072)的高效袋裝栽培方法，包括如下步驟 ①選料所述選料包括下述步驟，選擇新鮮無腐爛霉變的松樹的根、蔸、尾尖、枝條、邊角料或松木屑的任一種或其組合，將其截斷加工成長度為33-35cm的菌材，削去菌材的粗皮后，將其曬干，再將其扎成捆，備用； ②制袋所述制袋包括下述步驟，將步驟①中扎成捆的菌材置入清水中浸泡不少于10小時，使其吸收足夠的水份，撈起浙干，將所需加入配料攪拌均勻后，在菌袋底部加入部分配料，再將扎成捆的菌材裝入菌袋后，加入余量配料，扎緊袋口，進行高溫滅菌，其中，每袋菌袋裝入約為5公斤的菌材和約為0. 25公斤的配料，所述配料的含水量約為60%，pH值·5.5-6. 5，由77%的干燥松木屑、20%的麥皮或米糠、I %的蔗糖、I %的石膏、0. 5%的過磷酸隹丐、0. 5%的硫酸鎂和適量的水制作而成；③接種培養所述接種培養包括下述步驟，將高溫滅菌后的袋料放入潔凈的操作房間內，待袋料內溫度降至28°C以下時，將袋料搬入接種室內或接種箱內，無菌條件下，接種茯苓菌種(CCTCC NO :M2011072)，其中，每袋料接種100-150g茯苓菌種(CCTCC NO:M2011072)，所述茯苓菌種(CCTCC NO M2011072)分小塊均勻接種到袋料內，接種好后扎好袋口，將其放入培養室內，在26-28°C進行恒溫培養；待菌絲長滿全袋后，即可下地覆土管理結苓； ④場地選擇所述場地選擇包括下述步驟選擇向陽、土壤疏松、PH值4.5-6. 5、坡度為5-20度、排水良好的果園地、闊葉林地、旱地或房前屋后的空坪隙地的任一種或其組合作為栽培場地； ⑤整地所述整地包括下述步驟選好栽培場地后，清除場內雜草，深耕30-40cm； ⑥誘殺白蟻所述誘殺白蟻包括下述步驟整好栽培場地后，在土坑內堆放茶油枯、培養料及菌種，噴施殺蟲劑，蓋上新鮮松葉枝，再蓋好土，誘殺白蟻； ⑦菌袋下地所述菌袋下地包括下述步驟將長滿菌絲的菌袋劃開一條口子，插進一根小松樹枝或松樹根作引木，與菌袋一起橫放入土中，每排放兩包菌袋，插有引木的菌袋置于兩端，菌袋間的間隔為30_40cm,再蓋土 10_12cm ； ⑧菌袋下地后的管理所述菌袋下地后的管理包括下述步驟采取地表覆蓋、澆水、開排水溝的任一種方法或其組合，以調節菌袋下地后的土壤溫度和濕度，防止菌袋下地后的土壤長期處于高溫、干旱或陰雨的環境，并保持袋料內溫度26-32°C，土壤含水量約60% ； ⑨采收所述采收包括下述步驟菌袋下地覆土后，在正常的溫度、濕度條件下，待茯苓生長成熟。
6.一種權利要求I或2所述的茯苓菌種(CCTCC NO M2011072)的高效袋裝栽培方法，包括選料、制袋、接種培養、場地選擇、整地、誘殺白蟻、菌袋下地及其管理、采收的步驟，其特征在于，所述選料包括下述步驟，選擇新鮮無腐爛霉變的松樹的根、蔸、尾尖、枝條、邊角料或松木屑的任一種或其組合，將其截斷加工成長度為33-35cm的菌材，削去菌材的粗皮后，將其曬干，再將其扎成捆，備用。
7.根據權利要求6所述的高效袋裝栽培方法，所述制袋包括下述步驟，將步驟①中扎成捆的菌材置入清水中浸泡不少于10小時，使其吸收足夠的水份，撈起浙干，將所需加入配料攪拌均勻后，在菌袋底部加入部分配料，再將扎成捆的菌材裝入菌袋后，加入余量配料，扎緊袋口，進行高溫滅菌，其中，每袋菌袋裝入約為5公斤的菌材和約為0. 25公斤的配料，所述配料的含水量約為60%，pH值5. 5-6. 5，由77%的干燥松木屑、20%的麥皮或米糠、I %的蔗糖、I %的石膏、0. 5%的過磷酸鈣、0. 5%的硫酸鎂和適量的水制作而成。
8.根據權利要求6-7任一項所述的高效袋裝栽培方法，所述接種培養包括下述步驟，將高溫滅菌后的袋料放入潔凈的操作房間內，待袋料內溫度降至28°C以下時，將袋料搬入接種室內或接種箱內，無菌條件下，接種茯苓菌種(CCTCC NO :M2011072)，其中，每袋料接種100-150g 茯苓菌種(CCTCC NO :M2011072)，所述茯苓菌種(CCTCC NO M2011072)分小塊均勻接種到袋料內，接種好后扎好袋口，將其放入培養室內，在26-28°C進行恒溫培養；待菌絲長滿全袋后，即可下地覆土管理結苓。
9.根據權利要求6-8任一項所述的高效袋裝栽培方法，所述場地選擇包括下述步驟選擇向陽、土壤疏松、PH值4. 5-6. 5、坡度為5-20度、排水良好的果園地、闊葉林地、旱地或房前屋后的空坪隙地的任一種或其組合作為栽培場地。
10.根據權利要求6-9任一項所述的高效袋裝栽培方法，所述整地包括下述步驟選好栽培場地后，清除場內雜草，深耕30-40cm。
全文摘要
本發明涉及一種茯苓新菌種(CCTCC M2011072)及其袋料高效栽培技術，所述的茯苓新菌種適合采用袋料高效栽培技術進行栽培，其主要性狀特征包括1)菌絲體粗壯，白色，鎖狀聯合體明顯；菌絲在種植過程中傳引快；2)結苓早，苓體均勻結實，肉質白色或淺黃色，苓皮薄，呈紫紅色；3)具有遺傳性狀穩定、抗雜菌感染能力強，生物學效率高，產量高，質量好等優點；4)顯著提高了茯苓中的氨基酸和茯苓多糖等有效成分的含量。
文檔編號A01G1/04GK102742453SQ201110366610
公開日2012年10月24日 申請日期2011年11月18日 優先權日2011年11月18日
發明者喬明安, 何黎清, 戴甲木, 王先有, 黃定祥 申請人:湖南補天藥業有限公司
技術領域：
本發明涉及菌種選育及其栽培技木，尤其涉及茯苓新菌種選育及其高效栽培技術。
背景技術：
茯苓(Poria Cocos (schw)WOLF)為多孔真菌(擔子菌)，味甘、淡，性平，具有滲濕利水、益脾胃、保腎安神、生津等功能，為用途廣泛的藥用真菌和傳統中藥，也是“四君八珍”的組方之一，其市場前景十分廣闊。茯苓的主要成份為茯苓聚糖(又稱“茯苓多糖”)，約占干重的93 %。茯苓多糖為免疫增強劑，具有增強免疫、輔助化療、防治腫瘤、抗腫瘤等作用，已廣泛用作抗癌新藥、 肝炎康復藥，并用于治療支氣管哮喘和慢性支氣管炎等。已有的茯苓保健品包括茯苓平片、茯苓卷筒、茯苓方塊、茯苓多糖原粉、茯苓多糖ロ服液、茯苓多糖復方制劑等。茯苓為喜溫真菌，適產于中國、東南亞、美洲、大洋洲等有松樹的山區地方。中國是茯苓主產國，約占世界茯苓總產量的70%。近年來，我國年茯苓成品需求量在2萬噸以上，年出ロ量約為7000噸，且市場需求量呈現逐年遞增趨勢。但是，國內外有關茯苓新菌種選育及其高效栽培技術的研究尚顯不足。20世紀60年代開始的人工栽培茯苓技木，以茯苓菌種“5. 78”進行肉引栽培，并主要以松樹砍伐后的段木、圓木或樹蔸為栽培基質(又稱“菌材”)，該方法存在栽培技術落后，需消耗大量的松樹資源，且菌種經多年的繼代繁殖，菌株生命力下降，苓體變小，出現自然變異，品種衰老退化，生物學效率顯著下降(已從30% -40%下降到10% -20% )，以及存在接種成活率、結苓率、茯苓產量、茯苓質量、資源利用率均偏低，生產成本過高、產業效益不理想等缺陷。因此，選育質量更優的茯苓新菌種，研究更加高效環保的茯苓栽培技術，以提高茯苓的生物學效率和資源利用率，提高茯苓種植業的產量、質量和產業效益，成為人們迫切需要解決的技術問題。
發明內容
本發明的目的在于提供一種茯苓新菌種(CCTCC NO :Μ2011072)，所述茯苓菌種適合采用袋料高效栽培技術進行栽培。本發明所述的茯苓新菌種(CCTCC NO Μ2011072)具有遺傳性狀穩定，抗雜菌感染能力強，適應性廣，結苓率高(96%以上)，生物學效率高達42% -70%，平均畝產鮮茯苓達8500kg以上，高產地塊達到14624kg，并顯著縮短了茯苓的生長周期，減少了白蟻的危害與雜菌的污染，顯著提高了對松木原料的利用率，具有優質、高產、高抗等優點，還顯著提高和改善了茯苓的接種成活率、生物學效率、結苓率、茯苓產量、茯苓質量、資源利用率等性狀。本發明的優選實施方案中，茯苓新菌種(CCTCC NO M2011072)的主要性狀特征包括1)菌絲體粗壯，白色，鎖狀聯合體明顯；菌絲在種植過程中傳引快；2)結苓早，苓體均勻結實，肉質白色或淺黃色，苓皮薄，呈紫紅色；3)具有遺傳性狀穩定、抗雜菌感染能力強，生物學效率高，產量高，質量好等優點；4)顯著提高了茯苓中的氨基酸和茯苓多糖等有效成分的含量。本發明的另一目的在于提供ー種茯苓菌種(CCTCC NO M2011072)的選育方法，包括如下步驟I)菌絲體的培養選擇苓體均勻結實、苓皮薄、質量好的野生茯苓，在24-28°C條件下進行組織培養，分離菌核和菌絲體，其中，所述組織培養的培養基含水量為55-60%，pH值5-6，組成中包括適宜茯苓生長的碳源，所述的碳源選自蔗糖、可溶性淀粉、葡萄糖、麥芽汁、蛋白胨的任ー種或其組合，優選為蛋白胨；2)菌絲體的提純、復壯將分離的菌絲體接種于多管培養基中，再將其置于無菌箱內，26-28°C培養7-10天，至菌絲長滿培養基，從中選擇生長狀況最優者進行轉種培養，其中，所述菌絲體的提純、復壯培養基組成為，1000毫升的水、200克的馬鈴薯、20克的瓊月旨、20克的葡萄糖、3克的磷酸ニ氫鉀、I. 5克的硫酸鎂、I. 5克的維生素BI和5克的蛋白 胨；3)茯苓新菌種的選擇根據生物遺傳、變異、選育新品種的基本原理和生產實踐，針對性地遴選茯苓新菌種的性狀，從中選育出適宜袋料栽培和不需斷根栽培的茯苓新菌種(CCTCC NO M2011072)；其中，所述菌絲體的培養、提純、復壯的培養基組成為，1000重量份的水、200重量份的馬鈴薯、20重量份的瓊脂、20重量份的葡萄糖、3重量份的磷酸ニ氫鉀、I. 5重量份的硫酸鎂、I. 5重量份的維生素BI和5重量份的蛋白胨。本發明的優選技術方案中，所述菌絲體的培養、提純、復壯培養基的組成為，1000重量份的水、200重量份的馬鈴薯、20重量份的瓊脂、20重量份的葡萄糖、3重量份的磷酸ニ氫鉀、I. 5重量份的硫酸鎂、I. 5重量份的維生素BI和5重量份的蛋白胨，其制備方法包括下述步驟1)將馬鈴薯去皮，清選干凈，切成薄片，放入鍋中煮沸，煮到熟而不爛的程度，篩網過濾，制得馬鈴薯汁，調節其pH值5. 5-6. 5 ；2)在制得的馬鈴薯汁中加入培養基組成中的其它成份，加熱溶解后，分裝入試管后，在O. 15公斤壓カ下高溫滅菌30分鐘，取出，冷卻，將其制成斜面培養基。本發明的另一目的在于提供ー種茯苓菌種(CCTCC NO M2011072)的高效袋裝栽培方法，包括培養料的制備、制袋、接種培養、場地選擇、整地、誘殺白蟻、菌袋下地及其管理、采收的步驟，其特征在于，所述培養料的制備包括下述步驟，選擇新鮮無腐爛霉變的松樹的根、蔸、尾尖、枝條、邊角料或松木屑的任ー種或其組合，將其截斷加工成長度為33-35cm的菌材，削去菌材的粗皮后，將其曬干，再將其扎成捆，備用。本發明的優選實施方案中，所述制袋包括下述步驟，將步驟①中扎成捆的菌材置入清水中浸泡不少于10小時，使其吸收足夠的水份，撈起浙干，將所需加入配料攪拌均勻后，在菌袋底部加入部分配料，再將扎成捆的菌材裝入菌袋后，加入余量配料，扎緊袋ロ，進行高溫滅菌，其中，每袋菌袋裝入約為5公斤的菌材和約為O. 25公斤的配料，所述配料的含水量約為60%，pH值5. 5-6. 5，由77%的干燥松木屑、20%的麥皮或米糠、I %的蔗糖、I %的石膏、O. 5%的過磷酸鈣、O. 5%的硫酸鎂和適量的水制作而成。本發明的優選實施方案中，所述接種培養包括下述步驟，將高溫滅菌后的袋料放入潔凈的操作房間內，待袋料內溫度降至28°C以下時，將袋料搬入接種室內或接種箱內，無菌條件下，接種茯苓菌種(CCTCC NO :M2011072)，其中，每袋料接種100-150g茯苓菌種(CCTCC NO :M2011072)，所述茯苓菌種(CCTCC NO M2011072)分小塊均勻接種到袋料內，接
種好后扎好袋ロ，將其放入培養室內，在26-28 °C進行恒溫培養；待菌絲長滿全袋后，即可下地覆土管理結苓。本發明的優選實施方案中，所述場地選擇包括下述步驟選擇向陽、土壤疏松、pH值4. 5-6. 5、坡度為5-20度、排水良好的果園地、闊葉林地、旱地或房前屋后的空坪隙地的任ー種或其組合作為栽培場地。本發明的優選實施方案中，所述整地包括下述步驟選好栽培場地后，清除場內雜草，深耕30_40cm。
本發明的優選實施方案中，所述誘殺白蟻包括下述步驟整好栽培場地后，在土坑內堆放茶油枯、培養料及菌種(CCTCC NO :M2011072)，噴施殺蟲劑，蓋上新鮮松葉枝，再蓋好土，誘殺白蟻。本發明的優選實施方案中，所述菌袋下地包括下述步驟將長滿菌絲的菌袋劃開一條ロ子，插進ー根小松樹枝或松樹根作引木，與菌袋一起橫放入土中，每排放兩包菌袋，插有引木的菌袋置于兩端，菌袋間的間隔為30-40cm,再蓋土 10-12cm。本發明的優選實施方案中，所述菌袋下地后管理包括下述步驟采取地表覆蓋、澆水、開排水溝的任ー種方法或其組合，以調節菌袋下地后的土壌溫度和濕度，防止菌袋下地后的土壤長期處于高溫、干旱或陰雨的環境，并保持袋料內溫度26-32°C，土壌含水量約60%。本發明的優選實施方案中，所述采收包括下述步驟菌袋下地覆土后，在正常的溫度、濕度條件下，待茯苓生長成熟。本發明的另一目的在于提供一種茯苓的栽培方法，包括如下步驟①培養料的制備所述培養料的制備包括下述步驟，選擇新鮮無腐爛霉變的松樹的根、蔸、尾尖、枝條、邊角料或松木屑的任ー種或其組合，將其截斷加工成長度為33-35cm的菌材，削去菌材的粗皮后，將其曬干，再將其扎成捆，備用；②制袋所述制袋包括下述步驟，將步驟①中扎成捆的菌材置入清水中浸泡不少于10小時，使其吸收足夠的水份，撈起浙干，將所需加入配料攪拌均勻后，在菌袋底部加入部分配料，再將扎成捆的菌材裝入菌袋后，加入余量配料，扎緊袋ロ，進行高溫滅菌，其中，每袋菌袋裝入約為5公斤的菌材和約為O. 25公斤的配料，所述配料的含水量約為60%，pH值5. 5-6. 5，由77%的干燥松木屑、20%的麥皮或米糠、I %的蔗糖、I %的石膏、O. 5%的過磷酸鈣、O. 5%的硫酸鎂和適量的水制作而成；③接種培養所述接種培養包括下述步驟，將高溫滅菌后的袋料放入潔凈的操作房間內，待袋料內溫度降至28°C以下時，將袋料搬入接種室內或接種箱內，無菌條件下，接種茯苓菌種(CCTCC NO :M2011072)，其中，每袋料接種100-150g茯苓菌種(CCTCC NO:M2011072)，所述茯苓菌種(CCTCC NO M2011072)分小塊均勻接種到袋料內，接種好后扎好袋ロ，將其放入培養室內，在26-28 °C進行恒溫培養；待菌絲長滿全袋后，即可下地覆土管理結苓；④場地選擇所述場地選擇包括下述步驟選擇向陽、土壤疏松、pH值4. 5-6. 5、坡度為5-20度、排水良好的果園地、闊葉林地、早地或房前屋后的空坪隙地的任ー種或其組合作為栽培場地；⑤整地所述整地包括下述步驟選好栽培場地后，清除場內雜草，深耕30-40cm ；⑥誘殺白蟻所述誘殺白蟻包括下述步驟整好栽培場地后，在土坑內堆放茶油枯、培養料及菌種(CCTCC NO :M2011072)，噴施殺蟲劑，蓋上新鮮松葉枝，再蓋好土，誘殺白蟻；⑦菌袋下地所述菌袋下地包括下述步驟將長滿菌絲的菌袋劃開一條ロ子，插進ー根小松樹枝或松樹根作引木，與菌袋一起橫放入土中，每排放兩包菌袋，插有引木的菌袋置于兩端，菌袋間的間隔為30-40cm,再蓋土 10-12cm ；⑧菌袋下地后的管理所述菌袋下地后的管理包括下述步驟采取地表覆蓋、澆水、開排水溝的任ー種方法或其組合，以調節菌袋下地后的土壌溫度和濕度，防止菌袋下 地后的土壤長期處于高溫、干旱或陰雨的環境，并保持袋料內溫度26-32°C，土壌含水量約60% ；⑨采收所述采收包括下述步驟菌袋下地覆土后，在正常的溫度、濕度條件下，待茯苓生長成熟。本發明的優選實施方案中，所述的高溫滅菌條件為，在O. 15Kg壓カ下保持4-5小時，常壓滅菌溫度達到100°C后，旺火保持14-16小時，勻火再悶6-8小吋。本發明的優選實施方案中，所述殺蟲劑選自0，O-ニ甲基-(2，2，2_三氯-I-羥基こ基)膦酸酷、0，0_ ニ甲基-0-(2，2_ ニ氯こ烯基)磷酸酯的任ー種或其組合。本發明的優選實施方案中，菌袋下地時間為5-6月。為了清楚地表述本發明的保護范圍，本發明對術語進行如下界定本發明所述的殺蟲劑選自0，O- ニ甲基-(2，2，2-三氯_1_羥基こ基)膦酸酯(又稱“敵百蟲”)、0，0_ ニ甲基-0-(2，2_ ニ氯こ烯基)磷酸酯(又名DDVPdj^iig)的任ー種或其組合。本發明所述的茯苓成熟是指結苓處的土層和茯苓表皮沒有新的裂紋出現，苓蒂與木質易松脫。本發明所述的生物學效率=每窖新鮮茯苓凈重+該袋菌材的實際總干重量 X100%o本發明所述的“茶油枯”為油茶壓榨后殘留的餅或渣。本發明所述的“培養料的制備”包括下述步驟，選擇新鮮無腐爛霉變的松樹的根、蔸、尾尖、枝條、邊角料或松木屑的任ー種或其組合，將其截斷加工成長度為33-35cm的菌材,削去菌材的粗皮后,將其曬干,再將其扎成捆,備用。除非另有說明，本發明涉及液體與液體之間的百分比時，所述的百分比為體積/體積百分比；本發明涉及液體與固體之間的百分比時，所述百分比為體積/重量百分比；本發明涉及固體與液體之間的百分比時，所述百分比為重量/體積百分比；其余為重量/重量百分比。本發明的高效袋裝栽培技術具有下述優點1)利用松樹砍伐后留下的新鮮無腐爛霉變的松樹根、蔸、枝條、尾尖、加工后的邊條、鋸木屑的任ー種或其組合作為菌材(又稱“主要培養料”)，顯著提高資源的綜合利用率；2)本發明采用小松樹枝作引木插入菌袋的栽培技術，即在菌袋開ロ處采用小松樹枝作引木插入菌袋，將菌袋里的菌絲體引出袋ロ，以固定結苓處，以解決茯苓袋料栽培菌袋開ロ處容易形成菌膜而難以結苓或不結苓的技術問題，從而顯著地提高了茯苓的結苓率、生物學效率和產量；3)在栽植場地周圍土坑用茶油枯和培養料及菌種，噴施敵百蟲或敵敵畏進行誘殺白蟻的方法，解決了以前使用劇毒、高毒、高殘留農藥(如“六六六”粉，即六氯環己烷)所致的產品和環境污染等問題，提高了產
品質量。與現有技術相比，本發明具有如下特點①本發明在菌種選育的基礎上，提供了一種產量高、品質好的茯苓新菌種(CCTCCNO M2011072)及其高效袋裝栽培技術，不僅豐富了茯苓種質資源，并且，本發明所述的茯苓新菌種具有遺傳性狀穩定，抗雜菌感染能力強，適應性廣，結苓率高(96%以上)，生物學效率高達42% -70%，平均畝產鮮茯苓達8500kg以上，高產地塊達到14624kg，并顯著縮短了茯苓的生長周期，減少了白蟻的危害與雜菌的污染，顯著提高了對松木原料的利用率，具有優質、高產、高抗等優點，還顯著提高和改善了茯苓的接種成活率、生物學效率、結苓 率、茯苓產量、茯苓質量、資源利用率等性狀，菌袋下地15-20天左右即可結苓，100-120天茯苓陸續成熟；②本發明的茯苓袋料栽培技術簡單，勿需復雜的儀器設備，生物學效率高達42% _70%，利于茯苓的集約化、產業化、規模化生產本發明綜合利用松樹的根、蔸、枝、尾尖、加工后的邊條、鋸木屑的任ー種或其組合作為培養料袋料(又稱“菌材”)栽培茯苓，提高了資源利用率；④本發明大幅度地提高了產業效益，顯著降低了生產成本，例如，按50kg原料和4. 00元/Kg鮮茯苓計，段木栽培只能產鮮茯苓7. 5Kg-15kg，成本位31元/Kg，其投入產出比為I : 1.45 ;按50kg原料和4. 00元/Kg鮮茯苓計，本發明的袋料栽培可產鮮茯苓21kg-35kg，成本29元/Kg，其投入產出比高達I : 3.86 ;⑤本發明的茯苓新菌種(CCTCCNO M2011072)及其高效袋裝栽培技術提高了產品質量，栽培所得苓體均勻整齊，質地緊密，便于加工，產品質量好，深受客戶青睞；⑥茯苓新菌種(CCTCC NO M2011072)及其高效袋裝栽培技術縮短了生產周期，從接種到采收為130-150天，比段木栽培周期(200-240天)縮短了 70-90天(不包括休眠期)，特別是顯著縮短野外生長期，明顯降低茯苓的管理成本和生產成本；⑦茯苓新菌種(CCTCC NO M2011072)及其高效袋裝栽培技術可實現集約化、エ廠化的高效栽培，便于管理，便于標準化、規模化生產茯苓本發明還可將菌絲分解吸收養分后的原料進行發酵處理，將其轉化成有機肥，以提高土壌的有機質、養分含量和培肥地力，進ー步提高了資源的綜合利用率；⑨本發明的高效袋裝栽培方法還可回收和循環利用茯苓采收后的廢棄塑料袋，減少環境污染，進一歩提高資源利用；⑩本發明在誘殺白蟻時添加茶油枯，利用茶油枯的香味吸引白蟻，顯著提高白蟻的誘殺率。
具體實施例方式以下將結合實施例具體說明本發明，本發明的實施例僅用于說明本發明的技術方案，并非限定本發明的實質。實施例I茯苓新菌種(CCTCC N0:M2011072)的選育方法及其性狀分析本發明茯苓新菌種(CCTCC NO M2011072)的選育方法，包括如下步驟I)菌絲體的培養選擇苓體均勻結實、苓皮薄、質量好的野生茯苓，在24_28°C條件下進行組織培養，分離菌核和菌絲體，其中，所述組織培養的培養基組成為，水1000毫升，馬鈴薯200克，葡萄糖20克，瓊脂20克，磷酸ニ氫鉀3克，硫酸鎂I. 5克，I. 5克維生素BI和蛋白胨5克；2)菌絲體的提純、復壯將分離的菌絲體接種于多管培養基中，再將其置于無菌箱內，26-28°C培養7-10天，至菌絲長滿培養基，從中選擇生長狀況最優者進行轉種培養，其中，所述菌絲體的提純、復壯培養基組成為，水1000毫升，馬鈴薯200克，葡萄糖20克，瓊脂20克，磷酸ニ氫鉀3克，硫酸鎂I. 5克，I. 5克維生素BI和蛋白胨5克，其制備方法包括下述步驟①將馬鈴薯去皮，清選干凈，切成薄片，放入鍋中煎煮，致馬鈴薯到熟而不爛的程度，篩網過濾，碾壓制得馬鈴薯汁，調節其PH值5. 5-6. 5 在制得的馬鈴薯汁中加入培養基組成中的其它成份，加熱溶解后，分裝入試管后，在O. 15公斤壓カ下高溫滅菌30分鐘，取出，冷卻，將其制成斜面培養基；3)茯苓新菌種的選擇根據生物遺傳、變異、選育新品種的基本原理和生產實踐，針對性地遴選茯苓新菌種的性狀，從中選育出適宜袋料栽培和不需斷根栽培的茯苓新菌種(CCTCC NO M2011072)，以提高茯苓的接種成活率(高達98% )、生物學效率達、結苓率、茯 苓產量、茯苓質量、資源利用率等性狀。經湖南農大園藝園林學院中藥資源與開發系檢驗，與茯苓菌種5. 78對比，本發明的茯苓新菌種(CCTCC NO M2011072)的主要性狀特征包括1)菌絲體粗壯，白色，鎖狀聯合體明顯，菌絲在種植過程中傳引快；2)結苓早，苓體均勻結實，肉質白色或淺黃色，苓皮薄(I. 6-2. 2mm)，呈紫紅色，結苓率約96%，生物學效率42% -70%,具有生物轉化率高，氨基酸、多糖含量高，抗病蟲害能力強等優點；3)本發明的茯苓菌種具有遺傳性狀穩定、抗雜菌感染能力強，生物學效率高，產量高，質量好等優點；4)茯苓中的氨基酸(15. 12% )和茯苓多糖含量(19. 33% )顯著提高；5)本發明的茯苓菌種(CCTCC NO M2011072)提高了接種成活率，其接種成活率高達98%，具有遺傳性狀穩定，抗雜菌感染能力強，適應性廣，結苓率高(96%以上)，生物學效率高達42% -70%，平均畝產鮮茯苓達8500kg以上，高產地塊達到14624kg，縮短了生長周期，減少了白蟻危害與雜菌污染，提高了對松木原料的利用率，具有優質、聞廣、聞抗等特點。經過DNA檢測和酯酶同エ酶測定，證明本發明的茯苓菌種(CCTCC NO M2011072)與5. 78茯苓的親緣關系較近，但仍為不同菌株。實施例2茯苓新菌種(CCTCC NO :M2011072)的效率研究推廣茯苓新菌種(CCTCC NO M2011072) 52. 3萬包，袋料栽培1150萬袋，共創產值12060. 86萬元，新增利稅7973. I萬元，出ロ創匯19. 22萬美元，總產值達I. 16億元，并產生了良好的生態效益、經濟效益和社會效益，結果見表I。表I
權利要求
1.一種茯苓新菌種(CCTCC NO :M2011072)，所述茯苓菌種適合采用袋料高效栽培技術進行栽培。
2.根據權利要求I所述的茯苓新菌種(CCTCCNO :M2011072)，其主要性狀特征包括I)菌絲體粗壯，白色，鎖狀聯合體明顯；菌絲在種植過程中傳引快；2)結苓早，苓體均勻結實，肉質白色或淺黃色，苓皮薄，呈紫紅色；3)具有遺傳性狀穩定、抗雜菌感染能力強，生物學效率高，產量高，質量好等優點；4)顯著提高了茯苓中的氨基酸和茯苓多糖等有效成分的含量。
3.一種權利要求I或2所述的茯苓新菌種(CCTCC NO M2011072)的選育方法，包括如下步驟 1)菌絲體的培養選擇苓體均勻結實、苓皮薄、質量好的野生茯苓，在24-28°C條件下進行組織培養，分離菌核和菌絲體，其中，所述組織培養的培養基含水量為55-60 %，pH值5-6，組成中包括適宜茯苓生長的碳源，所述的碳源選自蔗糖、可溶性淀粉、葡萄糖、麥芽汁、蛋白胨的任一種或其組合，優選為蛋白胨； 2)菌絲體的提純、復壯將分離的菌絲體接種于多管培養基中，再將其置于無菌箱內，26-28°C培養7-10天，至菌絲長滿培養基，從中選擇生長狀況最優者進行轉種培養； 3)茯苓新菌種的選擇根據生物遺傳、變異、選育新品種的基本原理和生產實踐，針對性地遴選茯苓新菌種的性狀，從中選育出適宜袋料栽培和不需斷根栽培的茯苓新菌種(CCTCC NO M2011072)； 其中，所述菌絲體的培養、提純、復壯的培養基組成為，1000重量份的水、200重量份的馬鈴薯、20重量份的瓊脂、20重量份的葡萄糖、3重量份的磷酸二氫鉀、I. 5重量份的硫酸鎂、I. 5重量份的維生素BI和5重量份的蛋白胨。
4.根據權利要求4所述的選育方法，所述菌絲體的培養、提純、復壯培養基的組成為1000重量份的水、200重量份的馬鈴薯、20重量份的瓊脂、20重量份的葡萄糖、3重量份的磷酸二氫鉀、I. 5重量份的硫酸鎂、I. 5重量份的維生素BI和5重量份的蛋白胨，其制備方法包括下述步驟1)將馬鈴薯去皮，清選干凈，切成薄片，放入鍋中煮沸，煮到熟而不爛的程度，篩網過濾，制得馬鈴薯汁，調節其PH值5. 5-6. 5 ；2)在制得的馬鈴薯汁中加入培養基組成中的其它成份，加熱溶解后，分裝入試管后，在0. 15公斤壓力下高溫滅菌30分鐘，取出，冷卻，將其制成斜面培養基。
5.一種權利要求I或2所述的茯苓菌種(CCTCC NO M2011072)的高效袋裝栽培方法，包括如下步驟 ①選料所述選料包括下述步驟，選擇新鮮無腐爛霉變的松樹的根、蔸、尾尖、枝條、邊角料或松木屑的任一種或其組合，將其截斷加工成長度為33-35cm的菌材，削去菌材的粗皮后，將其曬干，再將其扎成捆，備用； ②制袋所述制袋包括下述步驟，將步驟①中扎成捆的菌材置入清水中浸泡不少于10小時，使其吸收足夠的水份，撈起浙干，將所需加入配料攪拌均勻后，在菌袋底部加入部分配料，再將扎成捆的菌材裝入菌袋后，加入余量配料，扎緊袋口，進行高溫滅菌，其中，每袋菌袋裝入約為5公斤的菌材和約為0. 25公斤的配料，所述配料的含水量約為60%，pH值·5.5-6. 5，由77%的干燥松木屑、20%的麥皮或米糠、I %的蔗糖、I %的石膏、0. 5%的過磷酸隹丐、0. 5%的硫酸鎂和適量的水制作而成；③接種培養所述接種培養包括下述步驟，將高溫滅菌后的袋料放入潔凈的操作房間內，待袋料內溫度降至28°C以下時，將袋料搬入接種室內或接種箱內，無菌條件下，接種茯苓菌種(CCTCC NO :M2011072)，其中，每袋料接種100-150g茯苓菌種(CCTCC NO:M2011072)，所述茯苓菌種(CCTCC NO M2011072)分小塊均勻接種到袋料內，接種好后扎好袋口，將其放入培養室內，在26-28°C進行恒溫培養；待菌絲長滿全袋后，即可下地覆土管理結苓； ④場地選擇所述場地選擇包括下述步驟選擇向陽、土壤疏松、PH值4.5-6. 5、坡度為5-20度、排水良好的果園地、闊葉林地、旱地或房前屋后的空坪隙地的任一種或其組合作為栽培場地； ⑤整地所述整地包括下述步驟選好栽培場地后，清除場內雜草，深耕30-40cm； ⑥誘殺白蟻所述誘殺白蟻包括下述步驟整好栽培場地后，在土坑內堆放茶油枯、培養料及菌種，噴施殺蟲劑，蓋上新鮮松葉枝，再蓋好土，誘殺白蟻； ⑦菌袋下地所述菌袋下地包括下述步驟將長滿菌絲的菌袋劃開一條口子，插進一根小松樹枝或松樹根作引木，與菌袋一起橫放入土中，每排放兩包菌袋，插有引木的菌袋置于兩端，菌袋間的間隔為30_40cm,再蓋土 10_12cm ； ⑧菌袋下地后的管理所述菌袋下地后的管理包括下述步驟采取地表覆蓋、澆水、開排水溝的任一種方法或其組合，以調節菌袋下地后的土壤溫度和濕度，防止菌袋下地后的土壤長期處于高溫、干旱或陰雨的環境，并保持袋料內溫度26-32°C，土壤含水量約60% ； ⑨采收所述采收包括下述步驟菌袋下地覆土后，在正常的溫度、濕度條件下，待茯苓生長成熟。
6.一種權利要求I或2所述的茯苓菌種(CCTCC NO M2011072)的高效袋裝栽培方法，包括選料、制袋、接種培養、場地選擇、整地、誘殺白蟻、菌袋下地及其管理、采收的步驟，其特征在于，所述選料包括下述步驟，選擇新鮮無腐爛霉變的松樹的根、蔸、尾尖、枝條、邊角料或松木屑的任一種或其組合，將其截斷加工成長度為33-35cm的菌材，削去菌材的粗皮后，將其曬干，再將其扎成捆，備用。
7.根據權利要求6所述的高效袋裝栽培方法，所述制袋包括下述步驟，將步驟①中扎成捆的菌材置入清水中浸泡不少于10小時，使其吸收足夠的水份，撈起浙干，將所需加入配料攪拌均勻后，在菌袋底部加入部分配料，再將扎成捆的菌材裝入菌袋后，加入余量配料，扎緊袋口，進行高溫滅菌，其中，每袋菌袋裝入約為5公斤的菌材和約為0. 25公斤的配料，所述配料的含水量約為60%，pH值5. 5-6. 5，由77%的干燥松木屑、20%的麥皮或米糠、I %的蔗糖、I %的石膏、0. 5%的過磷酸鈣、0. 5%的硫酸鎂和適量的水制作而成。
8.根據權利要求6-7任一項所述的高效袋裝栽培方法，所述接種培養包括下述步驟，將高溫滅菌后的袋料放入潔凈的操作房間內，待袋料內溫度降至28°C以下時，將袋料搬入接種室內或接種箱內，無菌條件下，接種茯苓菌種(CCTCC NO :M2011072)，其中，每袋料接種100-150g 茯苓菌種(CCTCC NO :M2011072)，所述茯苓菌種(CCTCC NO M2011072)分小塊均勻接種到袋料內，接種好后扎好袋口，將其放入培養室內，在26-28°C進行恒溫培養；待菌絲長滿全袋后，即可下地覆土管理結苓。
9.根據權利要求6-8任一項所述的高效袋裝栽培方法，所述場地選擇包括下述步驟選擇向陽、土壤疏松、PH值4. 5-6. 5、坡度為5-20度、排水良好的果園地、闊葉林地、旱地或房前屋后的空坪隙地的任一種或其組合作為栽培場地。
10.根據權利要求6-9任一項所述的高效袋裝栽培方法，所述整地包括下述步驟選好栽培場地后，清除場內雜草，深耕30-40cm。
全文摘要
本發明涉及一種茯苓新菌種(CCTCC M2011072)及其袋料高效栽培技術，所述的茯苓新菌種適合采用袋料高效栽培技術進行栽培，其主要性狀特征包括1)菌絲體粗壯，白色，鎖狀聯合體明顯；菌絲在種植過程中傳引快；2)結苓早，苓體均勻結實，肉質白色或淺黃色，苓皮薄，呈紫紅色；3)具有遺傳性狀穩定、抗雜菌感染能力強，生物學效率高，產量高，質量好等優點；4)顯著提高了茯苓中的氨基酸和茯苓多糖等有效成分的含量。
文檔編號A01G1/04GK102742453SQ201110366610
公開日2012年10月24日 申請日期2011年11月18日 優先權日2011年11月18日
發明者喬明安, 何黎清, 戴甲木, 王先有, 黃定祥 申請人:湖南補天藥業有限公司
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0訪客 來自[未知地區] 2019年03月02日 12:25哪里有茯苓新菌種我要買
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