專利名稱：一種雜交石斑魚的種質鑒定方法
技術領域：
本發明涉及一種種質鑒定方法，具體涉及一種雜交石斑魚的種質鑒定方法。
背景技術：
石斑魚屬于鱸形目酯科石斑魚亞科，全世界已命名的有約100多種，我國約40多種。石斑魚個體大、營養豐富、肉質鮮美，具有很高的經濟價值，是我國沿海地區重要的養殖魚類之一。但石斑魚具有生長緩慢、成熟期晚、存在性逆轉等特點，加上近年來面臨的過度捕撈，導致自然魚類資源數量急劇減少。但近年的人工繁殖石斑魚后代存在個體變小、抗病 力減弱等種質退化現象。雜交為解決該問題提供了一個新的研究方向。由于雜交涉及不同類型的親本遺傳物質的重新組合，后代可能會出現具有經濟價值的新品種，因而在魚類繁育方面應用比較廣泛。隨著養殖產業的蓬勃發展，雜交種的推廣以及同時面臨雜交種可能逃逸的環境生態壓力的加大，對雜交種的鑒定和鑒別顯得尤為重要。目前的魚類種質鑒定方法主要有兩大類，形態學方法、生化與分子遺傳學方法，各有其優缺點。分子遺傳學方法能從根本上去揭示其遺傳物質特征，進行物種鑒定和親緣關系分析。但操作技術較復雜，對儀器設備要求高，整個過程較耗時。比如應用RAro技術分析，容易出現非特異性擴增；AFLP技術在魚類種質檢測中多用于mtDNA多態性研究，而mtDNA具有一定的遺傳局限性；而微衛星技術需要大量篩選分子標記。相對而言，形態學方法更為直觀、簡便易行。對操作人員要求低，推廣起來比較容易。

發明內容
本發明的目的是提供一種簡便易行并準確有效的雜交石斑魚種質鑒定方法。為解決上述技術問題，本發明通過以下的技術方案來實現，一種雜交石斑魚的種質鑒定方法，包括步驟(I)獲取待測樣本石斑魚形態學參數，其中包括傳統可量性狀參數全長、體長、頭長、尾柄長、吻長、眼徑、眼間距；以及框架測量參數下頜骨最后端與頭背部末端的之間直線距離D1-4、臀鰭起點與背鰭末端之間直線距離D5-8 ；(2)對上述獲取的參數進行初步處理，獲得以下特征參數值下頜骨最后端與頭背部末端之間直線距離/體長、臀鰭起點與背鰭末端之間直線距離/體長、全長/體長、頭長/吻長、體長/尾柄長、頭長/眼徑、頭長/眼間距;(3)將以上獲得的下頜骨最后端與頭背部末端之間直線距離/體長、臀鰭起點與背鰭末端之間直線距離/體長、全長/體長、頭長/吻長、體長/尾柄長、頭長/眼徑、頭長/眼間距七個數據依次用Xf X7代替，并分別代入下列判定模型Yl=-1183+3099X1+2184X2+604. 432X3+37. 99X4+17. 807X5-10. 972X6+10. 687X7 ；Υ2=-1245+3413Χ1+1967Χ2+584. 208X3+37. 597X4+19. 98X5-6. 528X6+16. 487X7 ；Y3=-l103+3094X1+1895X2+572. 099X3+34. 5X4+17. 904X5-3. 031X6+11. 634X7 ；(4)根據所得最大的Y值來判別該樣本所屬類別，其中Yl代表鞍
帶石斑魚、Y2代表棕點石斑魚、Y3代表虎龍斑。本發明上述步驟(I)中，對所述的傳統可量性狀參數和框架測量參數通過傳統測量法或紙板測量法獲取。本發明所述紙板測量法，用針在紙板上比照魚體的框架結構點依次扎孔。本發明待測樣本石斑魚在測量前用冰浴處理5分鐘，以麻醉和舒展魚體。本發明與現有技術相比，本發明采用基于傳統可量性狀和框架數據的綜合判別，只需要測定9項形態指標，以獲得7個形態學參數代入判別模型進行判別即可；更加快速、經濟、簡便；而且準確有效。



圖I為石斑魚框架數據測量圖。
具體實施例方式以下結合實施例來進一步解釋本發明，但實施例并不對本發明做任何形式的限定。獲取數據前，待測魚體均冰浴處理5分鐘，以起到麻醉和魚體舒展的作用，以獲得更真實的數據。待測魚經天平稱量后進行形態學參數的測定，具體包括傳統可量性狀測定和框架測量參數測定。傳統可量性狀有全長、體長、體高、體寬、頭長、吻長、眼徑、眼間距、尾柄長、尾柄高、肛前體長、眼后頭長，共12項參數；本發明只需獲取全長、體長、頭長、尾柄長、吻長、眼徑、眼間距7項參數?？蚣軠y量所取定位點參照附圖1，數據為兩個坐標點之間的直線距離長度，可精確到O. 1cm。選取10個坐標點,其中坐標點I為下頜骨最后端；坐標點2為吻前端；坐標點3為腹鰭起點；坐標點4為頭背部末端；坐標點5為臀鰭起點；坐標點6為背鰭起點；坐標點7為臀鰭末端；坐標點8為背鰭末端；坐標點9為尾鰭腹部起點；坐標點10為尾鰭背部起點。各坐標點之間的距離為21個框架數據，例如，Dp2為坐標點I和坐標點2之間的直線距離。本發明只需獲取下頜骨最后端與頭背部末端的之間直線距離D1-4、臀鰭起點與背鰭末端之間直線距離D5-8。上述傳統可量數據和框架數據的采集可根據實際需要選用以下其中一種方法進行操作(I)傳統測量法選用直尺或卷尺等測量工具進行逐一測量。(2)紙板測量法把試驗魚放置在硬紙板或質量較好的白紙上，人工選取標志點(參照附圖1)，用大頭針在紙上扎孔作為標記，事后再測量紙板上兩點間的距離，得到所需數據。兩者相比，第一種操作較簡便，第二種操作時間較短，對魚體的損傷相對較小。但相比較的樣本組間同一類數據只能采取同一種測量方法，以減少誤差，提高結果準確度。對上述獲取的參數進行初步處理，獲得以下特征參數值下頜骨最后端與頭背部末端之間直線距離/體長、臀鰭起點與背鰭末端之間直線距離/體長、全長/體長、頭長/吻長、體長/尾柄長、頭長/眼徑、頭長/眼間距;將以上獲得的下頜骨最后端與頭背部末端之間直線距離D1-4/體長、臀鰭起點與背鰭末端之間直線距離D5-8/體長、全長/體長、頭長/吻長、體長/尾柄長、頭長/眼徑、頭長/眼間距七個數據依次用Xf X7代替，并分別代入下列判定模型Yl=-1183+3099X1+2184X2+604. 432X3+37. 99X4+17. 807X5-10. 972X6+10. 687X7 ；Υ2=-1245+3413Χ1+1967Χ2+584. 208X3+37. 597X4+19. 98X5-6. 528X6+16. 487X7 ；Y3=-l103+3094X1+1895X2+572. 099X3+34. 5X4+17. 904X5-3. 031X6+11. 634X7 ；根據所得最大的Y值來判別該樣本所屬類別，其中Yl代表鞍帶石斑魚、Υ2代表棕點石斑魚、Υ3代表虎龍斑。用已知的魚種對上述方法進行驗證實驗如下，待測雜交石斑魚均取自廣東省大亞灣水產實驗中心，鞍帶石斑魚、棕點石斑魚、虎龍斑各30尾。體重，體長(范圍)如下表 表I觀測樣本的數量和規格
權利要求
1.一種雜交石斑魚的種質鑒定方法，其特征在于，包括步驟 (1)獲取待測樣本石斑魚形態學參數，其中包括傳統可量性狀參數全長、體長、頭長、尾柄長、吻長、眼徑、眼間距；以及框架測量參數下頜骨最后端與頭背部末端的之間直線距離、臀鰭起點與背鰭末端之間直線距離； (2)對上述獲取的參數進行初步處理，獲得以下特征參數值下頜骨最后端與頭背部末端之間直線距離/體長、臀鰭起點與背鰭末端之間直線距離/體長、全長/體長、頭長/吻長、體長/尾柄長、頭長/眼徑、頭長/眼間距； (3)將以上步驟2獲得的七個數據依次用XfX7代替，并分別代入下列判定模型Yl=-1183+3099X1+2184X2+604. 432X3+37. 99X4+17. 807X5-10. 972X6+10. 687X7 ；Υ2=-1245+3413Χ1+1967Χ2+584. 208X3+37. 597X4+19. 98X5-6. 528X6+16. 487X7 ；Y3=-l103+3094X1+1895X2+572. 099X3+34. 5X4+17. 904X5-3. 031X6+11. 634X7 ； (4)根據所得最大的Y值來判別該樣本所屬類別，其中Yl代表鞍帶石斑魚、Υ2代表棕點石斑魚、Υ3代表虎龍斑。
2.根據權利要求I所述雜交石斑魚的種質鑒定方法，其特征在于步驟(I)中，對所述的傳統可量性狀參數和框架測量參數通過傳統測量法或紙板測量法獲取。
3.根據權利要求2所述雜交石斑魚的種質鑒定方法，其特征是所述紙板測量法，用針在紙板上比照魚體的框架結構點依次扎孔。
4.根據權利要求I或2或3所述雜交石斑魚的種質鑒定方法，其特征在于待測樣本石斑魚在測量前用冰浴處理5分鐘。
全文摘要
本發明公開了一種雜交石斑魚的種質鑒定方法，基本步驟如下對待測樣本進行形態學參數測定，包括傳統可量性狀全長、體長、頭長、尾柄長、吻長、眼徑、眼間距，以及框架測量數據D1-4、D5-8；對上述獲取的參數進行初步處理，獲得以下特征參數值下頜骨最后端與頭背部末端之間直線距離/體長、臀鰭起點與背鰭末端之間直線距離/體長、全長/體長、頭長/吻長、體長/尾柄長、頭長/眼徑、頭長/眼間距；將以上參數值處理后代入相應判別函數模型，根據最大Y值判斷該樣本所屬類別。本發明方法簡便易行并準確有效。
文檔編號A01K61/00GK102939915SQ20121039617
公開日2013年2月27日 申請日期2012年10月17日 優先權日2012年10月17日
發明者張勇, 王燕, 張海發, 李水生, 黃文 , 劉瓊瑜, 蒙子寧, 劉曉春, 林浩然 申請人:中山大學