小鼠近視模型的誘導裝置、誘導方法以及小鼠近視模型的制作方法
【專利摘要】本發明公開了一種小鼠近視模型的誘導裝置、誘導方法以及小鼠近視模型。裝置由螺絲套件和近視頭架兩部分組成。螺絲套件包括螺桿、墊片及螺帽，縫合于小鼠頭頂部作為第一支點固定近視頭架。近視頭架具可塑性，由腰孔，連接桿，鏡架及鼻托四部分組成。腰孔用于與螺桿固定及前后距離微調；鏡架用于固定鏡片，可根據小鼠眼球位置調整；鼻托固定于鼻部，作為第二支點加固近視頭架；連接桿連接上述三部分。本發明與現有技術相比，手術創傷?。徽w性能強，穩定、安全可靠；非接觸性設計，不影響小鼠生理習性，且利于反復操作及測量；裝置材料易獲取，成本低。
【專利說明】小鼠近視模型的誘導裝置、誘導方法以及小鼠近視模型
【技術領域】
[0001]本發明涉及近視研究領域中小鼠近視模型的誘導裝置、誘導方法以及小鼠近視模型。
【背景技術】
[0002]近視動物模型是近視研究的重要組成部分，對探討近視發病機理和尋求防治措施起到至關重要的作用。自上世紀70年代初小雞近視眼模型的建立，目前已有多種模式生物建立了近視模型，包括恒河猴、豚鼠、小鼠、斑馬魚等。這其中小鼠因其遺傳背景清晰，且建立了一系列成熟的基因敲除及轉基因模型，近10年來已成為國內外普遍采用的造模對象。
[0003]小鼠近視的誘導方法主要有形覺剝奪法(Form deprivation myopia, FDM)和離焦鏡片誘導法(Lens induced myopia, LIM)。形覺剝奪法應用比較廣泛,具體操作方法又包括了眼瞼縫合法、半透明膜法、塑料眼罩法、項圈+眼罩法以及頭架+眼罩法；離焦鏡片誘導法報道相對少，包括單純眼罩法、項圈+眼罩法及屈光手術等。各種方法的特點簡介如下:
眼瞼縫合法是Tejedor，J首創的經典方法，操作簡單，但易被小鼠破壞，存在感染風險，且壓迫眼球可能影響其健康，有逐漸被淘汰的趨勢；半透明膜法由國內復旦大學研究組設計，類似于彌散鏡片，將半透明膜固定于眼周，操作簡單，同樣容易被小鼠破壞；塑料眼罩法溫州醫學院發明，將特制的塑料眼罩縫合固定于小鼠的誘導眼一側，操作簡單，但穩定性可能不高；項圈+眼罩法由Schaeffel F首創，是目前應用比較多的方法，項圈可減少小鼠對眼罩的破壞，但容易影響其進食飲水及精神狀態，且限制生理性“洗臉”清潔動作；單純眼罩法最先由Barathi V A報道，可將誘導鏡片的圓形底座先固定在眼周，再將鏡片固定在底座上，置于眼前，操作簡單，但易被破壞；屈光手術法理論可行，尚未見相關的研究論文報道。
[0004]頭架+眼罩法由Faulkner A E首創，充分利用了盧頁骨與眼球位置相對固定的特點，是目前小鼠近視模型研究領域比較成功的制作方法。該制作方法需暴露小鼠局部顱骨，刮除骨膜，通過骨釘、丙烯酸樹脂頭座等裝置將遮眼鏡框置于小鼠的誘導眼前，可進行遮眼鏡框的前后距離調整，并配有對側平衡桿以穩定裝置。頭架+眼罩法實現了模型制作時不直接接觸小鼠眼球或眼周組織，可根據不同鼠齡調整遮眼鏡框位置，能方便地對眼球進行操作和測量，利于眼部健康的維護。但該方法也存在明顯的缺點:1)手術操作復雜，技術難度高，對小鼠創傷大；2)誘導裝置復雜且成本高，僅能在少數有條件的實驗室開展；3)頭頂固定裝置對局部組織的影響大，脫落后再次造模的可能性小。
[0005]總之，目前小鼠近視模型的誘導方法很多，各有利弊。相對而言，項圈能夠限制小鼠的搔抓，但會顯著影響正常的生活習性；頭頂固定最穩定，但手術復雜且技術難度高，成本也高，目前小鼠近視模型的制作尚缺乏一種既穩定、安全、經濟又微創的方法。

【發明內容】
[0006]本發明目的在于盡可能克服目前小鼠近視誘導方法的缺點，不安裝項圈限制小鼠的正常習性，吸取頭頂固定穩定性高的經驗，提出一種小鼠近視模型的誘導裝置、誘導方法以及小鼠近視模型，相對穩定、安全、經濟又微創。
[0007]—種小鼠近視模型的誘導裝置，包括螺絲套件和近視頭架兩部分，所述的螺絲套件用于將近視頭架固定在小鼠的頭部。
[0008]優選地，所述的螺絲套件采用無毒、生物相容性好的尼龍平頭螺絲套件，包括螺桿，螺帽及墊片。 [0009]優選地，所述的近視頭架具有可塑性，包括腰孔、連接桿、鏡架及鼻托四部分，連接桿分別與腰孔、鏡架、鼻托相連；腰孔呈橢圓形，用于與螺桿固定及前后距離微調，鏡架設有多個鏡片托用于固定鏡片，鼻托用于縫合固定近視頭架于鼻部。
[0010]一種小鼠近視模型的誘導方法，步驟如下:
1)小鼠麻醉后頭頸部剃毛，垂直耳根連線作長I厘米的縱行皮膚切口；
2)以頂間骨與兩塊頂骨的交點為中心，縫合固定螺桿于周邊組織，再縫合皮膚切口；
3)安裝墊片，將腰孔置于墊片上，根據眼球位置調節前后距離，使眼球中心與鏡架中心相對應，再用螺帽固定近視頭架；
4)對鼻托進行形態微調，使之與小鼠鼻部相吻合，縫合固定鼻托；
5)利用鏡片托固定鏡片于鏡架的一只上，并在連接桿上作標記；得到所述的小鼠近視模型。
[0011]一種利用所述的方法得到的小鼠近視模型，小鼠的誘導眼呈近視化發展，與對照眼的屈光度、眼軸長度存在顯著性的統計學差異。
[0012]本發明的有益效果在于:
1)手術創傷較頭架+眼罩法小，僅涉及皮膚及肌肉縫合；
2)裝置整體不接觸眼球或眼周結構，操作安全；
3)螺絲固定的方法方便拆卸，利于日常維護及檢測；
4)頭架前后距離及鏡架位置可調，適合不同日齡的小鼠造模；
5)雙支點固定，穩定可靠，無須單獨飼養；
6)不安裝項圈，不影響小鼠進食進水，也不限制“洗臉”行為；
7)裝置可自行采購或制作，成本低。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0013]圖1是本發明的螺絲套件結構示意圖；
圖2是本發明的近視頭架結構示意圖；
圖3是小鼠佩戴本發明裝置的正視效果圖；
圖4是小鼠佩戴本發明裝置的右視效果圖；
圖中，螺桿1、螺帽2、墊片3、腰孔4，連接桿5，鏡架6，鼻托7。
【具體實施方式】
[0014]以下結合附圖和【具體實施方式】對本發明做進一步的說明。
[0015]一種小鼠近視模型的誘導裝置，包括螺絲套件(如圖1所示)和近視頭架(如圖2所示)兩部分，所述的螺絲套件用于將近視頭架固定在小鼠的頭部。
[0016]優選地，所述的螺絲套件采用無毒、生物相容性好的尼龍平頭螺絲套件，包括螺桿I，螺帽2及墊片3。
[0017]優選地，所述的近視頭架具有可塑性，包括腰孔4、連接桿5、鏡架6及鼻托7四部分，連接桿5分別與腰孔4、鏡架6、鼻托7相連；腰孔4呈橢圓形，用于與螺桿I固定及前后距離微調，鏡架設有多個鏡片托用于固定鏡片，鼻托用于縫合固定近視頭架于鼻部。
[0018]一種小鼠近視模型的誘導方法(如圖3、4所示)，步驟如下:
1)小鼠麻醉后頭頸部剃毛，垂直耳根連線作長I厘米的縱行皮膚切口；
2)以頂間骨與兩塊頂骨的交點為中心，縫合固定螺桿I于周邊組織，再縫合皮膚切
n ；
3)安裝墊片3，將腰孔4置于墊片3上，根據眼球位置調節前后距離，使眼球中心與鏡架6中心相對應，再用螺帽2固定近視頭架；
4)對鼻托7進行形態微調，使之與小鼠鼻部相吻合，縫合固定鼻托7；
5)利用鏡片托固定鏡片于鏡架6的一只上，并在連接桿5上作標記；
得到所述的小鼠近視模型。
[0019]一種利用所述的方法得到的小鼠近視模型，小鼠的誘導眼呈近視化發展，與對照眼的屈光度、眼軸長度存在顯著`性的統計學差異。
實施例
[0020]我們采用出生后2廣24天的C57BL6小鼠作為模式動物，安裝好所述誘導裝置，右眼鏡架安裝離焦鏡片作為實驗眼，左眼鏡架不安裝鏡片作為對照。誘導4周后進行驗光及生物學參數測量，發現實驗眼呈近視化發展，與對照眼的屈光度、眼軸長度存在顯著性的統計學差異。
【權利要求】
1.一種小鼠近視模型的誘導裝置，其特征在于，它包括螺絲套件和近視頭架兩部分，所述的螺絲套件用于將近視頭架固定在小鼠的頭部。
2.根據權利要求1所述的小鼠近視模型的誘導裝置，其特征在于，所述的螺絲套件采用無毒、生物相容性好的尼龍平頭螺絲套件，包括螺桿(1)，螺帽(2)及墊片(3)。
3.根據權利要求1或2所述的小鼠近視模型的誘導裝置，其特征在于，所述的近視頭架具有可塑性，包括腰孔(4)、連接桿(5)、鏡架(6)及鼻托(7)四部分，連接桿(5)分別與腰孔(4 )、鏡架(6 )、鼻托(7 )相連；腰孔(4 )呈橢圓形，用于與螺桿(I )固定及前后距離微調，鏡架設有多個鏡片托用于固定鏡片，鼻托用于縫合固定近視頭架于鼻部。
4.一種小鼠近視模型的誘導方法，其特征在于，步驟如下: 1)小鼠麻醉后頭頸部剃毛，垂直耳根連線作長I厘米的縱行皮膚切口； 2)以頂間骨與兩塊頂骨的交點為中心，縫合固定螺桿(I)于周邊組織，再縫合皮膚切n ； 3)安裝墊片(3)，將腰孔(4)置于墊片(3 )上，根據眼球位置調節前后距離，使眼球中心與鏡架(6 )中心相對應，再用螺帽(2 )固定近視頭架； 4)對鼻托(7)進行形態微調，使之與小鼠鼻部相吻合，縫合固定鼻托(7 ); 5)利用鏡片托固定鏡片于鏡架(6)的一只上，并在連接桿(5)上作標記；得到所述的小鼠近視模型。
5.一種利用權利要求4所`述的方法得到的小鼠近視模型，小鼠的誘導眼呈近視化發展，與對照眼的屈光度、眼軸長度存在顯著性的統計學差異。
【文檔編號】A01K67/02GK103598143SQ201310576052
【公開日】2014年2月26日 申請日期:2013年11月18日 優先權日:2013年11月18日
【發明者】徐柏升, 姜波, 洪楠, 顧揚順 申請人:浙江大學