技術特征：

1.一種耐鎘蘆葦幼苗的人工種子的制備方法，其特征在于：包括如下步驟：

步驟一：采集成熟蘆葦小穗，去內外稃，以表面無損的蘆葦種子為外植體；

步驟二：將步驟一中所述的外植體消毒后，置于誘導培養基上誘導出粘性愈傷組織；

步驟三：剝取步驟二中所述的粘性愈傷組織，將所述粘性愈傷組織轉置于新鮮的誘導培養基上，進一步誘導出胚性愈傷組織；

步驟四：將步驟三所述的胚性愈傷組織通過增殖培養，獲取胚性培養物；

步驟五：將步驟四所述的胚性培養物轉至無植物生長調節劑的再生培養基上生成完整植株；

步驟六：將步驟五中生成的完整植株進行培養，得到蘆葦再生苗；

步驟七：將步驟六所述的蘆葦再生苗轉至無菌組培瓶中進行培養，向所述無菌組培瓶中加入無菌OECD模擬廢水；采集活性污泥，將所述活性污泥離心、清洗后加入所述組培瓶中，用組培膜覆蓋瓶口，將所述組培瓶于人工氣候箱中孵育；

步驟八：取經步驟七處理的蘆葦再生苗的根組織，將所述根組織的表面進行消毒后研磨成漿，再將所述根組織的漿標準稀釋涂布于MS平板上，將所述MS平板放置在恒溫培養箱中培養，待菌落長出；

步驟九：從步驟八所述的MS平板上挑選草螺菌單菌落，接種至NB液體培養基中培養；然后離心處理所述NB液體培養基以收集菌體，清洗收集的所述菌體，使用MS液體培養基重新懸浮所述菌體制成細菌重懸液，調節所述細菌重懸液中草螺菌的OD_600nm值為0.01-1；取至少一個蘆葦胚性培養物浸入所述細菌重懸液中孵育，將所述蘆葦胚性培養物轉至無菌濾紙上除去表面菌體后，再將所述蘆葦胚性培養物置于MS平板上進行培養；

步驟十：配制人工胚乳；向所述人工胚乳溶液中加入海藻酸鈉，配制成溶膠懸液作為種皮基質，同時使用去離子水配制CaCl₂溶液作為絡合劑，將所述溶膠懸液和CaCl₂溶液分別調節pH值后滅菌處理；

步驟十一：將步驟九所述的蘆葦胚性培養物加入步驟十所述的種皮基質中，均勻混合后，再用無菌巴氏吸管每次吸入一個所述蘆葦胚性培養物，滴入步驟十所述的CaCl₂溶液中，取出后將所述蘆葦胚性培養物清洗晾干，即形成人工種子；

步驟十二：將步驟十一所述的人工種子放在MS培養基上進行萌發培養。

2.根據權利要求1所述的一種耐鎘蘆葦幼苗的人工種子的制備方法，其特征在于：所述誘導培養基的制備方法為：向每升MS液體培養基中加入1mg的二氯苯氧乙酸、1mg的萘乙酸、0.5mg的6-芐基腺嘌呤、30g的蔗糖以及0.5mg L-谷氨酰胺；所述增殖培養基的配制方法為向每升MS液體培養基中加入2.5mg的二氯苯氧乙酸、30g的蔗糖以及16g的瓊脂；所述再生培養基的配置方法為：向每升MS液體培養基中加入2.5mg的二氯苯氧乙酸、30g的蔗糖以及16g的瓊脂。

3.根據權利要求1所述的一種耐鎘蘆葦幼苗的人工種子的制備方法，其特征在于：步驟二所述的消毒為用質量濃度為5％的次氯酸鈉進行表面消毒，步驟二所述的粘性愈傷組織為在胚芽鞘末端的白色、半透明、有光澤組織；步驟三所述的胚性愈傷組織為表面具有細小瘤狀物和綠點的組織；步驟四所述的胚性愈傷組織通過質量濃度為2.5mgL^-1的2,4-D進行增殖培養。

4.根據權利要求1所述的一種耐鎘蘆葦幼苗的人工種子的制備方法，其特征在于：步驟六所述的完整植株的高度為5cm～10cm，培養方式為轉至1/2MS液體培養基中進行水培，或以蛭石為栽培基質進行。

5.根據權利要求1所述的一種耐鎘蘆葦幼苗的人工種子的制備方法，其特征在于：步驟七所述的無菌組培瓶的高為20cm、直徑為5cm，所述OECD模擬廢水的配方為向0.5L去離子水中加入160mg的蛋白胨、110mg的肉膏、30mg的尿素、28mg的K₂HPO₄、7mg的NaCl、4mg的CaCl₂·2H₂O和2mg的MgSO₄·7H₂O，配制成混合液，再用去離子水將所述混合液定容至1L，再用規格為0.22μm的濾膜過濾滅菌，即制成OECD模擬廢水；所述加入無菌組培瓶中的OECD模擬廢水的體積為150ml，所述活性污泥從污水處理廠采集，所述離心條件為于12000rpm下離心5min，所述清洗為用pH值為7.4的磷酸鹽緩沖液清洗3次，所述組培瓶中溶液的終濃度為2.5g VSS L^-1，所述組培膜的大小為16cm×16cm，所述人工氣候箱中的條件為溫度24℃，光照時間16h d^-1，光照強度60μmol.m^-2.s^-1，所述孵育時間為14d。

6.根據權利要求1所述的一種耐鎘蘆葦幼苗的人工種子的制備方法，其特征在于：步驟八所取的根組織的重量為1g，所述研磨在無菌研缽中進行，所述恒溫培養箱中的溫度為30℃，培養時間為2d～3d。

7.根據權利要求1所述的一種耐鎘蘆葦幼苗的人工種子的制備方法，其特征在于：步驟九所述的培養的條件為30℃下150rpm振蕩培養24h；離心條件為12000rpm下離心5min；所述清洗為用磷酸緩沖液清洗3次，調節所述OD_600nm值為0.01；所述蘆葦胚性培養物數目為10個，所述細菌重懸液的體積為20mL，所述孵育的時間為30min。

8.根據權利要求1所述的一種耐鎘蘆葦幼苗的人工種子的制備方法，其特征在于：步驟十所述人工胚乳以MS培養基為基本培養基，所述基本培養基中含有質量濃度為3％的蔗糖作為碳源；所述海藻酸鈉的質量濃度為3％，所述CaCl₂溶液的濃度為100mM，所述溶膠懸液和CaCl₂溶液調節后的pH值均為5.8，所述滅菌為121℃下高溫高壓滅菌20min。

9.根據權利要求1所述的一種耐鎘蘆葦幼苗的人工種子的制備方法，其特征在于：步驟十一中所述的蘆葦胚性培養物表面有綠點，所述巴氏吸管的直徑為7mm，滴入所述的CaCl₂溶液中的時間為30min，用無菌水將所述蘆葦胚性培養物清洗5遍后在無菌濾紙上晾干。

10.根據權利要求1所述的一種耐鎘蘆葦幼苗的人工種子的制備方法，其特征在于：步驟十二所述的每個MS培養基內放置20粒人工種子，培養條件為溫度24℃，光照時間為16hd^-1，光照強度60μmol.m^-2.s^-1，重復培養3次。