專利名稱：一種以林檎樹葉為主要原料的天然防腐劑的制備方法及應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及防腐劑領(lǐng)域，具體是一種以林檎樹葉為主要原料的天然防腐劑的制備方法及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
食品防腐是一個(gè)古老的命題。人類自出現(xiàn)始，就自覺不自覺的發(fā)明了鹽潰、煙熏等食品保藏手段。到目前為止，食品防腐仍然是食品科學(xué)工作者的主要研究內(nèi)容之一。目前已經(jīng)探明:食品腐敗影響因素較多，如微生物、光線、氧氣、水分等，其中引起食品腐敗變質(zhì)最主要的因素是微生物。絕大部分食品的腐敗變質(zhì)均由微生物引起。自此，防腐劑因運(yùn)而生。食品工業(yè)中維持和延長食品保質(zhì)期的主要手段也主要是采用防腐劑。防腐劑按其來源可分為化學(xué)防腐劑(又稱人工合成防腐劑)和天然防腐劑兩大類。化學(xué)防腐劑以其成本低、防腐效果好、水溶性好等優(yōu)點(diǎn)使其自問世起到現(xiàn)在一直是食品防腐的主要應(yīng)用對(duì)象。而隨著科技的不斷進(jìn)步，化學(xué)防腐劑的缺點(diǎn)逐漸顯現(xiàn)。如最常用的苯甲酸鈉，已有眾多研究資料表明長期使用苯甲酸鈉對(duì)人體可誘發(fā)癌癥，苯甲酸鈉也存在致畸性等。世界各國對(duì)化學(xué)防腐劑的使用越來越嚴(yán)格，發(fā)達(dá)國家如日本已全面禁止苯甲酸鈉在食品中的應(yīng)用，我國盡管還允許在食品中使用苯甲酸鈉，但也做出了苯甲酸鈉用量和使用范圍的嚴(yán)格限制。總體而言，隨著人們對(duì)食品安全意識(shí)的不斷增強(qiáng)和近來“染色饅頭”、“麥樂雞”等有關(guān)食品添加劑的食品安全事件，人們對(duì)包括食品添加劑關(guān)注度越來越高，對(duì)食品防腐劑更是談虎色變。因此，開發(fā)食品安全性高、防腐效果好的天然防腐劑成為今后食品防腐劑的主要發(fā)展方向。林檎，薔薇科、蘋果屬。據(jù)《中國植物志》分類:我國分布的林檎種類有尖嘴林檎(Malus Mellina (Hana-Mazz) Rehd)和臺(tái)灣林擒(Malus Formosana (Kawak, Kooidz) Kawak)兩種。其中尖嘴林檎主要分布于浙江、安徽、江西、湖南、福建等省區(qū)。林檎葉和果實(shí)中均含有多種活性成分，如黃酮類、酚類、皂甙和有機(jī)酸等。在我國江浙一帶，群中有利用林檎冬季落葉代茶飲用的習(xí)慣，林檎葉用于防病治病、防霉防腐已有數(shù)百年歷史。林檎葉做飲料，飲用時(shí)口感好，味甘爽，并有生津止渴、解暑消炎的功效；夏天開水沖泡的林檎葉茶，防止三天不餿，不長霉菌；當(dāng)?shù)厝罕姶汗?jié)時(shí)常用林檎葉加水熬煮后，取枝葉浸泡糯米，可使糯米保存數(shù)月仍不變質(zhì)。林檎葉作為天然防腐劑顯示出極好的防腐效果。本發(fā)明正是利用林檎葉良好的防腐效果，以其為原料制備天然防腐劑。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的第一個(gè)技術(shù)問題是提供一種以林檎樹葉為主要原料的天然防腐劑的制備方法，具有資源廣、成產(chǎn)成本低的特點(diǎn)，制備的天然防腐劑安全無毒，對(duì)包括革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌在內(nèi)的多種微生物具有良好的抑制作用本發(fā)明所要解決的第二個(gè)技術(shù)問題是提供一種以林檎樹葉為主要原料的天然防腐劑的應(yīng)用。
本發(fā)明解決上述第一個(gè)技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案為:一種以林檎樹葉為主要原料的天然防腐劑的制備方法，其特征在于將洗凈的林檎樹葉在35 45°C條件下進(jìn)行熱風(fēng)干燥至水分含量為15% 18 (wt) %，粉碎后過50 70目篩；林檎樹葉粉末中加入質(zhì)量為20 30倍、體積百分比濃度為30% 95%的乙醇，40 70V條件下(優(yōu)選50 70°C )加熱回流提取2 4次，每次I 6小時(shí)，將每次回流所得的提取液合并、過濾，轉(zhuǎn)移至旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中濃縮至0.4-lg原藥/mL，微孔膜過濾或離心后上柱洗脫分離，洗脫柱為LSA-10大孔樹脂柱，林檎樹葉粉末與大孔樹脂的質(zhì)量比為1:1 4，樹脂柱直徑與高度之比為1: 4 I: 8，上柱流速為I 5BV/h;用水洗滌樹脂，洗脫量為5 10BV，洗脫速度為I 3BV/h，水洗脫液丟棄；而后用體積百分比濃度30% 95%的乙醇洗脫，洗脫速度I 3BV/h，將乙醇洗脫液收集后采用真空干燥，獲得固態(tài)林檎樹葉提取物，粉碎后即得天然防腐劑。作為優(yōu)選，所述乙醇的體積百分比濃度為60 95% ;所述水洗脫液和乙醇洗脫液的洗脫速度均為lBV/h。最后,所述離心速度為9000 11000r/min,時(shí)間為8 12min。優(yōu)選10000r/min,IOmin0本發(fā)明解決上述第二個(gè)技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案為:一種以林檎樹葉為主要原料的天然防腐劑應(yīng)用于水產(chǎn)品、畜產(chǎn)品的防腐。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于:采用的原料屬于天然植物的樹葉，為可再生資源,且資源保有量大,生產(chǎn)成本低,林檎樹葉中含有多種天然化合物,如黃酮類、酚類、皂甙、有機(jī)酸即單寧物質(zhì)，這些化合物大都具有一定殺菌防腐功效。由本發(fā)明的制備方法制取的天然防腐劑對(duì)包括革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌在內(nèi)的多種微生物具有良好的抑制作用；此外，該天然防腐劑可同其他輔料如檸檬酸、山梨酸等配伍，增強(qiáng)抑菌效果。
具體實(shí)施例方式以下結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)描述，但并不能理解為是對(duì)本發(fā)明的限制。實(shí)施例1:稱取I份林檎樹葉，清洗干凈后放入干燥箱內(nèi)40°C溫度下干燥至水分含量為15 %，粉碎后過60目篩；林檎樹葉粉末中加入20倍質(zhì)量的、百分比濃度為60 %的乙醇，50°C條件下加熱回流2次，每次5h，收集2次回流液，合并、過濾，轉(zhuǎn)移至旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中濃縮至0.4g原藥/mL,濃縮液微孔膜過濾或離心后(10000r/min, IOmin)上LSA-10大孔樹脂柱，林檎樹葉粉末與大孔樹脂的質(zhì)量比為1: 1，樹脂柱直徑與高度之比為1: 4，上柱流速lBV/h ;用水洗脫5BV/h，洗脫流速為lBV/h，水洗脫液丟棄；而后用百分比濃度60%的乙醇洗脫，洗脫流速lBV/h，收集乙醇洗脫液，采用真空干燥去除乙醇，得到固態(tài)林檎樹葉提取物，將該提取物粉碎后得到天然防腐劑。該天然防腐劑總黃酮含量(以蘆丁計(jì))含量:10.23 %，分光光度法；多酚類物質(zhì):16.65 %，分光光度法；皂甙:3.43 %，HPLC法。實(shí)施例2:稱取I份林檎樹葉，清洗干凈后放入干燥箱內(nèi)40°C溫度下干燥至水分含量為16%，粉碎后過60目篩；林檎樹葉粉末中加入25倍質(zhì)量、百分比濃度為75%的乙醇，50°C條件下回流3次，每次3h，收集3次回流液，合并、過濾，轉(zhuǎn)移至旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中濃縮至0.6g原藥/mL，濃縮液微孔膜過濾或離心后(10000r/min，IOmin)上LSA-1O大孔樹脂柱，林檎樹葉粉末與大孔樹脂的質(zhì)量比為1: 2，樹脂柱直徑與高度之比為1: 6，上柱速度3BV/h ;用水洗脫8BV，洗脫速度為2BV，水洗脫液丟棄；而后用百分比濃度75%的乙醇洗脫，洗脫流速2BV/h，收集乙醇洗脫液，采用真空干燥去除乙醇，得到固態(tài)林檎樹葉提取物，將該提取物粉碎后得到天然防腐劑。該天然防腐劑總黃酮含量(以蘆丁計(jì))含量:14.65%，分光光度法；多酚類物質(zhì):19.87%，分光光度法；皂甙:4.89%，HPLC法。實(shí)施例3:稱取I份林檎樹葉，清洗干凈后放入干燥箱內(nèi)40°C溫度下干燥至水分含量為18%，粉碎后過60目篩；林檎樹葉粉末中加入30倍質(zhì)量、百分比濃度為95%的乙醇，50°C條件下回流4次，每次2h，收集4次回流液，合并、過濾，轉(zhuǎn)移至旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中濃縮至1.0g原藥/mL，濃縮液微孔膜過濾或離心后(10000r/min，IOmin)上LSA-1O大孔樹脂柱，林檎樹葉粉末與大孔樹脂的質(zhì)量比為1: 4，樹脂柱直徑與高度之比為1: 8，上柱速度5BV/h ;用水洗脫10BV，洗脫速度為3BV，水洗脫液丟棄；而后用百分比濃度95%的乙醇洗脫，洗脫流速3BV/h，收集乙醇洗脫液，采用真空干燥去除乙醇，得到固態(tài)林檎樹葉提取物，將該提取物粉碎后得到天然防腐劑。該天然防腐劑總黃酮含量(以蘆丁計(jì))含量:19.98%，分光光度法；多酚類物質(zhì):24.53%，分光光度法；皂甙:5.98%, HPLC法。實(shí)驗(yàn)例:采用牛津杯雙層平板法測定上述實(shí)施例1 3所獲得的天然防腐劑的抑囷效果，結(jié)果如表I所不。表I天然防腐劑對(duì)不同微生物抑菌圈大小(單位:_)
權(quán)利要求
1.一種以林檎樹葉為主要原料的天然防腐劑的制備方法，其特征在于將洗凈的林檎樹葉在35 45°C條件下進(jìn)行熱風(fēng)干燥至水分含量為15% 18(wt) %，粉碎后過50 70目篩；林檎樹葉粉末中加入質(zhì)量為20 30倍、體積百分比濃度為30 % 95 %的乙醇，在40 70°C條件下加熱回流提取2 4次，每次I 6小時(shí)，將每次回流所得的提取液合并、過濾，轉(zhuǎn)移至旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中濃縮至0.4-lg原藥/mL，微孔膜過濾或離心后上柱洗脫分離，洗脫柱為LSA-10大孔樹脂柱，林檎樹葉粉末與大孔樹脂的質(zhì)量比為1:1 4，樹脂柱直徑與高度之比為1: 4 1: 8，上柱流速為I 5BV/h;用水洗滌樹脂，洗脫量為5 10BV，洗脫速度為I 3BV/h，水洗脫液丟棄；而后用體積百分比濃度30% 95%的乙醇洗脫，洗脫速度I 3BV/h，將乙醇洗脫液收集后采用真空干燥，獲得固態(tài)林檎樹葉提取物，粉碎后即得天然防腐劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于所述乙醇的體積百分比濃度為60 95% ;所述水洗脫液和乙醇洗脫液的洗脫速度均為lBV/h。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于所述離心速度為9000 11000r/min,時(shí)間為8 12min。
4.一種根據(jù)權(quán)利要求1所述的以林檎樹葉為主要原料的天然防腐劑應(yīng)用于水產(chǎn)品、畜廣品的防腐。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種以林檎樹葉為主要原料的天然防腐劑的制備方法及其應(yīng)用，步驟為將林檎樹葉清洗干凈并干燥、粉碎后加入乙醇，加熱回流提取，提取液過濾、合并，經(jīng)濃縮、微孔膜過濾或離心后通過大孔樹脂；先用水洗滌大孔樹脂，丟棄水洗脫液，在用乙醇做洗脫液洗脫，收集乙醇洗脫液并將乙醇洗脫液濃縮、去除后獲得林檎樹葉提取物，該提取物經(jīng)粉碎后獲得天然防腐劑。本發(fā)明原料屬于天然植物的樹葉，為可再生資源，且資源保有量大，生產(chǎn)成本低，由該方法制備的天然防腐劑對(duì)包括革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌在內(nèi)的多種微生物具有良好的抑制作用；此外，該天然防腐劑可同其他輔料如檸檬酸、山梨酸等配伍，增強(qiáng)抑菌效果，可應(yīng)用于水產(chǎn)品、畜產(chǎn)品等的防腐。
文檔編號(hào)A23B4/20GK103099293SQ20111036159
公開日2013年5月15日 申請(qǐng)日期2011年11月15日 優(yōu)先權(quán)日2011年11月15日
發(fā)明者霍健聰, 鄧尚貴 申請(qǐng)人:浙江海洋學(xué)院