一種飼用酵母自溶物的制備方法
【專利摘要】本發明涉及一種飼用酵母自溶物的制備方法，屬于農業生物【技術領域】。原始出發菌株產朊假絲酵母(Candida?utilis?CGMCC2.1180)1株經馬鈴薯葡萄糖瓊脂斜面活化，接種在酵母浸出粉胨葡萄糖液體培養基中，30℃，200-250rpm，培養12-16h，作為種子液；在液體擴大酵母浸出粉胨葡萄糖液體培養基中，以10％的接種量接種種子液，30℃，800rpm，培養12h，離心收集菌體，加入無菌水，無菌水與菌體混合比例為5∶1，然后加入辛酸，終濃度為2‰，50℃，6h，100rpm，酵母自溶率達61.5％。本發明的酵母自溶物的制備方法具有安全、高效、低成本的特點。
【專利說明】一種飼用酵母自溶物的制備方法
(—)【技術領域】
[0001]本發明涉及一種飼用酵母自溶物的制備方法，屬于農業生物【技術領域】。
(二)【背景技術】
[0002]產朊假絲酵母(Candida utilis)其蛋白質和維生素B的含量都比釀酒酵母高，它能以尿素和硝酸作為氮源，在培養基中不需要加入任何生長因子即可生長。它能利用五碳糖和六碳糖，既能利用造紙工業的亞硫酸廢液，還能利用糖蜜、木材水解液等生產出人畜可食用的蛋白質。
[0003]雖然酵母含有大量的蛋白質、碳水化合物、維生素、礦質元素、谷胱甘肽等物質，具有很好的營養作用，是一種非常優良的蛋白資源。但因酵母細胞壁堅硬、不易消化，因而不利于動物吸收。
[0004]國內外的大量研究證明，酵母自溶物在促進動物生長，提高飼料利用率，預防疾病，提高機體免疫力和改善環境方面具有重要作用。近些年，酵母自溶物已越來越受到國內外飼養業的重視，許多國外產品如美國達農威公司生產的“益康XP”、美國奧特奇公司生產的“益生酵母1026”等進入我國，目前酵母系列飼料添加劑產品市場長期被國外產品壟斷，并且價格昂貴。這種狀況對日益增長的奶牛產業、飼料產業構成很大威脅，同時也影響奶牛產業的可持續發展。
[0005]如何提高酵母自溶物的作用效果，并降低其生產成本，是目前國內外同類產品亟需解決的問題。關鍵技術與技術難點:確定和保持酵母細胞的敏感生理形態，選擇安全的溶解劑和安全濃度，提高和明確酵母自溶物的作用范圍與效果如何提高酵母自溶物的作用效果，并降低其生產成本，是目前國內外同類產品亟需解決的問題。關鍵技術與技術難點:確定和保持酵母細胞的敏感生理形態，選擇安全的溶解劑和安全濃度，提高和明確酵母自溶物的作用范圍與效果。本發明技術主要針對上述的酵母自溶破壁的關鍵問題，通過研究酵母助溶劑的濃度、溫度、時間、固形物濃度以及菌齡對酵母自溶的影響，最終獲得一種飼用酵母自溶物的制備方法。為制得安全、高效、低成本且易被吸收、兼具多種功能的產品酵母自溶物提供了技術支撐。
(三)
【發明內容】

[0006]本發明的目的在于通過研究酵母助溶劑的濃度、溫度、時間、固形物濃度以及菌齡對酵母自溶的影響，最終獲得一種飼用酵母自溶物的制備方法。為制得安全、高效、低成本且易被吸收、兼具多種功能的產品酵母自溶物提供了技術支撐。
[0007]本發明的目的通過以下技術方案予以實現。
[0008]本發明提供的一種飼用酵母自溶物的制備方法，其步驟如下:
[0009]a.原始出發菌株產朊假絲酵母(Candida utilis)劃線在馬鈴薯葡萄糖瓊脂斜面培養上，30 0C，靜置培養48h進行活化；
[0010]b.從斜面上挑取一環菌體，接種到酵母浸出粉胨葡萄糖液體培養基中，30°C，200-250rpm，培養12_16h，作為種子液，在液體擴大酵母浸出粉胨葡萄糖液體培養基中，以10%的接種量接種種子液，30°C，800rpm，培養12h ；
[0011]c.5000rpm, IOmin,收集菌體,加入無菌水,無菌術與菌體混合比例為5:1,然后加入辛酸，終濃度為然后加入助溶劑，終濃度為2%0，50 V，6h，IOOrpm,測定酵母自溶率。
[0012]本發明a中所述的馬鈴薯葡萄糖瓊脂斜面培養基，是由200g去皮馬鈴薯洗凈切塊，加水800ml煮沸30min,四層紗布過濾,再加20g葡萄糖和20g瓊脂,攪拌混勻后,定容至1000ml，分裝試管，121°C蒸汽滅菌20分鐘后取出試管擺斜面制得。
[0013]本發明a中所述的菌種為產朊假絲酵母(Candida utilis CGMCC2.1180) I株。
[0014]本發明b中所述的酵母浸出粉胨葡萄糖液體培養基和液體擴大酵母浸出粉胨葡萄糖液體培養基，是由IOg酵母浸出粉，20g蛋白胨于900ml水中，121°C蒸汽滅菌20min，加入115°C蒸汽滅菌15min的100ml20%葡萄糖溶液制得。
[0015]本發明c中所述的酵母自溶條件為是辛酸2%o,50°C,6h, lOOrpm。
[0016]本發明具有以下有益效果:
[0017]本發明所制備的酵母自溶物的自溶率達61.5%。與其他制備方法比較，本發明所用的方法是一種安全、高效和低成本的酵母細胞化學破壁自溶方法。
(四)【具體實施方式】
[0018]本發明提供的一種飼用酵母自溶物的制備方法的【具體實施方式】如下:
[0019]本實施例所用的菌株為產朊假絲酵母(Candida utilis)，保藏于中國微生物菌種保藏中心(CGMCC2.1180)。
[0020]a.200g去皮馬鈴薯洗凈切塊，加水800ml煮沸30min，四層紗布過濾，再加20g葡萄糖和20g瓊脂，攪拌混勻后，定容至1000ml，分裝試管，121 °C蒸汽滅菌20分鐘后取出試管擺斜面制得馬鈴薯葡萄糖瓊脂斜面培養基；
[0021]b.原始出發菌株產朊假絲酵母劃線在馬鈴薯葡萄糖瓊脂斜面培養上，30°C，靜置培養48h進行活化；
[0022]c.1Og酵母浸出粉，20g蛋白胨于900ml水中，121°C蒸汽滅菌20min，加入115°C蒸汽滅菌15min的100ml20%葡萄糖溶液制得酵母浸出粉胨葡萄糖液體培養基和液體擴大酵母浸出粉胨葡萄糖液體培養基；
[0023]d.從斜面上挑取一環菌體，接種到酵母浸出粉胨葡萄糖液體培養基中，30°C，200-250rpm，培養12_16h，作為種子液，在液體擴大酵母浸出粉胨葡萄糖液體培養基中，以10%的接種量接種種子液，30°C，800rpm，培養12h ；
[0024]e.5000rpm, IOmin,收集菌體,加入無菌水,無菌術與菌體混合比例為5:1,然后加入辛酸，終濃度為然后加入助溶劑，終濃度為2%0，50 V，6h，IOOrpm,測定酵母自溶率。
[0025]f.由上所述的飼用酵母自溶物的制備方法制作的酵母自溶物的自溶率達61.5%。
[0026]表1助溶劑的濃度對酵母自溶的影響
[0027]
辛酸濃度(％。) 酵母自溶率(％ )
【權利要求】
1.一種飼用酵母自溶物的制備方法，其步驟為: a.原始出發菌株產朊假絲酵母(Candida utilis)劃線在馬鈴薯葡萄糖瓊脂斜面培養上，30°C，靜置培養48h進行活化； b.從斜面上挑取一環菌體，接種到酵母浸出粉胨葡萄糖液體培養基中，30°C，200-250rpm，培養12_16h，作為種子液，在液體擴大酵母浸出粉胨葡萄糖液體培養基中，以10%的接種量接種種子液，30°C，800rpm，培養12h ； c.5000rpm, IOmin,收集菌體,加入無菌水,無菌術與菌體混合比例為5:1,然后加入辛酸，終濃度為然后加入助溶劑，終濃度為2%0，50 V，6h，IOOrpm,測定酵母自溶率。
2.根據權利要求1所述的一種飼用酵母自溶物的制備方法，其步驟a所述的活化菌體的馬鈴薯葡萄糖瓊脂斜面培養基，是由200g去皮馬鈴薯洗凈切塊，加水800ml煮沸30min，四層紗布過濾，再加20g葡萄糖和20g瓊脂，攪拌混勻后，定容至1000ml，分裝試管，121°C蒸汽滅菌20分鐘后取出試管擺斜面制得。
3.根據權利要求1所述的一種飼用酵母自溶物的制備方法，其步驟a所述的菌種為產朊假絲酵母(CGMCC2.1180) I株。
4.根據權利要求1所述的一種飼用酵母自溶物的制備方法，步驟b所述的酵母浸出粉胨葡萄糖液體培養基和液體擴大酵母浸出粉胨葡萄糖液體培養基，是由IOg酵母浸出粉，20g蛋白胨于900ml水中，121°C蒸汽滅菌20min,加入115°C蒸汽滅菌15min的100ml20%葡萄糖溶液制得。
5.根據權利要求1所述的一種飼用酵母自溶物的制備方法，其步驟c所述的酵母自溶條件為是辛酸2%，50°C，6h，IOOrpm制得。
6.根據權利要求1-5任一項所述的飼用酵母自溶物的制備方法制作的酵母自溶物的自溶率達61.5%。
【文檔編號】C12N1/06GK103773686SQ201210404632
【公開日】2014年5月7日 申請日期:2012年10月23日 優先權日:2012年10月23日
【發明者】滕達, 王建華, 王秀敏, 管慶豐 申請人:中國農業科學院飼料研究所