含紅景天苷植物的栽培方法及植物應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種栽培含紅景天苷植物的方法及植物應(yīng)用，在植物生長(zhǎng)的水體或培養(yǎng)液中加入外源性的酪醇，使其初始濃度為0.1～100mmol/L，每間隔一定時(shí)間，補(bǔ)充加入酪醇一次，也可不補(bǔ)充。植物吸收酪醇后，在細(xì)胞中相關(guān)酶的作用下轉(zhuǎn)化為紅景天苷，從而使植物獲得紅景天苷所具有的生理藥理活性，可直接使用，也可制成保健食品、藥物、食品添加劑等，或者作為紅景天苷提取的原料。
【專利說(shuō)明】含紅景天苷植物的栽培方法及植物應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及生物轉(zhuǎn)化【技術(shù)領(lǐng)域】，特別地，涉及一種栽培含紅景天苷植物的栽培方法及植物應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]紅景天苷(salidroside)是景天科(Crassulaceae)紅景天屬(RhodiolaL.)植物最重要的藥效成分，具有抗疲勞、增強(qiáng)免疫力、保護(hù)心血管、抗缺氧、抗衰老、保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞、保護(hù)肝臟、抗氧化、抗腫瘤、抗輻射等多種特異功效。在軍事、航天、運(yùn)動(dòng)及保健醫(yī)學(xué)等方面具有極其重要的應(yīng)用價(jià)值。近年來(lái)，以其作為主要原料生產(chǎn)的藥劑、飲料、食品以及化妝品等產(chǎn)品的種類越來(lái)越多，人們對(duì)紅景天苷的需求在不斷增加。
[0003]紅景天屬植物是提取紅景天苷的主要來(lái)源，但野生資源匱乏，且紅景天苷含量很低，如最常用的高山紅景天和大花紅景天，其植株中紅景天苷的含量只有0.5%~0.8%。盡管目前在人工栽培方面取得了進(jìn)展，但由于紅景天種子成熟度差、發(fā)芽率低，且需生長(zhǎng)在環(huán)境適宜的高海拔山區(qū)，人工栽培的紅景天成本較高而有效成分含量低，尚難以保證紅景天原料的大量供應(yīng)。
[0004]自然界中紅景天苷的生物合成是以酪醇(即對(duì)羥基苯乙醇)為底物，由植物體內(nèi)的葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶催化，轉(zhuǎn)移一個(gè)葡萄糖基到酪醇上，形成紅景天苷。但自然界中多數(shù)植物均不能合成酪醇，因而不含有紅景天苷。 [0005]紅景天苷的合成方法主要有植物組織培養(yǎng)、植物細(xì)胞培養(yǎng)、生物酶法和化學(xué)方法合成。其中組織培養(yǎng)和細(xì)胞培養(yǎng)采用的均是紅景天屬植物，通過(guò)優(yōu)化培養(yǎng)基條件和添加苷元酪醇等方法，來(lái)提高產(chǎn)量和收率。如韓愛(ài)明等人對(duì)高山紅景天細(xì)胞懸浮培養(yǎng)過(guò)程中的培養(yǎng)基進(jìn)行了優(yōu)化，干細(xì)胞中紅景天苷含量為5.66mg/g,另外在紅景天懸浮培養(yǎng)細(xì)胞的指數(shù)生長(zhǎng)期每隔24h重復(fù)3次添加3mmol/L酪醇，紅景天苷的產(chǎn)量可達(dá)516 μ mol/L。采用組織培養(yǎng)和細(xì)胞培養(yǎng)來(lái)生產(chǎn)紅景天苷，由于周期長(zhǎng)，成本高，尚未在生產(chǎn)中得到大規(guī)模應(yīng)用。
[0006]紅景天苷是一種由葡萄糖與酪醇以苷鍵結(jié)合而成的糖苷，酪醇為其苷元，可采用酶法進(jìn)行合成。有文獻(xiàn)報(bào)道提及，可利用植物種子中提取的β_糖苷酶合成紅景天苷，例如從蘋(píng)果種子中得到的β -糖苷酶，能使4-取代苯甲醇和紅景天苷元與葡萄糖在水-二噁烷單相介質(zhì)中發(fā)生糖基化作用，糖苷產(chǎn)率約13.1~23.1%，其中紅景天苷約15.8%。但β -糖苷酶在生物體內(nèi)的主要作用是催化糖苷鍵的水解，合成紅景天苷利用的是其逆反應(yīng)，該反應(yīng)受熱力學(xué)控制和反應(yīng)平衡限制，收率較低。
[0007]專利201110005088.2利用腸膜明串株菌葡萄糖糖基轉(zhuǎn)移酶在水相中合成紅景天苷或類似物，但首先需通過(guò)發(fā)酵方式生產(chǎn)并分離純化所需的葡萄糖糖基轉(zhuǎn)移酶，酶的成本較聞。
[0008]紅景天苷還可用化學(xué)法合成，但由于化學(xué)合成過(guò)程需要經(jīng)過(guò)多步的保護(hù)和去保護(hù)措施，過(guò)程復(fù)雜且成本高，副產(chǎn)物較多且難于分離，對(duì)環(huán)境危害較大，因此未見(jiàn)大規(guī)模生產(chǎn)。
[0009]綜上所述，目前紅景天苷的合成方法由于生產(chǎn)成本高、產(chǎn)量低、合成步驟復(fù)雜等原因，均未見(jiàn)在工業(yè)上推廣應(yīng)用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0010]本發(fā)明目的在于提供一種含紅景天苷植物的栽培方法及植物應(yīng)用，以解決現(xiàn)有紅景天苷產(chǎn)量低、化學(xué)合成方法復(fù)雜所帶來(lái)的資源短缺問(wèn)題。
[0011]為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了一種栽培含紅景天苷植物的方法:在植物生長(zhǎng)的水體或培養(yǎng)液中，加入酪醇使其初始濃度為0.1~lOOmmol/L，植物在生長(zhǎng)過(guò)程中便能轉(zhuǎn)化酪醇合成紅景天苷，當(dāng)酪醇被植物消耗后，可多次補(bǔ)充添加酪醇，從而培養(yǎng)出富含紅景天苷的植物。
[0012]優(yōu)選的，當(dāng)酪醇濃度降為初始濃度的0.1%~99.0%時(shí)，或者當(dāng)培養(yǎng)液的電導(dǎo)率降為初始值的10%~99%時(shí)，補(bǔ)充加入酪醇，使其濃度為0.1~100mmol/L。
[0013]優(yōu)選的，每間隔I~100天，補(bǔ)充加入酪醇，使其濃度為0.1~100mmol/L。
[0014]優(yōu)選的，在植物生長(zhǎng)的前期，每間隔7~100天，加入酪醇I次，在植物生長(zhǎng)的后期，每間隔I~15天，加入酪醇I次，使其濃度為0.1~lOOmmol/L。
[0015]優(yōu)選的，在植物收獲的前I~15天，停止加入酪醇。
[0016]優(yōu)選的,加入酪醇,使其初始濃度為0.1~30mmol/L。
[0017]本發(fā)明還公開(kāi)了上述方法栽培出的植物的直接食用、作為紅景天苷提取原料、用于制備保健食品或食品添加劑、制備具有紅景天苷藥效功能藥物的應(yīng)用。
[0018]本發(fā)明利用植物本身所含的酶，主要是葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶，轉(zhuǎn)化苷元一酪醇來(lái)合成紅景天苷。
[0019]UDPG為尿苷二磷酸葡萄糖，系葡萄糖在體內(nèi)的高能活性形式，是合成葡萄糖苷的前體。
[0020]
[0021] 申請(qǐng)人:經(jīng)多次試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，植物體內(nèi)的葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶可對(duì)多種酚類物質(zhì)進(jìn)行催化，得到相應(yīng)的糖苷。并且植物細(xì)胞中的葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶的種屬特異性也不強(qiáng)，如白花曼陀羅的懸浮培養(yǎng)細(xì)胞、紫花曼陀羅和人參的毛狀根等均能轉(zhuǎn)化對(duì)羥基苯甲醇生成相應(yīng)糖苷。
[0022]基于葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶在植物中普遍存在、且種屬特異性不強(qiáng)， 申請(qǐng)人:經(jīng)大量實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，通過(guò)供給外源性的酪醇，多種植物在生長(zhǎng)過(guò)程中均可轉(zhuǎn)化酪醇來(lái)合成紅景天苷，并在體內(nèi)積累。
[0023]在植物生長(zhǎng)的水體或培養(yǎng)液中加入外源性的酪醇后，植物可將其吸收進(jìn)入體內(nèi)，在細(xì)胞中相關(guān)酶的作用下轉(zhuǎn)化合成為紅景天苷，并在植物體內(nèi)的不同器官，如葉、根、莖、花、果實(shí)等部位進(jìn)行積累。
[0024]本發(fā)明具有以下有益效果:
[0025] 采用本發(fā)明的方法可以使得自然條件下難以產(chǎn)生紅景天苷的植物，能夠在體內(nèi)轉(zhuǎn)化和積累紅景天苷，從而獲得紅景天苷所具有的生理藥理活性，如抗疲勞、增強(qiáng)免疫力、保護(hù)心血管、抗缺氧、抗衰老、保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞、保護(hù)肝臟、抗氧化、抗腫瘤、抗輻射等功效，可直接使用，也可制成保健食品、藥物、食品或化妝品的添加劑等，含量高時(shí)亦可作為紅景天苷提取的原料。
[0026]自然條件下能夠產(chǎn)生紅景天苷的植物，如紅景天屬植物，采用此方法后，可使其紅景天苷含量顯著增加，增加其功效。
[0027]植物對(duì)酪醇的轉(zhuǎn)化效率受到多種因素的影響，其中植物本身的生長(zhǎng)量影響最大，同時(shí)還受到培養(yǎng)液的濃度和組成、日照長(zhǎng)短、環(huán)境溫度、有害物質(zhì)、病蟲(chóng)害等多種因素的影響。本申請(qǐng)采用通過(guò)對(duì)酪醇濃度或營(yíng)養(yǎng)液的電導(dǎo)率值進(jìn)行監(jiān)測(cè)，從而能夠根據(jù)植物生長(zhǎng)量和外界環(huán)境的變化，及時(shí)調(diào)整酪醇濃度，提供足夠的酪醇滿足紅景天苷轉(zhuǎn)化的原料需求，使得紅景天苷的轉(zhuǎn)化效率達(dá)到最大，以獲得較高的紅景天苷含量。
[0028]同時(shí)也可根據(jù)需要，靈活調(diào)整酪醇加入的濃度及次數(shù)，培養(yǎng)出不同紅景天含量的植物，以滿足不同的用途。
[0029]除了上面所描述的目的、特征和優(yōu)點(diǎn)之外，本發(fā)明還有其它的目的、特征和優(yōu)點(diǎn)。下面將對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的說(shuō)明。
【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0030]構(gòu)成本申請(qǐng)的一部分的附圖用來(lái)提供對(duì)本發(fā)明的進(jìn)一步理解，本發(fā)明的示意性實(shí)施例及其說(shuō)明用于解釋本發(fā)明，并不構(gòu)成對(duì)本發(fā)明的不當(dāng)限定。在附圖中:
[0031]圖1是紅景天苷對(duì)照品的高效液相色譜圖；
[0032]圖2是酪醇對(duì)照品的高效液相色譜圖；
[0033]圖3是含酪醇的營(yíng)養(yǎng)液所培養(yǎng)的生菜高效液相色譜圖； [0034]圖4是不含酪醇的營(yíng)養(yǎng)液所培養(yǎng)的生菜高效液相色譜圖；
[0035]圖5是含酪醇的營(yíng)養(yǎng)液所培養(yǎng)的油麥菜高效液相色譜圖；
[0036]圖6是不含酪醇的營(yíng)養(yǎng)液所培養(yǎng)的油麥菜高效液相色譜圖。
【具體實(shí)施方式】
[0037]以下對(duì)本發(fā)明的實(shí)施例進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明，但是本發(fā)明可以根據(jù)權(quán)利要求限定和覆蓋的多種不同方式實(shí)施。
[0038]本發(fā)明公開(kāi)了一種栽培含紅景天苷植物的方法，包括步驟:
[0039]在植物生長(zhǎng)的水體或培養(yǎng)液中加入酪醇，使其初始濃度為0.1~lOOmmol/L，植物將外源性酪醇吸收進(jìn)入體內(nèi)，轉(zhuǎn)化為紅景天苷。其中水體指的是植物生長(zhǎng)環(huán)境中的水，如水生植物生長(zhǎng)所需的水，又例如雙層栽培(即上層為土壤或基質(zhì)，下層為水)的水，又如采用滴灌栽培技術(shù)所用的水等，培養(yǎng)液主要指的是無(wú)土栽培的營(yíng)養(yǎng)液、或者肥料配制成的水溶液
坐寸ο
[0040]另外，當(dāng)酪醇被消耗一定量后，可補(bǔ)充加入酪醇，以提供足夠的酪醇滿足紅景天苷轉(zhuǎn)化的原料需求，酪醇加入的間隔時(shí)間有三種方式:
[0041]①通過(guò)檢測(cè)培養(yǎng)液或水體中酪醇的濃度，當(dāng)降至一定程度(如初始濃度80%時(shí))，補(bǔ)充加入酪醇。
[0042]②通過(guò)監(jiān)測(cè)培養(yǎng)液的電導(dǎo)率值，當(dāng)含有酪醇的培養(yǎng)液不斷被植物所消耗，電導(dǎo)率值降至一定值時(shí)(如初始值一半時(shí))，更換或補(bǔ)充加入含酪醇的營(yíng)養(yǎng)液。
[0043]③根據(jù)植物的生長(zhǎng)量，在植物生長(zhǎng)的前期(即長(zhǎng)出真葉開(kāi)始至出現(xiàn)花蕾之前)，可每間隔7~100天，補(bǔ)充加入酪醇I次，隨著植物生長(zhǎng)量的增加，酪醇轉(zhuǎn)化效率的提高，可逐漸縮短間隔時(shí)間或增大酪醇濃度，在植物生長(zhǎng)的后期(即出現(xiàn)花蕾至植物果實(shí)成熟的時(shí)期)，可間隔I~15天，補(bǔ)充加入酪醇I次。
[0044]在收獲的前I~15天，可停止加入酪醇，以便讓植物將剩余的酪醇全部轉(zhuǎn)化。
[0045]具體實(shí)施例如下:
[0046]實(shí)施例一、取旋花科植物蕹菜，在其生長(zhǎng)的水體中加入酪醇，使其初始濃度為10mmol/L,每隔3~5天檢測(cè)一次酪醇的濃度，當(dāng)降至8mmo/L (即初始濃度的80%時(shí)),補(bǔ)充加入酪醇使其濃度達(dá)lOmmol/L，培養(yǎng)至收獲前5天時(shí)，停止加入酪醇。收獲后，蕹菜體內(nèi)紅景天苷含量(鮮重)可達(dá)0.20%以上。
[0047]紅景天苷檢測(cè)方法:采用高效液相色譜方法，取0.5g待測(cè)樣品，加入50%甲醇25ml，稱定重量，加熱回流30分鐘，放冷，補(bǔ)足減失的重量，濾過(guò)，作為供試品溶液。另取紅景天苷對(duì)照品，加50%甲醇制成每1ml中含0.05mg的溶液,作為對(duì)照品溶液。用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇水(13:87)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為275nm。理論板數(shù)按紅景天苷峰計(jì)算應(yīng)不低于30 00。分別精密吸取供試品溶液及對(duì)照品溶液各10 μ 1，注入液相色譜儀，測(cè)定，計(jì)算，即得。以下測(cè)量方法類同，不再贅述。
[0048]實(shí)施例二、取菊科植物油麥菜種子，清水泡種，培養(yǎng)盤(pán)沙土中播種，保濕，待種子發(fā)芽子葉長(zhǎng)出2cm以后，用1/10濃度營(yíng)養(yǎng)液噴灑小苗，至長(zhǎng)出2對(duì)真葉后，移入1/2濃度的營(yíng)養(yǎng)液中培養(yǎng)，每天監(jiān)測(cè)培養(yǎng)液的EC值(電導(dǎo)率)，當(dāng)EC值降至初始EC值的一半時(shí)，換全濃度營(yíng)養(yǎng)液培養(yǎng)(營(yíng)養(yǎng)液中加入8mmol/L酪醇)，以后同樣當(dāng)EC值降至一半時(shí)，便更換含酪醇的全濃度營(yíng)養(yǎng)液，至苗高達(dá)20cm以上時(shí)收獲，測(cè)定紅景天苷含量，其含量(鮮重)最高可達(dá)
0.3%以上。
[0049]營(yíng)養(yǎng)液采用霍格蘭配方，具體如下:四水硝酸鈣945mg/L、硝酸鉀607mg/L、磷酸二氫銨115mg/L、七水硫酸鎂493mg/L,硼酸2.86mg/L、硼砂4.5mg/L、四水硫酸猛2.13mg/L、七水硫酸鋅0.22mg/L、五水硫酸銅0.08mg/L、四水鑰酸銨0.02mg/L、七水硫酸亞鐵27.8mg/L,EDTA-2Na37.3mg/L。
[0050]實(shí)施例三、取菊科植物生菜幼苗，按照常規(guī)無(wú)土栽培方式進(jìn)行培養(yǎng)，當(dāng)長(zhǎng)出3~5片真葉后，向培養(yǎng)液中加入酪醇使其濃度為5mmol/L，每隔3~15天(初期間隔為15天，隨后逐漸縮短間隔時(shí)間至3天)向培養(yǎng)液中加入酪醇使其濃度為5mmol/L，收獲前3天停止加入酪醇，以便讓酪醇轉(zhuǎn)化完全，收獲后的生菜，按上述方法測(cè)定紅景天苷含量，其含量(鮮重)最聞可達(dá)0.15%以上。
[0051]采用常用綠葉蔬菜營(yíng)養(yǎng)液配方，具體如下:四水硝酸鈣1260mg/L、硫酸鉀250mg/L、磷酸二氫銨350mg/L、七水硫酸鎂537mg/L，硫酸銨237mg/L、硼酸2.86mg/L、硼砂4.5mg/L、四水硫酸錳2.13mg/L、七水硫酸鋅0.22mg/L、五水硫酸銅0.08mg/L、四水鑰酸銨0.02mg/L、七水硫酸亞鐵 27.8mg/L, EDTA2Na37.3mg/L。
[0052]實(shí)施例四、取菊科植物生菜幼苗，按照常規(guī)無(wú)土栽培方式進(jìn)行培養(yǎng)，當(dāng)長(zhǎng)出3~5片真葉后，向培養(yǎng)液中加入酪醇，使其初始濃度為0.lmmol/L ;以后每隔5天向培養(yǎng)液中加入酪醇，使其濃度為前一次的兩倍(即分別為0.2,0.4,0.8、1.6,3.2,6.4、12.8mmol/L,達(dá)12.8mmol/L后,濃度不再增加，以后每次均為12.8mmol/L)。收獲前5天停止加入酪醇，以便讓酪醇轉(zhuǎn)化完全，收獲后的生菜，按上述方法測(cè)定紅景天苷含量，其含量(鮮重)最高可達(dá)
0.18%以上。
[0053]實(shí)施例五、藜科植物菠菜采用常規(guī)土壤方式栽培，收獲前15天挖出植物，洗凈泥沙，保護(hù)好根系，移入至含lOmmol/L酪醇的綠葉蔬菜營(yíng)養(yǎng)液中，培養(yǎng)5天后，移入至含20mmol/L酪醇的綠葉蔬菜營(yíng)養(yǎng)液中再培養(yǎng)5天后，移入至含30mmol/L酪醇的水溶液中培養(yǎng)至收獲，測(cè)定紅景天苷含量，其含量(鮮重)達(dá)0.05%。
[0054]實(shí)施例六:取十字花科植物萊菔(即蘿卜)，按常規(guī)土壤方式栽培，收獲前10天挖出植物，洗凈泥沙，保護(hù)好根系，移入至含lOOmmol/L酪醇的水溶液中培養(yǎng)10天，可在其葉中檢出紅景天苷。
[0055]實(shí)施例七:取十字花科植物萊菔(即蘿卜)，按常規(guī)土壤方式栽培，收獲前20天挖出植物，洗凈泥沙，保護(hù)好根系，移入至含15mmol/L酪醇的綠葉蔬菜營(yíng)養(yǎng)液中，培養(yǎng)5天后，移入至含30mmol/L酪醇的綠葉蔬菜營(yíng)養(yǎng)液中再培養(yǎng)5天后，移入至含100mmol/L酪醇的水溶液中培養(yǎng)10天，可在其葉和根莖中可檢出紅景天苷。
[0056]實(shí)施例八:取十字花科植物萊菔(即蘿卜)，按常規(guī)土壤方式栽培，收獲前10天挖出植物，洗凈泥沙，保護(hù)好根系，移入至含50mmol/L酪醇的水溶液中，培養(yǎng)5天后，移入至含80mmol/L酪醇的水溶液中培養(yǎng)5天，可在其葉中可檢出紅景天苷。
[0057]實(shí)施例九、取爺科植物番爺，按常規(guī)無(wú)土栽培方式培養(yǎng)，開(kāi)花后在培養(yǎng)液中每隔15天加入酪醇一次,第一次使其濃度為5mmol/L,第二次為10mmol/L,第三次為15mmol/L,第四次以后均為20mmol/L,果實(shí)成熟后可采摘,番爺果實(shí)中可檢出紅景天苷。
[0058]營(yíng)養(yǎng)液采用日本山崎配方，具體如下:四水硝酸鈣354mg/L、硝酸鉀404mg/L、磷酸二氫銨77mg/L、七水硫酸鎂246mg/L、螯合鐵2040mg/L、硼酸2.86mg/L、四水硫酸錳2.13mg/L、七水硫酸鋅0.22mg/L、五水硫酸銅0.08mg/L、四水鑰酸銨0.02mg/L。
[0059]實(shí)施例十、取爺科植物番爺，按常規(guī)無(wú)土栽培方式培養(yǎng)，當(dāng)長(zhǎng)出4~6片真葉后，在培養(yǎng)液中加入酪醇，使其初始濃度為lOmmol/L，按常規(guī)無(wú)土栽培方式補(bǔ)充或更換培養(yǎng)液，隔100天后加入酪醇一次，使其濃度為lOmmol/L，以后每隔I天加入酪醇一次，使其濃度為lOmmol/L，果實(shí)成熟后即可采摘。可在番茄的根、莖、葉和果實(shí)中可檢出紅景天苷。
[0060]實(shí)施例^ 、取爺科植物番爺，按常規(guī)無(wú)土栽培方式培養(yǎng)，當(dāng)長(zhǎng)出4~6片真葉后，在培養(yǎng)液中加入酪醇，使其初始濃度為5mmol/L ;按常規(guī)無(wú)土栽培方式補(bǔ)充或更換培養(yǎng)液，隔30天后加入酪醇一次；使其濃度為lOmmol/L，以后每隔10天加入酪醇一次；使其濃度為10mmol/L,開(kāi)始掛果后，每隔5天加入酪醇一次，使其濃度為lOmmol/L，果實(shí)成熟后即可采摘，可在番茄的根、莖、葉和果實(shí)中可檢出紅景天苷。
[0061]實(shí)施例十二、取旋花科植物蕹菜，在其生長(zhǎng)的水體中加入酪醇，使其初始濃度為10mmol/L,每天檢測(cè)一次酪醇的濃度，當(dāng)降至9.9mmol/L (即初始濃度的99%時(shí)),補(bǔ)充加入酪醇使其濃度達(dá)20mmol/L，培養(yǎng)至收獲前15天時(shí)，停止加入酪醇。收獲后，蕹菜體內(nèi)紅景天苷含量(鮮重)可達(dá)0.25%以上。
[0062]實(shí)施例十三、取旋花科植物蕹菜，在其生長(zhǎng)的水體中加入酪醇，使其初始濃度為10mmol/L,每隔3天檢測(cè)一次酪醇的濃度，當(dāng)降至0.lmmol/L (即初始濃度的1%時(shí)),補(bǔ)充加入酪醇使其濃度為5mmol/L，培養(yǎng)至收獲前3天時(shí)，停止加入酪醇。收獲后，蕹菜體內(nèi)紅景天苷含量(鮮重)可達(dá)0.20%以上。
[0063] 實(shí)施例十四、取旋花科植物蕹菜，在其生長(zhǎng)的水體中加入酪醇，使其初始濃度為10mmol/L,每隔5天檢測(cè)一次酪醇的濃度，當(dāng)降至0.01mmol/L (即初始濃度的0.1%時(shí)),補(bǔ)充加入酪醇使其濃度為lmmol/L，培養(yǎng)至收獲前I天時(shí)，停止加入酪醇。收獲后，蕹菜體內(nèi)紅景天苷含量(鮮重)可達(dá)0.10%以上。
[0064]實(shí)施例十五、取旋花科植物蕹菜，在其生長(zhǎng)的水體中加入酪醇，使其初始濃度為10mmol/L,每隔2天檢測(cè)一次酪醇的濃度，當(dāng)降至8mmol/L (即初始濃度的80%時(shí)),補(bǔ)充加入酪醇使其濃度為lOOmmol/L，培養(yǎng)至收獲前2天時(shí)，停止加入酪醇。收獲后，蕹菜體內(nèi)紅景天苷含量(鮮重)可達(dá)0.15%以上。
[0065]實(shí)施例十六、取旋花科植物蕹菜，在其生長(zhǎng)的水體中加入酪醇，使其初始濃度為10mmol/L,每隔5天檢測(cè)一次酪醇的濃度，當(dāng)降至6mmol/L (即初始濃度的60%時(shí)),補(bǔ)充加入酪醇使其濃度為29mmol/L，培養(yǎng)至收獲前I天時(shí)，停止加入酪醇。收獲后，蕹菜體內(nèi)檢出
紅景天苷。
[0066]實(shí)施例十七、取旋花科植物蕹菜，在其生長(zhǎng)的水體中加入酪醇，使其初始濃度為10mmol/L,每隔5天檢測(cè)一次酪醇的濃度，當(dāng)降至4mmol/L (即初始濃度的40%時(shí)),補(bǔ)充加入酪醇使其濃度為35mmol/L，培養(yǎng)至收獲前I天時(shí)，停止加入酪醇。收獲后，蕹菜體內(nèi)檢出紅景天苷。
[0067]實(shí)施例十八、取旋花科植物蕹菜，在其生長(zhǎng)的水體中加入酪醇，使其初始濃度為10mmol/L,每隔5天檢測(cè)一次酪醇的濃度，當(dāng)降至2mmol/L (即初始濃度的20%時(shí)),補(bǔ)充加入酪醇使其濃度為57mmol/L，培養(yǎng)至收獲前I天時(shí)，停止加入酪醇。收獲后，蕹菜體內(nèi)檢出紅景天苷。
[0068]實(shí)施例十九、取旋花科植物蕹菜，在其生長(zhǎng)的水體中加入酪醇，使其初始濃度為18mmol/L,每隔5天檢測(cè)一次酪醇的濃度，當(dāng)降至2.7mmol/L (即初始濃度的15%時(shí)),補(bǔ)充加入酪醇使其濃度為86mmo l/L，培養(yǎng)至收獲前I天時(shí)，停止加入酪醇。收獲后，蕹菜體內(nèi)檢出紅景天苷。
[0069]實(shí)施例二十、取菊科植物生菜幼苗，按照常規(guī)無(wú)土栽培方式進(jìn)行培養(yǎng)，當(dāng)長(zhǎng)出3~
5片真葉后，向培養(yǎng)液中加入酪醇，使其初始濃度為5mmol/L，同時(shí)每天監(jiān)測(cè)電導(dǎo)率，當(dāng)培養(yǎng)液的電導(dǎo)率值降至初始值的99%時(shí)，補(bǔ)充加入含lOmmol/L酪醇的2倍濃度營(yíng)養(yǎng)液，調(diào)整電導(dǎo)率恢復(fù)初始值。收獲前5天停止加入酪醇，收獲后，生菜葉中紅景天苷含量(鮮重)可達(dá)0.25%以上。
[0070]實(shí)施例二十一、取菊科植物生菜幼苗，按照常規(guī)無(wú)土栽培方式進(jìn)行培養(yǎng)，當(dāng)長(zhǎng)出3~5片真葉后，向培養(yǎng)液中加入酪醇，使其初始濃度為8mmol/L，同時(shí)每天監(jiān)測(cè)電導(dǎo)率，當(dāng)培養(yǎng)液的電導(dǎo)率值降至初始值的10%時(shí)，補(bǔ)充加入含lOOmmol/L酪醇的10倍濃度營(yíng)養(yǎng)液，調(diào)整電導(dǎo)率恢復(fù)初始值。收獲前5天停止加入酪醇，收獲后，生菜葉中紅景天苷含量(鮮重)可達(dá)0.15%以上。
[0071]實(shí)施例二十二、取菊科植物生菜幼苗，按照常規(guī)無(wú)土栽培方式進(jìn)行培養(yǎng)，當(dāng)長(zhǎng)出3~5片真葉后，向培養(yǎng)液中加入酪醇，使其初始濃度為5mmol/L，同時(shí)每天監(jiān)測(cè)電導(dǎo)率，當(dāng)培養(yǎng)液的電導(dǎo)率值降至初始值的50%時(shí)，更換為含5mmol/L酪醇的全濃度營(yíng)養(yǎng)液。收獲前15天更換營(yíng)養(yǎng)液，收獲后，生菜葉中紅景天苷含量(鮮重)可達(dá)0.22%以上。
[0072]實(shí)施例二十三、取菊科植物生菜幼苗，按照常規(guī)無(wú)土栽培方式進(jìn)行培養(yǎng)，當(dāng)長(zhǎng)出3~5片真葉后，向培養(yǎng)液中加入酪醇，使其初始濃度為5mmo/L，監(jiān)測(cè)電導(dǎo)率，當(dāng)培養(yǎng)液的電導(dǎo)率值降至初始值的70%時(shí)，補(bǔ)充加入含50mmol/L酪醇的5倍濃度營(yíng)養(yǎng)液，調(diào)整電導(dǎo)率恢復(fù)初始值。收獲前10天停止加入酪醇，收獲后，生菜葉中紅景天苷含量(鮮重)可達(dá)0.20%以上。
[0073]實(shí)施例二十四、取旋花科植物蕹菜，在其生長(zhǎng)的水體中加入酪醇，使其初始濃度為20mmol/L,培養(yǎng)數(shù)天至收獲,蕹菜體內(nèi)可檢出紅景天苷。
[0074]實(shí)施例二十五、取旋花科植物蕹菜，在其生長(zhǎng)的水體中加入酪醇，使其初始濃度為40mmol/L,培養(yǎng)數(shù)天至收獲,蕹菜體內(nèi)可檢出紅景天苷。
[0075]本發(fā)明還公開(kāi)了上述栽培出來(lái)的植物的應(yīng)用，因植物中含有紅景天苷，可直接作為保健植物使用，也可作為紅景天苷的提取原料，制備保健食品、食品添加劑或者制備用于具紅景天苷藥效功能的藥物等。
[0076]將上述實(shí)施例一至五所獲得的植物，可作為保健蔬菜直接食用，具有抗疲勞、增強(qiáng)免疫力、保護(hù)心血管、抗缺氧、抗衰老、保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞、保護(hù)肝臟、抗氧化、抗腫瘤、抗輻射等紅景天苷所具有的保健功能。
[0077]將上述實(shí)施例二和實(shí)施例二十所獲得的植物，可作為紅景天苷提取原料時(shí)，將采收的新鮮植物，加水5倍量，煎煮I小時(shí)，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.20，放冷，用等體積正丁醇萃取2次，合并正丁醇萃取液，減壓濃縮至無(wú)醇味，加2倍量水稀釋后，以IBV (床體積)/h通過(guò)AB-8大孔吸附樹(shù)脂柱，先用2倍床體積的水洗滌，棄去，再2倍床體積的10%乙醇洗滌，棄去，再用4倍床體積20%乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮至干，得粗提取物，加甲醇適量溶解后，加3倍粗 提取物重量的硅膠，混勻，加入20倍粗提取物重量的硅膠柱上部，用10倍床體積甲醇一氯仿(2:8)溶液，進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，減壓蒸干，用10倍體積的無(wú)水乙醇在10°C以下結(jié)晶，晶漿離心分離，無(wú)水乙醇洗滌后，真空干燥，得純度大于99%的紅景天苷。
[0078]將上述實(shí)施例十一所獲得的植物，作為制備保健食品的原料時(shí)，將3kg成熟的番茄果實(shí)用開(kāi)水燙過(guò)后，去皮、破碎、榨汁、得到番茄汁、然后在Ikg番茄汁中添加氯化鈉20g和0.5%山梨酸，溶解混勻后滅菌，制成保健食品，具有緩解運(yùn)動(dòng)疲勞、增強(qiáng)免疫力、提高缺氧耐受力、抗氧化和對(duì)肝損傷的輔助保護(hù)功能。
[0079]將上述實(shí)施例二和實(shí)施例二十所獲得的植物作為食品添加劑時(shí)，將采收的新鮮植物加水6倍量，煎煮I小時(shí)，煎液濾過(guò)，濾液濃縮成稠膏后，于60°C真空干燥得干膏，粉碎后即可作為食品添加劑使用，例如加入飲料中，可使飲料具有紅景天苷解除疲勞的保健功能。
[0080]將上述實(shí)施例二所獲得的植物作為制備具紅景天苷藥效功能的藥物時(shí)，可將收獲的油麥菜也可加水煎煮2次，每次加水6倍量，煎煮I小時(shí)，煎液合并濾過(guò)，濾液濃縮成稠膏后，于60°C真空干燥得干膏，粉碎后，取干膏粉350g，加入藥用淀粉50g，按常規(guī)制藥工藝制成膠囊或片劑，用于治療和預(yù)防高原反應(yīng)，或者用于治療冠心病，腦梗塞，老年性癡呆癥等疾病。
[0081]以上所述僅為本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例而已，并不用于限制本發(fā)明，對(duì)于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，本發(fā)明可以有各種更改和變化。凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.一種栽培含紅景天苷植物的方法，其特征在于，在植物生長(zhǎng)的水體或培養(yǎng)液中加入酪醇，使其初始濃度為0.1~lOOmmol/L。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種栽培含紅景天苷植物的方法，其特征在于，當(dāng)酪醇濃度降為初始濃度的0.1%~99.0%時(shí)，或者當(dāng)培養(yǎng)液的電導(dǎo)率降為初始值的10%~99%時(shí)，補(bǔ)充加入酪醇，使其濃度為0.1~lOOmmol/L。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種栽培含紅景天苷植物的方法，其特征在于，每間隔I~100天，補(bǔ)充加入酪醇，使其濃度為0.1~lOOmmol/L。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種栽培含紅景天苷植物的方法，其特征在于，在植物生長(zhǎng)的前期，每間隔7~100天，加入酪醇I次，在植物生長(zhǎng)的后期，每間隔I~15天，加入酪醇I次，使其濃度為0.1~IOOmmoI/Lο
5.根據(jù)權(quán)利要求1至4任一項(xiàng)所述的一種栽培含紅景天苷植物的方法，其特征在于，在植物收獲的前I~15天，停止加入酪醇。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種栽培含紅景天苷植物的方法，其特征在于，加入酪醇，使其初始濃度為0.1~30mmol/L。
7.—種如權(quán)利要求1至6任一項(xiàng)所述的一種栽培含紅景天苷植物的方法栽培出的植物直接食用的應(yīng)用。
8.—種如權(quán)利要求1至6任一項(xiàng)所述的一種栽培含紅景天苷植物的方法栽培出的植物作為紅景天苷提取原料 的應(yīng)用。
9.一種如權(quán)利要求1至6任一項(xiàng)所述的一種栽培含紅景天苷植物的方法栽培出的植物及其提取物用于制備保健食品或食品添加劑的應(yīng)用。
10.一種如權(quán)利要求1至6任一項(xiàng)所述的一種栽培含紅景天苷植物的方法栽培出的植物及其提取物用于制備具有紅景天苷藥效功能藥物的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】A23L1/29GK103999747SQ201310061704
【公開(kāi)日】2014年8月27日 申請(qǐng)日期:2013年2月27日 優(yōu)先權(quán)日:2013年2月27日
【發(fā)明者】譚朝陽(yáng), 張倩, 彭菲, 于靜, 崔培梧, 魯耀邦, 林艷 申請(qǐng)人:湖南中醫(yī)藥大學(xué)