一種乳酸菌和酵母菌共生發(fā)酵的微生物制劑的生產(chǎn)方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種乳酸菌和酵母菌共生發(fā)酵的微生物制劑的生產(chǎn)方法，其特征是將分離自內(nèi)蒙古民族乳制品酸馬奶酒中的乳酸菌和酵母菌進行共生組合篩選，選出一組具有互相促進作用的屎腸球菌HE5和釀酒酵母J-4。在優(yōu)化的脫脂乳培養(yǎng)基上培養(yǎng)篩選出的屎腸球菌HE5和釀酒酵母J-4時，乳酸菌活菌數(shù)達到2.88×109CFU/mL；酵母菌的活菌數(shù)達到3.3×108CFU/mL，雙菌培養(yǎng)促進乳酸菌生長作用較好。將培養(yǎng)收獲的雙菌冷凍干燥得到一種乳酸菌和酵母菌共生發(fā)酵的微生物制劑，所述微生物制劑共生作用好、產(chǎn)酸能力強。
【專利說明】—種乳酸菌和酵母菌共生發(fā)酵的微生物制劑的生產(chǎn)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于食品生物【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及的是一種全新的乳酸菌和酵母菌共生發(fā)酵的微生物制劑的生產(chǎn)方法，以及通過所述方法所獲得的微生物制劑。
【背景技術(shù)】
[0002]微生物制劑在食品加工、營養(yǎng)保健等領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用，如酸奶發(fā)酵劑；面包、饅頭發(fā)酵劑；家畜飼料發(fā)酵劑等。但作為乳酸菌和酵母菌共生發(fā)酵的微生物制劑還很少，特別是來自內(nèi)蒙古民族乳制品酸馬奶酒中的微生物菌種就更少見報道。酸馬奶酒是一種以馬奶為原料，乳酸菌和酵母菌共同自然發(fā)酵而形成的一種飲品，其以具有營養(yǎng)、保健、醫(yī)療功能和風(fēng)味獨特而著稱，在蒙醫(yī)藥領(lǐng)域一直是治療結(jié)核病、心血管疾病、高血壓、免疫力低下等疾病的輔助藥品。至今在東歐、蒙古國以及我國的內(nèi)蒙古、新疆地區(qū)興盛不衰。其醫(yī)療保健作用一直吸引著國內(nèi)外學(xué)者的研究興趣，尤其是日本、美國、新加坡以及國內(nèi)的學(xué)者對發(fā)酵酸馬奶的微生物種群投入了大量的研究，取得了可喜的成果，但至今還沒有將酸馬奶的微生物種群應(yīng)用到產(chǎn)品開發(fā)方面。因此，本發(fā)明是具有廣泛的應(yīng)用前景。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的是提供一種乳酸菌和酵母菌共生發(fā)酵的微生物制劑的生產(chǎn)方法，以及通過所述方法所獲得的微生物制劑。本發(fā)明的乳酸菌和酵母菌共生發(fā)酵的微生物制劑的生產(chǎn)方法，是按下述步驟完成的:
[0004](1)乳酸菌的活化和酵母菌的活化:將凍干保存的屎腸球菌Enterococcusfaecium HE5菌株接種至MRS液體培養(yǎng)基中，在其最適增殖溫度37°C下培養(yǎng)18h，連續(xù)增殖三代，備用；將凍干保存的釀酒酵母Saccharomyces cerevisiaeJ-4接種于YEF1D液體培養(yǎng)基中，30°C、130r/min搖床培養(yǎng)至36h，連續(xù)增殖三代，備用；
[0005](2)乳酸菌和酵母菌混合發(fā)酵:將活化三代的屎腸球菌HE5與釀酒酵母J-4接入優(yōu)化的脫脂乳培養(yǎng)基，先經(jīng)過30°C、130r/min搖床培養(yǎng)至12h，后進入37°C恒溫靜止培養(yǎng)至36h ；
[0006](3)將上述發(fā)酵液經(jīng)6000r/min離心15min,棄上清,用等量的滅菌生理鹽水清洗離心菌體2~3次，收集菌體。
[0007](4)將收集的菌體，按照菌體:保護劑=1:10 (g/ml)比例將保護劑加入制得的菌體中，振蕩混勻，分裝入凍存盤，然后將其放在_80°C冰箱中預(yù)凍12h，再將其迅速放入真空冷凍干燥機中，在_53°C，68X 10_3Mb的條件下干燥18h左右，即可收獲成品。
[0008](5)包裝:鋁箔袋真空包裝，
[0009]其中所述步驟(2)中發(fā)酵菌株屎腸球菌HE5和釀酒酵母J-4的接種體積配比為1:1，優(yōu)化的脫脂乳培養(yǎng)基為脫脂乳粉10g/100mL、大豆蛋白胨lg/100mL、蔗糖0.5g/100mL、酵母浸粉0.5g/100mL，所述步驟(3)中發(fā)酵產(chǎn)物需添加冷凍保護劑:脫脂乳濃度10%、蔗糖濃度10%、谷氨酸鈉5%、甘油3%，再冷凍干燥。[0010]本發(fā)明另一方面還涉及上述生產(chǎn)方法所獲得的微生物制劑，所述微生物制劑包含冷凍干燥的屎腸球菌HE5和釀酒酵母J-4。本發(fā)明中所用的屎腸球菌和畢赤氏酵母菌已經(jīng)保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，其中屎腸球菌菌株的保藏編號為CGMCC N0.7766，釀酒酵母J-4的保藏編號為CGMCC N0.7765。[0011]另一方面，本發(fā)明還涉及所述的微生物制劑的用途，本發(fā)明的這種微生物制劑可以進一步應(yīng)用到食品發(fā)酵、飼料發(fā)酵生產(chǎn)中。
[0012]本發(fā)明的具體實施包括以下工序:
[0013](I)共生作用好的乳酸菌和酵母菌篩選:在各自培養(yǎng)發(fā)酵過程中，加入對方的發(fā)酵培養(yǎng)液，均能促進生長和增強產(chǎn)酸能力。選出了一組共生作用好的屎腸球菌HE5和釀酒酵母 J-4。
[0014](2)乳酸菌的活化和酵母菌的活化:將凍干保存的屎腸球菌HE5菌株接種至MRS液體培養(yǎng)基中，在其最適增殖溫度37°C下培養(yǎng)18h，連續(xù)增殖三代，備用；將凍干釀酒酵母J-4接種于YEH)液體培養(yǎng)基中，30 0C、130r/min搖床培養(yǎng)至36h，連續(xù)增殖三代，備用。
[0015](3):乳酸菌和酵母菌混合發(fā)酵:將活化三代的乳酸菌與酵母菌按照1:1接種比例、總接種量為4%接入優(yōu)化脫脂乳培養(yǎng)基。優(yōu)化脫脂乳培養(yǎng)基為:脫脂乳粉10g/100mL、大豆蛋白胨lg/100mL、鹿糖0.5g/100mL、酵母浸粉0.5g/100mL。先經(jīng)過30°C、130r/min搖床培養(yǎng)至12h后進入37 °C恒溫靜止培養(yǎng)至36h。
[0016](4)將上述發(fā)酵液經(jīng)6000r/min離心15min,棄上清,用等量的滅菌生理鹽水清洗離心菌體2~3次，收集菌體。
[0017](5)添加保護劑:將收集的菌體，按照菌體:保護劑=1:10 (g/ml)比例將保護劑加入制得的菌體中，振蕩混勻。保護劑配制:脫脂乳濃度10%、蔗糖濃度10%、谷氨酸鈉5%、甘油3%。
[0018](6)冷凍干燥:將加入保護劑的發(fā)酵液放入-80°C冰箱中預(yù)凍12h，再將其迅速放入真空冷凍干燥機中，在-53°C，68X 10_3Mb的條件下干燥18h左右，即可收獲成品。
[0019](7)包裝:鋁箔袋真空包裝。
[0020]經(jīng)上述工藝生產(chǎn)的乳酸菌和酵母菌共生發(fā)酵的微生物制劑，共生效果好、產(chǎn)酸能力強。由于本發(fā)明使用乳酸菌和酵母菌均來自于自然發(fā)酵酸馬奶酒，并經(jīng)過安全性分析，因此食用安全可靠。本發(fā)明生產(chǎn)的微生物制劑是在傳統(tǒng)酸馬奶酒研究的基礎(chǔ)上開發(fā)的一種生物發(fā)酵劑，除菌種的產(chǎn)酸能力強外，還具有一定的抑菌特性，可以用來開發(fā)發(fā)酵食品、發(fā)酵飼料等產(chǎn)品；還可作為生物保鮮添加劑添加到食品中，減少化學(xué)防腐劑的使用量，開發(fā)綠色食品；可以作為治療腸道疾病的輔助產(chǎn)品等。
[0021]本發(fā)明的屎腸球菌Enterococcus faeciumHE5菌株,保藏編號為CGMCC N0.7766,于2013年06月20日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，地址100101北京市朝陽區(qū)北辰西路I號院3號中國科學(xué)院微生物研究所。
[0022]本發(fā)明的釀酒酵母Saccharomyces cerevisiaeJ-4,保藏編號為 CGMCC N0.7765,于2013年06月20日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，地址100101北京市朝陽區(qū)北辰西路I號院3號中國科學(xué)院微生物研究所。
【具體實施方式】[0023]實施例1:菌株組合的篩選
[0024]共生作用好的乳酸菌和酵母菌篩選:共選擇來自內(nèi)蒙古錫林郭勒盟牧區(qū)酸馬奶酒中分離鑒定的產(chǎn)酸作用較強的12株乳酸菌和8株酵母菌為供試菌株。其中乳酸桿菌6株，分別是HEl-1麥芽香乳桿菌、HE1-2舊金山乳桿菌、HE1-3干酪乳桿菌、HE1-4干酪乳桿菌、HE 1-5干酪乳桿菌、HE1-6舊金山乳桿菌；乳酸球菌6株，分別是HEl屎腸球菌、HE2屎腸球菌、HE3屎腸球菌、HE4堅強腸球菌、HE5屎腸球菌、HE6假鳥腸球菌；酵母菌8株，分別是J-1類酵母、J-2有孢圓酵母、J-3克勒克酵母、J-4酒香酵母、J-5厚壁孢酵母、J-6厚壁孢酵母、J-7類酵母、J-8內(nèi)孢霉酵母。這些菌株均保藏于內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院微生物實驗室，可以購買。
[0025]代謝產(chǎn)物的制備:將活化好的乳酸菌分別接種在MRS液體培養(yǎng)基中，37°C恒溫培養(yǎng)50h;將活化好的酵母菌分別接種在YPD液體培養(yǎng)基中，30°C恒溫培養(yǎng)70h。將培養(yǎng)液以4000g離心20min，取上清液，并用0.45 μ m的滅菌濾菌膜進行過濾處理，即得到無菌代謝產(chǎn)物，乳酸菌代謝產(chǎn)物PH值調(diào)至5.5±0.2備用，酵母菌代謝產(chǎn)物pH值調(diào)至6.5 ± 0.2備用。
[0026]共生菌株的篩選:將制備好的乳酸菌代謝產(chǎn)物按30%的量加入到Y(jié)PD液體培養(yǎng)基中，按照同樣比例在YPD液體培養(yǎng)基中添加pH=5.5±0.2的生理鹽水作為對照，按基礎(chǔ)培養(yǎng)基量的2%接入酵母菌，30°C恒溫培養(yǎng)30h測其OD值。與對照組比較，OD值高于對照組為有促進作用，低于對照組為有抑制作用。
[0027]將制備好的酵母菌代謝產(chǎn)物按30%的量加入到MRS液體培養(yǎng)基中，按照同樣比例在MRS液體培養(yǎng)基中添加pH=6.5±0.2的生理鹽水作為對照，按基礎(chǔ)培養(yǎng)基量的2%接入乳酸菌，37°C恒溫培養(yǎng)20h測其O D值。同理判斷是否有促進作用。
[0028]在各自培養(yǎng)基中交互添加代謝物作為試驗組，以各自培養(yǎng)基中添加等量生理鹽水作對照，分析比較穩(wěn)定期的濁度值和活菌數(shù)。乳酸菌各自對不同酵母菌有促進作用的有8株次；酵母菌對乳酸菌有促進作用的有18株次。乳酸菌和酵母菌相互均能促進生長和增強產(chǎn)酸能力有兩個組合HE5與J-4和LCl和乳酸菌HE4和酵母菌J_3，其中選出了一組共生作用好的屎腸球菌HE5和釀酒酵母J-4。
[0029]通過測定屎腸球菌HE5和釀酒酵母J-4在脫脂乳培養(yǎng)基中混合培養(yǎng)和二者在各自培養(yǎng)基中交互添加代謝物培養(yǎng)的發(fā)酵特性表明:①釀酒酵母J-4的代謝物可緩沖屎腸球菌HE5發(fā)酵液pH值下降速率，減小酸抑制作用，促進菌株的生長，使得滴定酸度增大。②屎腸球菌HE5的代謝物同樣促進釀酒酵母J-4的生長，使釀酒酵母J-4發(fā)酵液滴定酸度升高，pH值降低，接近酵母菌最適生長PH值條件。
[0030]通過測定屎腸球菌HE5和釀酒酵母J-4在脫脂乳培養(yǎng)基中混合培養(yǎng)和單獨培養(yǎng)的發(fā)酵過程中代謝產(chǎn)物中游離氨基氮、有機酸、揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)及維生素的含量表明:①釀酒酵母J-4蛋白水解力較屎腸球菌HE5強，屎腸球菌HE5代謝物可促進釀酒酵母J-4發(fā)酵產(chǎn)生游離氨基氮。②釀酒酵母J-4對屎腸球菌HE5發(fā)酵脫脂乳過程中產(chǎn)乳酸、丙酸和異戊酸有一定的促進作用，而對屎腸球菌HE5發(fā)酵產(chǎn)乙酸、丁酸和戊酸沒有明顯影響，釀酒酵母J-4使得屎腸球菌HE5發(fā)酵過程產(chǎn)的甲酸減少。釀酒酵母J-4提高了屎腸球菌HE5發(fā)酵液中蘋果酸、酒石酸和檸檬酸的含量。③釀酒酵母J-4對屎腸球菌HE5發(fā)酵產(chǎn)乙醛有顯著促進作用(P〈0.05)，而對產(chǎn)丁二酮沒有影響，屎腸球菌HE5使釀酒酵母J-4發(fā)酵產(chǎn)酒精量降低。
[0031]實施例2制備微生物制劑[0032]本實施例生產(chǎn)工藝主要包括:菌種活化一培養(yǎng)基配制一接種一發(fā)酵一離心洗滌一添加冷凍保護劑一預(yù)凍一凍干一真空包裝。
[0033]其中操作要點如下:
[0034](I)乳酸菌的活化和酵母菌的活化:將凍干保存的屎腸球菌HE5菌株接種至MRS液體培養(yǎng)基中，在其最適增殖溫度37°C下培養(yǎng)18h，連續(xù)增殖三代，備用；將凍干釀酒酵母J-4接種于YEH)液體培養(yǎng)基中，30 0C、130r/min搖床培養(yǎng)至36h，連續(xù)增殖三代，備用。
[0035](2)培養(yǎng)基配制:脫脂乳粉10g/100mL、大豆蛋白胨0.5g/100mL、蔗糖0.5g/100mL、酵母浸粉0.5g/100mL。溶解后經(jīng)過121 °C高溫滅菌15min。
[0036](3)接種:將活化三代的乳酸菌與酵母菌按照1:1接種比例、總接種量為4%接入優(yōu)化脫脂乳培養(yǎng)基。
[0037](4)發(fā)酵:先經(jīng)過30°C、130r/min搖床培養(yǎng)至12h后進入37°C恒溫靜止培養(yǎng)至36h。乳酸菌活菌數(shù)達到109CFU/mL以上；酵母菌活菌數(shù)達到108CFU/mL。
[0038](5)將上述發(fā)酵液經(jīng)6000r/min離心15min,棄上清,用等量的滅菌生理鹽水清洗離心菌體2~3次，收集菌體。
[0039](6)添加冷凍保護劑:將收集的菌體，按照菌體:保護劑=1:10 (g/ml)比例將保護劑加入制得的菌體中，振蕩混勻。保護劑配制:脫脂乳濃度10%、蔗糖濃度10%、谷氨酸鈉5%、甘油3%。
[0040](7)冷凍干燥:將加入保護劑的發(fā)酵液放入-80°C冰箱中預(yù)凍12h，再將其迅速放入真空冷凍干燥機中，在-53°C，68X 10_3Mb的條件下干燥18h左右，即可收獲成品。
[0041](8)包裝:鋁箔袋真空包裝。
[0042]實施例2:
[0043]本實施例過程包括:
[0044](I)屎腸球菌HE5菌株的生物學(xué)特性:屎腸球菌HE5菌株分離自內(nèi)蒙古錫林郭勒盟牧區(qū)的酸馬奶酒中，目前已保藏于“中國普通微生物菌種保藏管理中心”，保藏編號為CGMCCN0.7766。該菌株在MRS液體培養(yǎng)基中，37°C恒溫培養(yǎng)，OD值和活菌數(shù)變化均為前8h增長迅速，8h后增長趨緩，在20h達到穩(wěn)定期，活菌數(shù)達到1.8X 108CFU/ml，pH為4.13 ;該菌株產(chǎn)酸能力強，發(fā)酵上清液對枯草芽孢桿菌、單核增生李斯特菌、大腸桿菌均具有一定的抑菌特性。
[0045](2)釀酒酵母J-4菌株的生物學(xué)特性:釀酒酵母J-4.分離自內(nèi)蒙古錫林郭勒盟牧區(qū)的酸馬奶酒中，目前已保藏于“中國普通微生物菌種保藏管理中心”，該菌株的保藏編號為CGMCC N0.7765。該菌株接種在YPD液體培養(yǎng)基中，30°C恒溫培養(yǎng)，OD值和活菌數(shù)變化均為前12h增長迅速，12h后增長趨緩，28h活菌數(shù)為最大，達3.8X 107CFU/ml。
[0046](3)乳酸菌的活化和酵母菌的活化:將凍干保存的屎腸球菌HE5菌株接種至MRS液體培養(yǎng)基中，在其最適增殖溫度37°C下培養(yǎng)18h，連續(xù)增殖三代，備用；將凍干釀酒酵母J-4接種于YEH)液體培養(yǎng)基中，30 0C、130r/min搖床培養(yǎng)至36h，連續(xù)增殖三代，備用。
[0047](4)培養(yǎng)基配制:脫脂乳粉10g/100mL、大豆蛋白胨lg/100mL、鹿糖0.5g/100mL、酵母浸粉0.5g/100mL。溶解后經(jīng)過121 °C高溫滅菌15min。
[0048](5)接種:將活化三代的乳酸菌與酵母菌按照1:1接種比例、總接種量為5%接入優(yōu)化脫脂乳培養(yǎng)基。[0049](6)發(fā)酵:先經(jīng)過30°C、130r/min搖床培養(yǎng)至12h后進入37°C恒溫靜止培養(yǎng)至36h。乳酸菌活菌數(shù)達到109CFU/mL以上；酵母菌活菌數(shù)達到108CFU/mL。
[0050](7)將上述發(fā)酵液經(jīng)6000r/min離心15min,棄上清,用等量的滅菌生理鹽水清洗離心菌體2~3次，收集菌體。
[0051](8)添加冷凍保護劑:將收集的菌體，按照菌體:保護劑=1:10 (g/ml)比例將保護劑加入制得的菌體中，振蕩混勻。保護劑配制:脫脂乳濃度10%、蔗糖濃度10%、谷氨酸鈉5%、甘油3%。
[0052](9)冷凍干燥:將加入保護劑的發(fā)酵液放入-80°C冰箱中預(yù)凍12h，再將其迅速放入真空冷凍干燥機中，在-53°C，68X 10_3Mb的條件下干燥18h左右，即可收獲成品。
[0053](9)包裝:鋁箔袋真空包裝。 [0054]經(jīng)上述工藝生產(chǎn)的乳酸菌和酵母菌共生發(fā)酵的微生物制劑，共生效果好、產(chǎn)酸能力強，由于本發(fā)明使用乳酸菌和酵母菌均來自于自然發(fā)酵酸馬奶酒，并經(jīng)過安全性分析，因此食用安全可靠。本發(fā)明生產(chǎn)的微生物制劑是在傳統(tǒng)酸馬奶酒研究的基礎(chǔ)上開發(fā)的一種生物發(fā)酵劑，除菌種的產(chǎn)酸能力強外，還具有一定的抑菌特性，可以用來開發(fā)發(fā)酵食品、發(fā)酵飼料等產(chǎn)品；還可作為生物保鮮添加劑添加到食品中，減少化學(xué)防腐劑的使用量，開發(fā)綠色食品；可以作為治療腸道疾病的輔助產(chǎn)品等。
【權(quán)利要求】
1.一種乳酸菌和酵母菌共生發(fā)酵的微生物制劑的生產(chǎn)方法，其特征在于按下述步驟完成: (1)乳酸菌的活化和酵母菌的活化:將凍干保存的屎腸球菌EnterococcusfaeciumHE5菌株接種至MRS液體培養(yǎng)基中，在其最適增殖溫度37°C下培養(yǎng)18h，連續(xù)增殖三代，備用；將凍干保存的釀酒酵母Saccharomyces cerevisiaeJ-4接種于YEF1D液體培養(yǎng)基中，30°C、130r/min搖床培養(yǎng)至36h,連續(xù)增殖三代，備用；其中屎腸球菌EnterococcusfaeciumHE5 菌株的保藏編號為 CGMCC N0.7766,釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiaeJ-4的保藏編號為CGMCC N0.7765，均于2013年06月20日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，地址100101北京市朝陽區(qū)北辰西路I號院3號中國科學(xué)院微生物研究所； (2)乳酸菌和酵母菌混合發(fā)酵:將活化三代的屎腸球菌HE5與釀酒酵母J-4接入優(yōu)化的脫脂乳培養(yǎng)基，先經(jīng)過30°C、130r/min搖床培養(yǎng)至12h，后進入37°C恒溫靜止培養(yǎng)至36h ； (3)將上述發(fā)酵液經(jīng)6000r/min離心15min,棄上清,用等量的滅菌生理鹽水清洗離心菌體2~3次，收集菌體； (4)添加冷凍保護劑:將收集的菌體，按照菌體:保護劑=1:10(g/ml)比例將保護劑加入制得的菌體中，振蕩混勻； (5)冷凍干燥:將加入保護劑的發(fā)酵液放入_80°C冰箱中預(yù)凍12h，再將其迅速放入真空冷凍干燥機中，在_53°C，68X 10_3Mb的條件下干燥18h左右，即可收獲成品； (6)包裝:鋁箔袋真空包裝。
2.按照權(quán)利要求1所述的乳酸菌和酵母菌共生發(fā)酵的微生物制劑的生產(chǎn)方法，其特征在于:所述步驟(2)中發(fā)酵菌株屎腸球菌HE5和釀酒酵母J-4的接種體積配比為1:1，優(yōu)化的脫脂乳培養(yǎng)基為脫脂乳粉10g/100mL、大豆蛋白胨lg/100mL、蔗糖0.5g/100mL、酵母浸粉0.5g/100mL。
3.按照權(quán)利要求1所述的乳酸菌和酵母菌共生發(fā)酵的微生物制劑的生產(chǎn)方法，其特征在于:所述步驟(4)中發(fā)酵產(chǎn)物需添加冷凍保護劑:脫脂乳濃度10%、蔗糖濃度10%、谷氨酸鈉5%、甘油3%，按照菌體:保護劑=1:10 (g/ml)比例將保護劑加入制得的菌體中，振蕩混勻，再冷凍干燥。
4.權(quán)利要求1-5任一項的生產(chǎn)方法所獲得的微生物制劑，其特征在于，所述微生物制劑包含冷凍干燥的屎腸球菌HE5和釀酒酵母J-4。
5.權(quán)利要求4所述的微生物制劑用于制備發(fā)酵食品或發(fā)酵飼料的用途。
6.權(quán)利要求5所述的微生物制劑的用途，其特征在于所述微生物制劑被用作發(fā)酵劑。
7.一種用于制備權(quán)利要求1所述的微生物制劑的屎腸球菌Enterococcus faeciumHE5菌株，其特征在于該菌株的保藏編號為CGMCC N0.7766，于2013年06月20日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，地址100101北京市朝陽區(qū)北辰西路I號院3號中國科學(xué)院微生物研究所。
8. 一種用于制備權(quán)利要求1所述的微生物制劑的釀酒酵母Saccharomycescerevisiae J_4，其特征在于該菌株的保藏編號為CGMCC N0.7765，于2013年06月20日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，地址100101北京市朝陽區(qū)北辰西路I號院3號中國科學(xué)院微生物研究所。
【文檔編號】C12R1/865GK103468615SQ201310433882
【公開日】2013年12月25日 申請日期:2013年9月23日 優(yōu)先權(quán)日:2013年9月23日
【發(fā)明者】田建軍, 賀銀鳳, 張開屏, 靳燁 申請人:內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)