1.一種含有miRNA-34的對蝦飼料制作方法,其特點(diǎn)在于包括以下步驟:
1)把用于表達(dá)成熟miRNA-34的DNA序列構(gòu)建到LITMUS 38i載體質(zhì)粒上,構(gòu)建成功的質(zhì)粒轉(zhuǎn)入大腸桿菌菌株HT115中,加入異丙基硫代半乳糖苷(IPTTG)誘導(dǎo)大量轉(zhuǎn)錄獲得miRNA-34;
2)把步驟1)產(chǎn)生miRNA-34的菌體滅活,把滅活的菌體拌入對蝦飼料中,加入魚餌飼料粘合劑;
3)均勻攪拌飼料后,置于烘箱中烘干,獲得對蝦飼料。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種含有miRNA-34的對蝦飼料制作方法,其特點(diǎn)在于:所述步驟2)菌體滅活是在60℃水浴下滅活約90min,所述步驟3)烘箱中烘干是在60℃烘箱中烘干1h。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種含有miRNA-34的對蝦飼料制作方法,其特點(diǎn)在于:所述步驟1)的大腸桿菌菌株HT115是在37℃下培養(yǎng),加入IPTTG的濃度為1mM。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種含有miRNA-34的對蝦飼料制作方法,其特點(diǎn)在于:所述步驟2)滅活的菌體拌入對蝦飼料后,每克蝦飼料中含有的菌個數(shù)是3×1012數(shù)量級,魚餌飼料粘合劑加入量為蝦飼料質(zhì)量的3%。
5.一種含有miRNA-34的對蝦飼料,其特點(diǎn)在于:是采用權(quán)利要求1-4任一所述方法制備獲得的蝦飼料。
6.權(quán)利要求5所述的一種含有miRNA-34的對蝦飼料的應(yīng)用,其特點(diǎn)在于:所述的蝦飼料用于抗對蝦白斑綜合癥病毒(WSSV)。
7.一種含有miRNA-34的鼠飼料制作方法,其特點(diǎn)在于包括以下步驟:
步驟一、用權(quán)利要求1-4任一所述方法制備獲得的蝦飼料持續(xù)喂食對蝦;
步驟二、收集對蝦肌肉,加熱2min后,拌入到裸鼠飼料中,烘箱中烘干約2-3h,完成獲得鼠飼料。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種含有miRNA-34的鼠飼料制作方法,其特點(diǎn)在于:所述步驟二中的收集對蝦肌肉是在喂食對蝦的3-5天后收集,對蝦肌肉拌入到裸鼠飼料后,對蝦肌肉與裸鼠飼料的質(zhì)量比為1:1。
9.一種含有miRNA-34的鼠飼料,其特點(diǎn)在于:是采用權(quán)利要求7或8所述方法制備獲得的鼠飼料。
10.權(quán)利要求9所述的一種含有miRNA-34的鼠飼料的應(yīng)用,其特點(diǎn)在于:所述的鼠飼料用于抗乳腺癌。