本發(fā)明涉及微生物發(fā)酵技術(shù)領(lǐng)域，是一種混合微生物發(fā)酵飼料及采用混合微生物降解霉變飼料中黃曲霉毒素生產(chǎn)混合微生物發(fā)酵飼料的方法。
背景技術(shù)：
霉變降低了飼料的營養(yǎng)價值，影響了適口性，更為嚴(yán)重的是造成飼料產(chǎn)品霉菌毒素超標(biāo)，抑制動物的生產(chǎn)性能、降低動物的免疫力，甚至可以通過食物鏈威脅人體健康。霉菌毒素大部分對人類有害，畜禽食用了霉變的飼料，會在肉蛋奶中有殘留，通過食物鏈對人體健康造成危害，導(dǎo)致畸形、癌變、免疫抑制等。黃曲霉毒素是霉菌毒素中的典型主要的霉菌，其是哺乳動物體內(nèi)的主要代謝產(chǎn)物，存在于動物的乳汁、肝、蛋類等可食部分，常見于乳汁中，它有很強(qiáng)的毒性和致癌性，由于乳和乳制品是嬰幼兒的主食，而嬰幼兒的解毒功能器官發(fā)育不完善，對嬰幼兒的健康可產(chǎn)生直接的威脅。據(jù)世界糧食組織估算，全世界每年大約有5%～7%的糧食、飼料等農(nóng)產(chǎn)品受到霉菌的侵害，造成了數(shù)千億美元的經(jīng)濟(jì)損失。
目前處理霉變飼料的方法主要包括物理處理方法、化學(xué)處理方法和微生物處理方法。物理處理方法主要是通過高溫的方法去除霉變飼料中的黃曲霉毒素，但是在去除霉變飼料中的黃曲霉毒素的同時，高溫也很容易造成霉變飼料蛋白質(zhì)的變性，從而降低了處理后的霉變飼料的營養(yǎng)價值，同時，采用物理處理方法也使得生產(chǎn)過程中投入大量的能耗，增加了生產(chǎn)成本，難以控制，不適于實際生產(chǎn)。化學(xué)處理方法主要是通過向霉變飼料中加入化學(xué)處理劑、防霉劑、脫霉劑等，例如采用甲醛去除黃曲霉毒素，但是由于黃曲霉毒素的穩(wěn)定性強(qiáng)，需加入大量的化學(xué)處理劑，一方面成本高，另一方面加入的化學(xué)處理劑會殘留在處理后的霉變飼料中，很難提取，若是動物使用含有殘留的化學(xué)處理劑的飼料，勢必會對動物的生長造成不利影響。微生物處理手段是目前性價比較高的一種處理手段，其采用微生物降解霉變飼料中的黃曲霉毒素，在保證飼料蛋白質(zhì)營養(yǎng)成分的前提下，既不會投入過高的成本，也不會造成化學(xué)處理劑的殘留，目前常采用的微生物處理手段，例如采用乳酸菌粘附，其黃曲霉毒素降解率最高為70%，并且其只是粘附毒素，不能控制霉菌生長；采用假絲酵母菌處理霉變料，其黃曲霉毒素降解率最高為80%；采用紅色棒桿菌處理霉變料，其黃曲霉毒素降解率最高為99%，但是其需在液體中進(jìn)行發(fā)酵，難以工業(yè)實施，不適于實際生產(chǎn)；采用真菌E-2處理霉變料，其黃曲霉毒素降解率最高為99%，但是其生產(chǎn)條件苛刻，難以控制，不適于實際生產(chǎn)。因此，目前的微生物處理手段常采用的是單個菌種的處理手段，單一菌種在處理霉變飼料時存在發(fā)酵耗時長、黃曲霉毒素降解效率低、生產(chǎn)條件苛刻、不適于實際生產(chǎn)需要的問題。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明提供了一種混合微生物發(fā)酵飼料，克服了上述現(xiàn)有技術(shù)之不足，根據(jù)本發(fā)明得到的混合微生物發(fā)酵飼料無化學(xué)試劑的殘留、營養(yǎng)成分好，本發(fā)明還提供了一種采用混合微生物降解霉變飼料中黃曲霉毒素生產(chǎn)混合微生物發(fā)酵飼料的方法，克服了上述現(xiàn)有技術(shù)之不足，其能有效解決目前單一菌種在處理霉變飼料時存在發(fā)酵耗時長、黃曲霉毒素降解效率低、生產(chǎn)條件苛刻、不適于實際生產(chǎn)需要的問題。
本發(fā)明的技術(shù)方案之一是通過以下措施來實現(xiàn)的：一種混合微生物發(fā)酵飼料，按下述方法得到：第一步，選取乳酸菌、酒曲酵母菌、芽孢桿菌、分枝桿菌和短狀桿菌中的兩種以上，將選取好的菌種的菌落分別放入擴(kuò)培營養(yǎng)液中分別進(jìn)行擴(kuò)培；
第二步，將兩種以上的擴(kuò)培后的單個菌落進(jìn)行混合后得到混合菌群，向混合菌群中加入菌種促生長劑得到發(fā)酵劑，混合菌群與菌種促生長劑之間的質(zhì)量比為1:10至20；
第三步，將發(fā)酵劑放入溫度為30℃至35℃的10%至15%的紅糖水中進(jìn)行攪拌混合均勻，然后放置20分鐘進(jìn)行激活得到激活菌液，發(fā)酵劑與10%至15%的紅糖水之間的質(zhì)量比為1:100至150；
第四步，將待處理的霉變料進(jìn)行粉碎，然后向粉碎后的霉變料中加入激活菌液，激活菌液的加入量為每1000千克粉碎的霉變料中加入1千克至2千克的激活菌液，在溫度為25℃至45℃條件下攪拌混合均勻得到待發(fā)酵料，然后將待發(fā)酵料裝入飼料發(fā)酵袋；
第五步，將裝入飼料發(fā)酵袋的待發(fā)酵料在溫度為10℃至40℃條件下發(fā)酵3天至30天后得到混合微生物發(fā)酵飼料。
下面是對上述發(fā)明技術(shù)方案之一的進(jìn)一步優(yōu)化或/和改進(jìn)：
上述第一步中，將4克蔗糖、4克葡萄糖、4克豆粕粉、4g玉米粉、0.3g磷酸二氫鉀溶解于100克生理鹽水中，得到擴(kuò)培營養(yǎng)液，擴(kuò)培的溫度為34℃至36℃。
上述第二步中，混合菌群的菌量達(dá)到1×1015個/g以上。
上述第二步中，菌種促生長劑為30%至40%的低聚果糖、5%至15%的生長素和余量的磷酸氫銨的混合物。
上述第四步中，待處理的霉變料處理后作為雞飼料時，將待處理的霉變料粉碎至粒度小于1.5毫米以下；待處理的霉變料處理后作為羊飼料或牛飼料時，將待處理的霉變料粉碎至粒度為2.0毫米至2.5毫米；待處理的霉變料處理后作為豬飼料時，將待處理的霉變料粉碎至粒度為1毫米至1.3毫米。
本發(fā)明的技術(shù)方案之二是通過以下措施來實現(xiàn)的：一種采用混合微生物降解霉變飼料中黃曲霉毒素生產(chǎn)混合微生物發(fā)酵飼料的方法，按下述步驟進(jìn)行：第一步，選取乳酸菌、酒曲酵母菌、芽孢桿菌、分枝桿菌和短狀桿菌中的兩種以上，將選取好的菌種的菌落分別放入擴(kuò)培營養(yǎng)液中分別進(jìn)行擴(kuò)培；
第二步，將兩種以上的擴(kuò)培后的單個菌落進(jìn)行混合后得到混合菌群，向混合菌群中加入菌種促生長劑得到發(fā)酵劑，混合菌群與菌種促生長劑之間的質(zhì)量比為1:10至20；
第三步，將發(fā)酵劑放入溫度為30℃至35℃的10%至15%的紅糖水中進(jìn)行攪拌混合均勻，然后放置20分鐘進(jìn)行激活得到激活菌液，發(fā)酵劑與10%至15%的紅糖水之間的質(zhì)量比為1:100至150；
第四步，將待處理的霉變料進(jìn)行粉碎，然后向粉碎后的霉變料中加入激活菌液，激活菌液的加入量為每1000千克粉碎的霉變料中加入1千克至2千克的激活菌液，在溫度為25℃至45℃條件下攪拌混合均勻得到待發(fā)酵料，然后將待發(fā)酵料裝入飼料發(fā)酵袋；
第五步，將裝入飼料發(fā)酵袋的待發(fā)酵料在溫度為10℃至40℃條件下發(fā)酵3天至30天后得到混合微生物發(fā)酵飼料。
下面是對上述發(fā)明技術(shù)方案之二的進(jìn)一步優(yōu)化或/和改進(jìn)：
上述第一步中，將4克蔗糖、4克葡萄糖、4克豆粕粉、4g玉米粉、0.3g磷酸二氫鉀溶解于100克生理鹽水中，得到擴(kuò)培營養(yǎng)液，擴(kuò)培的溫度為34℃至36℃。
上述第二步中，混合菌群的菌量達(dá)到1×1015個/g以上。
上述第二步中，菌種促生長劑為30%至40%的低聚果糖、5%至15%的生長素和余量的磷酸氫銨的混合物。
上述第四步中，待處理的霉變料處理后作為雞飼料時，將待處理的霉變料粉碎至粒度小于1.5毫米以下；待處理的霉變料處理后作為羊飼料或牛飼料時，將待處理的霉變料粉碎至粒度為2.0毫米至2.5毫米；待處理的霉變料處理后作為豬飼料時，將待處理的霉變料粉碎至粒度為1毫米至1.3毫米。
本發(fā)明通過采用混合微生物降解霉變飼料中黃曲霉毒素得到混合微生物發(fā)酵飼料，其一方面微生態(tài)制劑能夠使發(fā)霉的原料或產(chǎn)品重新被利用而不被丟棄或成為廢品，一方面還能提高產(chǎn)品質(zhì)量，本發(fā)明采用混合微生物降解霉變飼料中黃曲霉毒素生產(chǎn)得到的混合微生物發(fā)酵飼料中，霉變料的黃曲霉毒素能夠100%降解，并且，生產(chǎn)過程中所添加的混合菌群在降解黃曲霉毒素的同時，即使沒有完全消耗，也能作為有益菌，為畜禽提供腸道有益菌，促進(jìn)動物生長和提高畜禽的的防病能力，大幅提高飼料的營養(yǎng)價值，保證其營養(yǎng)特性和安全性。
具體實施方式
本發(fā)明不受下述實施例的限制，可根據(jù)本發(fā)明的技術(shù)方案與實際情況來確定具體的實施方式。本發(fā)明中所提到各種化學(xué)試劑和化學(xué)用品如無特殊說明，均為現(xiàn)有技術(shù)中公知公用的化學(xué)試劑和化學(xué)用品；本發(fā)明中的百分?jǐn)?shù)如沒有特殊說明，均為質(zhì)量百分?jǐn)?shù)；本發(fā)明中的溶液若沒有特殊說明，均為溶劑為水的水溶液，例如，鹽酸溶液即為鹽酸水溶液。
下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步描述：
實施例1，該混合微生物發(fā)酵飼料采用混合微生物降解霉變飼料中黃曲霉毒素的生產(chǎn)方法得到，按下述步驟進(jìn)行：第一步，選取乳酸菌、酒曲酵母菌、芽孢桿菌、分枝桿菌和短狀桿菌中的兩種以上，將選取好的菌種的菌落分別放入擴(kuò)培營養(yǎng)液中分別進(jìn)行擴(kuò)培；
第二步，將兩種以上的擴(kuò)培后的單個菌落進(jìn)行混合后得到混合菌群，向混合菌群中加入菌種促生長劑得到發(fā)酵劑，混合菌群與菌種促生長劑之間的質(zhì)量比為1:10至20；
第三步，將發(fā)酵劑放入溫度為30℃至35℃的10%至15%的紅糖水中進(jìn)行攪拌混合均勻，然后放置20分鐘進(jìn)行激活得到激活菌液，發(fā)酵劑與10%至15%的紅糖水之間的質(zhì)量比為1:100至150；
第四步，將待處理的霉變料進(jìn)行粉碎，然后向粉碎后的霉變料中加入激活菌液，激活菌液的加入量為每1000千克粉碎的霉變料中加入1千克至2千克的激活菌液，在溫度為25℃至45℃條件下攪拌混合均勻得到待發(fā)酵料，然后將待發(fā)酵料裝入飼料發(fā)酵袋；飼料發(fā)酵袋可以選用目前市售的飼料發(fā)酵袋或呼吸膜發(fā)酵袋；待處理的霉變料為沒變的農(nóng)作物秸稈和霉變的糧食等，可以為霉變的農(nóng)作物秸稈或霉變的麩皮或霉變的玉米或霉變的棉粕等。
第五步，將裝入飼料發(fā)酵袋的待發(fā)酵料在溫度為10℃至40℃條件下發(fā)酵3天至30天后得到混合微生物發(fā)酵飼料。在適宜的發(fā)酵溫度和發(fā)酵時間的配合下，保證待發(fā)酵料能夠充分發(fā)酵，有效降解待發(fā)酵料中的黃曲霉毒素。
本發(fā)明采用混合微生物降解霉變飼料中黃曲霉毒素生產(chǎn)得到的混合微生物發(fā)酵飼料中，黃曲霉毒素能夠降解到合格目標(biāo)值，并且比國家行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)要求的標(biāo)準(zhǔn)值低60%，并且，生產(chǎn)過程中所添加的混合菌群在降解黃曲霉毒素的同時，即使沒有完全消耗，也能作為有益菌，為畜禽提供腸道有益菌，促進(jìn)動物生長和提高畜禽的的防病能力，大幅提高飼料的營養(yǎng)價值。
實施例2，該混合微生物發(fā)酵飼料采用混合微生物降解霉變飼料中黃曲霉毒素的生產(chǎn)方法得到，按下述步驟進(jìn)行：第一步，選取乳酸菌、酒曲酵母菌、芽孢桿菌、分枝桿菌和短狀桿菌中的兩種以上，將選取好的菌種的菌落分別放入擴(kuò)培營養(yǎng)液中分別進(jìn)行擴(kuò)培；
第二步，將兩種以上的擴(kuò)培后的單個菌落進(jìn)行混合后得到混合菌群，向混合菌群中加入菌種促生長劑得到發(fā)酵劑，混合菌群與菌種促生長劑之間的質(zhì)量比為1:10或20；
第三步，將發(fā)酵劑放入溫度為30℃或35℃的10%或15%的紅糖水中進(jìn)行攪拌混合均勻，然后放置20分鐘進(jìn)行激活得到激活菌液，發(fā)酵劑與10%或15%的紅糖水之間的質(zhì)量比為1:100或150；
第四步，將待處理的霉變料進(jìn)行粉碎，然后向粉碎后的霉變料中加入激活菌液，激活菌液的加入量為每1000千克粉碎的霉變料中加入1千克或2千克的激活菌液，在溫度為25℃或45℃條件下攪拌混合均勻得到待發(fā)酵料，然后將待發(fā)酵料裝入飼料發(fā)酵袋；
第五步，將裝入飼料發(fā)酵袋的待發(fā)酵料在溫度為10℃或40℃條件下發(fā)酵3天或30天后得到混合微生物發(fā)酵飼料。
實施例3，作為上述實施例的優(yōu)化，第一步中，將4克蔗糖、4克葡萄糖、4克豆粕粉、4g玉米粉、0.3g磷酸二氫鉀溶解于100克生理鹽水中，得到擴(kuò)培營養(yǎng)液，擴(kuò)培的溫度為34℃至36℃；擴(kuò)配營養(yǎng)液也可以按本領(lǐng)域?qū)I(yè)技術(shù)制備具有相同菌種培養(yǎng)效果的營養(yǎng)液；選擇適宜的擴(kuò)培溫度，能夠為菌種的擴(kuò)培提供較好的生長環(huán)境。
實施例4，作為上述實施例的優(yōu)化，第二步中，混合菌群的菌量達(dá)到1×1015個/g以上；將兩種以上的擴(kuò)培后的單個菌落進(jìn)行混合后得到混合菌群，使混合菌群的菌量達(dá)到1×1015個/g以上，能夠有效滿足保證后續(xù)霉變飼料的正常發(fā)酵，為黃曲霉毒素的降解提供保障。
實施例5，作為上述實施例的優(yōu)化，第二步中，菌種促生長劑為30%至40%的低聚果糖、5%至15%的生長素和余量的磷酸氫銨的混合物；生長素是一類含有一個不飽和芳香族烴和一個乙酸側(cè)鏈的內(nèi)源激素，文簡稱IAA，國際通用，是吲哚乙酸（IAA）。4-氯-IAA、5-羥-IAA、萘乙酸（NAA）、吲哚丁酸等為類生長素，有促進(jìn)細(xì)胞生長的作用。
實施例6，作為上述實施例的優(yōu)化，第四步中，待處理的霉變料處理后作為雞飼料時，將待處理的霉變料粉碎至粒度小于1.5毫米以下；待處理的霉變料處理后作為羊飼料或牛飼料時，將待處理的霉變料粉碎至粒度為2.0毫米至2.5毫米；待處理的霉變料處理后作為豬飼料時，將待處理的霉變料粉碎至粒度為1毫米至1.3毫米。根據(jù)不同動物的飼料喂養(yǎng)要求，將待處理的霉變料粉碎至適合于不同動物的喂藥飼料粒度要求，在保證為動物提供合適的營養(yǎng)飼料的前提下，不會影響動物的消化系統(tǒng)。
選一批500只雛雞雞苗分成兩組進(jìn)行對比試喂實驗，一組喂養(yǎng)根據(jù)本發(fā)明上述實施例得到的混合微生物發(fā)酵飼料，另一組喂養(yǎng)普通常規(guī)飼料，一個月后，兩組雞的成活率均在95%以上，生長體重兩組無明顯差別；說明根據(jù)本發(fā)明上述實施例得到的混合微生物發(fā)酵飼料營養(yǎng)成分好，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定。
將根據(jù)本發(fā)明上述實施例得到的混合微生物發(fā)酵飼料分別送去檢測，結(jié)果如表1所示，其中，霉變牛料為霉變牛飼料，霉變雞料為霉變雞飼料。由表1中數(shù)據(jù)可知，黃曲霉素毒的去除率均達(dá)到100%，因此，本發(fā)明的黃曲霉毒素降解率高、去除效果更好，并且本發(fā)明不會破壞飼料原有的蛋白質(zhì)等營養(yǎng)物質(zhì)，飼料營養(yǎng)價值高，安全高效無污染，同時，根據(jù)本發(fā)明實施例得到的混合微生物發(fā)酵飼料在飼喂過程無需添加任何成分，開包即食，相比于常規(guī)飼養(yǎng)方法，可降低飼養(yǎng)成本8%至15%，飼料在袋內(nèi)厭氧狀態(tài)下自然發(fā)酵，即生態(tài)又環(huán)保。
本發(fā)明通過采用混合微生物降解霉變飼料中黃曲霉毒素得到混合微生物發(fā)酵飼料，其一方面微生態(tài)制劑能夠使發(fā)霉的原料或產(chǎn)品重新被利用而不被丟棄或成為廢品，一方面還能提高產(chǎn)品質(zhì)量，本發(fā)明采用混合微生物降解霉變飼料中黃曲霉毒素生產(chǎn)得到的混合微生物發(fā)酵飼料中，霉變料的黃曲霉毒素能夠100%降解，并且，生產(chǎn)過程中所添加的混合菌群在降解黃曲霉毒素的同時，即使沒有完全消耗，也能作為有益菌，為畜禽提供腸道有益菌，促進(jìn)動物生長和提高畜禽的的防病能力，大幅提高飼料的營養(yǎng)價值，保證其營養(yǎng)特性和安全性。
以上技術(shù)特征構(gòu)成了本發(fā)明的實施例，其具有較強(qiáng)的適應(yīng)性和實施效果，可根據(jù)實際需要增減非必要的技術(shù)特征，來滿足不同情況的需求。