專利名稱：一種益母草生物堿組合物及其制備方法
技術領域：
本發明屬于制藥技術領域，具體的說是涉及一種益母草生物堿組合物。 技術背景益母草(Herba leonuri)為唇形科植物益母草(Leonuras japonicus Houtt.)的新 鮮或干燥地上部分，始載于《神農本草經》，別名益母艾、苦草、坤草等，其味辛、 微苦、性微寒。歸肝、心包經，具有活血調經，利尿消胂之功效。益母草具有以下的主要藥理作用i、對子宮的作用。益母草具有較強的子宮 興奮作用，能增加子宮的收縮幅度、頻率及張力；2、對心血管的作用。益母草可 以治療心肌缺血再灌注損傷；3、抗血小板聚集作用；4、降低血液黏度和抗血液凝 固作用；5、對腎臟的作用。益母草對急性腎小管壞死有一定的治療作用；6、對T、 B淋巴細胞的作用，能夠增強機體的細胞免疫功能。益母草在臨床上用于月經不調、產后淤痛、心腦血管疾病、血液病等疾病的治 療。而益母草中的生物堿類有效成分，主要包括益母草堿和水蘇堿，是其主要有效 成分。對于益母草中的生物堿有效成分的提取，文獻[安偉建。中藥益母草有效成分提 取和測定方法的研究進展。天津藥學，2003, 15 (3 ): 68]報道的有1、罐組式動 態逆流提取；2、超臨界提取；3、超聲波提取；4、不同溶劑提取等方法。部頒中藥20冊收錄有益母草注射液，其制法為益母草7jc提醇沉，活性炭脫 色得到；申請號為CN02148608.5的專利文獻公開了 一種益母草總生物堿的制備方 法，其制備方法為益母草浸骨溶于酸水后通過強酸性陽離子交換樹脂，水洗，氨 溶液和/或酸溶液洗脫，減壓濃縮，真空干燥，即得益母草總生物堿，含量大于50%; 申請號為CN02117432.6的專利文獻公開了益母草總堿的提取工藝及其用途，其提 取工藝為益母草水提醇沉，酸液過強酸性陽離子交換樹脂，水洗，酸洗液調pH 值，濃縮物用高濃度乙醇提取，即得益母草總生物堿；申請號為CN02123967.3的 專利申請文獻公開了益母草總生物堿的制備方法及其藥物新用途，其制備方法為 益母草水提醇沉，酸液過陽離子交換樹脂，水洗，酸液或堿液洗脫，濃縮，干燥即 得，生物堿含量大于50%,水蘇堿含量大于20%;申請號為CN03100594.2的專利 文獻公開類益母草總堿的提取工藝，其提取工藝為水提、醇沉、酸化上柱后，1-4% 鹽酸洗脫后用氫氧化鈉中和/1-4%疏酸洗脫后用生石灰或氫氧化鈣中和；申請號為 CN03118828.1的專利文獻公開類鮮益母草提取益母草總堿工藝及益母草總堿制劑， 其提取工藝為取汁、醇沉、濾過、酸液過酸性陽離子交換樹脂柱、水洗、酸洗或 堿洗液調中性、濃縮千燥，用乙醇提取，濃縮，干燥，即得。上述制備方法普遍采用水提醇沉和強酸性陽離子交換樹脂結合的方法對生物 堿進行提取和純化。益母草^A堿性很強的生物堿，直接用強酸性陽離子交換樹脂 純化益母草總生物械，對于堿性強的益母草堿是不可逆的死吸附，根本洗脫不下來，使得最終的益母草總生物堿中只含有少量甚至不含有益母草堿。 發明內容針對現有技術的不足，本發明研究人員經過大量的實驗，制備出了含有水蘇堿 與益母草堿的益母草生物堿組合物。本發明的益母草生物堿組合物中的水蘇堿和益母草堿的重量份比為10-20:1,兩者具有很好的協同增效作用。得到的益母草生物堿 組合物可用于各種口服制劑和注射制劑的制備。本發明所要解決的技術問題就是提供一種含有水蘇堿與益母草堿的益母草生 物堿組合物。本發明的益母草生物堿組合物，其中的水蘇堿和益母草堿的重量份比為10-20:1 時，具有很好的協同增效作用。優選的，上述的益母草生物堿組合物，其中的水蘇堿和益母草堿的重量份比為 12-16:1時協同增效作用明顯；水蘇堿和益母草堿的重量份比為15:1時，具有更好 的協同增效作用。將按照現有技術制備成的純度較高的益母草堿和水蘇堿，按照水蘇堿和益母草 堿的重量份比為10-20:1配制成混合物，也具有很好的協同增效作用。優選的，將按照現有技術制備成的純度較高的益母草堿和水蘇堿，按照水蘇堿 和益母草堿的重量份比為12-16:1,更優選為15:1配制成混合物，具有更好的協同 增效作用。水蘇堿的純品可以按照文獻[何黎琴，王效山。水蘇堿的合成工藝研究。華西藥 學雜志。2005, 20 ( 1 ): 50-51]中的方法合成。益母草堿的純品可以按照申請號為CN02138364.2專利文獻中的方法合成。所述的益母草生物堿組合物，可以制備成口服制劑和注射制劑；其中口服制劑 包括片劑、膠囊劑、丸劑、糖漿劑、顆粒劑、口服溶液劑、口服混懸劑或口服乳劑， 注射制劑包括小容量注射劑、大容量注射劑、粉針劑和凍干粉針劑。所述的益母草生物堿組合物的藥物制劑中還含有藥學上可以接受的藥用輔料。用于調節滲透壓的等滲調節劑，常用于靜脈注射劑和大輸液，例如，氯化鈉、 氯化鉀、氯化鎂、氯化鉤、乳酸鈉、葡萄糖、木糖醇、山梨醇和右旋糖酐等，優選 為氯化鈉和/或葡萄糖。粉針中可以加入賦形劑，例如，甘露醇、葡萄糖等。在片劑中可以根據需要加入填充劑、潤濕劑、粘合劑、崩解劑、潤滑劑等。填 充劑可以是淀粉、微晶纖維素、預膠化淀粉等。潤濕劑可以是水和/或乙醇。粘合劑 可以是聚維酮、淀粉漿、纖維素等。崩解劑可以是交聯聚維酮、CC-Na、淀粉或 CMC-Na等。潤滑劑可以是滑石粉、硬脂酸、硬脂酸鎂鈣、硬脂酸鎂等。在顆粒劑中可以根據需要加入填充劑、潤濕劑、粘合劑等。溶液型液體劑中可以加入防腐劑、矯味劑。糖漿劑中還應加入濃蔗糖水溶液。混懸劑中可以根據需要加入助懸劑、潤濕劑、絮凝劑等。助懸劑可以是阿拉伯 膠、海藻酸鈉、瓊脂、聚維酮、纖維素類、卡波普、丙烯酸鈉。 口服乳劑中可以加入乳化劑、防腐劑、矯味劑等.。本發明的益母革生物堿組合物在制備時所用的益母草藥材必須符合《中國藥 典》2005年版益母草藥材項下的有關規定。上迷的益母草生物堿組合物還可以采用依次用弱酸性陽離子交換樹脂、強酸性 陽離子交換樹脂、中性氧化鋁純化益母草提取液的制備方法獲得。具體的說，上述的益母草生物堿組合物的制備方法，包括以下步驟(1 )弱酸性陽離子交換樹脂純化；將益母草提取液上弱酸性陽離子交換樹脂 柱，用水洗脫至無色，收集水洗液備用；再用2%-5%氨水溶液洗脫，收集氨水洗脫 液，合并，得到洗脫液A;(2)強酸性陽離子交換樹脂純化；將上述備用液酸化至pH值為l-3后上強酸 性陽離子交換樹脂柱，水洗至無色后，棄去；再用2%-5%氨水溶液或氨水:乙醇 (20:80)溶液洗脫，收集洗脫液，合并，得到洗脫液B;(3 )中性氧化鋁柱純化；將上述洗脫液A和洗脫液B合并，調節pH值為中 性，濃縮，干燥，用95%乙醇溶解，過中性氧化鋁柱，用95%乙醇洗脫，收集洗脫 液，濃縮，干燥，即得益母草生物堿組合物。上述的益母草提取液可以通過將益母草藥材采用水提醇沉法或醇提水沉法或 酸水提取法得到的。當然，上述的益母草提取液也可以通過已公開文獻中的罐組式動態逆流提取 法、超臨界提取法、超聲波提取等方法得到。更具體的說，上述的益母草提取液可以采用下述任意一種方法制備(1) 將益母草藥材粉碎，用10-15倍量的60%-95%的乙醇溶液回流提取1-3 次，每次l-2小時，合并提取液，過濾，濾液減壓濃縮至無醇味后，加入水至藥材 溶液為1:1,離心，上清液即為提取液；(2) 將益母草藥材粉碎，用10-15倍量的水煎煮提取1-3次，每次1-2小時， 合并提取液，過濾，濾液減壓濃縮至藥材:溶液為1:1,加入乙醇使得醇濃度為 70%-90%,靜置，過濾，濾液減壓濃縮至藥材:溶液為1:1,靜置，上清液即為提取 液；(3 )將益母草藥材粉碎，用10倍量的酸水煎煮提取1-3次，每次1-2小時， 合并提取液，過濾，濾液減壓濃縮至藥材:溶液為1:1，調pH值為中性后加入乙醇 使醇濃度為70%-90o/。，靜置，過濾，濾液減壓濃縮至藥材:溶液為1:1，離心，上清 液即為提取液；其中的酸水為鹽酸或^E危酸的水溶液，pH值為l-3。上述的弱酸性陽離子交換樹脂可以是南開D151型、南開101型中的一種。上述的強酸性陽離子交換樹脂可以是南開001 x 1型、南開001 x2型、南開001 x3型、南開001 x 14.5型、D151型、D018型、D019型、D020型、YWD12V型、 核亞東732型中的一種。本發明的益母萆生物堿組合物中含有益母草中主要的有效生物堿——益母草 堿和水蘇堿，兩者具有協同增效的作用，因而具有更好的治療作用。本發明的益母草生物堿組合物具有以下的主要藥理作用1、對子宮的作用。 具有較強的子宮興奮作用，能增加子宮的收縮幅度、頻率及張力；2、對心血管的 作用。可以治療心肌缺血再灌注損傷；3、抗血小板聚集作用；4、降低血液翻度和 抗血液凝固作用；5、對腎臟的作用。對急性腎小管壞死有一定的治療作用；6、對 T、 B淋巴細胞的作用，能夠增強機體的細胞免疫功能。本發明的益母草生物堿組合物在臨床上用于月經不調、產后淤痛、心腦血管疾病、血液病等疾病的治療。為了驗證本發明益母草生物堿組合物中的水蘇堿和益母草堿具有協同增效的 作用，本發明研究人員對其進行f對大鼠子宮內膜異位癥影響的藥理學實驗。陽性對照藥為按照文獻[何黎琴，王效山。水蘇堿的合成工藝研究。華西藥學雜 志。2005， 20 ( 1 ): 50-51]中的方法合成水蘇堿，純度為97.4%;按照申^號為 CN02138364.2專利文獻中的方法合成益母草堿，純度為99.2%。本發明藥物為實施 例1-5所迷的組合物。取雌性SD大鼠，隨機分組，每組10只。依次為正常組、模型組、陽性對照 組、本發明l組-5組。除正常組外，其余各組動物擇動情期，建立EMT動物模型。 將大鼠以3 %戊巴比妥鈉40mg/kg腹腔注射麻醉，于下腹正中做一垂直切口 ，挑出 右側子宮角，切除7mm的子宮，于生理鹽水中分離子宮內膜，取3mmx3mm大小 的子宮內膜片，令其表面上皮對著腹壁，將四角與腹壁肌肉縫合，并將右側斷離之 子宮對接縫合，常規關腹消毒，并注射青霉素1萬單位/kg。假手術組僅切除子宮， 并不將其異位。每日按劑量定時灌胃給藥(0.5g/kg),連續給藥1個月后，對大鼠 眼眶后靜脈取血，分離血清，用放射性免疫法測定E2水平，觀察不同益母草總生物 堿對子宮內膜異位癥大鼠性激素E2的影響。結果見表3 。表3益母草生物堿組合物對子宮內膜異位癥大鼠性激素E2的影響組另'J動物數(只)E2 (pg/ml)正常組1013.46 ±8.75模型組1552.38 ±28.66陽性藥物組(水蘇堿)1533.65 ± 17.28*陽性藥物組(益母草堿)1530.50 ± 14.82*本發明1組1517.26 ±9.58**本發明2組1525.43 ± 12.33**本發明3組1518.63 ± 10.26**本發明4組1520.32 ± 11.38**本發明5組1523.74 ± 11.37"注**表示和模型組比較P<0.01。由上述實驗結果可以看出子宮內膜異位癥大鼠的E2有明顯的升高；陽性對照 組和本發明l-5組在給藥l個月后，對于E2的升高均有明顯的降低作用；而且本發 明l-5組對于E2的降4氐作用明顯強于陽性對照組，尤其以本發明l組的效果最好。 說明本發明益母草生物堿組合物中的水蘇堿和益母草堿具有很好的協同增效的作 用，在相同的給藥劑量下藥理效果強于水蘇堿；而且當本發明益母草生物堿組合物 中的水蘇堿和益母草堿的重量份配比為15:1時，效果最好。
具體實施方式
下面用實施例進一步描述本發明，有利于對本發明及其優點、效果更好的了解， 但所述實施例僅用于說明本發明而不是限制本發明。實施例1-5按照文獻[何黎琴，王效山。水蘇堿的合成工藝研究。華西藥學雜志。2005, 20 (1): 50-51]中的方法合成水蘇堿，純度為97.4%。按照申請號為CN02138364.2專 利文獻中的方法合成益母草堿，純度為99.2%。實施例水蘇堿和益母草堿的重量份配比實施例115: 1實施例220: 1實施例316: 1實施例412: 1實施例510: 1實施例6將益母草藥材粉碎，用12倍量的70%的乙醇溶液回流提取3次，每次1.5小時， 合并提取液，過濾，濾液減壓濃縮至無醇味后，加入水至藥材:溶液為1:1,離心， 上清液即為益母草提取液。將益母草提取液上南開D151型弱酸性陽離子交換樹脂柱，用水洗脫至無色， 收集水洗液備用；再用5%氨水溶液洗脫，收集氨水洗脫液，合并，得到洗脫液A。將上述備用液酸化至pH值為1后上南開001 x 2型強酸性陽離子交換樹脂柱， 水洗至無色后，棄去；再用3.5%氨水溶液洗脫，收集洗脫液，合并，得到洗脫液B。將上述洗脫液A和洗脫液B合并，調節pH值為中性，濃縮，千燥，用95%乙 醇溶解，過中性氧化鋁柱，用95%乙醇洗脫，收集洗脫液，濃縮，即得。
權利要求
1. 一種益母草生物堿組合物，其特征在于，其中的水蘇堿和益母草堿的重量份比為10-20∶1。
2、 根據權利要求1所述的益母草生物堿組合物，其特征在于，其中的水蘇堿 和益母草堿的重量份比為12-16:1。
3、 根據權利要求2所述的益母草生物堿組合物，其特征在于，其中的水蘇堿 和益母草堿的重量份比為15:1。
4、 根據權利要求1-3之一所述的益母草生物堿組合物，其特征在于，可以制 備成口服制劑和注射制劑；其中口服制劑包括片劑、膠囊劑、丸劑、糖漿劑、顆粒 劑、口服溶液劑、口服混懸劑或口服乳劑，注射制劑包括小容量注射劑、大容量注 射劑、粉針劑和凍干粉針劑。
5、 根據權利要求所述的益母草生物堿組合物，其特征在于，所述的藥物制劑 中還含有藥學上可以接受的藥用輔料。
全文摘要
本發明屬于制藥技術領域，具體公開了一種益母草生物堿組合物，其中的水蘇堿和益母草堿的重量份比為10-20∶1，兩者具有協同增效的作用，具有更好的藥理效果。
文檔編號A61P13/12GK101244060SQ200710080240
公開日2008年8月20日 申請日期2007年2月15日 優先權日2007年2月15日
發明者魏海關 申請人:北京天新園醫藥科技開發有限公司