專利名稱：一種治療類風濕性關節炎的藥物組合物及其制備方法和用途的制作方法
技術領域：
本發明涉及ー種治療類風濕性關節炎的藥物組合物其制備方法和用途，屬于藥物領域。
背景技術：
類風濕關節炎(Rheumatiod Arthritis,簡稱RA)是ー種常見的以慢性多關節炎病變為主要表現的全身性免疫性疾病，全世界共有上億病人。據統計，RA國外的患病率為I 2%，個別地區高達5% ;我國發病率約為O. 74%，現有病人1000萬人左右。據調查表明，在正常人群中，類風濕性關節炎的發病率占正常人群的O. 35%左右。本病致殘率高，未及時診治的類風濕性關節炎患者ニ年致殘率50%，三年致殘率達70%。而已經患類風濕性關節炎的患者，平均壽命縮短10 15年，所以RA嚴重影響勞動能力，研制RA的治療藥物，對于緩解該類疾病的臨床癥狀，提高病人的生存質量，保障生產力，具有積極的意義。藏藥翼首草，為川續斷科植物匙葉翼首草Pterocephalus hookeri (C. B. Clarke)Hoeck的干燥全草，具有清熱解毒、祛風濕、止痛功效。翼首草為藏醫常用藏藥，又名“榜姿毒烏”，為藏藥特征明顯的典型民族藥物，用藥歷史悠久，藏醫歷來將其主要用于治療風濕性等疾病，除藏醫及其密切相關的蒙醫外，中醫藥和其它傳統醫藥基本沒有應用翼首草的歷史。在藏醫藥理論指導下，以翼首草的臨床應用為依據，對翼首草提取物抗風濕性關節炎作用及機理進行了試驗研究，結果表明翼首草提取物抗RA作用是肯定的，對于實驗性佐劑關節炎動物模型原發性炎癥及繼發性關節炎均有較好的抗炎效果，井能減輕滑膜的病理改變，同時也有明顯的鎮痛作用，這與藏醫臨床以翼首草治療風濕、類風濕關節炎應用相吻合。(沈芄，藏藥翼首草抗類風濕性關節炎作用與機理研究，成都中醫藥大學，2002年.)對翼首草的化學成分研究表明，翼首草中主要含有齊墩果烷型三萜類皂苷、環烯醚萜苷類化合物、生物堿、多糖等成分。對翼首草有效成分的研究表明，采用大鼠急性足腫脹實驗、小鼠棉球肉芽腫實驗、小鼠急性耳腫脹實驗和小鼠急性滲出實驗等方法，證明了翼首草正丁醇部位總皂苷提取物具有顯著的抗炎活性[關昕璐，等.翼首草的抗炎作用與急毒實驗研究.北京中醫藥大學學報.2004，27 (2) :71 73]。翼首草中環烯醚萜苷類的主要成分馬錢素，具有明顯的抗炎藥理作用，但其結構類似物具有免疫增強作用。[龐偉.藏藥翼首草的研究與應用.中國民族醫藥雜志.2007，(5) :63-65]。專利申請號200910196870.X，該發明中提供了翼首草總皂苷提取物有效部位提取物，其主要成分為齊墩果烷型五環三萜皂苷，總皂苷提取物含量50-90 %，該總皂苷提取物能顯著抑制腫瘤細胞増殖，該總皂苷提取物中直接采用大孔樹脂分離得到，提取物中含有環烯醚萜苷。綜合現有文獻可知，目前僅有翼首草中總皂苷提取物及馬錢素具有抗炎鎮痛作用、以及總皂苷提取物抗腫瘤的報道，還未見將翼首草總皂苷提取物和環烯醚萜苷聯合使用治療類風濕性關節炎的報道
發明內容
本發明的目的在于提供一種治療類風濕性關節炎的藥物組合物及其制備方法。本發明提供了一種治療類風濕性關節炎的藥物組合物，它是由翼首草總皂苷提取物和總環烯醚萜苷提取物為活性成分制備而成的制劑，其中，所述的總皂苷提取物、總環烯醚萜苷提取物的重量配比為總皂苷提取物1-10份、總環烯醚萜苷提取物1-10份。其中，所述的總皂苷提取物、總環烯醚萜苷提取物的重量配比為總皂苷提取物10份、總環烯醚萜苷提取物I份；或總皂苷提取物5份、總環烯醚萜苷提取物5份。進一步地，所述翼首草總皂苷提取物中，皂苷含量大于50% w/w ;所述翼首草總環烯醚職苷提取物中，環烯醚職苷含量大于50% w/w。更進一步地，所述翼首草總皂苷提取物中，皂苷含量大于80% w/w，優選為80-90% w/w ;所述翼首草總環烯醚職苷提取物中，環烯醚職苷含量大于80% w/w,優選為80-90% w/w。其中，所述翼首草為川續斷科植物匙葉翼首草Pterocephalus hookeri (C.B. Clarke)Hoeck的干燥全草。本發明還提供了一種制備上述藥物組合物的方法，它包括如下步驟(I)制備翼首草總皂苷提取物a、取翼首草，加水提取，濾過，濾液濃縮后，采用非極性或弱極性大孔吸附樹脂純化,先以水洗去雜質后,棄去洗脫液；以60-85%乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液后；b、取步驟a的乙醇洗脫液，減壓回收溶劑后，加入醋酸鉛溶液，攪拌，濾過，濾液備用，取沉淀，脫鉛后，干燥，即得翼首草總皂苷提取物；(2)制備翼首草總環烯醚萜苷提取物取步驟b中加入醋酸鉛溶液后的濾液，濃縮后，用正丁醇萃取，取正丁醇液，回收溶劑后，干燥，即得翼首草總環烯醚萜苷提取物；(3)藥物組合物的制備按處方配比稱取翼首草總皂苷提取物和總環烯醚萜苷提取物，加入藥學上常用的輔料制備成制劑。其中，步驟a中選用D101、AB-8或HPD-300型大孔吸附樹脂；以65-75% v/v乙醇洗脫；步驟b中，取步驟a的乙醇洗脫液，減壓回收溶劑后，復溶于30-95% v/v乙醇中，力口入飽和中性醋酸鉛溶液，攪拌，濾過，濾液備用，取沉淀，懸浮于30-95% v/v乙醇中，用硫化氫氣體或陽離子交換樹脂脫鉛，過濾，取濾液濃縮，干燥，即得翼首草總皂苷提取物。進一步地,步驟a中選用DlOl型大孔吸附樹脂；以70% v/v乙醇洗脫；步驟b中，乙醇濃度為60-85% v/v。更進一步地,步驟b中，乙醇濃度優選為65-75% v/v。更進一步地，步驟a中大孔吸附樹脂純化的具體操作步驟如下將上樣液的濃度配制為O. 1-0. 2g生藥/ml，采用DlOl型大孔吸附樹脂純化，上樣流速為l_3BV/h，上樣量以藥材計為藥材樹脂=(O. 5-1. 5) I w/w,以3-5BV水洗脫，流速為l_3BV/h，棄去洗脫液；以2-4BV的70%乙醇洗脫，洗脫流速為2_4BV/h。
進ー步優選地，將上樣液的濃度配制為O. Ig生藥/ml藥液，采用DlOl型大孔吸附樹脂室溫下純化，上樣流速為2BV/h，上樣量以藥材計為藥材樹脂=I : 1，以4BV水洗脫，流速為2BV/h，棄去洗脫液；以3BV的70%こ醇洗脫，洗脫流速為3BV/h。本發明還提供了上述藥 物組合物在制備抗炎、鎮痛或治療類風濕性關節炎的藥物中的用途。本發明藥物組合物，將翼首草總皂苷提取物和總環烯醚萜苷提取物配伍使用，其抗炎抗類風濕作用強于各單ー提取物，具有協同增效作用，尤其以翼首草總皂苷提取物翼首草總環烯醚萜苷提取物(10 I)作用最佳，療效更穩定，為臨床用藥提供了新的選擇。顯然，根據本發明的上述內容，按照本領域的普通技術知識和慣用手段，在不脫離本發明上述基本技術思想前提下，還可以做出其它多種形式的修改、替換或變更。以下通過實施例形式的具體實施方式
，對本發明的上述內容再作進ー步的詳細說明。但不應將此理解為本發明上述主題的范圍僅限于以下的實例。凡基于本發明上述內容所實現的技術均屬于本發明的范圍。


圖IAA大鼠后肢原發性腫脹癥狀，左為正常對照組，右為模型對照組；圖2AA大鼠前肢繼發性腫脹癥狀，左為正常對照組，右為模型對照組。
具體實施例方式實施例I本發明翼首草總皂苷提取物的制備取翼首草原藥材IOOOg切段，加1600ml水潤濕，再用6000ml水煎煮提取2次，每次I. 5h，濾過，濾液濃縮后，離心除去沉淀，水提物稀釋至O. Ig生藥/ml藥液，采用DlOl型大孔吸附樹脂室溫下上樣，上樣流速為2BV/h，上樣量為樹脂用量的I倍(藥材樹脂=I I)，以4BV水洗脫，流速為2BV/h，棄去洗脫液；以3BV的70 % v/vこ醇洗脫，洗脫流速為3BV/h，洗脫液減壓回收こ醇，溶于60% v/vこ醇中，加入過量飽和的中性醋酸鉛溶液,攪拌，使得翼首草總皂苷提取物完全沉淀，濾過，取沉淀懸浮于70% v/vこ醇中，通入過量硫化氫氣體脫鉛，濾過，取濾液再通入空氣脫去硫化氫氣體，減壓回收こ醇至稠膏狀，干燥，即得總皂苷提取物。以齊墩果酸為對照品，采用比色法測定提取物中總皂苷提取物含量，結果見表I。表I
樣品號_I_2_3 .
總皂苷提取物含量占浸膏的比例 84.44 88. 73 82.69(%) _翼首草總皂苷提取物中，皂苷含量以齊墩果酸計，不應低于50% w/w，本發明中選用皂苷含量不低于80% w/w的翼首草總皂苷提取物。同時，未檢測到翼首草總皂苷提取物中含有環烯醚萜苷，以中藥新藥研究指南中“對空白試驗干擾允許在5%以下”的規定，設定翼首草總皂苷提取物中總環烯醚萜苷提取物含量為0-5% w/w。實施例2本發明翼首草總環烯醚萜苷提取物的制備
取翼首草原藥材IOOOg切段，加1600ml水潤濕，再加6000ml水煎煮提取2次，每次I. 5h，濾過，濾液濃縮，離心除去沉淀，水提物稀釋至O. Ig生藥/ml藥液，采用DlOl型大孔吸附樹脂室溫下上樣，上樣流速為2BV/h，上樣量為樹脂用量的I倍(藥材樹脂=1:1)，以4BV水洗脫，流速為2BV/h，棄去洗脫液；以3BV的70 %乙醇洗脫，洗脫流速為3BV/h，洗脫液減壓回收乙醇，溶于80% v/v乙醇中，加入過量飽和的中性醋酸鉛溶液，攪拌，使得翼首草總皂苷提取物完全沉淀，濾過，取濾液，減壓回收乙醇至稠膏狀，加水溶解，正丁醇萃取三次，取正丁醇液，減壓回收溶劑至稠膏狀，干燥，即得總環烯醚萜苷提取物。
以馬錢苷為對照品，采用比色法測定提取物中總環烯醚萜苷提取物的含量，結果見表2。表權利要求
1.一種治療類風濕性關節炎的藥物組合物，其特征在于它是由翼首草總皂苷提取物和總環烯醚萜苷提取物為活性成分制備而成的制劑，其中，所述的總皂苷提取物、總環烯醚萜苷提取物的重量配比為 總皂苷提取物1-10份、總環烯醚萜苷提取物1-10份。
2.根據權利要求I所述的藥物組合物，其特征在于所述的總皂苷提取物、總環烯醚萜苷提取物的重量配比為 總皂苷提取物10份、總環烯醚萜苷提取物I份；或總皂苷提取物5份、總環烯醚萜苷提取物5份。
3.根據權利要求I或2所述的藥物組合物，其特征在于所述翼首草總皂苷提取物中，皂苷含量大于50% w/w ;所述翼首草總環烯醚萜苷提取物中，總環烯醚萜苷提取物含量大于 50% w/w。
4.根據權利要求3所述的藥物組合物，其特征在于所述翼首草總皂苷提取物中，皂苷含量大于80% w/w ;所述翼首草總環烯醚職苷提取物中，環烯醚職苷含量大于80% w/w。
5.根據權利要求1-4任意一項所述的藥物組合物，其特征在于所述翼首草為川續斷科植物匙葉翼首草Pterocephalus hookeri (C. B. Clarke) Hoeck的干燥全草。
6.一種制備權利要求1-5任意一項所述的藥物組合物的方法，它包括如下步驟 (1)制備翼首草總皂苷提取物 a、取翼首草，加水提取，濾過，濾液濃縮后，采用非極性或弱極性大孔吸附樹脂純化，先以水洗去雜質后,棄去洗脫液；以60-85%乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液后； b、取步驟a的乙醇洗脫液，減壓回收溶劑后，加入醋酸鉛溶液，攪拌，濾過，濾液備用，取沉淀，脫鉛后，干燥，即得翼首草總皂苷提取物； (2)制備翼首草總環烯醚萜苷提取物 取步驟b中加入醋酸鉛溶液后的濾液，濃縮后，用正丁醇萃取，取正丁醇液，回收溶劑后，干燥，即得翼首草總環烯醚萜苷提取物； (3)藥物組合物的制備 按處方配比稱取翼首草總皂苷提取物和總環烯醚萜苷提取物，加入藥學上常用的輔料制備成制劑。
7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于步驟a中選用D101、AB-8或HPD-300型大孔吸附樹脂；以65-75% v/v乙醇洗脫；步驟b中，取步驟a的乙醇洗脫液，減壓回收溶劑后，復溶于30-95% v/v乙醇中，加入飽和中性醋酸鉛溶液，攪拌，濾過，濾液備用，取沉淀，懸浮于30-95% v/v乙醇中，用硫化氫氣體或陽離子交換樹脂脫鉛，過濾，取濾液濃縮，干燥，即得翼首草總皂苷提取物。
8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于步驟a中選用DlOl型大孔吸附樹脂；以70% v/v乙醇洗脫；步驟b中，乙醇濃度為60-85% v/v。
9.根據權利要求6-8任意一項所述的方法，其特征在于步驟a中大孔吸附樹脂純化的具體操作步驟如下 將上樣液的濃度配制為O. 1-0. 2g生藥/ml，采用DlOl型大孔吸附樹脂純化，上樣流速為l_3BV/h，上樣量以藥材計為藥材樹脂=(O. 5-1. 5) I w/w,以3-5BV水洗脫，流速為l-3BV/h，棄去洗脫液；以2-4BV的70%乙醇洗脫，洗脫流速為2_4BV/h。
10.權利要求1-5任意一項所述的藥物組合物在制備抗炎、鎮痛或治療類風濕性關節炎的藥物中的用途。
全文摘要
本發明提供了一種治療類風濕性關節炎的藥物組合物，它是由翼首草總皂苷提取物和總環烯醚萜苷提取物為活性成分制備而成的制劑，其中，所述的總皂苷提取物、總環烯醚萜苷提取物的重量配比為總皂苷提取物1-10份、總環烯醚萜苷提取物1-10份。本發明還提供了該藥物組合物的制備方法和用途。本發明藥物組合物，將翼首草總皂苷提取物和總環烯醚萜苷提取物配伍使用，其抗炎抗類風濕作用強于各單一提取物，具有協同增效作用，療效肯定，為臨床用藥提供了新的選擇。
文檔編號A61P19/02GK102614230SQ20121006116
公開日2012年8月1日 申請日期2012年3月9日 優先權日2011年3月9日
發明者古銳, 孟憲麗, 張藝, 賴先榮 申請人:成都中醫藥大學