專利名稱：一種復方阿替洛爾納米乳抗高血壓藥物的制作方法
技術領域：
本發明屬于醫藥領域，涉及一種抗高血壓藥物阿替洛爾的新劑型，特別涉及一種復方阿替洛爾納米乳抗高血壓藥物。

背景技術：
阿替洛爾(Atenolol)，分子式=C14H22N2O3,分子量266. 34。本品為心臟選擇性β_受體阻斷劑，無膜穩定作用，無內源性擬交感活性。一般用于竇性心動過速及早搏等，也可用于高血壓、心絞痛及青光眼。阿替洛爾有腎上腺素β受體部位競爭性地抑制兒茶酚胺的作用，但主要使β I受體的活動處于抑制狀態。通過減弱或防止β受體興奮而使心臟的收縮力與收縮速度下降，通過傳導系統的傳導速度減慢，使心臟對運動或應激的反應減弱。因此，用于心絞痛的治療，減低心肌氧耗，增加運動耐量。由于阻滯心臟起搏點電位的腎上腺素能興奮故用于治療心律失常?？赡鼙酒吠ㄟ^中樞、腎上腺素能神經元阻滯、抗腎素活性以及心排血量減低等降低血壓，適用于治療高血壓。由于本品能拮抗兒茶酚胺效應，也用于治療嗜鉻細胞瘤及甲狀腺機能亢進，使β 和β2受體的活動均處于抑制狀態。阿替洛爾為長效、選擇性β I腎上腺素受體阻滯藥，其心臟選擇性作用明顯強于美托洛爾，而對血管及支氣管平滑肌的β 2受體抑制較弱。無內源性擬交感活性，無膜穩定性，也無抑制心肌收縮力的作用。本品可降低高血壓患者的血壓，減輕由運動所致的血壓增高。同時，通過減低心率(8% 34%)和心率、血壓乘積(9% 40% )，減少心絞痛發作的嚴重程度和頻率，改善急性心肌梗死患者的耗氧指數。因此早期應用該藥可縮小心肌梗死面積和預防再梗死，長期應用可降低心肌梗死或卒中的死亡率?，F在市場上已有如阿替洛爾片劑的降壓藥物，雖然口服后能從胃腸道吸收，但吸收速度慢、吸收不完全，另外片劑中藥物的溶出速率慢，生物利用度差，再加上阿替洛爾本身作用緩慢，使得阿替洛爾的藥效無法迅速得到利用。

發明內容
針對現有技術中存在的缺陷與不足，本發明的目的在于提供一種分布均勻，穩定性好，生物利用度高，療效顯著的復方阿替洛爾納米乳抗高血壓藥物。實現上述發明目的的技術方案是一種復方阿替洛爾納米乳抗高血壓藥物，各原料及其質量百分比為
阿替洛爾1% 15%
表面活性劑5% 35%
助表面活性劑1% 20%
油1% 20%
杜仲水提物O. 5% 10%牡丹皮水提物O. 5 % 10 %
其余成分為蒸餾水，上述原料的質量百分比之和為100%。本發明選用的杜仲，甘微辛，溫。①《本經》“味辛，平?！雹凇秳e錄》“甘，溫，無毒。”③《藥性論》味苦?！比敫巍⒛I經。①王好古“肝經氣分?！雹凇独坠谥扑幮越狻啡肽I經?！雹邸侗静萁浗狻贰叭胧痔幏谓?。”
杜仲的皮、葉、枝條、果實和花中含有的成分大致可分為以下幾類
木脂素類(Iignans)杜仲膏包括松脂醇二葡萄糖苷(pinoresinol diglucoside)這一主要降壓成分、丁香脂醇二葡萄糖昔、橄欖脂素、吉尼波西狄克酸甲脂(geniposidicacid methylester)、兒茶素-(7,8_b, c) _4 α -(3,4_ 二輕苯基)-α -(3Η)卩比喃糖、兒茶素-(7，8-13，(3) -4 0-(3，4-二羥苯基)-(1-(3 )吡喃糖等，迄今為止，從杜仲中已分離出木脂素類化合物27種，其中許多有效成分在抗腫瘤方面具有很好的活性。苯丙素類化合物(penylpropanoids):包括香豆酸(coumaric)、咖啡酸乙酯(caffeic acid ethylester)、綠原酸(chlorogenic-acid)、松柏苷(syringin)。迄今為止，杜仲中發現苯丙素類化合物有11種。環烯醚職類(iridoids):杜仲醇(encommiol)、杜仲醇苷(encommio-side)、京尼平(genipin)、京尼平苷酸(geniposidic acid)、京尼平苷(geniposide)、桃葉珊瑚苷(aucubin)、筋骨草苷(ajugoside)、哈帕苷丁酸酯(harpagide acetate)、雷撲妥苷(reptoside)、車葉草酸、去乙酰車葉草酸、10 —乙酰雞屎藤苷、表杜仲醇。到目前為止，從杜仲中分離的環烯醚萜類化合物共15個。
黃酮類黃酮類化合物也是杜仲的主要有效成分之一，其含量的高低是判斷杜仲生藥及其產品質量的重要指標，對杜仲黃酮類化合物的報道多見于含量測定和分離提取工藝的研究。經研究發現杜仲中所含黃酮類化合物主要為山奈酚(kaempfeiOl)、槲皮素(quercetin)、紫云英苷(astragal in)、陸地錦苷(hirsutin)、蘆丁(rutin)。杜仲水提物的藥理作用
I.降壓作用樹皮的提取物及煎劑對動物有持久的降壓作用。用其浸膏5毫升(生藥I 2克)給麻醉犬靜脈注射后產生顯著的降壓作用，可持續2 3小時，呈〃快速耐受〃現象。在3只腎型高血壓狗，每天以煎劑5 8克/公斤灌胃，共4周，收縮壓降低最多時只有8 22毫米汞柱(4 10%)，因此療效不夠滿意。杜仲的炮制與劑型對降壓作用有一定影響，煎劑作用強于酊劑，炒杜仲的降壓作用較生杜仲為大。杜仲對貓有降壓作用，但持續較短，〃快速耐受〃現象不顯著。對膽留醇動脈硬化家兔之降壓作用較對正常家兔更為顯著，但亦能產生〃快速耐受〃。至于降壓原理，因尚未確定有效成分，故屬于初步性質，已證明急性降壓與迷走神經無大關系，亦不受阿托品之影響。對離體兔心，杜仲小量時先興奮，后略呈抑制；也有報告其對心臟的抑制作用與其pH有關(pH在4 5之間)，經調整后，對大鼠與家兔離體心臟皆呈興奮作用。杜仲對正常兔耳血管有直接擴張作用，但同樣濃度卻使實驗性膽留醇動脈硬化兔耳血管呈收縮作用，對正常家兔的冠狀血管與腎血管在低濃度時多呈擴張作用，高濃度時則相反，對動脈硬化家兔的冠狀血管在低濃度時亦呈收縮作用。因其降壓與心及血管的直接關系不大，故推論其為中樞性者。
2.利尿作用杜仲的各種制劑對麻醉犬均有利尿作用，且無“快速耐受”現象。對正常大鼠、小鼠亦有利尿作用。杜仲中含鉀0. 4%，故推論利尿可能與鉀有關。牡丹皮，為毛茛科植物牡丹干燥根皮?！侗静菥V目》滋陰降火，解斑毒，利咽喉，通小便血滯。后人乃專以黃蘗治相火，不知丹皮之功更勝也。赤花者利，白花者補，人亦罕悟，宜分別之。”現代研究，所含牡丹酚及其以外的糖苷類成分均有抗炎作用；牡丹皮的甲醇提取物有抑制血小板作用；牡丹酚有鎮靜、降溫、解熱、鎮痛、解痙等中樞抑制作用及抗動脈粥樣硬化、利尿、抗潰瘍等作用。性味歸經性寒，味苦；涼；微寒。歸心；肝；腎；肺經。味苦、辛，微寒。歸心、肝、腎經。鮮根含牡丹酹原式(paeonolide)約5% 6%，但在干燥及忙藏過程中易酶解成牡丹酹式(paeonoside)和一分子L-阿拉伯糖；根皮還含牡丹酹、茍藥式(paeonifolorin)輕基芍藥甙、苯甲酰芍藥甙及苯甲酰羥基芍藥甙、揮發油，以及苯甲酸、植物留醇、蔗糖、葡萄糖、阿拉伯糖等.
對心血管系統的作用靜脈注射牡丹皮提取物對犬冠脈結扎所致心肌缺血有明顯保護作用.煎劑、去牡丹酚煎劑或牡丹酚靜脈注射，對麻醉狗及大鼠均有降壓作用；煎劑、去牡丹酚煎劑或牡丹酚灌胃，對實驗性高血壓狗給藥I周后血壓顯著下降，可維持I 3周.牡丹皮在體外有顯著的抗凝血作用，對內毒素、ADP和膠原誘導的大鼠及人的血小板聚集均有顯著抑制作用。牡丹皮對麻醉犬心能增加冠脈血流量，減少心輸出量，降低左室作功的作用。對實驗性心肌缺血有明顯保護作用，并且持續時間較長，同時降低心肌耗氧量。丹皮煎劑，去牡丹酚后的煎劑I. O 3. 0g/kg或牡丹酚80 120mg/kg靜脈注射，對麻醉犬和大鼠均有降壓作用。原發和腎型高血壓犬，用牡丹皮煎劑5g/kg灌胃，連續5天，于第6天，第7天劑量增至10g/kg，血壓明顯下降。腎型高血壓犬，用去牡丹酚后的煎劑10g/kg灌胃，連續10天血壓下降。用牡丹酚0.5 I. 0g/kg給腎型高血壓犬和大鼠也出現一定的降壓效果。牡丹酚能顯著抑制正常心肌細胞快相(5分鐘)和慢相(120分鐘)45Ca攝取及搏動頻率，顯著抑制鈣反常心肌細胞45Ca攝取和降低胞內過氧化脂質含量，且呈劑量依賴性，表明牡丹酚減輕鈣反常損傷與阻止Ca2+內流及抗氧化有關。牡丹酚磺酸鈉除能抑制鈣離子攝取外，且能顯著抑制鈣反常心肌細胞的45Ca攝取及其胞膜SA含量，與劑量呈相關關系。另用食餌性動脈粥樣硬化模型，研究牡丹酚的抗動脈粥樣硬化作用。結果造型加牡丹酚組主動脈內膜病變肉眼定級及形態學組化分析，均比造型對照組顯著減輕。表明腹腔注射牡丹酚IOOmg/kg · d，連續6周能明顯抑制動脈粥樣硬化斑塊形成。本發明選用的表面活性劑是非離子表面活性劑聚氧乙烯醚-40氫化蓖麻油(Cremophor RH 40),蓖麻油聚氧乙烯醚40 (EL40)、吐溫80或泊洛沙姆188中的任意一種或任意一種與span80的混合物。這些表面活性劑對人體低毒、安全、無刺激。本發明選用的油是大豆油、菜籽油、三乙酸甘油酯、棕櫚酸異辛酯、油酸、油酸乙酯、肉豆蘧酸異丙酯(IPM)或乙酸乙酯等可食用油類中的任意一種或幾種的混合物。安全、
母O為了達到更好的效果，本發明在上述表面活性劑中加入助表面活性劑無水乙醇、 1，2-丙二醇、丙三醇、聚乙二醇200 (PEG200)、聚乙二醇400 (PEG400)或聚乙二醇600(PEG600 )中的任意一種，或幾種的混合物。本發明中助表面活性劑在復方阿替洛爾納米乳的構建中同樣是很好的藥物助溶齊U，本發明在藥物中加入刺激性小的助表面如乙醇、1，2-丙二醇、丙三醇或聚乙二醇200，聚乙二醇400，聚乙二醇600，除了助溶作用外，助表面活性劑主要是為了調整表面活性劑的親水親油平衡值(HLB)，使得油水界面張力進一步降低，增大界膜的油水性和剛性。助表面活性劑摻入到界面膜中，促進曲率半徑很小膜的形成，擴大復方阿替洛爾納米乳的乳區面積。本發明的復方阿替洛爾納米乳，一方面極大的提高了阿替洛爾的溶解度，減少了 藥物在體內的首過效應，促進藥物的胃腸道吸收。阿替洛爾是BCS 二類藥物，在水中極難溶解，使藥物的轉運及吸收變得困難，納米乳基質為阿替洛爾提供了良好的溶解環境?？诜r可經淋巴吸收，克服首過效應和分子通過胃腸道時的屏障；另一方面通過復配杜仲水提物及牡丹皮水提物，使得本藥物降壓更平穩，效果更持久。本發明的復方阿替洛爾納米乳與現有技術相比，具有以下優點
I.本發明的阿替洛爾抗高血壓納米乳的藥物粒徑在10. I 50. 7nm之間，平均粒徑為22. 89 nm，是將阿替洛爾溶于油相，加入表面活性劑和助表面活性劑，用溶解杜仲水提物及牡丹皮水提物的蒸餾水滴定到均勻、透明的納米乳體系。形成的復方阿替洛爾納米乳含阿替洛爾達8. 1%。2.本發明的阿替洛爾抗高血壓納米乳分布均勻，體系透明、穩定性好，有較低的表面張力，油包水型納米乳具有良好的流動性。3.本發明的阿替洛爾抗高血壓納米乳給藥后迅速被網狀內皮細胞吞噬，使藥物迅速起效，并維持恒定的血藥濃度及藥理效應，提高藥物的生物利用度，減少藥物的用量和使用次數。4.本發明的阿替洛爾抗高血壓納米乳通過中西藥結合，發揮兩者優點，一方面降壓迅速、起效快，另一剛面藥效穩定、作用持久，符合高效安全的治療標準。5.本發明的阿替洛爾抗高血壓納米乳藥效穩定，生耗能低。6.本發明制成納米乳后可制成口服液直接服用、也可經膠囊包封或經凍干粉技術等處理。


圖I為本發明復方阿替洛爾納米乳電鏡照片。圖2為本發明復方阿替洛爾納米乳粒徑分析曲線圖。
具體實施例方式發明人給出具體制備方法實施例及使用藥效試驗來進一步說明本發明藥物的效
果O試驗例I本發明復方阿替洛爾納米乳抗高血壓藥物粒徑大小分析
本發明的最優配比經透射電子顯微鏡檢測(圖1)，液滴呈類球形，分散性好，無粘連；經馬爾文粒度分析儀檢測(圖2)其直徑分布在17. I 60. Inm之間，平均粒徑為42. 3nm。試驗例2本發明復方阿替洛爾納米乳抗高血壓藥物穩定性分析
通過以下離心試驗、光穩定性試驗、溫度穩定性試驗等觀察本發明復方阿替洛爾納米乳抗高血壓藥物的穩定性，觀察本發明是否有分層、渾濁或晶體析出等不穩定現象。I.高速離心試驗
取適量制備好的本發明復方阿替洛爾納米乳抗高血壓藥物于離心管中，以10 OOOr/min的轉速離心15 min,離心試驗后,本發明復方阿替洛爾納米乳抗高血壓藥物依然保持離心前的澄清透明，未見分層、渾濁或晶體析出等不穩定現象。2.光穩定性試驗
將適量制備好的復方阿替洛爾納米乳抗高血壓藥物裝入透明好的無色、透明玻璃瓶中，密封，放置于正常光照條件下10d，分別于ld、2d、4d、6d、8d、10d取樣觀察。結果表明復方阿替洛爾納米乳抗高血壓藥物每份樣品均保持澄清透明，未見分層、渾濁或晶體析出等不穩定現象。3.溫度穩定性試驗
將適量制備好的復方阿替洛爾納米乳抗高血壓藥物裝入透明好的無色、透明玻璃瓶中，密封，放置于4°C、室溫(25°C)和40°C三中溫度條件下留樣考察各30d，每隔5d取樣觀察。結果表明，復方阿替洛爾納米乳抗高血壓藥物在此三種溫度條件下均保持澄清透明，未見分層、渾濁或晶體析出等不穩定現象。4.長期穩定性試驗
將3批納米乳密封于棕色玻璃瓶內，置于(25±2)°C、相對濕度(60±5)%條件下12個月，分別于0、3、6、9和12個月時取樣，考察納米乳的性狀及含量變化，并參考文獻統計分析方法，計算復方阿替洛爾納米乳抗高血壓藥物的有效期。試驗結果表明在長期試驗條件下，復方阿替洛爾納米乳抗高血壓藥物的外觀一直保持澄明、均一，未見分層、色變、絮凝和破乳等現象；體系中的阿替洛爾含量隨時間延長而逐漸降低，其含量一時間變化曲線提供的線性回歸方程，計算出復方阿替洛爾納米乳抗高血壓藥物的有效期為32. 7個月。試驗例3大鼠尾部測壓法測定復方阿替洛爾納米乳抗高血壓藥物的藥效(與市售阿替洛爾片對比)
SHR大鼠3只隨機分為3組，每組10只，分別設為SHR陽性對照組、阿替洛爾片組、復方阿替洛爾納米乳組分別給予阿替洛爾片溶液、復方阿替洛爾納米乳各20 mg/kgd，溶于飲水中，均從飲水中給藥，I次/d，連續14周。WKY6只為正常對照組，對照組不給藥物，飲水不限。測量各組大鼠尾動脈血壓。鼠齡為6周時(即用藥前)測壓I次，鼠齡7周(用藥后I周)測壓I次，以后每隔兩周測I次血壓，直到實驗結束。結果見表I。表I各組大鼠SBP的比較(x±s , η = 6)_
組另Il_收縮壓(mmHg)
雨7性對照Τ00Γ2±10. 3
雨舂洛爾片142. 7± 11. 5
復方阿替洛爾納米乳—132. 3 ±10.1—
正常對照組|l23. 6±9. 7
結果顯示，復方阿替洛爾納米乳與陽性對照組和阿替洛爾片比較，差異均極顯著，表明
阿替洛爾不但能顯著降低陽性大鼠的血壓，而且降壓效果與阿替洛爾片劑相比效果更好。試驗例4毒性試驗
I.毒理研究項目及結論本發明產品嚴格按照新藥非臨床安全性評價方法與市售阿替洛爾片劑對比進行了急性毒性試驗，重復給藥毒性試驗、遺傳毒性試驗(包括Ames試驗、小鼠骨髓微核試驗、體外培養哺乳動物細胞染色體突變試驗)、生殖毒性試驗(一般生殖毒性試驗、致畸敏感期毒性試驗、圍產期毒性試驗)、致癌試驗、免疫毒性試驗和局部刺激性試驗，試驗結果如下。本品對小鼠急性毒性實驗結論與市售阿替洛爾片劑對比，復方阿替洛爾納米乳未出現劑量內不良反應及死亡。
本發明產品的Ames試驗、小鼠精子畸形試驗和睪丸染色體畸變試驗等遺傳毒性試驗的結果均為陰性。大鼠30d喂養本發明產品的結果表明與市售阿替洛爾片劑對比，在試驗期內，復方阿替洛爾納米乳劑量內各實驗組動物生長發育良好，體重、攝食量、血常規、血生化、臟器系數等指標均在正常范圍內，病理組織學檢查亦未見異常。本品長期毒性實驗結論與市售阿替洛爾片劑對比，在試驗期內，復方阿替洛爾納米乳劑量內，本藥品在連續灌胃給藥三個月未見大鼠不良反應，各項檢查指標均在正常范圍內，病理檢查其主要臟器及靶器官均未見該藥引起的中毒性病理改變。試驗例5藥物動力學
試驗結果表明，復方阿替洛爾納米乳抗高血壓藥物口服吸收好，口服后吸收率達82%，血藥達峰時間為4h。生物利用度約91%，血漿蛋白結合率約76%。體內分布廣泛，能進入腦部，能迅速透過胎盤。腎功能正常的成年患者消除半減期約7h。腎功能異常者清除率降低，主要與腎小球濾過率有關。實施例I
精確稱取EL40 18g，乙酸乙酯10g，阿替洛爾8. lg，1，2-丙二醇15g在室溫(25°C )條件下攪拌均勻，然后向其中緩慢滴入已溶解杜仲水提物及牡丹皮水提物的蒸餾水。隨著蒸餾水量的增加，體系黏稠度增大，當蒸餾水量使得體系由油包水變為水包油型納米乳時，體系粘稠度從最粘稠的狀態變稀，此時產生的是無色透明的復方阿替洛爾納米乳，杜仲水提物6. lg，牡丹皮水提物4. Sg，余量為水。此實施例為復方阿替洛爾納米乳的最佳配比。以下實施例步驟同實施例I :
實施例2
阿替洛爾7g，吐溫80 28g，肉豆蘧酸異丙酯12g，乙醇12g，杜仲水提物5g，牡丹皮水提物4g，余量為水32 g。實施例3
RH40 28g，油酸10g，阿替洛爾8g，PEG400 3g，杜仲水提物5g，牡丹皮水提物7g，蒸餾水
39g0實施例4
EL40氫化蓖麻油30g，油酸乙酯7g，阿替洛爾6g，丙三醇3g，杜仲水提物3. 5g，牡丹皮水提物6. 5g，蒸餾水44g。實施例5
泊洛沙姆188 25g，肉豆蘧酸異丙酯10g，阿替洛爾8g，PEG200 12g，杜仲水提物6g，牡丹皮水提物3g，蒸餾水36g。實施例6RH40 22g，大豆油10g，阿替洛爾8g，聚乙二醇600 17g，杜仲水提物2g，牡丹皮水提物4g,蒸懼水37g。實施例7
阿替洛爾lg，吐溫80 5g，肉豆蘧酸異丙酯lg，乙醇20g，杜仲水提物10g，牡丹皮水提物IOg,蒸懼水53 go實施例8
阿替洛爾3g，RH40 10g，油酸4g，PEG400 17g，杜仲水提物8g，牡丹皮水提物12g，蒸餾水 46g。實施例9
阿替洛爾5g，EL40 15g，油酸乙酯7g，丙三醇13g，杜仲水提物7g，牡丹皮水提物8g，蒸懼水45 go實施例10
阿替洛爾7g，泊洛沙姆188 20g，肉豆蘧酸異丙酯10g，PEG200 10g，杜仲水提物5g，牡丹皮水提物5g，蒸餾水43g。實施例11
阿替洛爾9g，RH40 25g，大豆油13g，聚乙二醇600 7g，杜仲水提物4g，牡丹皮水提物3g,蒸懼水39g。實施例12
阿替洛爾12g，吐溫80 30g,肉豆蘧酸異丙酯16g，乙醇3g，杜仲水提物2g，牡丹皮水提物3g，蒸餾水34 g0實施例13
阿替洛爾15g，RH40 35g，油酸20g，PEG400 lg，杜仲水提物0. 5g，牡丹皮水提物0. 5g，蒸餾水28g。權利要求
1.一種復方阿替洛爾納米乳抗高血壓藥物，其特征在于，其原料及其質量百分比為阿替洛爾1% 15% 表面活性劑5% 35% 助表面活性劑1% 20%油1% 20% 杜仲水提物O. 5% 10% 牡丹皮水提物O. 5 % 10 % 其余成分為蒸餾水，上述原料的質量百分比之和為100% ； 所述的表面活性劑為聚氧乙烯醚-40氫化蓖麻油，蓖麻油聚氧乙烯醚40、吐溫80或泊洛沙姆188中的任意一種或任意一種與span80的混合物； 所述的油是大豆油、菜籽油、三乙酸甘油酯、棕櫚酸異辛酯、油酸、油酸乙酯、肉豆蘧酸異丙酯或乙酸乙酯等可食用油類中的任意一種或幾種的混合物； 所述的助表面活性劑為無水乙醇、1，2-丙二醇、丙三醇、聚乙二醇200 (PEG200)、聚乙二醇400 (PEG400)或聚乙二醇600 (PEG600)中的任意一種，或幾種的混合物。
2.根據權利要求I所述的復方阿替洛爾納米乳抗高血壓藥物，其特征在于該藥的粒徑介于10 50nm之間。
全文摘要
本發明公開了一種復方阿替洛爾納米乳抗高血壓藥物，其原料及其質量百分比為阿替洛爾1％～15％、表面活性劑5％～35％、助表面活性劑1％～20％，油1％～20％，杜仲水提物0.5％～10％，牡丹皮水提物0.5％～10％，其余成分為蒸餾水，上述原料的質量百分比之和為100％。本納米乳乳滴顆粒小、分布均勻、粘度小、流動性好。阿替洛爾制備成納米乳劑型后，明顯增加了透過血腦屏障的能力、顯著提高了原藥的生物利用度，延長了藥物的半衰期，減少給藥次數；納米乳提高了阿替洛爾的藥物溶解及滲透能力，增加阿替洛爾的穩定性；而且與杜仲和牡丹皮的水提物復配后，具有明顯的協同作用，藥物療效發揮更加充分。
文檔編號A61K31/165GK102631428SQ20121014272
公開日2012年8月15日 申請日期2012年5月10日 優先權日2012年5月10日
發明者孫江宏, 歐陽五慶, 郭建軍, 高士孔 申請人:西北農林科技大學