本發明是關于一種免疫性lhrh組合物，且特別是關于一種免疫性lhrh組合物，其含有包含可功能性抑制豬只lhrh濃度的lhrh肽結構，以有效地免疫去勢豬只、消除公豬臭和促進生長。
背景技術：
：促性腺激素釋放激素(gonadotropin-releasinghormone，gnrh)，也被稱為促黃體激素釋放激素(luteinizing-hormone-releasinghormone，lhrh)，是一種營養性肽激素，負責使濾泡刺激素(follicle-stimulatinghormone，fsh)和黃體成長激素(luteinizinghormone，lh)由腦下垂體前葉釋放。lhrh是由下視丘內的神經元合成與釋放。自1970年代早期已證實接種下視丘激素lhrh疫苗可作為一種用以控制繁殖的免疫方法。引發對lhrh的免疫反應可預防激素lh和fsh由腦下垂體前葉釋放，lh和fsh為性腺(雄性的睪丸與雌性的卵巢)發展和維持所需。因此，減少lh和fsh水平可導致生殖功能的喪失。絕育(或閹割)手術是獸醫學和畜牧動物管理上最為廣泛使用的手術方法。家畜和伴侶動物之兩種性別的顯著比例是利用常規手術絕育以防止各種伴隨性成熟的非欲求的特性。免疫阻絕lhrh作用可導致動物不孕，因為lhrh控制睪固酮生成，睪固酮生成進而調控精子發展與雌激素生成，雌激素生成進而導致卵子成熟。此外，基于lhrh的免疫療法提供一種用于雄性與雌性伴侶動物(例如：狗、貓、馬和兔子)的節育方法，以及和緩非欲求的雄性激素-驅動的行為(例如:發情、區域性標記和攻擊)。一旦接受基于lhrh的免疫療法的免疫接種，此種過程是可逆性的，其取決于受試動物的血清抗體水平。免疫去勢(例如：利用抗體對lhrh作用的抑制)在肉用動物畜產上已有一種其他應用。因為討人厭的氣味與風味與其肉品相關，是睪固酮代謝的結果(例如：公豬臭(boartaint))，故雄性的肉品無法被加工制成特級肉塊。因為視雄性食用動物的機械去勢(例如：手術)為不人道，故免疫去勢針對此方法提供一種可接受的替代方案。多種免疫性型式的lhrh用于試驗。例如，結合lhrh肽至載體蛋白以增強此肽激素的免疫效力。然而，此些蛋白載體對大規模使用過于昂貴，且作為結果的肽-蛋白結合物無法有效的(1)產生長期的免疫去勢，也無法(2)在所有動物產生抗-lhrh免疫反應，此二種條件對作為去勢手術的替代方案的有效疫苗是需要的。更進一步，以一種非免疫性10-mer肽的lhrh有效的免疫接種，取決于lhrh和載體蛋白間的結合位置。此外，聯結至lhrh的蛋白質作為免疫原是有問題的，因為對此免疫原的免疫反應的主體指向的是大的載體蛋白，而非lhrh肽(毒素或其他載體蛋白的質量遠大于lhrh的質量，lhrh為10-mer肽)。此現象頻繁地造成載體蛋白所引發的表位免疫抑制。據此，為了在免疫去勢的多種應用，應該尋找一種免疫增強劑，此免疫增強劑適用于連結lhrh肽以產生作為疫苗制劑關鍵成份的價錢低廉的肽結構，此免疫增強劑能夠刺激對lhrh早期且強烈的免疫反應。同樣地，此免疫增強劑也需避免載體蛋白所引發的表位免疫抑制。因此，對免疫去勢具有一貫高效力的lhrh疫苗包括(1)在豬只的公豬臭消除和生長曲線促進的具體應用，以及(2)用于行為矯正以易于牧場中動物管理；特別是在豬只，業界亟需解決目前基于lhrh的免疫療法所不足之處。技術實現要素：本發明提供一種用于豬只去勢的疫苗組合物，其包含肽免疫原和獸醫學上可接受的載體或佐劑，其中肽免疫原包含(a)seqidno：1的lhrh肽，以及(b)選自由seqidno：2、3、4、5以及6組成的群組的至少一th抗原表位或免疫刺激性元件，其中lhrh的肽可借由gly-gly或εnlys間隔序列(spacersequence)經由其氨基端與th抗原表位和/或免疫刺激性元件共價連結。間隔“εnlys”是一個出現于二氨基酸間的賴氨酸殘基，用以連接(1)位于賴氨酸殘基的ε-nh2基團的在先的氨基酸的羧酸端，以及(2)位于賴氨酸殘基羧酸端的接著的氨基酸的氨基端。本發明中所述的“εnlys”、“εlys”和“εk”可交替使用。在另一實施例中，本發明的肽免疫原包含seqidno：7、8、9或10，或其混合物，且獸醫學上可接受的佐劑選自由isa50v2和emulsigend組成的群組。每劑量的肽免疫原的總量為超過6.25μg，優選地為50μg至200μg。本發明的另一范疇是關于一種用以抑制豬只因性成熟所引發的特征的方法，包含利用本發明的疫苗組合物的有效量投予豬只，以降低豬只的睪固酮及其衍生物(例如︰二氫睪固酮和雌激素)產量。此特征包含，但不限于，公豬臭、性活動力、生育力以及發情行為。本發明的方法可抑制公豬臭和睪丸與副睪的生長。在一實施例中，借由肌肉注射投予公豬兩劑疫苗組合物，第一劑施用于早至3周齡的豬只，作為加強免疫的第二劑則于10至16周齡注射，或投予年齡更大的豬只，其于加強免疫后約兩周造成有效的免疫去勢、生長促進和公豬臭消除。本發明將詳細描述于以下的實施例中，并請參照附圖。附圖說明圖1a和圖1b是公豬以配制于佐劑isa50v2(圖1a)或emulsigend(圖1b)中的lhrh3(seqidno：7、8和9)制劑免疫接種后個別抗-lhrh抗體的效價。所有試驗組的豬只(第1至4組和第8至11組)在加強免疫后兩周(即初免后十周，或10wpi，約為18周齡)具有高的抗-lhrh抗體效價。相對之下，注射目前市售疫苗(第7組和第14組)豬只的lhrh-抗體效價只在14wpi時上升，其效價低于本發明肽疫苗制劑(第1至4組和第8至11組)。第5和12組豬只接受生理食鹽水作為陰性對照組，且第6和13組豬只以手術程序去勢作為陽性對照組。圖2a和圖2b是公豬以配制于佐劑isa50v2(圖2a)或emulsigend(圖2b)的lhrh3(seqidno：7、8和9)制劑免疫接種后豬只相對應的睪固酮濃度，用以說明個別動物的去勢持續性。配制于isa50v2或emulsigend的所有組別在10wpi前維持低濃度的睪固酮，并維持低水平直到16wpi(24周齡)。相較之下，第7和14組接受疫苗的豬只具有高濃度的血清睪固酮直到12wpi，且低濃度的睪固酮在14wpi時濃度開始上升，顯示免疫去勢的效力較低。圖3a和圖3b是公豬以配制于isa50v2(圖3a)或emulsigend(圖3b)的lhrh3(seqidno：7、8和9)制劑免疫接種后于24周齡豬只的個別體重。經標準化的陰性對照組和手術去勢組具有顯著較低的平均體重94.9kg(陰性對照組，第5和12組)和88kg(手術去勢組，第6和13組)。相對于手術去勢組，證明本發明的疫苗(第4和11組)可增加約27.9％的體重，具有顯著的好處。圖4a和圖4b是公豬以配制于佐劑isa50v2(圖4a)或emulsigend(圖4b)中的lhrh1(seqidno：10)制劑免疫接種后個別抗-lhrh抗體的效價。所有試驗組豬只在加強免疫后兩周在10wpi(即18周齡)具有高的抗-lhrh抗體效價。不論是配制在isa50v2或emulsigend組別的豬只，此抗體效價可維持于接近3.0(log10)直到16wpi(即24周齡)，此相當于上市販售之時。圖5a和圖5b是公豬以配制于佐劑isa50v2(圖5a)或emulsigend(圖5b)中的lhrh1(seqidno：10)制劑免疫接種后的個別睪固酮濃度。在配制于isa50v2的第1至4組和配制于emulsigend的第8至11組豬只的血清睪固酮濃度相反地對應至lhrh-抗體的血清效價，即較高的抗-lhrh抗體效價具有較低的血清睪固酮濃度，去勢血清睪固酮濃度于加強免疫后兩周(即10wpi或18周齡)達到1.87nmol/l的邊界值。除了第1組，配制于佐劑isa50v2或emulsigend中所有組別豬只均維持低濃度的血清睪固酮濃度直到16wpi(24周齡)。圖6a和圖6b是以配制于佐劑isa50v2(圖6a)或emulsigend(圖6b)中的lhrh1(seqidno：10)制劑免疫接種公豬后豬只的個別體重。陰性對照組(即未接種疫苗組(第5和11組))和手術去勢組(第6和12組)在24周齡時分別具有顯著較低的平均體重94.9kg和88kg。相對于手術去勢組的豬只，本發明的疫苗制劑(第4和10組)可增加約20.3％的體重，具有顯著的好處。圖7是公豬以配制于佐劑isa50v2或emulsigend中的lhrh1(seqidno：10)制劑免疫接種后抗-lhrh抗體效價的持續性。加強免疫后兩周(即10wpi)，第1至4組抗-lhrh抗體效價達到超過3.0(log10)，且此高效價持續至20wpi。第2和3組的動物甚至可維持抗-lhrh抗體效價于3.0(log10)直到24wpi(即32周齡)。相較之下，陰性對照組(第5組)和手術去勢組(第6組)總是保持低的抗-lhrh抗體效價。圖8是公豬以配制于佐劑isa50v2或emulsigend中的lhrh1(seqidno：10)制劑免疫接種后豬只個別睪固酮濃度的去勢持續性。第1至4組所有豬只在加強免疫后兩周(即10wpi)具有低濃度的血清睪固酮，且證實可借由抗-lhrh抗體之抑制達到去勢程度。第1至4組豬只的睪固酮水平維持如去勢對照組(第6組)一樣低至20wpi(即28周齡)。圖9是豬只以配制于佐劑isa50v2或emulsigend中的lhrh1(seqidno：10)制劑免疫接種后于24wpi時的睪丸重量。在第1至4組，豬只的睪丸萎縮至無功能的尺寸。圖10是豬只以配制于佐劑isa50v2或emulsigend中的lhrh1(seqidno：10)制劑免疫接種后于24wpi時的副睪重量。在第1至4組，副睪的重量顯著地下降。圖11是豬只以配制于佐劑isa50v2或emulsigend中的lhrh1(seqidno：10)制劑免疫接種后的體重。在第1至4組中的動物具有較陰性對照組和手術去勢組(第5和6組)更佳的體重增加表現。圖12是豬只以配制于佐劑isa50v2或emulsigend中的lhrh1(seqidno：10)制劑免疫接種后對雄甾烯酮濃度的影響。在第1至4組中，脂肪中的雄甾烯酮濃度控制在0.5μg/g脂肪以下。在第3組，雄甾烯酮的平均值甚至控制在0.1384μg/g脂肪。圖13是豬只以配制于佐劑isa50v2或emulsigend的lhrh1(seqidno：10)制劑免疫接種后對糞臭素濃度的影響。在第1至3組中，糞臭素濃度控制在低于0.1μg/g脂肪。以第3組的糞臭素平均值最低(為0.0514μg/g脂肪)。圖14是公豬臭因子分布圖。第1組與第2組的表現相似，7/8樣品分布于低度風險區域，一個樣品位于中度/高度風險區域。第3組具有較佳的表現直到24wpi，其中所有樣品分布于低度風險區域。手術去勢組(第6組)總是保持公豬臭因子的最低濃度。生理食鹽水對照組(第5組)只有2/8位于低度風險區域，2/8位于中度風險區域，且4/8位于高度風險區域。圖15是公豬以配制于佐劑isa50v2中的lhrh1(seqidno：10)制劑利用不同初免和加強免疫時程表免疫接種后的抗-lhrh抗體效價，用以評估免疫去勢時程表的適應性。第1組豬只證實了高度免疫原性，在22周齡時達到3.556(log10)的lhrh抗體平均效價，且在26周齡時維持于3.235(log10)。第2組達到其最高抗體效價，在18周齡時為3.526(log10)的平均效價，且在26周齡時維持于2.869(log10)。第3組于24周齡達到其最高平均抗體效價3.219(log10)，且在26周齡維持于2.682(log10)。圖16是公豬以配制于佐劑isa50v2中的lhrh1(seqidno：10)制劑利用不同初免和加強免疫時程表免疫接種后的血清睪固酮濃度，用以評估免疫去勢時程表的適應性。第1組的豬只在20周齡(即加強免疫后兩周)時展現免疫去勢效果(睪固酮濃度≦1.87nmol/l)，且此效果持續至少六周直到26周齡。第2組的豬只睪固酮濃度在加強免疫后的2至6周期間(即由22周齡至26周齡)顯著地低于1.87nmol/l，且保持低水平(睪固酮濃度≦1.644nmol/l)直到26周齡。加強免疫后兩周，第3組的平均睪固酮濃度為4.535nmol/l。圖17a、圖17b、圖17c和圖17d是豬只以配制于佐劑isa50v2中的lhrh3(seqidno：7、8和9)制劑免疫接種后睪丸和副睪的重量。睪丸的重量于10wpi(圖17a)、12wpi(圖17b)、14wpi(圖17c)和16wpi(圖17d)測量。睪丸和副睪隨著時間逐漸萎縮，且副睪于10wpi時以及睪丸于12wpi時重量顯著地減少(p<0.001)。圖18a、圖18b、圖18c和圖18d是以配制于佐劑isa50v2中的lhrh3(seqidno：7、8和9)制劑免疫接種后的公豬臭因子(雄甾烯酮和糞臭素)量。雄甾烯酮和糞臭素量在10wpi(分別為圖18a和圖18c)和12wpi(分別為圖18b和圖18d)評估。免疫接種后，睪固酮濃度抑制到去勢程度(即低于1.87nmol/l)，造成脂肪中的雄甾烯酮減少。圖19a和圖19b是通過比較未接受處理的陰性對照組(圖19a)與以lhrh肽疫苗制劑接種公豬(圖19b)的脂肪中雄甾烯酮和糞臭素濃度進行風險評估。所有接種的組別從10wpi至16wpi皆處于敏化評估中的低度風險區域(低雄甾烯酮(<0.5μg/g脂肪)和低糞臭素濃度(<0.22μg/g脂肪))。圖20是公豬以配制于佐劑isa50v2中的lhrh1(seqidno：10)制劑免疫接種后對抗-lhrh抗體效價的持續性的影響。第1組的抗體效價從3.636±0.577(log10)(最高點)減少到2.418±0.742(log10)(實驗結束時)。第2組的抗體效價從3.868±0.221(log10)減少到2.806±0.213(log10)(實驗結束時)。圖21是公豬以配制于佐劑isa50v2中的lhrh1(seqidno：10)制劑免疫接種后的睪固酮濃度。于本試驗起始階段所有組別的睪固酮濃度為2.943±2.854(平均值±標準差)nmol/l。疫苗效力評估的時間點設為加強免疫后2周，其顯示最低睪固酮濃度。第1至4組豬只于加強免疫后2周的平均睪固酮濃度分別為1.265±0.353、1.329±0.636、1.904±2.297以及1.222±0.445(平均值±標準差)nmol/l。圖22a和圖22b是公豬以配制于佐劑isa50v2中的lhrh1(seqidno：10)制劑免疫接種后的睪丸長度(圖22a)和體積(圖22b)。第1至4組的豬只于成對睪丸和成對副睪的重量與睪丸的長度并無差異。依據各組別以箭號指出加強免疫的時間點。圖23a、圖23b和圖23c是公豬以配制于佐劑isa50v2中的lhrh1(seqidno：10)制劑免疫接種后于尸體剖檢時豬只的成對睪丸(圖23a)和成對副睪(圖23b)的重量，以及睪丸的長度(圖23c)。圖24是公豬以配制于佐劑isa50v2中的lhrh1(seqidno：10)制劑免疫接種后于24周齡的雄甾烯酮和糞臭素濃度。在公豬臭因子分布圖中，除了第1組中的一只豬以外，第1至4組中所有豬只的危險因子均位于低度/中度危險。圖25是公豬以配制于佐劑isa50v2中的lhrh1(seqidno：10)制劑免疫接種后的抗-lhrh抗體效價。第1、2和3組在第0和3周齡的抗-lhrh抗體效價分別位于背景值1.718±0.297、1.765±0.340和1.770±0.283(log10)附近。在16周齡加強免疫后，在18周齡時，第4組的抗-lhrh抗體效價為3.249±0.346，第5組為2.893±0.786。圖26是豬只以配制于佐劑isa50v2中的lhrh1(seqidno：10)制劑免疫接種后的血清睪固酮濃度。第1和2組的豬只血清睪固酮濃度分別為2.154±0.921nmol/l于10周齡，以及2.183±1.231nmol/l于6周齡。第3組豬只于12周齡時有最低睪固酮濃度3.065±0.205nmol/l。第4和5組在20周齡的血清睪固酮濃度分別地被抑制至0.586±0.184和0.893±1.192nmol/l的低濃度。相較之下，接受疫苗(第6組)豬只的血清睪固酮在20周齡保持在高濃度(約9.415±7.560nmol/l)，且之后在22周齡下降至低濃度。圖27是公豬以配制于佐劑isa50v2中的lhrh3(seqidno：7、8和9)制劑免疫接種后的抗-lhrh抗體效價。第1和2組豬只的抗-lhrh抗體效價顯著地高于第3組(未去勢未接種疫苗(公豬))和第4組(手術去勢(閹豬))。圖28是第1和2組的公豬以不同劑量的配制于佐劑isa50v2的lhrh3(seqidno：7、8和9)制劑免疫接種后的完全(100％)免疫去勢。圖29是顯示在與手術去勢組相比時，對于以配制于佐劑isa50v2中的lhrh3(seqidno：7、8和9)制劑免疫接種的公豬而言，因平均日采食量(adfi)的增加而有較高的平均體重。具體實施方式為使本發明的目的、技術方案和優點更加清楚明白，以下結合具體實施例，對本發明作進一步的詳細說明。下面的描述是用以實現本發明的最佳的預期模式。此描述的目的是說明本發明的一般原理，且不應被理解成具有限定意義。本發明的范圍借由參照所附的權利要求書而被最適地裁定。為了使文稿排版更美觀和便于閱讀，以下具體實施方式中出現的表格將被統一放置于文字之后。本發明提供包含lhrh的肽，lhrh為經由其氨基端連結至共同刺激或輔助t細胞抗原表位(th抗原表位)的10-mer肽。本發明的名詞“lhrh”是指促黃體激素釋放激素(genbank：aab34379.1)，其為營養性肽激素，負責使fsh和lh由腦下垂體前葉釋放。用于此揭露內容中的名詞lhrh包含衍生自不同門(包含鳥類、魚類、爬行動物和無脊椎動物)的lhrh同系物。此lhrh肽優選地包含如表1所示的seqidno：1的氨基酸序列。本發明的名詞“疫苗(vaccine)”為一般的臨床術語，用以描述可導致暴露于此疫苗的受試者產生抗體的免疫刺激性組合物。從臨床角度看，接受疫苗組合物的受試者將對存在于此疫苗中的抗原產生抗體。本申請案所敘述的疫苗組合物不限于用以改善對特定疾病或病原體的免疫力的生物制劑。本發明的名詞“輔助t細胞抗原表位(th抗原表位)”指衍生自外源病原體的th抗原表位，包含但不限于，例如：b型肝炎表面和核心抗原(hbsag和hbc)輔助t細胞抗原表位、百日咳毒素輔助t細胞抗原表位(ptth)、破傷風毒素輔助t細胞抗原表位(ttth)、麻疹病毒f蛋白質輔助t細胞抗原表位(mvfth)、砂眼披衣菌的主要外膜蛋白質輔助t細胞抗原表位(ctth)、白喉毒素輔助t細胞抗原表位(dtth)、鐮狀瘧原蟲環圍種蟲輔助t細胞抗原表位(pfth)、曼氏住血吸蟲三醣磷酸鹽異構酶輔助t細胞抗原表位(smth)、大腸桿菌trat輔助t細胞抗原表位(tratth)。此等病原-衍生th抗原表位作為濫交th抗原表位的代表性例子，如美國專利號5,759,551中之seqidno：2-9和42-52并入本文作為參考。有用的th抗原表位可包含組合的th抗原表位。wang等人(wo95/11998)描述一特別種類的組合th抗原表位，稱為“結構性合成抗原庫(syntheticantigenlibrary，ssal)”。此ssal抗原表位包含眾多的th抗原表位，以氨基酸序列圍繞一在特定位置具有取代物的不變的殘基的結構性架構而組成。ssal的序列是借由保留相對不變的殘基，同時改變其他殘基以提供各種不同的mhc限制元素的辨認而決定。此可借下列達成，將濫交th的初級氨基酸序列排成一列，選擇并保存造成th肽獨特結構的殘基作為骨架，以及根據已知的mhc限制元素改變剩余的殘基。已有不變位置及具mhc限制元素的較佳氨基酸的可變位置的清單，可用于得到mhc-結合特色(mhc-bindingmotifs)。此等可作為設計ssalth抗原表位時的參考((meister等人，vaccine，1995；13:581-591)。在一實施例中，th抗原表位包含如表1所示的seqidno：2、3、4及/或5。seqidno：6是指衍生自致病的耶爾辛森氏屬(yersiniaspp.)細菌的侵染素蛋白質的肽片段，其為微生物外膜蛋白質，以調停細菌進入哺乳動物細胞。已證實細菌侵入培養的哺乳動物細胞時需要耶爾辛森氏菌的侵染素分子和多種出現于培養的細胞上的β1家族整聯蛋白質之間的交互作用。因為t淋巴球具有豐富的β1整聯蛋白質(特別是活化的免疫或記憶t細胞)，且證明t細胞協同刺激的特性與侵染素結構區域有關，其可連結至包含lhrh結構的濫交th抗原表位，以進一步增強所設計的肽免疫原的免疫原性(美國專利號6,025,468)。本發明的肽包含至少一lhrh、th抗原表位，以及任選地共同刺激的侵染素肽結構區域。lhrh肽(包含其同系物)可經由其氨基端氨基酸與間隔共價連結到包含至少一已知含有th抗原表位的序列。th抗原表位可經由其氨基端共價連結至共同刺激的侵染素肽結構區域。間隔包含，但不限于，gly-gly、lys、εnlys、εnlys-(lys)n(此處n＝1至3)，或lys-lys-lys-εnlys(seqidno：11)等。本發明的肽具有約20個至約100個氨基酸殘基，較佳介于約20個至約70個氨基酸殘基，以及更佳介于約25個至約50個氨基酸殘基。在另一較佳實施例中，肽具有約27個至約45個氨基酸殘基。th抗原表位的數量包含，但不限于，一、二、三、四或更多個如本發明表1所示的th肽。本發明的肽包含至少一選自seqidno：2、3、4、5之th抗原表位的肽，其可任選地連結至seqidno：1的lhrh肽的氨基端。在一實施例中，th抗原表位可連結至lhrh的氨基端以形成本發明的肽。例如，seqidno：2和3的肽可借由間隔(gly-gly、lys或εnlys)連續地連結至lhrh的氨基端。如果有必要，此領域的習知技藝者可改變th抗原表位數目和用以連結至lhrh肽免疫原的間隔種類，以提供本發明的最理想肽。在另一實施例中，本發明的肽包含如表2所示的seqidno：7、8、9和/或10，或與其具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％，或至少99％相似性者。本發明的肽可以一般習知技藝者所熟知的化學合成方法制造；參見，例如，合成肽中的auser'sguide(grant編輯，w.h.freeman&co.出版，newyork,n.y.,1992，第382頁)。因此，可利用叔丁氧基羰基(t-butyloxycarbonyl,t-boc)或9-芴甲氧羰基(9-fluorenyl-methyloxycarbonyl,f-moc)化學法之自動化固相合成技術在應用生物系統自動化肽合成儀(430a或431型)上合成肽。為合成聚賴氨酸核心部分，未保護的di(t-boc)或di(f-moc)-nα，nε)賴氨酸殘基可用以代替具有保護的ε-胺基的t-boc或f-moc。為改進所設計的肽的溶解度，可在肽的氨基端增加額外的絲氨酸或/和賴氨酸殘基加以延長。在組合完成所欲的肽后，依照標準程序處理樹脂，將肽由樹脂上切下，并去除位于氨基酸側鏈上的保護基團。以高效能液相層析純化游離的肽，并確認其生化特性。另外，較長的線性肽可利用習知的重組dna技術合成。任何dna技術的標準手冊可提供詳細方法以制造本發明的肽。當本發明的肽作為疫苗制劑的關鍵成份時，可在接受免疫接種的動物產生免疫去勢，其包含與性成熟有關的物理及/或化學特性(例如：性行為、戰斗、徘徊、攻擊性行為、非欲求的感官特性、生殖器官腫瘤以及懷孕、動情周期、生育力)的喪失。因此，抑制的特性包含抑制性行為(例如，避免雄性牛只駕乘其他雄性牛只)、避免或延遲排卵、使睪丸和副睪萎縮、降低睪固酮濃度、減少攻擊行為或減少非欲求的感官特性(例如公豬臭)。為了方便且有效地投予本發明的肽的有效量和適合的藥學上可接受的載體，以在此揭露的單位劑量型式配制本發明肽。單位劑量可為，例如，通常含有介于0.5μg至約2000μg的主要肽抗原量，較佳為超過6.25μg，最佳為25μg、30μg、40μg、50μg、60μg、70μg、80μg、90μg、100μg、150μg或200μg。在含有補充活性成分的組合物的情況下，此劑量是通過參考所述成分的給藥的常用劑量和方式來決定。本發明亦提供包含用于肽免疫原投予的藥學上可接受的傳輸系統的組合物。此組合物包含至少一種本發明肽的免疫學上的有效量。在本發明組合物(疫苗)中，本發明肽的數量包含，但不限于，一、二、三、四或更多。例如，本發明的組合物包含seqidno：7、8、9、10或其混合物。在一實施例中，本發明的組合物包含seqidno：7、8、9或10的單一肽。在其他實施例中，本發明的組合物包含seqidno：7、8和9(在以下范例稱為lhrh3)。在其他實施例中，本發明的組合物包含seqidno：10(在以下范例稱為lhrh1)。當如此配制時，包含作為目標抗原性位點的lhrh或其同系物的本發明組合物，可用于預防/消除公豬臭、促進生長、豬只免疫去勢，以及用于雄性和雌性的避孕。本發明的肽免疫原可利用佐劑、乳化劑、醫藥上可接受的載劑或其他例行提供于疫苗組合物的成分，配制作為免疫性組合物?？捎糜诒景l明的佐劑或乳化劑包括明礬、不完全弗羅恩特氏佐劑(ifa)、liposyn、皂角苷、鯊烯、l121、emulsigen、單磷?；|a(mpl)、qs21，和isa720、isa50、isa50v2、isa35或isa206，以及其他有效的佐劑和乳化劑。此類調配物可由此領域中一般熟知技藝者輕易決定，且也可包含可立即釋放及/或可持續釋放的調配物。此疫苗可借由任何合宜的途徑施用，包含皮下、口服、肌肉、腹腔或其他非經腸途徑或腸胃途徑。相似地，免疫原可以單一劑量或多劑量施用。一般熟知技藝者可輕易地決定免疫接種的時程表。在特定實施例中，傳輸系統和佐劑為montanidetmisa50v2(一種包含植物油和二縮甘露醇油酸(mannideoleate)的油質疫苗佐劑組合物以制造油包水(即w/o)乳化液)、80(也稱為聚山梨醇酯80或聚氧乙烯(20)山梨醇酐單油酸酯)、cpg寡核苷酸和/或其任意組合。在其他實施例，此藥物組合物為具有emulsigen或emulsigend作為佐劑的水包油包水(即w/o/w)乳化液。亦提供其他例行合并于疫苗制劑的成分，以及劑量用法說明書，以產生良好的b和t細胞免疫反應。適合注射用的藥物劑型包括無菌水溶液(水溶性)或分散體和無菌粉末，以當場配制無菌注射液或分散體。其于制造和儲存狀況下必須穩定，且必須可對抗微生物(例如細菌或真菌)污染而加以保存。載體可為溶劑或分散介質，包含，例如︰水、乙醇、多元醇(例如，甘油、丙二醇和液體聚乙二醇等)、其合適的混合物和植物油。借由例如涂層(例如卵磷脂)、借由在懸浮狀況下維持所需粒徑，以及借由使用界面活性劑，以維持適當的流動性。可借由各種抗細菌和抗真菌劑(例如：對羥基苯甲酸酯，氯丁醇，苯酚，山梨酸，硫柳汞等)預防微生物作用。在許多情況下，以含有等滲劑(例如：糖或氯化鈉)為較佳?？墒褂醚舆t吸收試劑(例如：單硬脂酸鋁或/和明膠)來延長注射用的組合物的吸收或延遲釋放。本發明也提供借由對哺乳動物投予目標肽組合物一段時間，以引發抗-lhrh抗體效價、降低睪固酮濃度、避免公豬臭、使睪丸和副睪萎縮、豬只免疫去勢，以及避孕的方法。普遍來說，本發明的方法可于豬只引發抗-lhrh抗體效價，且抗-lhrh抗體效價于一或兩次疫苗接種后超過2.0，較佳為2.5或3.0(log10)。本發明的方法也可抑制豬只睪固酮濃度，睪固酮濃度于一或兩次疫苗接種后不超過2.5nmol/l，較佳為2.0、1.87或1.0nmol/l。再者，本發明的方法可增加豬只體重，較佳為增加10％或更多。本發明的組合物可以此領域已知的任何適當方法投予，包含，但不限于，口服或注射，以肌肉注射為優選。本發明的組合物包含一或多個本發明肽免疫原的有效量，以及藥學上可接受的載體。適當劑型單位的組合物通常包含每公斤體重約0.5μg至約1mg的肽免疫原。當以多劑量投予，其可以方便地劃分為每劑量的適當量。劑量可例如為6.25μg至200μg，較佳為50μg，可通過注射給藥，較佳為肌肉注射。此后可重復(加強)劑量。劑量取決于受試者的年齡、體重，以及此疫苗和治療領域所熟知的一般健康狀況。本發明更提供抑制豬只由性成熟所引發的特征的方法，包含投予本發明的疫苗組合物的有效量。在本發明方法中，劑量投予次數與時機并無特別限制。普遍來說，本發明的方法包含至少一劑量，較佳為二、三、四、五劑量或更多，更佳為二劑量或更多。此領域之技術者可輕易知道增加劑量投予次數以引發功效。第一劑可投予任何時期的豬只(例如：1、2、3、4、5、6、7、8、9、10周齡)。疫苗接種時間點可依豬只種類、劑量、佐劑和投予方式而改變或修改。普遍來說，是于3周齡后進行初次免疫(第一劑)，以于3至8周齡為較佳。于初次免疫后3至13周間進行加強免疫(第二劑)為較佳。接種時程表于初免和加強免疫間有3至13周。在一實施例中，較佳的疫苗接種時程表可依據以下事項：于約8周齡進行初次免疫，于約16周齡進行加強免疫，在某些狀況下于加強免疫后6至8周屠宰豬只。本發明的初免/加強免疫疫苗接種時程表適用于豬只。其取決于不同國家的生產方法，在許多狀況下，豬只并不會生長到21周齡。本發明的特定實施例包含，但不限于，以下事項：(1)用于去勢豬只的疫苗組合物，包含肽免疫原以及獸醫學上可接受的輸送載體或佐劑，其中肽免疫原包含(a)seqidno：1的lhrh肽，以及(b)選自由seqidno：2、3、4以及5組成的群組的至少一th抗原表位，以及，任選地，seqidno：6的免疫刺激肽，其中lhrh肽經由其氨基端殘基共價連結至th抗原表位。(2)依據(1)的疫苗組合物，其中lhrh肽、th抗原表位，以及，任選地，免疫刺激肽，是利用gly-gly、εnlys、lys-εnlys、lys-lys-εnlys、lys-lys-lys-εnlys(seqidno：11)、εnlys-lys-lys或εnlys-lys-lys-lys(seqidno：12)加以連接。(3)依據(1)的疫苗組合物，其中肽免疫原包含seqidno：7、8、9和/或10，或其混合物。(4)依據(1)的疫苗組合物，其中獸醫學上可接受的佐劑包含isa50、isa50v2或emulsigend。(5)依據(1)的疫苗組合物，其中每一劑量的肽免疫原的總量為約12.5μg至200μg。(6)用以抑制豬只由性成熟所引發的特性的方法，包含投予(1)的疫苗組合物的有效量給豬只。(7)依據(6)的方法，其中特性包含公豬臭、性活動力、性行為、生育力以及發情行為。(8)依據(6)的方法，其中疫苗組合物是以肌肉或皮下注射投予。(9)依據(6)的方法，其中疫苗組合物的第一劑是施用于3周齡至8周齡的豬只。(10)依據(6)的方法，其中疫苗組合物的第二劑是施用于6周齡至16周齡的豬只。本發明的額外的特定實施例包含，但不限于，以下事項：(1)獸醫學組合物包含：肽免疫原，選自以下所組成的群組(i)seqidno：7、8以及9的混合物，(ii)seqidno：10，以及(iii)(i)和(ii)的結合；以及獸醫學上可接受的輸送載體或佐劑。(2)依據(1)的獸醫學組合物，其中(a)中的肽免疫原為(i)seqidno：7、8和9的混合物。(3)依據(2)的組合物，其中獸醫學上可接受的佐劑包含isa50、isa50v2或emulsigend。(4)依據(2)的組合物，其中每一劑量的肽免疫原的總量為約12.5μg至200μg。(5)用以抑制豬只由性成熟所引發的特性的方法，包含投予(2)的組合物的有效量給豬只。(6)依據(5)的方法，其中特性包含公豬臭、性活動力、性行為、生育力以及發情行為。(7)依據(5)的方法，其中組合物是以肌肉或皮下注射投予。(8)依據(5)的方法，其中組合物的第一劑是施用于3周齡至8周齡的豬只。(9)依據(5)的方法，其中組合物的第二劑是施用于6周齡至16周齡的豬只。(10)用以減少動物睪固酮及其衍生物產量的方法，包含投予(2)的組合物的有效量給動物。(11)依據(1)的獸醫學組合物，其中(a)中的肽免疫原為(ii)seqidno：10。(12)依據(11)的組合物，其中獸醫學上可接受的佐劑包含isa50、isa50v2或emulsigend。(13)依據(11)的組合物，其中每一劑量的肽免疫原的總量為約12.5μg至200μg。(14)用以抑制豬只由性成熟所引發的特性的方法，包含投予(11)的組合物的有效量給豬只。(15)依據(14)的方法，其中特性包含公豬臭、性活動力、性行為、生育力以及發情行為。(16)依據(14)的方法，其中組合物是以肌肉或皮下注射投予。(17)依據(14)的方法，其中組合物的第一劑是施用于3周齡至8周齡的豬只。(18)依據(14)的方法，其中組合物的第二劑是施用于6周齡至16周齡的豬只。(19)用以減少動物睪固酮及其衍生物產量的方法，包含投予(11)的組合物的有效量給動物。【實施例】實施例1lhrh肽的合成關于有效的lhrh疫苗設計和制劑的開發工作中的lhrh相關肽結構的合成方法于下文描述。此肽可于小規模合成以進行實驗室試驗和現場研究，以及大規模(公斤)量產以進行工/商業的疫苗制劑生產和血清學測定。設計lhrh相關抗原性肽的大型體系(長度介于約10至40個氨基酸)，以篩選和選擇供有效lhrh疫苗使用的最優化肽結構。每一個結構含有合成地連接至特定th抗原表位或免疫刺激肽(記載于表1，seqidno：2至6)的lhrh肽(seqidno：1)。用于本發明lhrh疫苗的lhrh肽為seqidno：7至10。用于偵測及/或測定抗-lhrh抗體的免疫原性的研究或相關血清學試驗的所有肽是使用應用生物系統自動肽合成儀(型號430a、431及/或433型)，以fmoc化學法小規模合成。借由在固相支持物上獨立合成以制造每一個肽，其在氨基端和側鏈具有fmoc保護，用以保護三官能團氨基酸的基團。由固相支持物上切下完整的肽，且借由90％三氟乙酸(tfa)移除側鏈保護基團。利用基質輔助激光脫附游離飛行時間(maldi-tof)質譜儀評估合成肽制備以確認其正確氨基酸型式。另外也借由逆相高效能液相層析(rp-hplc)評估每一個合成肽以確認其合成概況和制品濃度。盡管嚴格控制合成過程(包括階段性監測耦合效率)，但在延長循環期間的意外的事件(包括氨基酸插入、刪除、置換，和提前終止)也制造了肽相似物。因此，合成的制劑通常包含多種肽相似物和目標肽。即使包含這些非預期的肽相似物，得到的合成肽制劑仍然適合免疫學應用(包括免疫診斷(作為抗體捕獲抗原)和疫苗接種(作為肽免疫原)的使用)。一般來說，這樣的肽相似物，無論是有意設計，或是在合成過程所生成作為副產物的混合物，經常如所欲肽的純化制劑般有效，只要利用具鑒別力的品質管理程序監控制程和產品評估過程，以保證采用這些肽的最終產品的再現性和效力。數百至千公克量的大規模肽合成可于商業化自動合成儀ubi2003上，以15mmole至50mmole規模，依據相同的固態肽合成原理加以實行。為了獲得田間試驗中最終疫苗制劑的活性成分，利用淺洗脫梯度以逆相高效能液相層析純化lhrh肽結構，以maldi-tof質譜儀分析特性，并以氨基酸分析和逆相高效能液相層析分析純度和一致性。實施例2疫苗制劑的制備三個lhrh肽免疫原(lhrh3：seqidno：7、8和9)的混合物和單一肽免疫原(lhrh1：seqidno：10)分別配制于使用seppic(france)的isa佐劑的油包水(w/o)乳化液，或mvp(usa)的emulsigend的水包油包水(w/o/w)乳化液。簡而言之，以等摩爾比率混合在生理食鹽水中的肽(20％重量/體積氯化鈉溶液)，經無菌過濾(以0.22micron的過濾器)，并以均質方式與isa50v2或emulsigend佐劑混合。全程監測制備過程中的粘度。以鑒別測試(identitytest)、物理測試和無菌試驗分析最終產物的特性。在無塵室中進行所有配制、充填和包裝程序以維持無菌狀態。實施例3利用不同劑量的lhrh3(seqidno：7、8和9)疫苗制劑免疫接種公豬本實施例總共使用40只8周齡的公豬和8只手術去勢公豬。如表3和表4所示，這些豬只以每組8只分組，lhrh3(seqidno：7、8和9)以油質基底佐劑(montanidetmisa50v或isa50v2)配制以形成油包水(w/o)乳化液(如表3第1至4組所示)，或以油質基底佐劑emulsigend配制形成水包油包水(w/o/w)乳化液(如表4第8至11組所示)，以加強疫苗產品的免疫原性。三個對照組包含接受生理食鹽水的陰性對照組(第5和12組)、接受手術去勢的陽性對照組(第6和13組)，以及接受最先進市售lhrh疫苗的功效對照組(第7和14組)。血液樣品于初免后(或免疫接種后周數(wpi))0、4、8、10、12、14，和16周收集，分別測量豬只抗-lhrh抗體的血清效價和睪固酮的血清濃度。a.利用酶聯免疫吸附分析法(enzyme-linkedimmunosorbentassay，elisa)分析血清抗-lhrh抗體效價開發用于評估抗-lhrh抗體血清效價的酶聯免疫吸附分析法如以下所述。除非特別說明，96-孔平底微盤的各孔洞分別以100μl的各目標肽于37℃下涂覆1小時(以各2μg/ml或等摩爾混合物，于10mm的碳酸氫鈉緩沖液(ph9.5)中)。涂覆肽的孔洞以250μl含3％(重量)的明膠的pbs于37℃下培育1小時，以阻斷非特異性蛋白結合位點，隨后以含有0.05％(體積)20的pbs洗滌三次并干燥。將100μl稀釋的血清樣品加入到每個孔洞中，并于37℃下反應60分鐘。隨后以含有0.05％(體積)的20的pbs洗滌孔洞六次以移除未結合的抗體。加入100μl預先滴定為最佳稀釋濃度的以過氧化酶標示的山羊-抗-豬igg抗體(置于含有1％(體積)的正常山羊血清與0.05％(體積)的20的pbs中)于每個孔洞中，并在37℃下再培育30分鐘。這些孔洞以含有0.05％(體積)的20的pbs洗滌六次以移除未結合的抗體，并以100μl受質混合物(含0.04％(重量)的3’,3’,5’,5’-四甲基聯苯胺(tmb)和0.12％(體積)過氧化氫于檸檬酸鈉緩沖液中)反應15分鐘。此受質混合物借由形成有色的產物以檢測過氧化酶標示。加入100μl的1.0m硫酸停止反應并測定于450nm的吸光值(a450)。根據測定lhrh抗體血清效價的目的實行血清稀釋。為測定接受lhrh肽疫苗制劑豬只的抗體效價，將血清10倍連續稀釋(介于1:10至1:10,000)后，進行酶聯免疫吸附分析，且所測定的血清效價以log10表示，其由a450的線性回歸分析計算而來。依據圖1a和圖1b，除了陰性(第5和12組)和手術去勢(第6和13組)組，包含seqidno：7、8以及9的試驗組證明在加強免疫后兩周于10wpi(18周齡)具有高效價的lhrh抗體。接受疫苗接種組別(不僅是配制于isa50v2的組別(第1至4組)，也包括配制于emulsigend的組別(第8至11組))的抗體效價維持于接近或高于3.0(log10)直到16wpi(24周齡)(市場販售豬只的時間)。相對來說，接受豬只(第7組)的抗體效價只于14wpi(加強免疫后兩周)時上升，其抗體效價低于本發明的肽疫苗(第1至4組和第8至11組)。b.血清睪固酮濃度的評估借由市售酶聯免疫吸附分析法或放射免疫分析檢測血清睪固酮(tt)濃度。此試劑包括睪固酮酶聯免疫吸附分析法試劑(型號：eia-5179)、biovendor酶聯免疫吸附分析法試劑，以及seamans的放射免疫分析試劑。配制于isa50v2或emulsigend的第1至4組和第8至11組的血清中睪固酮濃度于特定實施例中分別地利用睪固酮酶聯免疫吸附分析法試劑加以測定，其與豬只相對應的血清抗體效價呈逆相關，豬只于加強免疫后兩周(即10wpi或18周齡)具有低于去勢邊界值的濃度(去勢邊界值一般為1.87nmol/l，或更嚴格的標準為1.0nmol/l)。在配制于isa50v2或emulsigend之所有其他組別的豬只則維持睪固酮的去勢程度，如圖2a和圖2b所示，直到16wpi(即24周齡)，市場上豬只出售的時期。結果顯示本發明的lhrh3疫苗制劑對睪固酮具有劑量依賴性抑制，且第4和11組提供相對其他組別更高的抑制程度。與接受疫苗制劑的豬只相比，陰性和去勢對照組的豬只總是維持低抗-lhrh抗體效價的背景值水平，于作為未去勢動物之陰性對照組(第5和12組)具血清睪固酮濃度波動。對手術去勢陽性對照組的豬只(第6和13組)而言，血清睪固酮濃度均保持于低去勢程度。接受lhrh疫苗的豬只直到12wpi仍維持高濃度的血清睪固酮，此時給予加強免疫，血清睪固酮濃度于14wpi(即加強免疫后兩周)后下降。結果清楚地顯示，對豬只去勢而言并不如本發明的疫苗制劑(第1至4組和第8至11組，包含配制于isa50v2或emulsigend的seqidno：7、8和9肽)般具有效力。c.體重依據圖3a和圖3b，全程監測從免疫接種前(3周齡)至本試驗結束(16wpi，24周齡)的豬只體重。結果顯示疫苗接種對動物體重的影響。陰性對照組(接受生理食鹽水)和陽性對照組(接受手術去勢)的豬只于24周齡都具有顯著較低的平均體重，分別為94.9kg(陰性對照組，第5和12組)和88.8kg(手術去勢對照組，第6和13組)。相較于接受手術去勢的豬只(第6和13組)，接受200μg/ml/劑量之本發明疫苗制劑的豬只(第4和11組)具有顯著較高的經濟效益，其于體重增加約27.9％。實施例4利用不同劑量lhrh1(seqidno：10)疫苗制劑免疫接種公豬在本實施例中，使用與實施例3類似的試驗方法，除了將疫苗制劑中的肽免疫原改成seqidno：10，并根據表5和表6調整劑量。免疫接種后，在多個時間點收集來自所有動物的血清以測定lhrh抗體效價和血清睪固酮的相對應濃度。此外，在犧牲時，也收集于24周齡豬只的性器官(睪丸和副睪)分析重量。a.利用酶聯免疫吸附分析法分析血清抗-lhrh抗體效價依據圖4a和圖4b，除了陰性(生理食鹽水)和陽性(手術去勢)對照組，包含seqidno：10之肽免疫原的所有試驗組于加強免疫后二周的10wpi(18周齡)具有高效價的抗-lhrh抗體。不僅配制于佐劑isa50v2的第1至4組的豬只，也包括配制于emulsigend的第7至10組的豬只，此抗體效價維持于接近或高于3.0(log10)直到16wpi(24周齡)，即市場上豬只出售的時期。b.血清睪固酮濃度的評估依據圖5a和圖5b，配制于isa50v2的第1至4組或配制于emulsigend的第7至10組豬只的血清睪固酮濃度均與相對應的抗體效價呈逆相關，且于加強免疫后兩周(即10wpi，18周齡)均達到低于去勢邊界值(<1.87nmol/l)的水準。除了第1和7組的最低劑量，配制于isa50v2或emulsigend的所有其他組別的豬只均維持血清睪酮的去勢程度直到16wpi(24周齡)，此為市場上豬只出售的時期。c.體重依據圖6a和圖6b，全程監測從免疫接種前(3周齡)至本試驗結束(16wpi，24周齡)的豬只體重。結果顯示疫苗接種對動物體重的影響。接受生理鹽水的陰性對照組和接受手術去勢的陽性對照組豬只于24周齡都具有顯著較低的平均體重，分別為94.9kg(陰性對照組，第5和11組)和88.8kg(手術去勢對照組，第6和12組)。相較于接受手術去勢的豬只(第6和12組)，接受本發明疫苗制劑的豬只(第4和10組)具有顯著較高的經濟效益，體重增加約20.3％。實施例5接受不同劑量lhrh1(seqidno：10)疫苗制劑豬只的免疫持續性在本實施例中，使用與實施例3類似的試驗方法，除了將肽免疫原改成seqidno：10，且根據表7調整劑量。于免疫接種后，在多個時間點收集血清以測定lhrh抗體效價和相對應的血清睪固酮濃度。此外，在豬只于32周齡犧牲時，收集豬只性器官(睪丸和副睪)測量重量。此試驗的目的是延長田間試驗至24wpi或32周齡，收集血清樣品以測定lhrh抗體效價和相對應的血清睪固酮濃度，用以評估依循標準免疫接種試驗方法(于8周齡(0wpi)初免和于16周齡(8wpi)加強免疫)使用本發明疫苗制劑的免疫去勢效力的持續性。a.利用elisa分析血清抗-lhrh抗體效價如圖7所示，收集來自第1至4組豬只于加強免疫后兩周(即10wpi)的血清樣品，并測定其抗-lhrh抗體效價。所有樣本的抗-lhrh抗體效價均超過3.0(log10)，且此效價在10周的期間，直到20wpi(即28周齡)，仍維持于約3.0(log10)。此外，第2和3組維持抗-lhrh抗體效價于3.0(log10)直到24wpi(即32周齡)。相反地，陰性對照組(第5組)和去勢對照組(第6組)的抗體效價總是維持在低濃度的背景值程度。b.血清睪固酮濃度的評估如圖8所示，收集第1至4組豬只于加強免疫后兩周(即10wpi)的血清樣品，并測定血清睪固酮濃度。第1至4組豬只的所有樣品因為高效價抗-lhrh抗體的抑制，而具有位于去勢程度的血清睪固酮濃度。直到20wpi(即28周齡)，第1至4組的睪固酮濃度皆維持與手術去勢對照組(第6組)一樣低的程度。c.經lhrh1疫苗制劑免疫去勢后的性器官(睪丸和副睪)萎縮在于24wpi(即32周齡)的擴大試驗結束時，犧牲豬只并分析其性器官(包括睪丸和副睪)的重量，以評估免疫去勢效力。第1至4組豬只的睪丸和副睪萎縮至無功能的尺寸，如圖9至圖10所示。睪丸和副睪的重量也與血清睪固酮濃度相關。d.體重如圖11所示，第1至4組豬只相較于對照組(第5和6組)于體重增加上具有較佳的表現。e.以腹部脂肪的雄甾烯酮和糞臭素濃度衡量公豬臭的消除在試驗期間，由試驗結束時的公豬臭因子定量證明腹部脂肪的公豬臭的有效消除可延長豬只出售的時期至24wpi(即32周齡)。在此試驗中，于豬只犧牲時由腹部脂肪萃取出雄甾烯酮和糞臭素，并以高效能液相層析偵測。參照圖12，來自第1至4組豬只脂肪中雄甾烯酮濃度控制于0.5μg/g脂肪以下。特別在第3組，雄甾烯酮的平均值降低到0.1384μg/g脂肪。參照圖13，第1至3組豬只的糞臭素濃度控制在0.1μg/g脂肪以下。對第3組豬只而言，其糞臭素的平均值為最低，為0.0514μg/g脂肪。此外，繪制特定樣品的個別雄甾烯酮和糞臭素濃度以評估公豬臭的風險因子，如圖14所示，將試驗所收集的所有樣品分成如低度、中度/低度、中度/高度和高度四個區域。依照圖14，手術去勢組(第6組)總是維持最低濃度的公豬臭因子。來自第3組豬只的樣品具有出色表現，其所有樣品均分布于低度風險區域直到24wpi。來自第2組豬只的樣品具有良好的表現直到24wpi，此時7/8的樣品分布于低度風險區域，以及一個樣品位于高度風險區域。來自第1組與第2組的樣品具有相似表現，其中7/8的樣品分布于低度風險區域，且一個樣品出現于中度/高度風險區域。相反地，生理食鹽水對照組只有2/8樣品位于低度風險區域，2/8位于中度風險區域，且4/8位于高度風險區域(圖14)。本發明的lhrh1疫苗制劑證實其公豬臭消除效力可持續到24wpi(即32周齡)。本試驗結果明確指出，接受不同劑量的本發明lhrh1疫苗制劑的豬只可有效地抑制雄甾烯酮和糞臭素的產生，以消除相對應肉制品的公豬臭。實施例6以lhrh1疫苗制劑于不同時間間隔實行初免與加強免疫的免疫接種時程表對免疫去勢的影響在本實施例中，使用與實施例3類似的試驗方法，除了使用于疫苗制劑的肽免疫原改成seqidno：10和使用佐劑isa50v2外，根據表8修改初免與加強免疫接種的時間點。收集不同時間點的血清以測定抗-lhrh抗體效價與睪固酮的血清濃度。如圖15所示，第1組豬只證實了高度免疫原性，在22周齡豬只測得為3.556(log10)的抗lhrh平均抗體效價，且此效價維持于3.235(log10)直到26周齡。對第2組豬只而言，最高抗體效價為在18周齡的3.526(log10)，且在26周齡時維持在2.869(log10)。對第3組豬只而言，因為在22周齡之晚期加強免疫接種時程表，最高抗體效價為于24周齡(即加強免疫后兩周)的3.219(log10)，且效價維持于2.682(log10)直到26周齡。此外，如圖16所示，第1組的豬只在20周齡(即加強免疫后兩周)時顯現免疫去勢效應(睪固酮濃度≦1.0nmol/l)，免疫去勢效應持續至少6周至26周齡。第2組豬只也顯現高度免疫去勢效力。第2組豬只的睪固酮濃度于加強免疫后2至6周(即在22周齡)期間為低于1.0nmol/l，且維持相對低濃度(睪固酮濃度≦1.644nmol/l)直到26周齡。于加強免疫后兩周，第3組豬只的平均睪固酮濃度為4.535nmol/l。第3組豬只的睪固酮濃度在26周齡抑制至1.968nmol/l。此對豬農有利，因為可于年齡較小的豬只進行疫苗初次免疫，較佳于約3周齡，以方便進行動物管理。豬農也可以對年齡較大的豬只進行加強免疫，因此對工作者提供緩沖時間以免疫豬只。對于豬場實際的免疫去勢操作而言，可確保將睪固酮濃度穩定地維持在低的去勢程度。本試驗的結果指出，本發明疫苗制劑的應用可提早至3至4周齡，以及遲至在18周齡提供加強免疫。初免和加強免疫時程表均可誘導高免疫原性，有效抑制于22至26周齡豬只的血清睪固酮濃度，此為肉品市場上一般豬只出售的時期。實施例7借由lhrh3疫苗制劑消除公豬臭于肉品產業建立謹慎和對消費者友好的方法，設定雄甾烯酮的邊界值為0.5μg/g脂肪供公豬臭風險因子的評估。以中度雄甾烯酮水平(0.5-1.0μg/g脂肪)結合低度糞臭素水平(<0.1μg/g脂肪)，或以低度雄甾烯酮水平(<0.5μg/g脂肪)結合中度糞臭素水平(0.1-0.22μg/g脂肪)，表示發生公豬臭的低度風險。當公豬臭的參數(生物標記)均于中度水準(雄甾烯酮0.5-1.0μg/g脂肪；糞臭素0.1-0.22μg/g脂肪)時，表示發生公豬臭的中度風險。當生物標記(雄甾烯酮和糞臭素)同時超過此些邊界值時，其意謂著視肉品為具有發生公豬臭的高度風險(表9)。在此實施例中，使用與實施例3類似的試驗方法。豬只以配制于佐劑isa50v2的lhrh3(seqidno：7、8和9)的油包水(w/o)乳化液進行免疫接種(如表10所示)。免疫接種后，收集多個時間點的血清以測定血清睪固酮濃度和抗-lhrh抗體效價。此外，收集豬只的組織和器官以測定睪丸和副睪的重量，并利用高效能液相層析測定腹部脂肪的糞臭素和雄甾烯酮量。a.睪丸和副睪的萎縮由不同時間點(即于本研究中分別為10、12、14和16wpi)犧牲的豬只所分離器官的重量，可觀察到睪丸和副睪的萎縮(分別如圖17a至圖17d所示)。以本發明的疫苗制劑(lhrh3)免疫接種時，于本試驗期間，在增加濃度的抗-lhrh抗體的抑制性影響下，睪丸和副睪隨時間萎縮，于10wpi時的副睪和于12wpi(p<0.05)時的睪丸的重量顯著地減少，如圖17所示。b.公豬臭的測定由接種的豬只或未去勢的公豬收集5g背部脂肪，分別加入1.5ml的100％甲醇。然后將脂肪磨碎直到完全均質化。將脂肪萃取物置于15ml離心管中，并在室溫下超音波震蕩5分鐘。將脂肪萃取物置于冰上冷卻15分鐘，然后在5℃下以4,000rpm離心20分鐘，以分離組織碎片。將上清液轉移至另一個1.5ml的離心管中。豬只以疫苗制劑免疫接種后，抗-lhrh抗體的最高效價出現在10wpi(即加強免疫后兩周)，睪固酮濃度抑制至接近去勢程度，為約或低于1.0nmol/l，其造成之脂肪中雄甾烯酮濃度的減少如圖18a所示。接受本發明的lhrh3疫苗制劑豬只的雄甾烯酮濃度為少于0.02至0.53μg/g脂肪，相較之下，接受生理食鹽水的陰性對照組豬只的雄甾烯酮濃度為約少于0.02至2.12μg/g脂肪。相對于對照組，其雄甾烯酮濃度于10wpi顯著地被抑制(p<0.05)直到16wpi(24周齡)本試驗結束。此外，當與陰性對照組的糞臭素濃度(為約0.04至0.36μg/g脂肪)(圖19a)比較時，接受本發明的lhrh3疫苗制劑豬只的糞臭素濃度介于約0.004至0.2μg/g脂肪(圖19b)。因為常進行豬只食物攝取和代謝衍生物(例如：儲存于相對應脂肪組織的糞臭素)的控制，接受本發明的lhrh3疫苗制劑豬只的糞臭素濃度只有于14wpi顯著地減少。依照產業結論，當雄甾烯酮和糞臭素二者同時超過邊界值(雄甾烯酮：0.5μg/g脂肪；糞臭素：0.22μg/g脂肪)時，其意謂著視肉品為發生公豬臭的高度風險。圖19的結果指出，由疫苗接種組別提供的所有脂肪樣品于對厭惡氣味的敏化評估中屬于低度風險區域，其不論于10wpi或于16wpi具有低雄甾烯酮濃度(<0.5μg/g脂肪)和低糞臭素濃度(<0.22μg/g脂肪)；然而，陰性對照組豬只中有約50％的肉品曝露于發生公豬臭的風險中。實施例8本發明lhrh1疫苗制劑的免疫接種時程表的適應性在本實施例中，使用與實施例3類似的試驗方法，除了劑量為25μg/2ml之外，以如表11所示配制于佐劑isa50v2以形成油包水(w/o)乳化液的lhrh1(seqidno：10)肽進行免疫接種，且疫苗接種時間點如表11所示。a.利用elisa分析血清抗-lhrh抗體效價實施例初始階段的抗-lhrh抗體的效價為1.458±0.007(log10)(平均值±標準差)，以其作為背景值。初免和加強免疫接種后(第1至3組)，其抗體效價逐漸增加且均于加強免疫后兩周達到最高水準。第1組的平均抗體效價從10wpi的最高水準3.636±0.577(log10)下降到在試驗結束時的2.418±0.742(log10)。第2組的平均抗體效價從此四組中的最高水準3.868±0.221(log10)下降到研究結束時的2.806±0.213(log10)。第3組和第4組的抗體濃度曲線相似。此結果顯示，第一次免疫接種可優選地于8周齡到3周齡時投予(圖20)。b.血清睪固酮濃度的評估如圖21所示，所有組別于試驗起始階段的睪固酮濃度為2.943±2.854(平均值±標準差)nmol/l。設定疫苗效力評估的時間點為加強免疫后兩周，其通常為免疫去勢中最低睪固酮(tt)濃度?；诖擞^察，第1至4組的平均睪固酮濃度分別為1.265±0.353、1.329±0.636、1.904±2.297以及1.222±0.445(平均值±標準差)nmol/l。借由克-瓦二氏單因子等級變異數分析法(kruskal-wallisonewayanalysisofvarianceonranks)分析，顯示組別間不具有統計上顯著性差異(p＝0.992)。此外，抗-lhrh抗體效價與睪固酮濃度呈現負相關，具有-0.72的相關系數。在此，在加強免疫后，高抗-lhrh抗體效價造成低睪固酮濃度。為評估免疫持續性，以第3組的豬只表現最佳(即最低睪固酮濃度)，于24周齡的平均血清睪固酮濃度為0.896±0.386nmol/l。第3和4組的間則沒有顯著差異(p＝0.835)。隨時程表推進，睪固酮的濃度增加至1.913±0.930nmol/l(第2組)和4.149±3.603nmol/l(第1組)。通過鄧恩法(dunn’smethod)分析，顯示第1和3組之間具有顯著差異(p＝0.010)。c.性器官測量從12周齡起測量睪丸尺寸(長度和寬度)，并使用下述公式計算體積：睪丸體積＝1/2xaxb2，此處“a”為睪丸的長度“b”為睪丸的寬度性器官的測量包含：(1)活體的睪丸長度和寬度，以及(2)在尸體剖檢的睪丸和副睪重量、長度和寬度。根據圖22和圖23，第1至4組間的成對睪丸重量、成對副睪重量和睪丸長度沒有差異?；铙w的睪丸長度和體積(如圖22a和圖22b所示)在22周齡前均高度地被抑制。然而，于每一個參數中，第2組豬只均具有最佳結果。于24周齡的雄甾烯酮和糞臭素濃度分布如圖24所示。依據討人喜歡的公豬臭因子濃度的類別，第1、3和4組中87.5％的豬只為“低度風險”，其對人類的味覺和嗅覺并不敏感。第2組的所有豬只落于“低度風險”區域，因此呈現100％有效。d.體重測定本試驗中每頭豬只的體重。各分組豬只的生長模式類似。臺灣市場上販售豬只的平均重量為約115kg，此可在26周齡前達成。總之，相較分別于8和16周齡實行初免和加強免疫的定期免疫接種計劃，本發明的初免時程表可彈性地改變至于3周齡的豬只施用。此外，如本試驗所示，加強免疫的時程表可遲至于14至16周齡時施用。實施例9利用lhrh1疫苗制劑分析早期適應性處理在本實施例中，使用與實施例3類似的試驗方法，除了于疫苗制劑使用的肽免疫原改成seqidno：10之外，疫苗接種時間點如表12所示。本實施例的目的為評估若疫苗制劑投予非常幼小豬仔時的去勢持續性，以及導致性器官萎縮的免疫治療。此試驗可評估非常早期的“彈性治療方案”，以決定免疫接種方案的最早初免時間。a.血清抗-lhrh抗體效價分析如圖25所示，第1組(于3日齡(d3)進行初免，并于3周齡進行加強免疫)于12周齡的平均抗-lhrh抗體效價為2.346±0.451(log10)。另外，第2組(于7日齡進行初免，并于3周齡進行加強免疫)于6周齡的抗-lhrh抗體效價為2.173±0.527(log10)。于這些組別中，只有第3組的豬只(于3周齡進行初次免疫且于6周齡進行加強免疫)于8周齡的抗-lhrh抗體效價高達2.767±0.476(log10)。對在第1至3組的豬只而言，于加強免疫二周后達到最高的抗-lhrh抗體效價之后，第1、2和3組的抗體效價分別高于1.718±0.297、1.765±0.340和1.770±0.283(log10)。第4組豬只于3周齡實行初免，但于16周齡加強免疫。第4和5組的豬只于16周齡進行加強免疫后二周(在18周齡)可達到較高的抗體效價，分別為3.249±0.346和2.893±0.786。接受市售疫苗的豬只(第6組)，抗-lhrh抗體效價在22周齡(即加強免疫后二周)被誘發至高于1.724±0.339(log10)。陽性對照(即接受手術去勢的豬只(第7組))和陰性對照(即未接受疫苗接種的豬只(第8組))皆不會引發超過背景水平的抗-lhrh抗體效價，其分別測定數值為1.451±0.006和1.445±0.010(log10)。b.血清睪固酮濃度的評估如圖26所描述，第1和2組豬只的血清睪固酮濃度分別減少至最低濃度2.154±0.921nmol/l于10周齡以及2.183±1.231nmol/l于6周齡。第3組于3周齡投予第一劑，且睪固酮濃度曲線與第1和2組相似。第3組的最低睪固酮濃度為于12周齡的3.065±0.205nmol/l。無論是否于3或8周齡投予第一劑，當延遲第4和5組的加強免疫接種至16周齡，第4和5組在20周齡之睪固酮濃度分別抑制至低水準，為約0.586±0.184和0.893±1.192nmol/l。相反地，第6組的豬只依使用說明進行接種，在20周齡豬只的血清中，保持高濃度的睪固酮(約9.415±7.560nmol/l)。對接受手術去勢的第7組的豬只而言，每頭豬的睪固酮濃度始終保持在背景值(約0.559±0.372nmol/l)。對于未接受疫苗接種以作為陰性對照組(第8組)的豬只而言，試驗期間中的平均睪固酮濃度維持在正常濃度(介于3.546±2.409nmol/l和7.380±3.269nmol/l之間)。綜上所述，抗-lhrh抗體效價可利用早在3周齡的初免和之后的加強免疫有效地誘導，其維持高抗體效價至試驗結束，與依循常規疫苗接種時程表(于8周齡初免和16周齡加強免疫)者具有相似的抗體濃度曲線。因此，于3周齡至8周齡給予初次免疫，而于16周齡給予加強免疫時，血清睪酮濃度可有效地抑制至低水平。因此方便豬農可于3周齡豬只(此時豬只要投予許多其他一般疫苗)實行具彈性的早期階段免疫去勢時程表。實施例10以100μg/ml/劑量的lhrh3疫苗制劑于田間試驗(于8和16周齡分別進行初免和加強免疫并在22周齡結束)評估免疫去勢效力于臺灣南部的豬場施行大規模的田間試驗，利用二個gmp批次的lhrh3疫苗制劑于田間試驗評估免疫去勢效力。在此實施例中，于豬場內準備36頭公豬和8至9周齡的8只去勢豬只。將豬只分為4組，并于0、8、10、12以及14wpi稱重。所有豬只在0和8wpi免疫接種，且于0、8、10、12以及14wpi抽血以測定抗-lhrh抗體的血清效價和血清睪固酮濃度(如表13所示)。犧牲后，測量性器官(睪丸、副睪、精囊和前列腺腺體)重量、背部脂肪厚度和腰眼面積(最長肌)。a.利用elisa分析血清抗-lhrh抗體效價如圖27和表14所示，第1和2組豬只的抗-lhrh抗體效價明顯高于第3組(未去勢對照組(公豬))和第4組(手術去勢對照組(閹豬))的豬只。例如，第1組的抗-lhrh抗體效價約為1.52±0.12(log10)至2.90±0.42(log10)，以及第2組的抗-lhrh抗體效價約為1.45±0.01(log10)至3.09±0.37(log10)。相較之下，第3和4組的所有抗-lhrh抗體效價顯著地低在第1和2組。b.對免疫去勢的血清睪固酮濃度的評估如圖28和表15所示，第1和2組所有豬只在以每劑量100μg/ml的lhrh3疫苗制劑免疫接種后，具有100％的免疫去勢率。第1和2組所有豬只的睪固酮濃度從8wpi起抑制至非常低的水平，達到免疫去勢。試驗結果證實本發明的lhrh3疫苗制劑可有效地抑制豬只性成熟的特性。c.于接受疫苗接種豬只的體重增加豬只體重的測定如表16所示。第1和2組豬只體重高于第3組。如圖29和表17所示，與去勢對照組(第4組)相比，接種疫苗的豬只(第1和2組)的平均日增重(adg)較高。平均日增重增加的主要原因是平均日攝食量(adfi)的增加，而非飼料換肉率(fe)。田間試驗的結果證明，本發明的lhrh3疫苗制劑當利用分別于8和16周齡的初免和加強免疫方案以每劑量100μg投予時，可有效地免疫去勢及顯著地促進公豬生長。此促進生長的結果為豬只可超前常規育種計劃二周于市場上販售，對豬農具有顯著的額外經濟效益。d.生殖道性器官的萎縮在14wpi(即22周齡)本試驗結束時犧牲豬只，對睪丸、副睪、精囊和前列腺稱重，以評估免疫去勢效力。對第1和2組的豬只而言，生殖道性器官(包括睪丸、副睪、精囊和前列腺)的重量顯著地下降(表18)，且這些生殖道性器官萎縮至無功能的尺寸。綜上所述，本發明的lhrh肽疫苗制劑具有比市售產品更高的免疫去勢效果。于畜牧業領域中，除了因為人道因素將常規的手術去勢改變成免疫去勢之外，此種免疫去勢所造成的顯著重量增加還可產生顯著的經濟效益，故為往后動物去勢的趨勢。雖然本發明已經通過實施例及較佳實施例加以描述，可被理解的是，本發明并不限于所揭露的實施例。相反的，其意圖涵蓋各種修改和類似的排列(如對本領域技術人員為顯而易見者)。因此，應賦予本案所附的權利要求書最寬的解釋，以包含所有此種的修改和類似的排列。所有說明書中所揭示的發明技術特點可以任意方式組合。說明書中揭示之每一技術特點可以提供相同、等同或相似目的的其他方式替換。因此，除非另有特別說明，文中所有揭示的特點均只是等同或相似特點的一般系列的實例。由上述可知，熟習此技藝者能輕易地了解本發明的必要特征，在不脫離其精神與范圍之下能就本發明做許多改變與調整以應用于不同用途與條件。表1、lhrh、th抗原表位和協同刺激的侵染素肽結構區域序列表2、本發明lhrh肽免疫原序列表3、配制于isa50v2中的lhrh3制劑的研究設計*周齡；#wpi：疫苗接種后周數(初免后周數)(weekspost(first)immunization)；§lhrh3包含seqidno：7、8以及9的肽。表4、配制于emulsigend中的lhrh3制劑的研究設計*周齡；#wpi：疫苗接種后周數(初免后周數)；§lhrh3包含seqidno：7、8以及9的肽。表5、配制于isa50v2中的lhrh1制劑的研究設計*周齡；#wpi：疫苗接種后周數(初免后周數)；§lhrh1包含seqidno：10的肽。表6、配制于emulsigend中的lhrh1制劑的研究設計*周齡；#wpi：疫苗接種后周數(初免后周數)；§lhrh1包含seqidno：10的肽。表7、免疫持續性的研究設計*周齡；#wpi：疫苗接種后周數(初免后周數)；§lhrh1包含seqidno：10的肽。表8、疫苗接種的時間點疫苗接種：25μg/ml的seqidno：10的肽；b：采血。表9、借由雄甾烯酮和糞臭素的組合的邊界值(cut-offvalues)對公豬臭的風險評估表10、公豬臭消除的研究設計*周齡；§lhrh3包含seqidno：7、8以及9的肽。表11、免疫接種適應性研究的時程表表12、早齡適應性研究的時程表日齡；*w:周齡；#wpi：疫苗接種后周數(初免后周數)。表13、免疫持續性的研究設計表14、抗-lhrh抗體的效價分析表15、睪固酮濃度和免疫去勢*設定睪固酮的去勢程度為在第二次注射后二周(10wpi)≦1.87nmol/l(99％置信區間)。表16、相較于對照組豬只(第3和4組)的接受疫苗制劑豬只(第1和2組)的體重表17、平均日增重、平均日采食量和飼料換肉率組別平均日增重(kg)平均日采食量(kg)飼料換肉率10.9232.4892.69621.0002.6322.63230.9062.2202.45340.8092.2882.828表18、生殖道性器官重量表18(續)、生殖道性器官重量【序列表】<110>美國聯合生物醫學公司<120>免疫性lhrh組合物及其在豬只中的應用<130>1004263.212wo(2033-wo)<140>tbd<141>2014-07-25<150>pct/us2014048164/<151>2014-07-25<160>12<170>patentinversion3.5<210>1<211>10<212>prt<213>豬<220><221>肽<222>(1)..(10)<223>lhrh肽<400>1gluhistrpsertyrglyleuargprogly1510<210>2<211>17<212>prt<213>豬<220><221>肽<222>(1)..(17)<223>破傷風毒素(aa.830-844)<400>2lyslysglntyrilelysalaasnserlyspheileglyleuthrglu151015leu<210>3<211>17<212>prt<213>豬<220><221>肽<222>(1)..(17)<223>麻疹病毒f蛋白質輔助t細胞抗原表位<400>3leusergluilelysglyvalilevalhisargleugluglyvalgly151015gly<210>4<211>15<212>prt<213>豬<220><221>肽<222>(1)..(15)<223>b型肝炎表面抗原輔助t細胞抗原表位<400>4phepheleuleuthrargileleuthrileproglnserleuglu151015<210>5<211>19<212>prt<213>豬<220><221>肽<222>(1)..(19)<223>結構性合成抗原庫(ssal)輔助t細胞抗原表位<220><221>misc_feature<222>(4)..(4)<223>sort<220><221>misc_feature<222>(7)..(7)<223>korr<220><221>misc_feature<222>(8)..(8)<223>gort<220><221>misc_feature<222>(12)..(12)<223>hort<220><221>misc_feature<222>(13)..(13)<223>korr<400>5ileserilexaagluilexaaxaavalilevalxaaxaailegluthr151015ileleuphe<210>6<211>16<212>prt<213>豬<220><221>肽<222>(1)..(16)<223>來自侵染素之協同刺激的肽結構區域<400>6thralalysserlyslyspheprosertyrthralathrtyrglnphe151015<210>7<211>27<212>prt<213>豬<220><221>肽<222>(1)..(17)<223>破傷風毒素輔助t細胞抗原表位<220><221>肽<222>(18)..(27)<223>lhrh<400>7lyslysglntyrilelysalaasnserlyspheileglyilethrglu151015leugluhistrpsertyrglyleuargprogly2025<210>8<211>45<212>prt<213>豬<220><221>肽<222>(1)..(16)<223>來自侵染素之協同刺激的肽結構區域<220><221>肽<222>(17)..(18)<223>連接子<220><221>肽<222>(19)..(35)<223>麻疹病毒f蛋白質輔助t細胞抗原表位<220><221>肽<222>(36)..(45)<223>lhrh<400>8thralalysserlyslyspheprosertyrthralathrtyrglnphe151015glyglyleusergluilelysglyvalilevalhisargleuglugly202530valglyglygluhistrpsertyrglyleuargprogly354045<210>9<211>45<212>prt<213>豬<220><221>肽<222>(1)..(16)<223>來自侵染素之協同刺激的肽結構區域<220><221>肽<222>(17)..(18)<223>連接子<220><221>肽<222>(19)..(33)<223>b型肝炎表面抗原輔助t細胞抗原表位<220><221>肽<222>(34)..(35)<223>連接子<220><221>肽<222>(36)..(45)<223>lhrh<400>9thralalysserlyslyspheprosertyrthralathrtyrglnphe151015glyglyphepheleuleuthrargileleuthrileproglnserleu202530gluglyglygluhistrpsertyrglyleuargprogly354045<210>10<211>47<212>prt<213>豬<220><221>肽<222>(1)..(16)<223>來自侵染素之協同刺激的肽結構區域<220><221>肽<222>(17)..(17)<223>epsilonk作為連接子<220><221>肽<222>(18)..(36)<223>結構性合成抗原庫1(ssal1)輔助t細胞抗原表位<220><221>misc_feature<222>(21)..(21)<223>sort<220><221>misc_feature<222>(24)..(24)<223>rork<220><221>misc_feature<222>(25)..(25)<223>torg<220><221>misc_feature<222>(29)..(29)<223>torh<220><221>misc_feature<222>(30)..(30)<223>korr<220><221>肽<222>(37)..(37)<223>epsilonk作為連接子<220><221>肽<222>(38)..(47)<223>lhrh<400>10thralalysserlyslyspheprosertyrthralathrtyrglnphe151015lysileserilexaagluilexaaxaavalilevalxaaxaaileglu202530thrileleuphelysgluhistrpsertyrglyleuargprogly354045<210>11<211>4<212>prt<213>人類<220><221>肽<222>(4)..(4)<223>epsilonk<220><221>肽<222>(1)..(4)<223>間隔<400>11lyslyslyslys1<210>12<211>4<212>prt<213>人類<220><221>肽<222>(1)..(1)<223>epsilonk<220><221>肽<222>(1)..(4)<223>間隔<400>12lyslyslyslys1當前第1頁12