本發明涉及材料
技術領域：
，尤其涉及一種可注射用美容整形材料及其制備方法。
背景技術：
：當今社會，整形已經不僅僅是損傷修復領域的專利，更成為人們追求美麗的手段。隨著生活水平的提高、整形技術的發展，通過整形獲得美麗這一途徑已經逐漸為人們所接受和信任。接受整形的人群也已經由從事演藝事業的娛樂圈明星向普通群眾擴散，從整形美容材料所擁有的巨大需求市場，我們可以預測其良好的發展前景。各種整形美容手段如雨后的春筍不斷涌現，包括傳統的整形外科手術、顯微外科技術、皮膚擴張技術及注射移植技術等,其中注射移植技術尤其受到整形美容就醫者的追捧，應用注射性軟組織填充材料進行無創的面部填充成為最流行的操作手段，在全世界范圍內得到醫療美容行業專業人員與愛美人士的廣泛認同，成為未來醫療美容的發展方向。注射填充技術操作簡單，僅幾分鐘的注射就能馬上顯出效果，沒有痛苦、不影響工作、生活，非常方便，而且不留痕跡，秘密性好，保護了客戶的隱私。但是理想的注射性軟組織填充材料要同時具有生物相容性、安全性、易操作性、錨定性和持久性，這對于研究和開發整形美容產品的學者來說，一直是一個極具挑戰性的課題。到目前為止，可注射整形美容外科材料的研究經歷了3個發展階段。(1)高分子化學階段：產品以石蠟、羊毛脂、硅凝膠等不可降解材料為代表。多為天然提取物和化學合成物，具有組織充填、修復的作用。(2)高分子生物化學階段：以膠原、透明質酸、聚乳酸等可降解材料及丙烯酸水凝膠、聚甲基丙烯酸甲酯不可降解加可降解復合材料為代表。多為天然組織提取物和化學聚合物，具有組織充填或介導組織成形作用。(3)生物組織工程階段：以異體脫細胞真皮微粒、自體成纖維細胞、種子細胞加可降解或不可降解支架或基質成形或誘導、介導組織細胞生成的材料為代表。具有在分子水平精確引導細胞分化、增殖、構架、形成組織，加速組織修復的作用。近年來，各種生物材料(如自體脂肪、自體或異體膠原)和人工材料在注射整形美容方面都得到了廣泛的應用，但都有各自的優、缺點。目前國際上常用的注射性軟組織填充材料有以下幾種：1、牛膠原蛋白(Zyrerm)：被準許用于人的除皺治療上的第一個充填品。目前應用的膠原主要是牛的肌腱等經過特殊工藝制取的真皮膠原。盡管至今它都是可注射入真皮的最安全的材料之一，但因為能夠被人體吸收或降解，所以除皺效果僅能維持數月。而且牛膠原蛋白屬于異種蛋白，只有通過皮膚過敏測試的患者才準許使用。2、硅油(Silicone)：對人體無害，且長期不變質，填入后手感柔軟。但存在移位問題。3、透明質酸(Restylane)：一種天然多糖類，透明、具有黏性的膠狀物質，在自然界中廣泛存在于脊椎動物的結締組織、皮膚真皮層、關節軟骨、胎盤等組織中。它能與人體皮膚組織很好地融合，與蛋白質的水合作用能幫助人體結締組織吸收、鎖定水分子，進而改善細胞的代謝環境及水分和離子平衡，以增加皮膚彈性，達到除皺效果。雖然它具有無毒、無免疫性、生物相容性好、可常溫保存等優勢，但它同樣可被人體分解吸收，除皺效果維持時間較牛膠原蛋白長，但仍非永久除皺材料。4、肉毒素(Botox)：嚴格說來，肉毒素并非皺紋充填材料，因為其除皺機理與以上材料有所不同，并非物理充填。肉毒素的除皺治療機理在于它能作用于周圍運動神經末梢及神經肌肉接頭，抑制突觸前膜釋放乙酰膽堿，從而導致肌肉松弛性麻痹，治療肌肉痙攣和肌張力障礙性疾病。從機理可知，肉毒素主要適用于動力性皺紋，即由表情肌收縮引起的各種皺紋的消除，而并不適合皮膚嚴重松弛者。肉毒素注射要避免過量，過量會造成面部神經麻痹和表情僵硬。一次肉毒素注射的除皺效果能夠維持9個月到1年，保持長期效果需反復注射。5、愛貝芙(Artecoll)：經過歐盟七年，美國FDA五年的臨床驗證，愛貝芙成為世界上第一種美國FDA認證的永久性除皺填充材料。作為現今最優秀的除皺材料，它具有以往所有美容外科領域軟組織填充材料所不具有的永久性療效。雖然是現今最優秀的的填充材料，但是好材料的應用和普及推廣要求以合理的價格為前提，而愛貝芙的生產由一家荷蘭公司壟斷，技術壁壘的存在導致愛貝芙的價格居高不下，注射一針達萬元的費用使愛貝芙的客戶群局限于都市金領和高端愛美一族，無疑阻礙了其應用推廣。綜上所述，目前常用的牛膠原蛋白、透明質酸和肉毒素這些注射材料的機械強度不夠，注射效果維持的時間短；硅油雖然維持的效果長，但是與人體組織的生物相容性差，注射后效果不自然；而愛貝芙的價格過高。有鑒于此，特提出本發明。技術實現要素：本發明要解決的技術問題是，針對現有填充材料的機械強度不夠，注射后的組織中存在硬結的問題，提供了一種可注射用美容整形材料，本發明提供的材料具有機械強度較高，注射后可見成骨現象，并且注射后能達到最自然的效果，組織柔軟，無硬結。(二)技術方案為了解決上述技術問題，本發明提供了一種可注射用美容整形材料，包含：膠原蛋白粉和粒徑為30～40μm的球形羥基磷灰石粉。在本發明提供的這一可注射用美容整形材料中，使用粒徑為30～40μm球形羥基磷灰石粉，具有如下優點：羥基磷灰石用于注射用整形材料中時，常常是被粉碎成粉末，并且一般是追求粒度越細越好，雖然粉末注射時能夠很容易地進入人體組織。但是，本發明人發現，如果羥基磷灰石粒徑過小，會存在注射入組織的粉末被人體的單核細胞、巨噬細胞等所吞噬、帶走，無法在注射部位起到支撐作用，從而導致注射效果不理想的問題。而且，這些粉末一般是粉碎后得到的，沒有一定規則的外形，無論粒徑較大還是粒徑較小，在注射入人體組織后都容易引起肉芽腫反應。而本發明中采用的是球形的羥基磷灰石粉，其表面光滑的特性使得其對組織的刺激性降到最低，最重要的是這些圓形光滑的微球注射后能夠達到最自然的效果，注射部位的組織柔軟，無硬結。而且微球的粒徑大小既可保證充填劑被細小針頭輕松注入皮下，又保證了微球不被人體的單核細胞、巨噬細胞等所吞噬、帶走，持久地留在治療部位，利用它對局部組織的刺激和支架作用，可使人體自身纖維結締組織增生并包裹球形羥基磷灰石粉，恢復皮膚原來的厚度，從而消除面頸部皺紋及凹陷等的衰老征象，讓臉部重現青春。經檢測，采用本發明這一材料注射后可見成骨現象。注射入人體組織后，材料中的膠原蛋白在1-3個月后逐步被降解吸收，不再起到支撐作用。如果其粒徑過大，可能無法保證注射過程的順利進行，而且有可能引起不適感，如果其粒徑過小，很容易在制備時導致形成的凝膠的內部網狀結構強度過高，不易注射。為了避免上述問題，本發明中，優選地，所述膠原蛋白粉的粒徑為0.1～2mm。優選地，所述膠原蛋白粉和所述球形羥基磷灰石粉的質量比為1：(3～8)。采用這一質量比制備而成的材料中，膠原蛋白形成的凝膠可將球形羥基磷灰石粉均勻地包裹起來，避免羥基磷灰石粉出現團聚。即使放置24個月后使用，仍能保持注射效果。另外，如果膠原蛋白粉的量過大，可能會造成局部不適，并且球形羥基磷灰石粉相對量過少，不能或者不足以及時地刺激產生足夠的纖維結締組織；如果膠原蛋白粉的量過小，可能維持初始支撐作用時間過短，等不到刺激增生足夠的人體自身纖維結締組織來代替其支撐作用，導致注射部位塌縮。優選地，還包含麻醉劑。優選地，所述麻醉劑選自利多卡因、普魯卡因、依替卡因、阿替卡因、甲哌卡因、普莫卡因、奎尼卡因或它們的鹽中的一種或多種。本發明還提供了該可注射用美容整形材料的制備方法，包括如下步驟：(1)、提供膠原蛋白粉和球形羥基磷灰石粉；(2)、對所述膠原蛋白粉和/或球形羥基磷灰石粉進行鈷60輻照滅菌；(3)、將滅菌后的膠原蛋白粉與滅菌注射用水混合并攪拌，得到凝膠；(4)、將所述凝膠與所述球形羥基磷灰石粉混合，得到可注射用美容整形材料。采用本發明提供的制備方法，可將羥基磷灰石粉均勻地包裹在凝膠中。為了保證材料能夠用于人體注射，保證制備過程的無菌條件至關重要。在本發明中，在原料準備階段，對所用的膠原蛋白粉和/或球形羥基磷灰石粉進行鈷60輻照滅菌，有效殺滅制備原料中的微生物。在本發明中，優選地，所述鈷60輻照滅菌的有效劑量為15～35KGy，經檢測，采用這一劑量進行輻射照射后，制備原料中的微生物的存活率為0，而且制備原料也不會存在輻射問題。此外，在具體制備過程中，還要對所用的全部設備和器具進行滅菌，將所用的設備中接觸產品的部件，與所用的器具，例如剪刀、鑷子、扳手等，分別包好并貼上濕熱滅菌指示貼，放在蒸汽滅菌器內，在120℃濕熱滅菌30min。優選地，在步驟(1)中，所述粉碎的轉速為8000-12000rpm，粉碎的時間為1～2s。在這一轉速下轉動1～2s，可快速將膠原蛋白海綿粉碎成粒徑符合要求的膠原蛋白粉，而且還不會出現轉動時間過長時導致溫度升高從而使得膠原蛋白粉在高溫下溶解的問題。優選地，所述步驟(3)具體包括：將滅菌后的膠原蛋白粉與所述滅菌注射用水混合后，在100～150r/min的轉速下攪拌20～24h，得到凝膠；其中，所述膠原蛋白粉在所述滅菌注射用水中的濃度為2質量％～10質量％，例如可以為2質量～6質量％。在制備過程中，將膠原溶解獲得均勻、無分層、無沉淀、無懸浮的凝膠也至關重要。發明人發現，其中一個重要因素就是攪拌時的轉速和時間，攪拌過快，時間過長，常常出現升溫，從而導致化學變化，而攪拌過慢，時間過短，則不能很好地溶解，因此，本發明中，在100～150r/min的轉速下攪拌20～24h，得到的凝膠目測均勻，無分層、無沉淀、無懸浮等現象。此外，為了更好地溶解，可將膠原蛋白粉分批次加入。優選地，當所述可注射用美容整形材料中還包含麻醉劑時，所述步驟(3)具體包括：將麻醉劑與滅菌注射用水混合，得到第一溶液；將滅菌后的膠原蛋白粉與所述第一溶液混合后，在100～150r/min的轉速下攪拌20～24h，得到凝膠；其中，所述膠原蛋白粉在所述第一溶液中的濃度為2質量％～10質量％，例如可以為2質量～6質量％。此外，在步驟(4)中，為了將凝膠與球形羥基磷灰石粉混合均勻，可在100～150r/min的轉速下攪拌2～3h，得到的材料目測混合均勻，無析出，無沉淀。在上述制備方法中只說明了如何制備本發明提供的這一可注射用美容整形材料，若是采用注射器將這一材料包裝成成品，則后續包裝步驟具體包括：灌裝步驟：在超凈臺上組裝完成灌裝機，保證無菌操作，及時更換手套。將制得的材料轉移到灌裝機上，并打開下出料口，調節灌裝機，使灌裝量在0.8-1.0ml。在超凈操作臺中打開一次性注射器的包裝，接入灌裝機出口處的螺口，打開空氣壓縮機的總開關(在潔凈車間外)，踩下灌裝機灌裝開關，材料被灌入注射器中。內包裝步驟：灌裝完成后，在超凈操作臺中擰好螺旋帽，并裝入，迅速封口，然后再放入雙層鋁箔袋，在熱合封口機上進行封口，完成雙層內包裝。所用的透明復合袋和雙層鋁箔袋在使用前需進行鈷60輻照滅菌，有效劑量為15～35KGy。儲存步驟：將包裝好的產品裝入中包裝盒或者自封袋，放入2-8℃的環境冷藏。(三)有益效果本發明的上述技術方案具有如下優點：一是本發明中采用的是球形的羥基磷灰石粉，其表面光滑的特性使得其對組織的刺激性降到最低，最重要的是這些圓形光滑的微球注射后能夠達到最自然的效果，注射部位的組織柔軟，無硬結。而且微球的粒徑大小既可保證充填劑被細小針頭輕松注入皮下，又保證了微球不被人體的單核細胞、巨噬細胞等所吞噬、帶走，持久地留在治療部位，利用它對局部組織的刺激和支架作用，可使人體自身纖維結締組織增生并包裹球形羥基磷灰石粉，恢復皮膚原來的厚度，從而消除面頸部皺紋及凹陷等的衰老征象，讓臉部重現青春。經檢測，采用本發明這一材料注射后可見成骨現象。二是長效，持久性祛皺，大多數人只需注射一次。三是快速，注射過程方便，只需3-5分鐘，注射完后即能正常活動。四是安全，膠原為人體所需，能夠被人體吸收，達到除皺目的。五是價廉，價格不貴，本發明產品每注射一針的生產成本只需約200～400元就能夠達到相當甚至更好的效果，因此能夠惠及大眾。附圖說明圖1是本發明制得的材料注射入兔的頭頂骨組織后在光鏡下顯示的切片圖；圖2是將本發明實施例三制得的材料注射入兔頭部的皮下組織1個月后，在光鏡下的切片圖；圖3是將本發明實施例三制得的材料注射入兔頭部的皮下組織4個月后，在光鏡下的切片圖。具體實施方式為使本發明實施例的目的、技術方案和優點更加清楚，下面將結合本發明實施例中的附圖，對本發明實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例是本發明的一部分實施例，而不是全部的實施例。基于本發明中的實施例，本領域普通技術人員在沒有做出創造性勞動的前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本發明保護的范圍。本發明中所用的主要設備如表1所示。表1本發明實施例所用的主要設備設備名稱型號/性能技術要求備注反應釜自制不銹鋼反應釜———灌裝機D9-10單頭膏體灌裝機———粉碎機———組織粉碎機或者小型機械粉碎機電子天平0.01g或者更高精度———空氣壓縮機ZBM-0.0678———立式壓力蒸汽滅菌器LS-B50L-Ⅱ或者其他以上規格———多功能自動薄膜封口機HYH-900或者FR-900———實施例一用粉碎機將膠原蛋白海綿粉碎為粉末，粉碎機的轉速設定為7000rpm，時間設定為2s，得到膠原蛋白粉。將所用的粒徑為30μm的球形羥基磷灰石粉和上述步驟中制得的膠原蛋白粉進行鈷60輻照滅菌，確保原材料無菌。將反應釜接觸產品的部分配件拆卸下來，與制備所用的剪刀、鑷子、扳手等，分別包好并貼上濕熱滅菌指示貼，放在蒸汽滅菌器內，120℃濕熱滅菌30min。將滅菌后的膠原蛋白粉40g分4次和滅菌注射用水1000mL分批交替加入到反應釜中，直至添加完成，密封反應釜，開啟攪拌，轉速120r/min，攪拌反應24小時，同時開啟操作臺紫外燈及高效空調，得到目測均勻，無分層、無沉淀、無懸浮等現象的凝膠。打開反應釜頂蓋或者投料口，加入180克羥基磷灰石微球粉，攪拌2小時，得到產品。目測產品混合均勻，無析出，無沉淀。實施例二用粉碎機將膠原蛋白海綿粉碎為粉末，粉碎機的轉速設定為8000rpm，時間設定為2s，得到膠原蛋白粉。將所用的粒徑為35μm球形羥基磷灰石粉和上述步驟中制得的膠原蛋白粉進行鈷60輻照滅菌，確保原材料無菌。將反應釜接觸產品的部分配件拆卸下來，與制備所用的剪刀、鑷子、扳手等，分別包好并貼上濕熱滅菌指示貼，放在蒸汽滅菌器內，120℃濕熱滅菌30min。將滅菌后的膠原蛋白粉50g分5次和滅菌注射用水950mL分批交替加入到反應釜中，直至添加完成，密封反應釜，開啟攪拌，轉速120r/min，攪拌反應24小時，同時開啟操作臺紫外燈及高效空調，得到目測均勻，無分層、無沉淀、無懸浮等現象的凝膠。打開反應釜頂蓋或者投料口，加入150克羥基磷灰石微球粉，攪拌3小時，得到產品。目測產品混合均勻，無析出，無沉淀。實施例三用粉碎機將膠原蛋白海綿粉碎為粉末，粉碎機的轉速設定為12000rpm，時間設定為1s，得到膠原蛋白粉。將所用的粒徑為40μm球形羥基磷灰石粉和上述步驟中制得的膠原蛋白粉進行鈷60輻照滅菌，確保原材料無菌。將反應釜接觸產品的部分配件拆卸下來，與制備所用的剪刀、鑷子、扳手等，分別包好并貼上濕熱滅菌指示貼，放在蒸汽滅菌器內，120℃濕熱滅菌30min。將利多卡因50ml，加入到950ml滅菌注射用水中，形成第一溶液。將滅菌后的膠原蛋白粉40g分4次和第一溶液加入交替添加到反應釜中，直至添加完成，密封反應釜，開啟攪拌，轉速180r/min，攪拌反應20小時，同時開啟操作臺紫外燈及高效空調，得到目測均勻，無分層、無沉淀、無懸浮等現象的凝膠。打開反應釜頂蓋或者投料口，加入320克羥基磷灰石微球粉，攪拌3小時，得到產品。目測產品混合均勻，無析出，無沉淀。將產品注射入兔的頭頂骨組織后在光鏡下切片觀察，如圖1所示，材料的結構為網格支架中充滿帶有一定折光性的小顆粒團。將產品灌入注射器中，具體操作如下：在超凈臺上組裝完成灌裝機，保證無菌操作，及時更換手套。將制得的材料轉移到灌裝機上，并打開下出料口，調節灌裝機，使灌裝量在0.8-1.0ml。在超凈操作臺中打開一次性注射器的包裝，接入灌裝機出口處的螺口，打開空氣壓縮機的總開關(在潔凈車間外)，踩下灌裝機灌裝開關，材料被灌入注射器中。將注射器中的材料注射入兔的頭部皮下組織中，注射入1個月后，如圖2所示，顯示了皮膚和頭骨以及兩者之間的疏松結締組織，其中，皮膚：可見表皮、真皮組織，毛囊深入到真皮厚度的1/2或全層。真皮層下為皮下組織，可見肌肉層和疏松結締組織。頭骨：切面可見帶有骨膜的板狀骨，更深層為松質骨，可見骨小梁和骨髓結構。皮下結締組織：這是材料注射區域，可見疏松結締組織、小血管，其中一處可見一個包囊，內側貼近囊壁可見植入材料；為紫紅色小顆粒團，外面被成纖維細胞和纖維細胞、膠原纖維組成的囊壁包繞。本例材料中可見新生骨結構，可見骨基質中骨陷窩的骨細胞，見下圖箭頭所指，外緣似乎可見成骨細胞環繞。另外顆粒樣材料之間可見成纖維細胞分割包繞，伴有吞噬細胞和少量淋巴細胞散在分布。注射入4個月后，如圖3所示，顯示了皮膚和頭骨以及兩者之間的疏松結締組織，其中，皮下組織，可見疏松結締組織。頭骨：切面可見帶有骨膜的板狀骨，更深層為松質骨，可見骨小梁和骨髓結構。靠近頭骨的皮下結締組織：這是材料植入區域，可見疏松結締組織、小血管，可見見植入材料形成的包囊，類似骨樣基質的早期成骨現象，出現骨陷窩樣結構。材料之間和四周可見成纖維細胞和纖維細胞分割包繞，伴有吞噬細胞和少量淋巴細胞散在分布。對比例一取0.8g羥基磷灰石，研磨成粉狀，粒度為40目，用1mL的膠原蛋白在16℃下，攪拌成乳狀物，裝入2mL注射針管內密封備用。對比例二取0.8g羥基磷灰石，研磨成粉狀，粒度為60目，用1mL的膠原蛋白在16℃下，攪拌成乳狀物，裝入2mL注射針管內密封備用。對比例三基本步驟同本發明實施例三，不同之處在于，在本對比例中，所用未采用球形的羥基磷灰石粉，而是采用研磨而成的羥基磷灰石粉末，該粉末的制備方法為：取320g羥基磷灰石，研磨成粉狀，粒度為60目。將本發明制得的材料以及對比例制得的材料分別注射入兔的頭骨皮下組織中，觀察1各月后和4個月后注射部位在光鏡下的切片組織以及手感，其結果如表2所示。表2對比結果由表2的對比結果可以看出，本發明中采用的球形的羥基磷灰石粉，其表面光滑的特性使得其對組織的刺激性降到最低，最重要的是這些圓形光滑的微球注射后能夠達到最自然的效果，注射部位的組織柔軟，無硬結。而且微球的粒徑大小既可保證充填劑被細小針頭輕松注入皮下，又保證了微球不被人體的單核細胞、巨噬細胞等所吞噬、帶走，持久地留在治療部位，利用它對局部組織的刺激和支架作用，可使人體自身纖維結締組織增生并包裹球形羥基磷灰石粉，恢復皮膚原來的厚度，從而消除面頸部皺紋及凹陷等的衰老征象，讓臉部重現青春。最后應說明的是：以上實施例僅用以說明本發明的技術方案，而非對其限制；盡管參照前述實施例對本發明進行了詳細的說明，本領域的普通技術人員應當理解：其依然可以對前述各實施例所記載的技術方案進行修改，或者對其中部分技術特征進行等同替換；而這些修改或者替換，并不使相應技術方案的本質脫離本發明各實施例技術方案的精神和范圍。當前第1頁1 2 3