1.一種聚多巴胺微膠囊口服胰島素給藥載體的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:
1)將胰島素粉末溶解在酸性溶液中使?jié)舛冗_(dá)到5-50mg/mL,向其中加入氯化鈉,使氯化鈉的含量為0.5-5mol/L,通過鹽析法制備胰島素微納米顆粒;
2)將胰島素微納米顆粒分散在多巴胺的弱堿性溶液中,使得胰島素的濃度為10-80mg/mL,多巴胺的濃度為0.5-5mg/mL,震蕩下反應(yīng),得到聚多巴胺包覆的胰島素核殼結(jié)構(gòu);
3)將聚多巴胺包覆的胰島素核殼結(jié)構(gòu)分散在功能性分子的溶液中,使得聚多巴胺包覆的胰島素核殼結(jié)構(gòu)的濃度為10-80mg/mL,功能性分子的濃度為5-10mg/mL,在核殼結(jié)構(gòu)表面修飾功能性分子,得到能夠克服腸道屏障的生物相容性的聚多巴胺微膠囊口服胰島素給藥載體。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種聚多巴胺微膠囊口服胰島素給藥載體的制備方法,其特征在于:所述的胰島素為人胰島素、牛胰島素、豬胰島素、羊胰島素、馬胰島素、狗胰島素或貓胰島素中的一種或多種。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種聚多巴胺微膠囊口服胰島素給藥載體的制備方法,其特征在于:所述的酸性溶液為鹽酸溶液,其pH為1-2。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種聚多巴胺微膠囊口服胰島素給藥載體的制備方法,其特征在于:所述的通過鹽析法制備胰島素微納米顆粒的水浴反應(yīng)溫度為5-20℃;反應(yīng)條件為震蕩、攪拌或是超聲處理;反應(yīng)時間為0.5-3h。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種聚多巴胺微膠囊口服胰島素給藥載體的制備方法,其特征在于:所述的鹽析法制備胰島素微納米顆粒,制備后通過分散在2mol/L氯化鈉溶液中進(jìn)行清洗,離心分離,得到純凈的胰島素微納米顆粒。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種聚多巴胺微膠囊口服胰島素給藥載體的制備方法,其特征在于:所述的弱堿性溶液為Tris-HCl溶液、Tris-HCl及H2O2溶液、或者NaOH及H2O2溶液,溶液的pH為7.5-10.5。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種聚多巴胺微膠囊口服胰島素給藥載體的制備方法,其特征在于:所述的震蕩下反應(yīng)的震蕩轉(zhuǎn)速為500-1500rpm;反應(yīng)時間為12-48h;反應(yīng)溫度為4-30℃。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種聚多巴胺微膠囊口服胰島素給藥載體的制備方法,其特征在于:所述的聚多巴胺包覆的胰島素核殼結(jié)構(gòu)通過離心、分散在弱堿性溶液中清洗,并保存在4℃環(huán)境中。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種聚多巴胺微膠囊口服胰島素給藥載體的制備方法,其特征在于:所述的功能性分子為能夠與疏水性的、帶負(fù)電荷的腸道粘液發(fā)生較強的相互作用或是能夠與腸道粘液內(nèi)的糖蛋白進(jìn)行特異性識別的生物靶向分子,包括聚乙二醇、殼聚糖、陽離子脂質(zhì)體和凝集素。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種聚多巴胺微膠囊口服胰島素給藥載體的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:
1)使用pH為2的鹽酸溶液溶解胰島素粉末,使其濃度為10mg/mL,向其中加入氯化鈉晶體,直到氯化鈉的量達(dá)到0.6mol/L,15℃水浴中震蕩下反應(yīng)1h,觀察到白色的胰島素顆粒逐漸析出,離心分離產(chǎn)品,并采用2mol/L氯化鈉溶液清洗產(chǎn)品2次,離心分離,得到胰島素微納米顆粒;
2)首先,配制pH 7.5的Tris-HCl緩沖溶液;其次,將胰島素微納米顆粒分散于Tris-HCl緩沖溶液,使得胰島素的濃度為10mg/mL,加入多巴胺粉末,使其濃度為2mg/mL,將以上反應(yīng)體系置于室溫下以900rpm的轉(zhuǎn)速震蕩反應(yīng)24h,反應(yīng)過程中,溶液的顏色由粉紅色,逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)樽厣⑸钭厣蛔詈螅x心收集顆粒,采用Tris-HCl緩沖溶液清洗顆粒,得到聚多巴胺包覆的胰島素核殼結(jié)構(gòu),保存在4℃環(huán)境中;
3)首先,將聚多巴胺包覆的胰島素核殼結(jié)構(gòu),分散到0.025%戊二醛的PBS溶液中(pH 7.4),使得聚多巴胺包覆的胰島素核殼結(jié)構(gòu)的濃度為10mg/mL,吸附24小時;洗滌三次后,加入5mg/mL殼聚糖的PBS溶液,吸附12小時,洗滌三次;離心分離,得到殼聚糖修飾的口服胰島素給藥載體,保存在4℃環(huán)境中。