1.一種魚膠原蛋白修復(fù)海綿及其制備方法,其特征在于,包括如下步驟:
1)取凍干的魚皮膠原蛋白原料,用冰醋酸完全溶解,溶液溶度為8~20mg/ml,然后調(diào)節(jié)其pH為4~6,20-30℃靜置處理24小時, 進(jìn)行微納結(jié)構(gòu)自組裝;
2)將上述自組裝之后的膠原蛋白溶液注入模具中,在-40℃~-80℃下真空冷凍干燥24~48h,得到魚膠原蛋白海綿;
3)將凍干后的魚膠原海綿用交聯(lián)劑進(jìn)行4~24小時的低溫交聯(lián),然后純化水進(jìn)行清洗透析,再次進(jìn)行冷凍干燥,然后進(jìn)行包裝與輻照滅菌處理,即可得生物學(xué)性能優(yōu)良、降解性可控的魚皮膠原蛋白修復(fù)海綿。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種魚膠原蛋白修復(fù)海綿及其制備方法,其特征在于,所述的魚膠原蛋白原料的制備方法如下:取魚皮清洗干凈并脫水,加入正丁醇脫脂,于0-4℃攪拌 8-12 小時后加入0.05- 0.2M的NaOH溶液中攪拌數(shù)小時,再用去離子水充分清洗經(jīng)堿溶液處理后的魚皮直至中性;將清洗后的魚皮以料液比1:5-20(w/w)的比例放入 0.05-0.5M 的酸性溶液中,加入蛋白酶攪拌 24-60 小時,酶解處理得酶解膠原液,最后加入無水乙醇溶液,直至所述膠原液中的乙醇含量達(dá)到30-80%,靜置,過濾,得膠原蛋白,無水乙醇脫水,低溫真空干燥得膠原蛋白粉末,獲得分子量高達(dá)300kD的醫(yī)用級生物材料用天然高分子魚皮膠原。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種魚膠原蛋白修復(fù)海綿及其制備方法,其特征在于,所述的魚皮包括草魚、羅非魚、三文魚、青魚、鯊魚在內(nèi)的魚皮產(chǎn)物。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種魚膠原蛋白修復(fù)海綿及其制備方法,其特征在于,所述的冰醋酸體積分?jǐn)?shù)為0.3%~5%。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種魚膠原蛋白修復(fù)海綿及其制備方法,其特征在于,所述的自組裝條件為20-30℃、弱酸性條件下靜置致使膠原內(nèi)部的納米膠原絲生長,形成網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種魚膠原蛋白修復(fù)海綿及其制備方法,其特征在于,所述的注模模具選擇為特氟龍模具。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種魚膠原蛋白修復(fù)海綿及其制備方法,其特征在于,所述交聯(lián)劑有碳化二亞胺、乙醇、環(huán)氧化合物、羥基琥珀酰亞胺、二苯基磷酸鹽 ( DPPA)、戊二醛、甲醛、乙醛酸或京尼平中的一種或幾種,交聯(lián)時間為4~24小時。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種魚膠原蛋白修復(fù)海綿及其制備方法,其特征在于,制備的膠原蛋白修復(fù)海綿的孔徑為100~400微米,孔隙率為85%以上;根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種魚膠原蛋白修復(fù)海綿及其制備方法,其特征在于,魚皮膠原原料蛋白含量在95%以上,pH大于4.0 。