發(fā)明領(lǐng)域：

本發(fā)明涉及醫(yī)藥配制品，具體涉及含有雜環(huán)化合物的藥物，該藥物可治療非小細胞肺癌。

技術(shù)背景：

肺癌在世界上許多國家和地區(qū)的發(fā)病率不斷增高，成為致死率最高的腫瘤。2016年世界衛(wèi)生組織發(fā)布的統(tǒng)計數(shù)據(jù)表明，2016年全球肺癌新發(fā)病例約220萬，占到全部腫瘤類型的13％。國家癌癥中心估計，2015年中國肺癌發(fā)病例數(shù)共733300例，其中男性509300例、女性224000例；同年，中國死亡的肺癌病例數(shù)共610200例，其中男性432400例、女性177800例。非小細胞肺癌(non-small-celllungcancer,nsclc)是肺癌最常見的組織學(xué)類型，約占肺癌總數(shù)的80-85％，可進一步分為鱗狀細胞癌、腺癌和大細胞癌。與小細胞癌相比nsclc的癌細胞生長分裂較慢，擴散轉(zhuǎn)移相對較晚，約75％的患者發(fā)現(xiàn)時已處于中晚期，5年生存率低于15％。

化療是治療肺癌的主要方法，然而由于缺乏經(jīng)濟有效的篩查和早期診斷的方案，臨床確診時約60％以上患者已屬晚期，失去了手術(shù)根治機會。中藥因具有多靶點、多作用機制和整體治療的特點，在治療中晚期nsclc具有穩(wěn)定病灶、防止腫瘤細胞轉(zhuǎn)移、改善臨床癥狀、提高患者生存質(zhì)量、延長生存期等顯著的優(yōu)勢。

山奈酚(kaempferol)又名黃芪甙元、山奈黃素，是植物界中廣泛存在的黃酮醇類化合物，具有抗炎、抗癌、抗氧化等多種生物活性及藥理作用，具有開發(fā)成為抗癌新藥的潛能。酸棗仁皂苷a(jujubosidesa)是水溶性皂苷類化合物，具有鎮(zhèn)靜、催眠、降壓、降脂、抗缺氧、增強免疫功能等廣泛的藥理效應(yīng)。山奈酚與酸棗仁皂苷a聯(lián)合應(yīng)用，在非小細胞肺癌的治療過程中起到協(xié)同作用，誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡，增強抗腫瘤效果，對于晚期失去手術(shù)機會的患者可提高生存質(zhì)量，延長生存期。

公開號為cn104922392a的專利申請公開了一種治療非小細胞肺癌的中藥組合物及其檢測方法，該藥由黃芪、牛蒡子、靈芝、五味子、黨參、板藍根等14味中藥制成。但是該藥物不僅處方較大，而且含有多味貴重和毒性較大的中藥，成本和安全隱患較高，不利于有效的質(zhì)量控制和生產(chǎn)。

公開號為cn104013610a的專利申請公開了山奈酚在防治放射性肺損傷藥物中的應(yīng)用，發(fā)現(xiàn)山奈酚能夠明顯改善小鼠放射性肺損傷肺組織的炎性滲出，對放射性肺損傷有很好的積極作用。但是，山奈酚作為唯一有效成分治療非小細胞肺癌效果尚不理想。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明所要解決的問題是提供一種防治非小細胞肺癌的藥物組合物，該藥物組合物藥味少，有利于質(zhì)量控制，而且效果顯著。

本發(fā)明解決上述問題的技術(shù)方案如下所述：

一種防治非小細胞肺癌的藥物組合物，該藥物組合物由有效成分和醫(yī)學(xué)上可接受的輔料組成，其特征在于，所述的有效成分由以下重量百分比的酸棗仁皂苷a和山奈酚組成：酸棗仁皂苷a25％-45％；山奈酚55％-75％。

上述方案中，所述的酸棗仁皂苷a與山奈酚最佳重量配比是酸棗仁皂苷a35％，山奈酚65％。

本發(fā)明所述的藥物組合物常見的制劑，如片劑或注射劑。

本發(fā)明具備以下優(yōu)點：

本發(fā)明由酸棗仁皂苷a和山奈酚組成，不僅藥味較少，有利于質(zhì)量控制，而且防治非小細胞肺癌的效果也十分顯著。

為了便于公眾更好地理解本發(fā)明，下面通過藥效實驗和具體實施方式來進一步說明本發(fā)明的有益效果。

附圖說明：

圖1為本發(fā)明所述藥物組合物與山奈酚及酸棗仁皂苷a單一成分體外抑制肺癌細胞的生長效果比較的條形圖。

圖2為本發(fā)明所述藥物組合物與山奈酚及酸棗仁皂苷a單一成分對肺癌細胞周期阻滯效果比較的曲線圖，其中，a圖為空白對照，b圖為山奈酚單用，c圖為酸棗仁皂苷a單用，d圖為本發(fā)明所述組合；

圖3為本發(fā)明所述藥物組合物、山奈酚、酸棗仁皂苷a抑制肺癌的發(fā)生和發(fā)展的效果圖，其中，a圖為不同藥物對小鼠體重變化影響的曲線圖，b圖為不同藥物抑制肺癌的發(fā)生和發(fā)展的效果圖(小鼠腫瘤細胞數(shù)量)。

具體實施方式

實施例1：(體外肺癌細胞的抑制作用)

1、實驗藥液的制備：

(1)山奈酚組藥液：取山奈酚(kae)2.86mg，加入1mldmso制備成10mm的母液存儲備用，用前用完全培養(yǎng)基制備出山奈酚濃度為25μm的藥液；

(2)酸棗仁皂苷a組藥液：取酸棗仁皂苷a(ja)12.07mg，加入加入1mldmso制備成10mm的母液存儲備用，使用前用完全培養(yǎng)基制備出酸棗仁皂苷a濃度為25μm的藥液；

(3)本發(fā)明所述藥物組合物組藥液：按質(zhì)量比取35％的酸棗仁皂苷a和65％的山奈酚，加入完全培養(yǎng)基制備出本發(fā)明所述藥物組合物濃度為25μm的藥液。

2、實驗方法：

取對數(shù)生長的腫瘤細胞，以3000/孔接種于96孔培養(yǎng)板中，培養(yǎng)過夜，細胞生長狀態(tài)良好后，棄去原有的培養(yǎng)基，然后分別加入上述山奈酚組藥液、酸棗仁皂苷a組藥液和本發(fā)明所述藥物組合組物藥液作用于a549細胞5天后停止培養(yǎng)；然后加入0.5mg/ml的mtt溶液，處理4小時后，棄上清，最后加入150μldmso震蕩混勻，置于酶標(biāo)儀中年測定其吸光度值(測定波長為570nm)。

3、統(tǒng)計學(xué)分析處理及其結(jié)果：

平行10組實驗，結(jié)果如表1和圖1所示。由表1和圖1可見，本發(fā)明所述藥物組合物中的酸棗仁皂苷a與山奈酚具有協(xié)同增效作用，抑制肺癌細胞a549的生長的效果明顯優(yōu)于單一的山奈酚和酸棗仁皂苷a。

表1不同藥物對肺癌細胞活性的影響(n＝3)

^*與空白對照組組比較，p＜0.05；^#分別與山奈酚和酸棗仁皂苷a比較，p＜0.05；

實施例2：(不同藥物對肺癌細胞周期的影響)

1、實驗藥液的制備：與實施例1相同。

2、實驗方法：

取對數(shù)生長期a549細胞，以2×10⁵/孔接種于六孔培養(yǎng)板中，培養(yǎng)過夜，棄去培養(yǎng)基，分別加入上述山奈酚組藥液、酸棗仁皂苷a組藥液和本發(fā)明所述藥物組合物組藥液，處理細胞5天后，用胰酶消化、收集、離心，用pbs清洗2次，再用預(yù)冷的體積分?jǐn)?shù)為75％乙醇溶液混懸細胞，密封置于4度冰箱過夜。次日，離心，pbs洗兩次，每管加入500μlpi，混勻，室溫避光孵育15min，用流式細胞儀檢測周期，樣品1h內(nèi)檢測完。

3、統(tǒng)計學(xué)分析處理及其結(jié)果：

平行10組實驗，結(jié)果如表2和圖2所示。由表2和圖2可見，本發(fā)明所述藥物組合物中的酸棗仁皂苷a與山奈酚具有協(xié)同增效作用，可將周期阻滯在g2/m期，且效果顯著優(yōu)于單一的山奈酚和酸棗仁皂苷a。

表2不同藥物對肺癌細胞周期的影響(n＝3)

^*分別與山奈酚和酸棗仁皂苷a比較，p＜0.05；

實施例3：(抑制移植瘤的生長)

1、實驗藥物：

(1)山奈酚組藥物：取山奈酚15g，去掉酸棗仁皂苷a，按照下述實施例1的方法制成片劑；

(2)酸棗仁皂苷a組藥物：取酸棗仁皂苷a15g，去掉山奈酚，按照下述實施例1的方法制成片劑；

(3)本發(fā)明所述藥物組合組藥物：改組實驗藥物為下述實施例4中例1的片劑；

將上述三種片劑，分別搗碎后加入含0.1％乙醇(體積百分比)的生理鹽水溶解，配置成藥物濃度均為0.25mg/ml的藥液。

2、實驗方法：

烏拉坦誘導(dǎo)肺癌模型：選取6周齡大小的fvb雌性小鼠，分為4組，每組10只。按體重腹腔注射600mg/kg烏拉坦(水溶液)，每周一次，共計15周。在烏拉坦腹腔注射第三周時開始灌胃給藥，給藥劑量為小鼠體重5mg/kg，對照(control)組灌胃等量的生理鹽水。每周稱量一次小鼠體重。到第22周，處死小鼠，取肺臟組織，在顯微鏡下數(shù)每組小鼠的肺結(jié)節(jié)數(shù)，按公式“腫瘤數(shù)＝腫瘤的結(jié)節(jié)總數(shù)/該組存活的小鼠總數(shù)”計算每組平均肺瘤數(shù)。腫瘤抑制率按照公式“(對照組腫瘤數(shù)-給藥組腫瘤數(shù))/對照組腫瘤數(shù)”計算。

3、統(tǒng)計學(xué)分析處理及其結(jié)果：

全部數(shù)據(jù)采用spss18.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行統(tǒng)計分析，計量數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，結(jié)果如圖3和下表3所示。由表3和圖3可見，本發(fā)明所述藥物組合物抑制腫瘤的發(fā)生和發(fā)展的效果顯著優(yōu)于單一的山奈酚和酸棗仁皂苷a。

表3不同藥物對小鼠肺癌抑制率的影響(n＝10)

^*與空白對照組組比較，p＜0.05；^#分別與山奈酚和酸棗仁皂苷a比較，p＜0.05；

實施例4：(藥物制劑的制備例)

例1(片劑)

取山奈酚9.75g和β-環(huán)糊精10g加入研缽，研磨攪拌20min，加入5.25g酸棗仁皂苷a，混合均勻，等量遞加法加入處方量的羧甲基淀粉鈉與淀粉，加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10％的淀粉漿適量制軟材，2200μm篩制粒，60℃干燥，控制干顆粒水的質(zhì)量分?jǐn)?shù)在1％～2％，停止干燥，2200μm篩整粒，加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1％的滑石粉，混合均勻，調(diào)節(jié)壓片機，壓制片重為200mg環(huán)糊精山奈酚酸棗仁皂苷a片劑。

例2(亞微乳注射劑)

稱取山奈酚30mg加入5g注射用大豆油中，加熱攪拌使溶解制得油相；將2g磷脂經(jīng)高速剪切分散于20ml注射用水中，加16mg酸棗仁皂苷a制得水相。將油相和水相預(yù)熱至60℃，將油相加入水相中，高速剪切得初乳。高壓均質(zhì)，一定壓力下均質(zhì)數(shù)次，調(diào)節(jié)ph至6.5，補加注射用水至100ml，以0.22μm微孔濾膜擠出過濾，灌裝熔封，100℃流通蒸汽滅菌30min，即得。