本發明屬于長效緩釋藥物制劑領域，具體地涉及一種起效快、日間釋放率差異小、血藥濃度波動幅度小的長效緩釋藥物制劑及其制備方法。
背景技術：
：藥物在連續恒速給藥(如靜脈輸注)或分次恒量給藥的過程中，血藥濃度會逐漸增高，經4～5個半衰期可達穩定而有效的血藥濃度，此時藥物吸收速度與消除速度達到平衡，血藥濃度相對穩定在一定水平，這時的血藥濃度稱為穩態血藥濃度，也稱坪值。給藥方案中，不僅要關注藥物的有效血藥濃度，并且還要考慮有效血藥濃度的范圍。隨著給藥間隔時間延長，穩態血藥濃度的波動越大，對治療窗較窄的藥物(如氨茶堿等)越容易產生不利的影響。給藥次數增加能提高穩態血藥濃度，并使其波動減小，但不能加快達到穩態血藥濃度的時間；增加給藥劑量能提高穩態血藥濃度，但也不能加快達到穩態血藥濃度的時間。達到穩態血藥濃度的時間僅僅決定于半衰期，與劑量、給藥間隔及給藥途徑無關，但劑量與給藥間隔能影響穩態血藥濃度波動。以特定速率釋放的緩控釋制劑等給藥系統，減少服藥次數，使血藥濃度平穩，避免峰谷現象，對提高患者用藥順應性、降低毒副作用、提高療效有著重要價值，特別是對于需要長期給藥治療的病癥(如精神分裂癥)，長效給藥系統可以大大降低患者漏服的概率，但如何在較長的給藥間隔下減小血藥濃度的波動幅度，具有很高的技術挑戰性。如基于專利cn1137756公開的技術開發的已上市長效抗精神病藥risperidalconsta(恒德)以分子量約150kda的plga為載體，利培酮為api，每2周肌肉注射一次，但在首日僅有少量的藥物釋放，隨后出現長達約3周的藥物釋放停滯期，因此患者在注射該微球后的3周內還需要依靠口服給藥片劑才能達到治療效果，臨床使用不方便，患者依從性差。因此，加快開發沒有延遲釋放期、給藥間隔時間長(如2周、4周及以上)，能夠快速達到穩態血藥濃度，并且血藥濃度波動幅度小的長效或超長效緩釋藥物制劑，才能滿足市場的迫切需求。技術實現要素：本發明的目的在于提供一種給藥后無明顯釋放延遲期或突釋現象、能夠快速達到穩態血藥濃度、單次給藥就能在數周或更長的時間內維持波動幅度較小的血藥濃度的長效緩釋藥物制劑，其起效速度快、患者順應性好。同時，本發明的另一目的在于提供所述長效緩釋藥物制劑的制備方法。所述長效緩釋藥物制劑，其特征在于，在單次肌肉注射給藥時，主要釋放期內的最高血藥濃度和最低血藥濃度的比值小于5，優選小于4.5，更優選小于4。所述主要釋放期是指血藥濃度高于最低起效濃度的釋放期。所述主要釋放期不小于12天，優選不小于14天。所述長效緩釋藥物制劑，其特征在于，在體外模擬釋放條件下，累計釋放曲線的線性趨勢線的斜率小于8，優選小于7，更優選小于6；日釋放量小于8.5％，優選小于8％，更優選小于7.5％。所述模擬釋放介質為37±0.5℃、ph為6.5-8.4的緩沖溶液，包括pbs、hepes、tea、tris-hcl、mops。為進一步接近實際應用情況，優選的，所述模擬釋放介質為37±0.5℃、ph為6.8-7.4的緩沖溶液，包括pbs、hepes、tea、tris-hcl、mops。在一種實施方式中，模擬釋放介質采用37±0.5℃、ph為7.4的緩沖溶液，包括pbs、hepes、tea、tris-hcl、mops。由于人體在活動或者運動時，體液ph會降低，因此本發明在另外的一種實施方式中，模擬釋放介質采用為37±0.5℃、ph為6.8的緩沖溶液，包括pbs、hepes、mops。所述長效緩釋藥物制劑包含水難溶/微溶性藥物和高分子聚合物。所述長效緩釋藥物制劑中，所述水難溶/微溶性藥物的質量百分含量為25～60％，所述高分子聚合物的質量百分含量為40-75％；優選地，所述水難溶/微溶性藥物的質量百分含量為30～55％，所述高分子聚合物的質量百分含量為45-70％；進一步優選地，所述水難溶/微溶性藥物的質量百分含量為35～50％，所述高分子聚合物的質量百分含量為50-65％。本發明所述高分子聚合物為可生物降解的水難溶性聚合物，選自聚丙交酯(pla)、聚乙交酯(pga)、丙交酯-乙交酯共聚物(plga)、聚己內酯(pcl)、它們與聚乙二醇的共聚物(如pla-peg、plga-peg、plga-peg-plga、pla-peg-pla、peg-pcl、pcl-peg-pcl、peg-pla-peg、peg-plga-peg)、聚羥基丁酸、聚羥基戊酸、聚對二氧環己酮(ppdo)、聚氰基丙烯酸酯、聚酸酐、聚原酸酯、聚酰胺、聚磷腈、聚磷酸酯中的任意一種或幾種的組合物，然而并不限于上述水難溶性聚合物。作為本發明優選實施方式，所述高分子聚合物為聚丙交酯(pla)、丙交酯-乙交酯共聚物(plga)、它們與聚乙二醇的共聚物中的至少一種。作為本發明所述水難溶/微溶性藥物緩釋組合物的優選實施方式，所述水難溶性聚合物為聚丙交酯(pla)、丙交酯-乙交酯共聚物(plga)中的至少一種。作為本發明優選實施方式，所述聚丙交酯(pla)、丙交酯-乙交酯共聚物(plga)、它們與聚乙二醇的共聚物的重均分子量均為20000-50000da。優選地，所述聚丙交酯(pla)、丙交酯-乙交酯共聚物(plga)、它們與聚乙二醇的共聚物的重均分子量均為23000-45000da。更優選地，所述聚丙交酯(pla)、丙交酯-乙交酯共聚物(plga)、它們與聚乙二醇的共聚物的重均分子量均為25000-40000da。作為本發明的優選實施方式，所述高分子聚合物的分子鏈攜帶陰離子或陽離子基團，或者不攜帶陰離子或陽離子基團。優選地，所述高分子聚合物具有端羧基或端酯基。更優選地，所述水難溶性聚合物具有端羧基。由于所述藥物為水難溶性藥物，以具有一定親水性的高分子聚合物作為載體更有利于消除或縮短延遲釋放期。作為本發明的優選實施方式，所述高分子聚合物為聚丙交酯(pla)、丙交酯-乙交酯共聚物(plga)、它們與聚乙二醇的共聚物中的丙交酯與乙交酯的摩爾比為100∶0～65∶35；優選地，所述高分子聚合物為聚丙交酯(pla)、丙交酯-乙交酯共聚物(plga)、它們與聚乙二醇的共聚物中的丙交酯與乙交酯的摩爾比為100∶0～70∶30。更優選地，所述高分子聚合物為聚丙交酯(pla)、丙交酯-乙交酯共聚物(plga)、它們與聚乙二醇的共聚物中中的丙交酯與乙交酯的摩爾比為100∶0～75∶25。本發明所述長效緩釋藥物制劑中，所述高分子聚合物可以為單一的聚合物，也可以為多種聚合物的混合物。如，丙交酯(la)與乙交酯(ga)的比率及分子量相同但攜帶基團不同的plga和或pla的組合；丙交酯(la)與乙交酯(ga)的摩爾比及攜帶基團相同但分子量不同的plga和或pla的組合，且分子量差別不大于10kda；分子量及攜帶基團相同但丙交酯與乙交酯的摩爾比不同的plga和或pla的組合，且乙交酯的百分率差別不大于10％；分子量、攜帶基團及丙交酯與乙交酯的摩爾比均不同的plga和或pla的組合，且分子量差別不大于10kda、乙交酯的百分率差別不大于10％。上述分子量為重均分子量，是通過凝膠滲透色譜儀(gpc)檢測所獲得的值。作為本發明的優選實施方式，所述水難溶性聚合物為聚丙交酯(pla)、丙交酯-乙交酯共聚物(plga)、它們與聚乙二醇的共聚物中的至少一種時，所述聚丙交酯(pla)、丙交酯-乙交酯共聚物(plga)、它們與聚乙二醇的共聚物的粘度均為0.25-0.52dl/g(測試條件為0.5-1％(w/v)，25℃)，優選為0.27-0.47dl/g，更優選為0.30-0.42dl/g。作為本發明的優選實施方式，所述水難溶/微溶性藥物包括且不限于利培酮、帕利哌酮、阿立哌唑、伊潘立酮、依匹哌唑、齊拉西酮、阿那曲唑、多奈哌齊、奧氮平、納曲酮、氟哌啶醇、恩替卡韋及上述藥物的衍生物中的至少一種。作為本發明的優選實施方式，所述水難溶/微溶性藥物包括且不限于利培酮、帕利哌酮、阿立哌唑、伊潘立酮、恩替卡韋、依匹哌唑以及上述藥物的衍生物中的至少一種。其中，所述衍生物包括且不限于棕櫚酸帕立哌酮、月桂酰阿立哌唑、癸酸氟哌啶醇、雙羥萘酸奧氮平、甲磺酸齊拉西酮。更優選的，所述水難溶/微溶性藥物包括且不限于利培酮、帕利哌酮、棕櫚酸帕立哌酮中的至少一種。在一些實施例中，所述長效緩釋藥物制劑中，水難溶/微溶性藥物為利培酮、帕利哌酮或棕櫚酸帕利哌酮，所述高分子聚合物為丙交酯-乙交酯共聚物(plga)，重均分子量為22000-30000da，丙交酯與乙交酯的摩爾比為72∶28～78∶22，特性粘度為0.25-0.36dl/g。所述長效緩釋藥物制劑在單次給藥的主要釋放期內的最高血藥濃度和最低血藥濃度的比值小于5，優選小于4.5，更優選小于4。在體外模擬釋放條件下，所述長效緩釋藥物制劑的累計釋放曲線的線性趨勢線的斜率小于6.5，優選小于6，更優選小于5.5；日釋放量小于8.5％，優選小于8％，更優選小于7.5％。所述長效緩釋藥物制劑的主要釋放期不小于12天，優選不小于14天。優選的，所述長效緩釋藥物制劑在單次給藥的第1-14天期間，最高血藥濃度和最低血藥濃度的比值小于2。在一些實施例中，所述長效緩釋藥物制劑中，水難溶/微溶性藥物為利培酮、帕利哌酮或棕櫚酸帕利哌酮，所述高分子聚合物為丙交酯-乙交酯共聚物(plga)，重均分子量為22000-30000da，丙交酯與乙交酯的摩爾比為82∶18～88∶12，特性粘度為0.25-0.36dl/g。所述長效緩釋藥物制劑在單次給藥的主要釋放期內的最高血藥濃度和最低血藥濃度的比值小于5，優選小于4.5，更優選小于4。在體外模擬釋放條件下，所述長效緩釋藥物制劑的累計釋放曲線的線性趨勢線的斜率小于5，優選小于4.5，更優選小于4；日釋放量小于5.5％，優選小于5％，更優選小于4.5％。優選的，所述長效緩釋藥物制劑的主要釋放期不小于26天，優選不小于28天。優選的，所述長效緩釋藥物制劑在單次給藥的第1-28天期間，最高血藥濃度和最低血藥濃度的比值小于2。在一些實施例中，所述長效緩釋藥物制劑中，水難溶/微溶性藥物為利培酮，所述高分子聚合物為丙交酯-乙交酯共聚物(plga)，重均分子量約為25000da，丙交酯與乙交酯的摩爾比約為76∶24，特性粘度約為0.30dl/g。所述長效緩釋藥物制劑在單次給藥的主要釋放期內的最高血藥濃度和最低血藥濃度的比值約為3.6。在體外模擬釋放條件下，所述長效緩釋藥物制劑的累計釋放曲線的線性趨勢線的斜率約為5.7；日釋放量小于7.3％。所述長效緩釋藥物制劑的主要釋放期約為14-18天。優選的，所述長效緩釋藥物制劑在單次給藥的第1-14天期間，最高血藥濃度和最低血藥濃度的比值約為1.7。在一些實施例中，所述長效緩釋藥物制劑中，水難溶/微溶性藥物為利培酮，所述高分子聚合物為丙交酯-乙交酯共聚物(plga)，重均分子量約為24000da，丙交酯與乙交酯的摩爾比約為85∶15，特性粘度約為0.29dl/g。所述長效緩釋藥物制劑在單次給藥的主要釋放期內的最高血藥濃度和最低血藥濃度的比值約為2.5。在體外模擬釋放條件下，所述長效緩釋藥物制劑的累計釋放曲線的線性趨勢線的斜率約為2.84；日釋放量小于3.25％。優選的，所述長效緩釋藥物制劑的主要釋放期約為28-35天。優選的，所述長效緩釋藥物制劑在單次給藥的第1-28天期間，最高血藥濃度和最低血藥濃度的比值約為1.6。在一些實施例中，所述長效緩釋藥物制劑中，水難溶/微溶性藥物為利培酮，所述高分子聚合物為丙交酯-乙交酯共聚物(plga)，重均分子量約為28000da，丙交酯與乙交酯的摩爾比約為75∶25，特性粘度約為0.34dl/g。所述長效緩釋藥物制劑在單次給藥的主要釋放期內的最高血藥濃度和最低血藥濃度的比值約為3.5。在體外模擬釋放條件下，所述長效緩釋藥物制劑的累計釋放曲線的線性趨勢線的斜率約為5.7；日釋放量小于7.3％。所述長效緩釋藥物制劑的主要釋放期約為14-18天。優選的，所述長效緩釋藥物制劑在單次給藥的第1-14天期間，最高血藥濃度和最低血藥濃度的比值約為1.6。在一些實施例中，所述長效緩釋藥物制劑中，水難溶/微溶性藥物為利培酮，所述高分子聚合物為丙交酯-乙交酯共聚物(plga)，重均分子量約為27000da，丙交酯與乙交酯的摩爾比約為84∶16，特性粘度約為0.32dl/g。所述長效緩釋藥物制劑在單次給藥的主要釋放期內的最高血藥濃度和最低血藥濃度的比值約為3.0。在體外模擬釋放條件下，所述長效緩釋藥物制劑的累計釋放曲線的線性趨勢線的斜率約為2.84；日釋放量小于4.0％。優選的，所述長效緩釋藥物制劑的主要釋放期約為28-35天。優選的，所述長效緩釋藥物制劑在單次給藥的第1-28天期間，最高血藥濃度和最低血藥濃度的比值約為1.5。作為本發明的優選實施方式，所述長效緩釋藥物制劑的非溶劑型制備原料還包含質量百分含量為0～8％的賦形劑。作為本發明所的優選實施方式，所述賦形劑包括緩沖劑和抗氧化劑。所述緩沖劑包括但不限于無機酸和有機酸鹽，如碳酸、乙酸、草酸、檸檬酸、磷酸、鹽酸的鹽，包括碳酸鈣、氫氧化鈣、肉豆蘧酸鈣、油酸鈣、棕櫚酸鈣、硬脂酸鈣、磷酸鈣、醋酸鈣、醋酸鎂、碳酸鎂、氫氧化鎂、磷酸鎂、肉豆蔻酸鎂、油酸鎂、棕櫚酸鎂、硬脂酸鎂、碳酸鋅、氫氧化鋅、氧化鋅、肉豆蘧酸鋅、油酸鋅、醋酸鋅、氯化鋅、硫酸鋅、硫酸氫鋅、碳酸鋅、硝酸鋅、葡萄糖酸鋅、棕櫚酸鋅、硬脂酸鋅、磷酸鋅、碳酸鈉、碳酸氫鈉、亞硫酸氫鈉、硫代硫酸鈉、醋酸-醋酸鈉緩沖鹽，及它們的組合。優選無機酸和有機酸的鋅鹽。所述緩沖劑在所述水難溶/微溶性藥物緩釋組合物的非溶劑型制備原料中的質量百分含量為0～5％。所述抗氧化劑為叔丁基對羥基茴香醚、二丁基苯酚、生育酚、肉豆蔻酸異丙酯、d-a乙酸生育酚、抗壞血酸、棕櫚酸抗壞血酸酯、丁基化羥基苯甲醚、丁基化羥基醌、羥基香豆素、丁基化羥基甲苯、掊酸脂肪酸酯、丙羥基苯甲酸酯、三羥基苯丁酮、維生素e、維生素e-tpgs、ρ-羥基苯甲酸酯中的至少一種；所述抗氧化劑在所述水難溶/微溶性藥物緩釋組合物的非溶劑型制備原料中的質量百分含量為0～1％。本發明所述長效緩釋藥物制劑為微球，所述微球優選具有小于200μm的幾何粒徑。典型地，大約為10～200μm，優選15～150μm，更優選大約20～120μm。微球粒徑大小通過動態光散射方法(例如激光衍射法)、或顯微技術(如掃描電鏡法)來測量。另外，本發明還提供一種如上所述長效緩釋藥物制劑的制備方法，為實現此目的，本發明采取的技術方案為：(1)將非溶劑型制備原料溶于有機溶劑中，形成內油相；(2)將表面活性劑溶于水中，形成外水相；(3)將步驟(1)得到的內油相與步驟(2)外水相混合制成乳液，然后通過溶劑蒸發或溶劑提取使溶液中的微粒硬化，收集微粒，洗滌并干燥，得水難溶/微溶性藥物的長效緩釋微球。所述步驟(1)中的非溶劑型制備原料包括水難溶/微溶性藥物和高分子聚合物。作為本發明的優選實施方式，非溶劑型制備原料還包含賦形劑。作為本發明所述長效緩釋藥物制劑的制備方法的優選實施方式，所述步驟(1)中水難溶性聚合物與有機溶劑的質量百分比為7～12％，優選；所述步驟(2)中，所述表面活性劑在外水相中的質量百分含量為1～5％；所述步驟(3)中，所述外水相的體積是所述內油相體積的60倍以上。所述步驟(1)中的有機溶劑可以同時溶解水難溶/微溶性聚合物、水難溶/微溶性藥物。所述溶劑可以為單一的有機溶劑，也可以為混溶的兩種及以上的有機溶劑。所述有機溶劑為鹵代烴、脂肪酸酯、芳香烴中的至少一種；所述鹵代烴包含二氯甲烷、氯仿、氯乙烷、四氯乙烯、三氯乙烯、二氯乙烷、三氯乙烷、四氯化碳、氟烴、氯代苯(單、雙、三取代)、三氯氟甲烷；所述脂肪酸酯包含乙酸乙酯、乙酸丁酯；所述芳香烴包含苯、甲苯、二甲苯、苯甲醇。所述有機溶劑的選擇中，優選鹵代脂肪烴類溶劑，更優選二氯甲烷、氯仿中的至少一種。所述內油相中，有機溶劑的用量比例按照不同藥物有所不同，根據實際情況調配。本發明所述長效緩釋藥物制劑的制備方法中，所述步驟(2)的外水相中含有表面活性劑，所述表面活性劑可以增加有機相的濕潤性質、提高乳化過程中小液珠的穩定性及形狀，避免小液珠重新聚合、減少未包封的或部分包封的小球顆粒的數量，從而減少了藥物在釋放過程中的初始突釋。所述表面活性劑為非離子表面活性劑，所述非離子表面活性劑優選泊洛沙姆、聚乙烯醇、聚山梨酸酯、聚乙烯吡咯烷酮和多糖，優選聚乙烯醇。作為本發明所述的制備方法的優選實施方式，所述步驟(3)中制備乳液時采用了產生高剪切力的裝置(如磁力攪拌器、機械攪拌器、高速均質機、超聲儀、膜乳化器、轉子-定子混合器、靜態混合器、高壓均質機等)，將有機內相與水性外相混合以形成均勻乳液。作為本發明的優選實施方式，所述長效緩釋藥物制劑的制備方法的步驟(3)中，使用管線式高速均質機將內油相和外水相混合制成乳液。其中，內油相通過蠕動泵進行供料，蠕動泵轉速為50-100rpm；外水相通過螺桿泵進行供料，介質線速度為2-8m/s。當所述長效緩釋藥物制劑以懸浮劑形式給藥時，其可與適當的分散介質制成混懸液制劑形式。所述分散介質包括非離子表面活性劑(或穩定劑)、聚氧乙烯蓖麻油衍生物、纖維素增稠劑、海藻酸鈉、透明質酸、糊精、淀粉。或可選擇的，還可以與其他賦形劑如等滲劑(如氯化鈉、甘露醇、甘油、山梨醇、乳糖、木糖醇、麥芽糖、半乳糖、蔗糖、葡萄糖等)、ph調節劑(例如碳酸、醋酸、草酸、檸檬酸、磷酸、鹽酸或這些酸的鹽，例如碳酸鈉、碳酸氫鈉等)、防腐劑(例如對羥基苯甲酸酯、對羥基苯甲酸丙酯、苯甲醇、氯代丁醇、山梨酸、硼酸等)等結合，制成水性溶液后通過冷凍干燥法、減壓干燥法、噴霧干燥等方法固化，使用前再將固化物溶解于注射用水中獲得用于分散微球的分散介質。此外，緩釋注射劑也可通過下述方法獲得：將微?；蛭⑶蚍稚⒂谥参镉?諸如芝麻油及玉米油)或添加有磷脂(諸如卵磷脂)的植物油中，或者分散于中鏈甘油三酯中，以獲得油性混懸液。本發明獲得的微球可用于顆粒劑形式、懸浮劑形式、埋植劑形式、注射劑形式、粘附劑形式等等，并可以口服或非胃腸道給藥(肌內注射、皮下注射、經皮給藥、粘膜給藥(頰內、陰道內、直腸內等)。本發明的長效緩釋藥物制劑可以持續釋放數周以上，諸如長達約2周、諸如長達約4周、諸如長達約8周、諸如長達約12周、諸如長達約24周、諸如長達約48周，或更長時間，可根據具體藥物特性或治療需求進行調節。本發明的目的在于提供一種給藥后無明顯釋放延遲期或突釋現象、能夠快速達到穩態血藥濃度、單次給藥就能在數周或更長的時間內維持波動幅度較小的血藥濃度的長效緩釋藥物制劑，起效速度快、患者順應性好。所述長效緩釋藥物制劑為水難溶/微溶性藥物緩釋組合物。本發明所述長效緩釋藥物制劑的制備方法，能夠快速高效制備得到本發明的長效緩釋藥物制劑。所述長效緩釋藥物制劑，適用于急性和慢性精神分裂癥以及其它各種精神病性狀態的明顯的陽性癥狀和明顯的陰性癥狀、與精神分裂癥有關的情感癥狀、阿爾茨海默病、病毒、戒毒后復吸、乳腺癌等病癥的治療。所述長效緩釋藥物制劑，當所述水難溶/微溶性藥物為利培酮、帕利哌酮或棕櫚酸帕利哌酮時，適用于急性和慢性精神分裂癥以及其它各種精神病性狀態的明顯的陽性癥狀和明顯的陰性癥狀、與精神分裂癥有關的情感癥狀的治療。附圖說明圖1～14分別為實施例1-14制備的長效緩釋微球體外累計釋放曲線及線性趨勢線圖；圖15為恒德微球的體外累計釋放曲線及線性趨勢線圖。具體實施方式以下通過試驗例的形式對本發明的上述內容再作進一步的詳細說明，但不應將此理解為本發明上述主題的范圍僅限于以下的實例，凡基于本發明上述內容所實現的技術均屬于本發明的范圍。實施例1(1)將7.5gplga(20000da，0.22dl/g，丙交酯/乙交酯＝100/0，cooh，cooh代表端羧基，下同)溶于30ml二氯甲烷中，然后將2.5g恩替卡韋加入plga溶液中溶解，得內油相；(2)將聚乙烯醇溶于純化水中，濃度為1％，體積為2.4l，然后冷卻至4-8℃，得外水相；(3)通過膜乳化器(平均孔徑約50μm)將步驟(1)得到的內油相注入步驟(2)外水相中制成乳液，然后攪拌10h使微粒硬化，過濾收集微粒，以超純水洗滌，冷凍干燥50h，得載藥率為22.59％、幾何粒徑為28-105μm的長效緩釋恩替卡韋微球。所得微球通過常用方法檢測其載藥率(hplc)及幾何粒徑(激光粒度儀)，下同。實施例2(1)將7gplga(23000da，0.27dl/g，90/10，cooh)溶于31.5ml二氯甲烷中，然后將3g阿那曲唑加入plga溶液中溶解，得內油相；(2)將聚乙烯醇溶于純化水中，濃度為1％，體積為2.5l，然后冷卻至4-8℃，得外水相；(3)通過靜態混合器(l/d＝30-50)將步驟(1)得到的內油相與步驟(2)外水相混合制成乳液，然后攪拌10h使微粒硬化，過濾收集微粒，以超純水洗滌，冷凍干燥50h，得載藥率為27.11％、幾何粒徑為32-110μm的長效緩釋阿那曲唑微球。實施例3(1)將6.5gplga(22000da，0.25dl/g，88/12，cooh)溶于42ml二氯甲烷中，然后將3.5g帕利哌酮加入plga溶液中溶解，得內油相；(2)將聚乙烯醇溶于純化水中，濃度為1.5％，體積為3.4l，然后冷卻至4-8℃，得外水相；(3)通過管線式均質機將步驟(1)得到的內油相(蠕動泵70rpm)和步驟(2)外水相(螺桿泵4m/s)混合制成乳液，然后繼續攪拌10h使微粒硬化，過濾收集微粒，以超純水洗滌，冷凍干燥50h，得載藥率為32.08％、幾何粒徑為25-95μm的長效緩釋帕利哌酮微球。實施例4(1)將6.2gplga(24000da，0.29dl/g，85/15，cooh)溶于38ml二氯甲烷中，然后將3.8g利培酮加入plga溶液中溶解，得內油相；(2)將聚乙烯醇溶于純化水中，濃度為2.0％，體積為3.0l，然后冷卻至4-8℃，得外水相；(3)通過管線式均質機將步驟(1)得到的內油相(蠕動泵60rpm)和步驟(2)外水相(螺桿泵3m/s)混合制成乳液，然后攪拌10h使微粒硬化，過濾收集微粒，以超純水洗滌，冷凍干燥50h，得載藥率為35.00％、幾何粒徑為27-112μm的長效緩釋利培酮微球。實施例5(1)將6.0gplga(27000da，0.32dl/g，84/16，cooh)溶于38ml二氯甲烷中，然后將4.0g利培酮加入plga溶液中溶解，得內油相；(2)將聚乙烯醇溶于純化水中，濃度為2.5％，體積為3.0l，然后冷卻至4-8℃，得外水相；(3)通過機械攪拌(1300rpm)將步驟(1)得到的內油相和步驟(2)外水相混合制成乳液，然后攪拌10h使微粒硬化，過濾收集微粒，以超純水洗滌，冷凍干燥50h，得載藥率為36.85％、幾何粒徑為30-122μm的長效緩釋利培酮微球。實施例6(1)將5.5gplga(30000da，0.36dl/g，80/20，cooh)溶于41ml二氯甲烷中，然后將4.5g棕櫚酸帕利哌酮加入plga溶液中溶解，得內油相；(2)將聚乙烯醇溶于純化水中，濃度為3.0％，體積為3.2l，然后冷卻至4-8℃，得外水相；(3)通過管線式均質機將步驟(1)得到的內油相(蠕動泵80rpm)和步驟(2)外水相(螺桿泵6m/s)混合制成乳液，然后攪拌10h使微粒硬化，過濾收集微粒，以超純水洗滌，冷凍干燥50h，得載藥率為40.26％、幾何粒徑為35-132μm的長效緩釋棕櫚酸帕利哌酮微球。實施例7(1)將6.5gplga(22000da，0.25dl/g，78/22，cooh)溶于37ml二氯甲烷中，然后將3.5g帕利哌酮加入plga溶液中溶解，得內油相；(2)將聚乙烯醇溶于純化水中，濃度為1.5％，體積為3l，然后冷卻至4-8℃，得外水相；(3)通過管線式均質機將步驟(1)得到的內油相(蠕動泵50rpm)和步驟(2)外水相(螺桿泵2m/s)混合制成乳液，然后繼續攪拌10h使微粒硬化，過濾收集微粒，以超純水洗滌，冷凍干燥50h，得載藥率為31.55％、幾何粒徑為30-117μm的長效緩釋帕利哌酮微球。實施例8(1)將6.2gplga(25000da，0.30dl/g，76/24，cooh)溶于38ml二氯甲烷中，然后將3.8g利培酮加入plga溶液中溶解，得內油相；(2)將聚乙烯醇溶于純化水中，濃度為2.0％，體積為3.0l，然后冷卻至4-8℃，得外水相；(3)通過管線式均質機將步驟(1)得到的內油相(蠕動泵60rpm)和步驟(2)外水相(螺桿泵3m/s)混合制成乳液，然后攪拌10h使微粒硬化，過濾收集微粒，以超純水洗滌，冷凍干燥50h，得載藥率為34.08％、幾何粒徑為22-98μm的長效緩釋利培酮微球。實施例9(1)將6.0gplga(28000da，0.34dl/g，75/25，cooh)溶于36ml二氯甲烷中，然后將4.0g利培酮加入plga溶液中溶解，得內油相；(2)將聚乙烯醇溶于純化水中，濃度為3.0％，體積為2.9l，然后冷卻至4-8℃，得外水相；(3)通過機械攪拌(1500rpm)將步驟(1)得到的內油相和步驟(2)外水相混合制成乳液，然后攪拌10h使微粒硬化，過濾收集微粒，以超純水洗滌，冷凍干燥50h，得載藥率為35.85％、幾何粒徑為38-125μm的長效緩釋利培酮微球。實施例10(1)將5.5gplga(30000da，0.36dl/g，72/28，cooh)溶于38ml二氯甲烷中，然后將4.5g棕櫚酸帕利哌酮加入plga溶液中溶解，得內油相；(2)將聚乙烯醇溶于純化水中，濃度為3.5％，體積為3.1l，然后冷卻至4-8℃，得外水相；(3)通過管線式均質機將步驟(1)得到的內油相(蠕動泵100rpm)和步驟(2)外水相(螺桿泵8m/s)混合制成乳液，然后攪拌10h使微粒硬化，過濾收集微粒，以超純水洗滌，冷凍干燥50h，得載藥率為40.88％、幾何粒徑為31-130μm的長效緩釋棕櫚酸帕利哌酮微球。實施例11(1)將5.5gplga(35000da，0.39dl/g，85/15，cooh)溶于41ml二氯甲烷中，然后將4.5g依匹哌唑加入plga溶液中溶解，得內油相；(2)將聚乙烯醇溶于純化水中，濃度為3.0％，體積為3.3l，然后冷卻至4-8℃，得外水相；(3)通過機械攪拌(1500rpm)將步驟(1)得到的內油相和步驟(2)外水相混合制成乳液，然后繼續攪拌10h使微粒硬化，過濾收集微粒，以超純水洗滌，冷凍干燥50h，得載藥率為41.56％、幾何粒徑為28-122μm的長效緩釋依匹哌唑微球。實施例12(1)將5.0gplga(40000da，0.42dl/g，75/25，cooh)溶于40ml二氯甲烷中，然后將5.0g伊潘立酮加入plga溶液中溶解，得內油相；(2)將聚乙烯醇溶于純化水中，濃度為3.5％，體積為3.2l，然后冷卻至4-8℃，得外水相；(3)通過機械攪拌(1400rpm)將步驟(1)得到的內油相和步驟(2)外水相混合制成乳液，然后繼續攪拌10h使微粒硬化，過濾收集微粒，以超純水洗滌，冷凍干燥50h，得載藥率為46.30％、幾何粒徑為35-133m的長效緩釋伊潘立酮微球。實施例13(1)將4.5gplga(40000da，0.47dl/g，70/30，cooh)溶于44ml二氯甲烷中，然后將5.5g阿立哌唑加入plga溶液中溶解，得內油相；(2)將聚乙烯醇溶于純化水中，濃度為4％，體積為3.5l，然后冷卻至4-8℃，得外水相；(3)以高速均質機(5000rpm，轉子半徑2.5-3cm)將步驟(1)得到的內油相和步驟(2)外水相混合制成乳液，然后繼續攪拌10h使微粒硬化，過濾收集微粒，以超純水洗滌，冷凍干燥50h，得載藥率為50.32％、幾何粒徑為34-127μm的長效緩釋阿立哌唑微球。實施例14(1)將4.0gplga(50000da，0.52dl/g，65/35，cooh)溶于40ml二氯甲烷中，然后將6.0g多奈哌齊加入plga溶液中溶解，得內油相；(2)將聚乙烯醇溶于純化水中，濃度為5.0％，體積為3.8l，然后冷卻至4-8℃，得外水相；(3)以高壓均質機(700bar)將步驟(1)得到的內油相和步驟(2)外水相混合制成乳液，然后繼續攪拌10h使微粒硬化，過濾收集微粒，以超純水洗滌，冷凍干燥50h，得載藥率為55.19％、幾何粒徑為38-110μm的長效緩釋多奈哌齊微球。實施例15體外模擬釋放測試方法：精密稱取實施例1-14的微球及市場購買的的恒德微球各20mg置于200ml錐形瓶中(平行3個樣品)，加ph7.4的pbs緩沖液(含0.05％吐溫80，0.05％疊氮化鈉)100ml，置于37±0.5℃、100rpm恒溫水浴振蕩器中，在預設時間點(1天、2天，之后每隔2天取樣)取出2ml釋放液，補充等量新鮮介質后置于恒溫水浴振蕩器中繼續釋放度試驗。取出液采用高效液相色譜法(hplc)檢測藥物釋放量，然后制累計釋放曲線(含線性趨勢線)，并計算日釋放率(每2天取樣時取平均值)，結果如圖1～14和表1所示。表1緩釋微球的體外日釋放率(％)表2長效緩釋微球的體外釋放趨勢線斜率及最大日釋放率從表1-2和圖1～15可以看出，相對于市售產品(恒德)，本發明的緩釋微球沒有突釋效應，而且沒有明顯的延遲釋放期，首日釋放率不超過2％，而且能在66天內以接近零級趨勢釋放，藥物釋放率差異較小，顯示出優越的緩釋效果。沒有出現前期釋放緩慢后期釋放加劇的現象，克服市售產品的缺點，使病人避免注射服藥后仍需口服普通制劑造成的不便，顯著增加給藥依從性和便利性。本發明同時測試了實施例1-14的微球及市場購買的的恒德微球在ph6.8的hepes緩沖液(含0.05％吐溫80，0.05％疊氮化鈉)中的釋放行為，結果表明，在ph6.8的條件下，釋放雖然略加快，但依然沒有突釋效應，而且沒有明顯的延遲釋放期，首日釋放率不超過2-4％，而且能在14-60天內以接近零級趨勢釋放，藥物釋放率差異較小，顯示出優越的緩釋效果。實施例16動物試驗測試方法：取重量為2.0kg-3.0kg的新西蘭大耳白兔，每組6只(隨機分組)，雌雄各半，每組分別肌肉注射含有實施例4、5、8、9制備的利培酮微球、恒德微球的1.2ml含0.5％cmc-na的生理鹽水溶液的混懸液，每劑量的混懸液中的緩釋微球的藥物含量為18mg，分別于第0.04d，0.5d，1d，2d，7d，14d，21d，28d，35d，42d，49d，56d，63d，77d和84d于兔耳緣靜脈取血5ml。所有采集的血樣均于8000rpm離心10min后取上清液-70℃凍存，然后采用本領域已知方法檢測上述所有血樣中的血藥濃度，取平均值。結果見表3所示。表3長效緩釋利培酮微球給藥后藥時濃度(ng/ml)時間/d實施例4實施例5實施例8實施例9恒德0.041.681.081.421.872.720.55.154.845.325.859.8818.359.8911.2712.455.04210.5411.3914.2515.373.26711.6813.8719.1520.361.561410.8514.4611.2710.522.502112.9513.422.862.565.122811.849.640.350.4432.20356.744.870012.50422.161.02--4.33490.510.150.9756000.1863--0表4最高血藥濃度和最低血藥濃度及比值項目實施例4實施例5實施例8實施例9恒德max(ng/ml)12.9514.4619.1520.3632.20min(ng/ml)5.154.845.325.855.12比值2.512.993.603.486.29由表3可看到，即使是在單次給藥的情況下，相對于市售產品，本發明的長效緩釋利培酮微球顯示更優越的緩釋效果，給藥后很快增加血藥濃度(以約5ng/ml為參考值)，而市售產品除了給藥首日的應激現象，需要差不多2-3周的時間才能達到5ng/ml以上。市售產品給藥后出現接近21天內的血藥濃度未達治療窗口，而本發明長效緩釋利培酮微球給藥后的首日開始就能處于治療窗口內，并且血藥濃度持續維持在5-20ng/ml范圍內能夠持續達14天以上，甚至達35天，為市售產品的2倍。由表4可看到，在主要釋放期間(以約5ng/ml為底限)，本發明的長效緩釋利培酮微球單次給藥后，血藥濃度波動幅度明顯比市售產品要小，作用周期相同的情況下，本發明的長效緩釋利培酮微球的血藥濃度波動幅度不到市售產品的57％，作用周期更長的情況下，本發明的長效緩釋利培酮微球的血藥濃度波動幅度更小，甚至不到市售產品的48％。由此可見，本發明的長效緩釋微球具有更優越的緩釋效果，與市售產品相比更具競爭力。最后所應當說明的是，以上實施例僅用以說明本發明的技術方案而非對本發明保護范圍的限制，盡管參照較佳實施例對本發明作了詳細說明，本領域的普通技術人員應當理解，可以對本發明的技術方案進行修改或者等同替換，而不脫離本發明技術方案的實質和范圍。當前第1頁12