本發明涉及醫藥,更具體的說是涉及一枝蒿二氯甲烷組分制備方法及應用
背景技術:
1、非酒精性脂肪肝病(nonalcoholic?fatty?liver?disease,nafld)是指排除其他原因(大量飲酒、藥物等)的一種慢性代謝性疾病,其特征是肝脂質蓄積和代謝紊亂。nafld包括最初的單純脂肪肝到非酒精性脂肪性肝炎,甚至纖維化、肝硬化和癌癥。nafld在世界范圍內的患病率正在上升,全球患病率32.4%左右,我國高達29%左右。目前研究發現,對于nafld的臨床防治主要包括單靶向藥物治療、手術治療和生活方式改變,僅有一種fda批準的治療藥物但具有惡心嘔吐等副作用。這些治療不能完全解決肝損傷復雜的發病機制。故而研發高效、不良反應少的治療非酒精性脂肪肝病藥物是本領域技術人員亟需解決的問題。
2、一枝蒿是菊科蒿屬植物巖蒿artemisia?rupestris?l.的全草,全草入藥,具有抗過敏、健胃消食、解毒、抗病毒、抗菌及保肝等多重功效。臨床上用于治療消化不良、感冒發燒、肝炎、蕁麻疹、過敏性疾病等。目前國內對一枝蒿的研究開發并利用已有近40年歷史,其化學成分主要包括倍半萜類、黃酮類、揮發油類及其他化合物。zhang等研究了一枝蒿醇提取物體外抗肝癌的作用及機制。近期研究表明一枝蒿二氯甲烷組分對急性肝損傷具有保肝降酶、抗炎和抗氧化的作用。以此本申請擬對一枝蒿二氯甲烷組分進行對非酒精性脂肪肝病治療作用的驗證。
技術實現思路
1、本發明目的在于,提供一枝蒿二氯甲烷組分制備方法及應用。該方法將一枝蒿全草粉碎后,加95%乙醇混合均勻后進行回流提取,過濾,合并提取液,再減壓回收濃縮,后再用乙酸乙酯萃取,將萃取后剩余液體,用二氯甲烷萃取,濃縮,得二氯甲烷萃取液,再加入加飽和碳酸氫鈉萃取至層無色,用鹽酸調ph?3-4,再用二氯甲烷萃取,減壓濃縮,真空干燥后即得一枝蒿二氯甲烷組分。通過本發明所述方法獲得的一枝蒿二氯甲組分在制備治療非酒精性脂肪肝的藥物中的應用;為進一步開發利用一枝蒿二氯甲烷組分治療非酒精性脂肪肝病的作用奠定理論基礎。
2、本發明所述的一種一枝蒿二氯甲烷組分制備方法,按下列步驟進行:
3、a、將一枝蒿全草粉碎后,按每1g的粉碎后的一枝蒿中加入10ml濃度95%乙醇混合均勻,得到混合溶液;
4、b、將步驟a得到的混合溶液常溫下進行回流提取2次,每次2h,過濾,合并回流提取液,得到過濾液;
5、c、將步驟b得到的過濾液減壓回收,濃縮,得一枝蒿醇提取物濃縮液;
6、d、將步驟c得到的一枝蒿醇提取物濃縮液,用乙酸乙酯萃取,收集萃取后剩余液體;
7、e、將步驟d得到的一枝蒿剩余的液體,用二氯甲烷萃取,濃縮,得到二氯甲烷萃取液;
8、f、將步驟e得到的一枝蒿二氯甲烷萃取液,加入飽和碳酸氫鈉萃取至碳酸氫鈉層無色,得碳酸氫鈉萃取液;
9、g、將步驟f得到的碳酸氫鈉萃取液,用鹽酸調ph?3-4,再用二氯甲烷萃取,收集二氯甲烷萃取液減壓濃縮,真空干燥,得一枝蒿二氯甲烷組分。
10、所述方法獲得的一枝蒿二氯甲烷組分在制備治療非酒精性脂肪肝的藥物中的應用。
11、本發明所述的一枝蒿二氯甲烷組分制備方法及應用,經過高脂飲食誘導的非酒精性脂肪肝大鼠模型,觀察其對大鼠體重,臟器指數及脂肪指數的影響,對大鼠血清中的甘油三酯(tg)、總膽固醇(tc)、高密度脂蛋白膽固醇(hdl-c)、丙氨酸氨基轉移酶(alt)、天門冬氨酸氨基轉移酶(ast)、總膽紅素(t-bil)、堿性磷酸酶(alp)、乳酸脫氫酶(ldh)、總蛋白(tp)、白蛋白(alb)和總膽汁酸(tba)水平的變化,進行肝組織病理學檢查以及肝組織炎癥因子白細胞介素-6(il-6)、白細胞介素-1β(il-1β)和腫瘤壞死因子-α(tnf-α)檢測;通過測定:進而驗證一枝蒿二氯甲烷組分治療非酒精性脂肪肝的功效。
12、通過本發明所述方法獲得的一枝蒿二氯甲烷組分在非酒精性脂肪肝病中是指減少非酒精性脂肪肝模型大鼠體重、臟器系數和肥胖指數;降低非酒精性脂肪肝模型大鼠血清中tg、tc、alt、ast、alp和ldh的水平;升高非酒精性脂肪肝模型大鼠血清中hdl-c水平;降低非酒精性脂肪肝模型大鼠肝臟中白細胞介素-6(il-6)、白細胞介素-1β(il-1β)和腫瘤壞死因子-α(tnf-α)水平。
1.一種一枝蒿二氯甲烷組分制備方法,其特征在于按下列步驟進行:
2.一種如權利要求1所述方法獲得的一枝蒿二氯甲烷組分在制備治療非酒精性脂肪肝的藥物中的應用。