本發明涉及一種菌劑及其制備方法。具體的說，涉及一種改良土壤酸化的微生物菌劑及其制備方法，屬于農業技術領域。
背景技術：
引起土壤酸化的原因較多，包括土壤母質、自然環境、盲目施肥以及經驗性施肥過量等；土壤酸化嚴重影響植物的根系發育以及養分吸收，導致植物主根根尖變黃、不發育，以及根基部腐爛，給農業生產帶來嚴重的危害。
目前，改善土壤酸化的方法主要有：施用石灰，一調酸二補鈣，調節酸堿，可以增加養分的有效性；或者熏制火糞，通過有機肥調整；但上述方法都是在土地沒有農作物的條件下，對大田進行整體、調理；如果有作物生長的農田，上述方法無法使用，容易導致燒苗等問題。
在實際生產中，農民一般在植物生長過程中植株不長或者生長緩慢、爛根等發生后才發現土壤酸化，此時，人們多選用微生物肥料來調節，通過微生物改善土壤微環境，進一步緩解土壤酸化的問題，微生物代謝過程中產生的代謝產物以及中間產物還有助于提高植物的抗逆性，促進植物的生長；但普通微生物肥料只能緩解土壤酸化后，盡量保全未發病的植株，對于已經發生爛根、主根變黃不發育等癥狀的植株沒有治療效果。
因此，發明人針對上述問題，對改善土壤酸化方面的微生物菌劑進行了的多年實驗和研究。
目前的改善土壤酸化的微生物菌劑存在的缺陷：1、改善土壤酸化效果不理想； 2、雖然土壤得到一定改善，但土壤酸化導致的植物主根不發育以及根基部腐爛的病癥并不能得到改善。
技術實現要素：
針對以上問題，本發明提供一種改良土壤酸化的微生物菌劑及其制備方法，實現以下發明目的：
1、明顯改善土壤酸化導致的植物主根不發育，主根恢復正常生長；
2、有效改善土壤酸化導致的植物根基部腐爛；
3、有效改良酸化土壤。
為解決以上問題，本發明采用以下技術方案：
一種改良土壤酸化的微生物菌劑，所述的微生物菌劑包括以下組分：乙酸鈉、酵母浸膏、藻藍蛋白、艾葉、葡萄糖、硫酸銨、紫云英、異嗪皮啶、磷酸氫鈣、白云石粉、花椒粉、酸魚乳桿菌菌粉、粘土壤桿菌菌粉、德爾布有孢圓酵母菌菌粉。
以下是對上述技術方案的進一步改進：
所述的微生物菌劑包括以下重量份的組分：
乙酸鈉10～14份、酵母浸膏1～5份、藻藍蛋白15～17份、艾葉5～6份、葡萄糖10～12份 、硫酸銨1～3份、紫云英 7～10份、異嗪皮啶0.5～0.8份、磷酸氫鈣0. 1～0.6份、白云石粉0.8～1.2份、花椒粉2～3份、酸魚乳桿菌菌粉18～21份、粘土壤桿菌菌粉4～6份、德爾布有孢圓酵母菌菌粉6～7份。
所述的微生物菌劑包括以下重量份的組分：
乙酸鈉12份、酵母浸膏4～5份、藻藍蛋白16份、艾葉6份、葡萄糖11～12份 、硫酸銨2～2.5份、紫云英 9份、異嗪皮啶0.7份、磷酸氫鈣0.5～0.6份、白云石粉0.9～1.2份、花椒粉2～2.8份、酸魚乳桿菌菌粉19～20份、粘土壤桿菌菌粉5～6份、德爾布有孢圓酵母菌菌粉6～6.5份。
所述的乙酸鈉：有效成分含量為60%，密度為1.14g/m3；
所述的酵母浸膏：含氮（干基）%≥10%，氨基氮（干基）%≥4.5%，pH為6.5，NaCl含量≤1%；
所述的異嗪皮啶：有效成分含量為98%，密度為1.358 g/m3，閃點為183.2℃。
所述的酸魚乳桿菌菌粉：含酸魚乳桿菌活菌量為8×108CFU/ g；
所述的粘土壤桿菌菌粉：含粘土壤桿菌活菌量為4×108CFU/ g；
所述的德爾布有孢圓酵母菌菌粉：含德爾布有孢圓酵母菌活菌量為2×109CFU/ g。
一種改良土壤酸化的微生物菌劑的制備方法，所述的制備方法包括汽蒸步驟，所述的汽蒸：蒸汽溫度為118-120℃，控制壓強為1.2atm，汽蒸時間為1小時；汽蒸后，以1-4℃/min的降溫速率冷卻至25℃。
所述的制備方法還包括超聲破壁步驟，所述的超聲破壁：
將艾葉、紫云英、花椒粉進行混合，加入水，料液比為1:20。
所述的超聲破壁：超聲波功率為90-95w，破壁時間為20-22min。
所述的制備方法還包括菌粉制備，所述菌粉制備包括：
酸魚乳桿菌菌種發酵：
采用的發酵培養基為肉湯培養基，控制培養基pH為6-6.5，控制32-34℃，接種菌種量為5%，發酵28-30小時；
粘土壤桿菌菌種發酵：
采用的發酵培養基為MRS培養基，控制培養基pH為7-7.2，控制35-36℃，接種菌種量為5%，發酵24-25小時；
德爾布有孢圓酵母菌菌種發酵：
采用的發酵培養基為：馬鈴薯200g、葡萄糖50g、黃豆汁50g、硫酸鎂30g、水1000ml，控制培養基pH為7-7.1，控制30-32℃，接種菌種量為5%，發酵20-22小時。
所述的制備方法還包括菌種穩定處理，所述的菌種穩定處理：
將菌粉分別放入恒溫箱，20-21℃保持45-50min后，以0.5-1℃/min的升溫速率升溫至30℃，恒溫60-65min，然后以0.5-1℃/min的降溫速率降溫至25℃，恒溫120-130min。
本發明采用以上技術方案，與現有技術相比，具有以下有益效果：
1、采用本發明微生物菌劑，因土壤酸化引起的植物主根不發育癥狀明顯得到改善，使用后主根恢復正常生長，主根不發育的治愈率達到96.72-98.23%；
2、采用本發明微生物菌劑，因土壤酸化引起的植物根基部腐爛癥狀明顯得到改善，治愈率達80.36-96.43%；
3、本發明微生物菌劑明顯改善土壤酸化，pH由5.2調整到6.5-7.2，效果顯著。
具體實施方式
本發明所述粘土壤桿菌（Agrobacterium viscosum）保藏號為CICC10215；
所述酸魚乳桿菌（Lactobacillus acidipiscis）保藏號為CICC10851；
所述德爾布有孢圓酵母菌（Torulaspora delbrueckii）保藏號為CICC 1004；
上述菌種均來自于市售。
實施例1 一種改良土壤酸化的微生物菌劑
所述的微生物菌劑包括以下重量份的組分：
乙酸鈉10份、酵母浸膏2份、藻藍蛋白15份、艾葉5.2份、葡萄糖11份 、硫酸銨1份、紫云英 7份、異嗪皮啶0.5份、磷酸氫鈣0. 2份、白云石粉0.8份、花椒粉2份、酸魚乳桿菌菌粉18份、粘土壤桿菌菌粉5份、德爾布有孢圓酵母菌菌粉6份；
所述的乙酸鈉：有效成分含量為60%，密度為1.14g/m3；
所述的酵母浸膏：含氮（干基）%≥10%，氨基氮（干基）%≥4.5%，pH為6.5，NaCl含量≤1%；
所述的艾葉：為艾葉鮮草烘干至水分含量7%以下，粉碎至200目的細粉；
所述的紫云英：為紫云英鮮草曬干后，烘干至水分含量9%以下，粉碎至200目的細粉；
所述的異嗪皮啶：有效成分含量為98%，密度為1.358 g/m3，閃點為183.2℃；
所述的花椒粉：細度為800目；
所述的酸魚乳桿菌菌粉：含酸魚乳桿菌活菌量為8×108CFU/ g；
所述的粘土壤桿菌菌粉：含粘土壤桿菌活菌量為4×108CFU/ g；
所述的德爾布有孢圓酵母菌菌粉：含德爾布有孢圓酵母菌活菌量為2×109CFU/ g。
實施例2 一種改良土壤酸化的微生物菌劑
所述的微生物菌劑包括以下重量份的組分：
乙酸鈉12份、酵母浸膏1份、藻藍蛋白16份、艾葉5份、葡萄糖10份 、硫酸銨1.5份、紫云英 8份、異嗪皮啶0.7份、磷酸氫鈣0. 1份、白云石粉1份、花椒粉2.5份、酸魚乳桿菌菌粉20份、粘土壤桿菌菌粉4份、德爾布有孢圓酵母菌菌粉7份；
所述的乙酸鈉：有效成分含量為60%，密度為1.14g/m3；
所述的酵母浸膏：含氮（干基）%≥10%，氨基氮（干基）%≥4.5%，pH為6.5，NaCl含量≤1%；
所述的艾葉：為艾葉鮮草烘干至水分含量7%以下，粉碎至200目的細粉；
所述的紫云英：為紫云英鮮草曬干后，烘干至水分含量9%以下，粉碎至200目的細粉；
所述的異嗪皮啶：有效成分含量為98%，密度為1.358 g/m3，閃點為183.2℃；
所述的花椒粉：細度為800目；
所述的酸魚乳桿菌菌粉：含酸魚乳桿菌活菌量為8×108CFU/ g；
所述的粘土壤桿菌菌粉：含粘土壤桿菌活菌量為4×108CFU/ g；
所述的德爾布有孢圓酵母菌菌粉：含德爾布有孢圓酵母菌活菌量為2×109CFU/ g。
實施例3 一種改良土壤酸化的微生物菌劑
所述的微生物菌劑包括以下重量份的組分：
乙酸鈉14份、酵母浸膏3份、藻藍蛋白17份、艾葉5.5份、葡萄糖11份 、硫酸銨3份、紫云英 10份、異嗪皮啶0.8份、磷酸氫鈣0. 4份、白云石粉1.2份、花椒粉3份、酸魚乳桿菌菌粉21份、粘土壤桿菌菌粉5份、德爾布有孢圓酵母菌菌粉6.5份；
所述的乙酸鈉：有效成分含量為60%，密度為1.14g/m3；
所述的酵母浸膏：含氮（干基）%≥10%，氨基氮（干基）%≥4.5%，pH為6.5，NaCl含量≤1%；
所述的艾葉：為艾葉鮮草烘干至水分含量7%以下，粉碎至200目的細粉；
所述的紫云英：為紫云英鮮草曬干后，烘干至水分含量9%以下，粉碎至200目的細粉；
所述的異嗪皮啶：有效成分含量為98%，密度為1.358 g/m3，閃點為183.2℃；
所述的花椒粉：細度為800目；
所述的酸魚乳桿菌菌粉：含酸魚乳桿菌活菌量為8×108CFU/ g；
所述的粘土壤桿菌菌粉：含粘土壤桿菌活菌量為4×108CFU/ g；
所述的德爾布有孢圓酵母菌菌粉：含德爾布有孢圓酵母菌活菌量為2×109CFU/ g。
實施例4 一種改良土壤酸化的微生物菌劑
所述的微生物菌劑包括以下重量份的組分：
乙酸鈉12份、酵母浸膏5份、藻藍蛋白16份、艾葉6份、葡萄糖12份 、硫酸銨2份、紫云英 9份、異嗪皮啶0.7份、磷酸氫鈣0.6份、白云石粉0.9份、花椒粉2.8份、酸魚乳桿菌菌粉20份、粘土壤桿菌菌粉6份、德爾布有孢圓酵母菌菌粉6份；
所述的乙酸鈉：有效成分含量為60%，密度為1.14g/m3；
所述的酵母浸膏：含氮（干基）%≥10%，氨基氮（干基）%≥4.5%，pH為6.5，NaCl含量≤1%；
所述的艾葉：為艾葉鮮草烘干至水分含量7%以下，粉碎至200目的細粉；
所述的紫云英：為紫云英鮮草曬干后，烘干至水分含量9%以下，粉碎至200目的細粉；
所述的異嗪皮啶：有效成分含量為98%，密度為1.358 g/m3，閃點為183.2℃；
所述的花椒粉：細度為800目；
所述的酸魚乳桿菌菌粉：含酸魚乳桿菌活菌量為8×108CFU/ g；
所述的粘土壤桿菌菌粉：含粘土壤桿菌活菌量為4×108CFU/ g；
所述的德爾布有孢圓酵母菌菌粉：含德爾布有孢圓酵母菌活菌量為2×109CFU/ g。
實施例5 一種改良土壤酸化的微生物菌劑
所述的微生物菌劑包括以下重量份的組分：
乙酸鈉12份、酵母浸膏4份、藻藍蛋白16份、艾葉6份、葡萄糖11份 、硫酸銨2.5份、紫云英 9份、異嗪皮啶0.7份、磷酸氫鈣0. 5份、白云石粉1.2份、花椒粉2份、酸魚乳桿菌菌粉19份、粘土壤桿菌菌粉5份、德爾布有孢圓酵母菌菌粉6.5份；
所述的乙酸鈉：有效成分含量為60%，密度為1.14g/m3；
所述的酵母浸膏：含氮（干基）%≥10%，氨基氮（干基）%≥4.5%，pH為6.5，NaCl含量≤1%；
所述的艾葉：為艾葉鮮草烘干至水分含量7%以下，粉碎至200目的細粉；
所述的紫云英：為紫云英鮮草曬干后，烘干至水分含量9%以下，粉碎至200目的細粉；
所述的異嗪皮啶：有效成分含量為98%，密度為1.358 g/m3，閃點為183.2℃；
所述的花椒粉：細度為800目；
所述的酸魚乳桿菌菌粉：含酸魚乳桿菌活菌量為8×108CFU/ g；
所述的粘土壤桿菌菌粉：含粘土壤桿菌活菌量為4×108CFU/ g；
所述的德爾布有孢圓酵母菌菌粉：含德爾布有孢圓酵母菌活菌量為2×109CFU/ g。
實施例6 一種改良土壤酸化的微生物菌劑
所述的微生物菌劑包括以下重量份的組分：
乙酸鈉10份、酵母浸膏1份、藻藍蛋白17份、艾葉5份、葡萄糖10份 、硫酸銨3份、紫云英 7份、異嗪皮啶0.5份、磷酸氫鈣0. 1份、白云石粉1.2份、花椒粉3份、酸魚乳桿菌菌粉18份、粘土壤桿菌菌粉6份、德爾布有孢圓酵母菌菌粉7份；
所述的乙酸鈉：有效成分含量為60%，密度為1.14g/m3；
所述的酵母浸膏：含氮（干基）%≥10%，氨基氮（干基）%≥4.5%，pH為6.5，NaCl含量≤1%；
所述的艾葉：為艾葉鮮草烘干至水分含量7%以下，粉碎至200目的細粉；
所述的紫云英：為紫云英鮮草曬干后，烘干至水分含量9%以下，粉碎至200目的細粉；
所述的異嗪皮啶：有效成分含量為98%，密度為1.358 g/m3，閃點為183.2℃；
所述的花椒粉：細度為800目；
所述的酸魚乳桿菌菌粉：含酸魚乳桿菌活菌量為8×108CFU/ g；
所述的粘土壤桿菌菌粉：含粘土壤桿菌活菌量為4×108CFU/ g；
所述的德爾布有孢圓酵母菌菌粉：含德爾布有孢圓酵母菌活菌量為2×109CFU/ g。
實施例7 一種改良土壤酸化的微生物菌劑的制備方法
1、菌粉制備
將酸魚乳桿菌、粘土壤桿菌、德爾布有孢圓酵母菌菌種分別發酵并制備菌粉；
酸魚乳桿菌菌種發酵：
采用的發酵培養基為肉湯培養基，控制培養基pH為6，控制32℃，接種菌種量為5%，發酵28小時；
將發酵液12000rpm離心10min，分離收集菌體，將菌體噴于土豆淀粉上，含水量為15%，得到酸魚乳桿菌菌粉，含酸魚乳桿菌活菌量為8×108CFU/ g；
粘土壤桿菌菌種發酵：
采用的發酵培養基為MRS培養基，控制培養基pH為7.2，控制36℃，接種菌種量為5%，發酵25小時；
將發酵液12000rpm離心12min，分離收集菌體，將菌體噴于紅薯淀粉上，含水量為10%，得到粘土壤桿菌菌粉，含粘土壤桿菌活菌量為4×108CFU/ g；
德爾布有孢圓酵母菌菌種發酵：
采用的發酵培養基為：馬鈴薯200g、葡萄糖50g、黃豆汁50g、硫酸鎂30g、水1000ml，控制培養基pH為7.1，控制32℃，接種菌種量為5%，發酵20小時；
將發酵液10000rpm離心10min，分離收集菌體，將菌體噴于土豆淀粉上，含水量為12%，得到德爾布有孢圓酵母菌菌粉，含德爾布有孢圓酵母菌活菌量為2×109CFU/ g。
2、菌種穩定處理
將步驟1制備的酸魚乳桿菌、粘土壤桿菌、德爾布有孢圓酵母菌菌粉分別放入恒溫箱，20℃保持50min后，以0.5-1℃/min的升溫速率升溫至30℃，恒溫60min，然后以0.5-1℃/min的降溫速率降溫至25℃，恒溫120min，備用；
在實際操作中發明人發明采用上述菌種穩定處理后，與不經過穩定處理相比，微生物菌劑性能更強，酸魚乳桿菌、粘土壤桿菌、德爾布有孢圓酵母菌及其代謝產物對腐爛植株細胞的修復效果明顯增強，植株根基腐爛的治愈率提高22-26%。
3、原料準備
按照改良土壤酸化的微生物菌劑的配方稱取原料乙酸鈉、酵母浸膏、藻藍蛋白、艾葉、葡萄糖 、硫酸銨、紫云英、異嗪皮啶、磷酸氫鈣、白云石粉、花椒粉、酸魚乳桿菌菌粉、粘土壤桿菌菌粉、德爾布有孢圓酵母菌菌粉備用。
4、超聲破壁
將艾葉、紫云英、花椒粉進行混合，1000rpm攪拌20min；加入水，料液比為1:20；混合粉末置于超聲波破碎儀中進行破壁，超聲波功率為90w，破壁時間為20min；破壁后，將溶液濃縮烘干至粉末狀，含水量低于8%。
5、混料
將上述步驟制得的混合粉末導入混料罐內；加入乙酸鈉、異嗪皮啶、磷酸氫鈣、白云石粉，開啟攪拌1800rpm，20min；將攪拌速率降至600rpm，邊攪拌，邊向混料罐中依次加入葡萄糖、硫酸銨、乙酸鈉、酵母浸膏、藻藍蛋白；攪拌30min放料，得到混合料。
6、汽蒸
將上述混合料放入汽蒸裝置中，控制通入蒸汽溫度為120℃，控制壓強為1.2atm（標準大氣壓），汽蒸時間為1小時；汽蒸后，以2-4℃/min的冷卻速率冷卻至25℃，不宜冷卻過快，以免破壞分子結構；25℃恒溫靜置，備用；
在實際操作中發明人發明采用上述汽蒸步驟后，與不經過汽蒸相比，微生物菌劑在土壤中的下滲效果明顯增強，使藥物成分更多的到達植株根尖部位，植株主根不發育的治愈率提高30-35%。
7、混入菌體
將上述步驟的混合料與酸魚乳桿菌菌粉、粘土壤桿菌菌粉、德爾布有孢圓酵母菌菌粉混合，80rpm攪拌30-35min，混合均勻，不宜攪拌過快，以免影響細菌活性。
在實際生產應用中，發明人發現：在種植西瓜的田塊中，西瓜生長瓜蔓初期，測得pH為5.2，普遍存在土壤酸化導致的西瓜主根不長或生長緩慢，并有根基部腐爛癥狀；將西瓜種植區分為等面積的7個區域，每個區域100株；1-6區分別對應施用實施例1-6的微生物菌劑，將菌劑溶于水灌根施用，施用量為每棵植物2g菌劑，每5天施用一次，共施用4次， 7區為對照組施用等量水；25天后，測定具體效果見表1；
表1采用實施例1-6的微生物菌劑的效果
由表1可見，實施例4、5為優選實施例，本發明微生物菌劑明顯改善土壤酸化，pH由5.2調整到6.5-7.2，效果顯著，且改良土壤酸化的同時，因土壤酸化引起的植物主根不發育、根基部腐爛等癥狀明顯得到改善，主根長度明顯恢復正常生長，從10cm增長至16.5-22.5cm，主根不發育的治愈率達到96.72-98.23%；根基部腐爛的植株數量從56株降低至2-11株，即治愈率達80.36-96.43%。
實施例8 汽蒸溫度和冷卻速率對微生物菌劑儲存時間的影響
在制備微生物菌劑的實際操作過程中，發明人發現汽蒸步驟中的汽蒸溫度和冷卻速率對微生物菌劑的耐熱穩定性有較大影響，采用實施例4的配方按照實施例7的方法制備微生物菌劑，只改變汽蒸溫度和冷卻速率，采用表2所示的汽蒸條件進行實施例8-11；
表2實施例8-11的汽蒸條件
實施例8-11的微生物菌劑在42℃條件下維持菌劑性狀不變的存儲時間見表3；
表3 實施例8-11的微生物菌劑的熱存儲時間
由表3可見，汽蒸步驟中的汽蒸溫度優選為118℃，冷卻速率優選為2℃/min。
發明人長期從事微生物菌劑的研發工作，特別是對改良土壤的相關微生物菌劑開發，有獨特的見解，并取得了顯著的效果，攻克了本領域的瓶頸問題。
除特殊說明的外，本發明中的百分數均為質量百分數，本發明中的比值均為質量比值。
最后應說明的是：以上所述僅為本發明的優選實施例而已，并不用于限制本發明，盡管參照前述實施例對本發明進行了詳細的說明，對于本領域的技術人員來說，其依然可以對前述實施例所記載的技術方案進行修改，凡在本發明的精神和原則之內，所作的任何修改、等同替換、改進等，均應包含在本發明的保護范圍之內。