專利名稱：醋酸卡培立肽的制備方法
技術領域：
本發明涉及一種多肽的制備方法，尤其涉及一種醋酸卡培立肽的制備方法。
背景技術：
本品所含卡培立肽，別名基因重組心房肽、卡哌利丁、Hamp、人腦利鈉肽。它的適應癥是急性心功能衰竭(包括慢性心功能衰竭加重)。；卡培立肽藥理學作用是通過刺激心肌伸展，由心室內顆粒合成的，然后通過冠狀動脈分布全身，作用于血管平滑肌和腎臟等組織，調節血壓和體內電解質平衡。本品為觀個氨基酸組成的一種循環調節激素，起血管擴張和利尿作用。本品引起的血管舒張是由于與血管平滑肌的ANP(心房利鈉多肽)受體結合，通過提高鳥苷酸環化酶的活性而實現的，提示可減輕心臟前、后負荷。目前國內有一篇卡培立肽專利(專利號ZL200510012425.5)，采用的是基因重組技術生產，未見固相合成工藝方法的報道；CA1245635A1專利報道的為采用Boc路線合成卡培立肽，CA1245637A1專利報道的為采用基因重組技術生產卡培立肽，其它的專利如EP0440311A1、JP3004169A、US4673732A等都是或者采用基因重組技術生產卡培立肽或者采用Boc路線合成卡培立肽，未見采用Fmoc路線合成卡培立肽的相關文獻及專利。

發明內容
本發明提出了一種采用固相Fmoc合成線性卡培立肽的制備方法，整個工藝操作方便、收率高。本發明提供的一種制備醋酸卡培立肽的方法，包括以下步驟
1)由Fmoc-Tyr (tBu)-OH 禾口替代度為 0. 5mmol/g -1. Ommo 1/g 的 Wang Resin 反應,得至IjFmoc-Tyr(tBu)-Wang Resin ；
2)將Fmoc-Tyr(tBu) -Wang Resin樹脂采用逐一偶聯的方式合成得到線性卡培立肽_Wang Resin ；
3)采用固相氧化法氧化卡培立肽-WangResin ；
4)采用TFA裂解，得到粗肽；
5)經過反相高效色譜純化、凍干得到醋酸卡培立肽。本發明相對于Boc法，Fmoc法操作簡單，對環境污染小。采用Wang Resin (Wang-樹脂)不僅成本低，更加具有社會價值，而且Wang Resin能夠使整個固相合成反應穩定。申請人意外地發現，本合成中Wang resin的替代度對反應的收率有著重要影響，當wang resin的替代度大于1. Ommol/g時，合成產物卡培立肽的收率明顯降低；當Wang resin的替代度低于1. Ommol/g時，收率比較穩定，但是當替代度低于0. 5mmol/g時，Wang resin用量會大幅度增加，對合成產品卡培立肽的成本影響很大。為了尋求收率與成本的最佳結合點，本發明采取用替代度為0. 5mmol/g -1. Ommol/g的WangResin0
本發明采用逐一偶聯的方式合成得到線性卡培立肽-Wang Resin，偶聯過程采用的偶聯劑包括DIC/HOBt、PyBOP/HOBt或TBTU/HOBt。同時采用有機堿包括TEA、NMM或DIPEA0優選體系為TBTU/HOBt體系，優選有機堿為NMM。實驗發現，采用本發明的多種偶聯體系能顯著提高反應效率。申請人意外地發現，有機堿為TEA、NMM或DIPEA，可以有效的防止合成產物消旋。采用固相碘氧化法在應用于氧化卡培立肽-Wang Resin，碘的用量是一個非常重要的因素，當碘的物質量大于卡培立肽-Wang Resin物質量的80倍時，由于用量過高，致使氧化產物復雜，難以純化；當碘的物質量小于卡培立肽-Wang Resin物質量的10倍時，氧化的收率很低，致使反應效率低下。申請人意外的發現，當碘的物質量是卡培立肽-WangResin物質量的10-80倍時，是平衡了反應效率和純化難度的一個理想范圍。其中氧化時間確定為4-16小時。所述步驟5)卡培立肽反相高效色譜純化包括以下步驟
第一步純化將合成所得粗肽溶解后用十八烷基硅烷鍵合硅膠為固定相，以磷酸鹽緩沖溶液為A相，緩沖溶液pH范圍為2. 5-3.5 ；色譜純乙腈為B相，B相的梯度為17% 32%，進行梯度洗脫純化45-120min。磷酸鹽緩沖溶液可以為體積濃度是0. 1-0.洲的磷酸緩沖溶液；
第二步轉鹽采用RP-HPLC法將其轉成醋酸鹽。作為A相的醋酸鹽緩沖溶液濃度應為0. 5-0. 1% ；緩沖溶液pH應為3. 5 4. 4 ；第二步轉鹽的色譜純乙腈B相的梯度為6% 36%，梯度洗脫時間為30-90 min0其中min是單位分鐘的英文縮寫。
采用本純化方法，可以使整個生產過程可控性高、重現性好，同時可以得到很高的產率。 本發明合成方法示意流程如下其中
Fmoc-Tyr (tBu) -OH代表N_芴甲氧羰基-側鏈叔丁基保護酪氨酸
Fmoc-Arg (R) -OH代表N_芴甲氧羰基-側鏈R基保護精氨酸
Fmoc-Phe-OH代表N_芴甲氧羰基苯丙氨酸
Fmoc-Ser (R) -OH代表N_芴甲氧羰基-側鏈R基保護絲氨酸
Fmoc-Asn (R) -OH代表N_芴甲氧羰基-側鏈R基保護天冬酰胺
Fmoc-Cys (R) -OH代表N_芴甲氧羰基-側鏈R基保護半胱氨酸
Fmoc-Gly-OH代表N_芴甲氧羰基甘氨酸
Fmoc-Leu-OH代表N_芴甲氧羰基亮氨酸
Fmoc-Gln (R) -OH代表N_芴甲氧羰基-側鏈R基保護谷氨酰胺
Fmoc-Ala-OH代表N_芴甲氧羰基丙氨酸
Fmoc-Ile-OH代表N_芴甲氧羰基異亮氨酸
Fmoc-Asp (R) -OH代表N_芴甲氧羰基-側鏈R基保護天冬氨酸
Fmoc-Met-OH代表N_芴甲氧羰基-蛋氨酸
當氨基酸為精氨酸時，側鏈R=Pbf (2，2，4，6，7-五甲基苯并呋喃_5_磺酰基)；當氨基酸為絲氨酸、天冬氨酸時，側鏈R=tBu (叔丁基)；當氨基酸為半胱氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺時，側鏈R=Trt (三苯甲基)。DIC代表二異丙基碳二亞胺DMAP代表4，4- 二甲氨基吡啶HOBt代表1-羥基苯并三氮唑
TBTU代表0-苯并三氮唑-N，N，N’，N’ -四甲基脲四氟硼酸酯TFA代表三氟乙酸TEA代表三乙胺
本發明工藝具有反應操作簡單、后處理容易、原料投入少、成本低、收率高等特點，全部反應的總收率可達30%。具有可觀的經濟實用價值，同時在多肽藥物設計合成領域具有廣泛的應用前景。
具體實施例方式下面結合附圖
和實施例對本發明做進一步詳細說明。Wang Resin購自天津南開和成有限公司，各種保護氨基酸購自吉爾生化有限公司。說明書和權利要求書中所使用英文縮寫的含義列于下表中
Fmoc9-芴甲氧羰基DIC二異丙基碳二亞胺HOBt1 -羥基苯并三唑DIPEAN, N-二異丙基乙胺N麗N-甲基嗎啉Pbf2，2，4，6，7-五甲基苯并呋喃-5-磺酰基Trt三苯甲基tBu叔丁基DMFN, N-二甲基甲酰胺DCM二氯甲烷DMF二甲基甲甲酰胺TFA三氟乙酸DMAP4，4-二甲氨基吡啶TBTU0-苯并三氮唑-N, N, N’，N’ -四甲基脲四氟硼酸酯
實施例 1> Fmoc-Tyr (tBu)-Wang Resin 的合成
在50ml的反應柱中加入4. 8克Wang ResinCsub=O. 5mmol/g)，加入DMF溶脹30分鐘，并用適量 DMF 洗滌樹脂三次。稱取 Fmoc-Tyr (tBu)-OH (2. 89g, 6. 3mmol)，HOBT (1. 02g，7. 56mmol)，全部混合后，加入DMF (IOml) ,DCM(IOml)攪拌溶解完全。然后加入DIC (0. 98ml，
6.3mmol)，室溫下攪拌20min。將反應液轉移至反應柱中，并加入DMAP( 29. 3mg,0. 24mmol),鼓氮氣反應池。抽干反應液，并用DMF洗滌樹脂4次，然后加入乙酸酐(16. 2mlUSOmmol),批啶((13.81111、180讓01)，反應211。抽干反應液，并用DMF洗滌樹脂6次。真空干燥，取樣測其取代度為0. 3mmol/g。 實施例 2、Fmoc-Tyr (tBu) -ffang Resin 的合成
在50ml的反應柱中加入3. O克Wang ResinCsub=O. 8mmol/g)，加入DMF溶脹30分鐘，并用適量 DMF 洗滌樹脂三次。稱取 Fmoc-Tyr (tBu)-OH (2. 89g, 6. 3mmol)，HOBT (1. 02g，
7.56mmol)，全部混合后，加入DMF (IOml) ,DCM(IOml)攪拌溶解完全。然后加入DIC (0. 98ml，6. 3mmol)，室溫下攪拌20min。將反應液轉移至反應柱中，并加入DMAP( 29. 3mg,0. 24mmol),鼓氮氣反應池。抽干反應液，并用DMF洗滌樹脂4次，然后加入乙酸酐(16. 2mlUSOmmol),
5批啶((13.81111、180讓01)，反應211。抽干反應液，并用DMF洗滌樹脂6次。真空干燥，取樣測其取代度為0. 4mmol/g。實施例 3、Fmoc-Tyr (tBu) -ffang Resin 的合成
在50ml的反應柱中加入2. 4克Wang ResinCsub=L Ommol/g)，加入DMF溶脹30分鐘，并用適量 DMF 洗滌樹脂三次。稱取 Fmoc-Tyr (tBu)-OH (2. 89g, 6. 3mmol)，HOBT (1. 02g，7. 56mmol)，全部混合后，加入DMF (IOml) ,DCM(IOml)攪拌溶解完全。然后加入DIC (0. 98ml，6. 3mmol)，室溫下攪拌20min。將反應液轉移至反應柱中，并加入DMAP( 29. 3mg,0. 24mmol),鼓氮氣反應池。抽干反應液，并用DMF洗滌樹脂4次，然后加入乙酸酐(16. 2mlUSOmmol),批啶((13.81111、180讓01)，反應211。抽干反應液，并用DMF洗滌樹脂6次。真空干燥，取樣測其取代度為0. 6mmol/g。實施例4、線性卡培立肽-Wang Resin的合成
將 5mmol Fmoc-Tyr (tBu) -ffang Resin (取代度=0. 4mmol/g)用 DMF 溶脹 30 分鐘，抽干溶劑，加入20%六氫吡啶/DMF反應30min，抽干反應液，并用DMF洗滌樹脂6次。稱取Fmoc-Arg (pbf) -OH(9. 732g, 15mmol)、HOBT (2. 027g, 15mmol)，全部混合后加入 DMF (30ml)、DCM(30ml)攪拌溶解完全。然后加入DIC(2. 355ml, 15mmol)，室溫下攪拌20min。將反應液轉移至反應柱中，鼓氮氣反應池。抽干反應液，重復去保護、偶聯操作，依次逐步偶聯合成線性卡培立肽-Wang Resin 47. 233g，樹脂合成收率106. 3%。實施例5、線性卡培立肽-Wang Resin的合成
將 5mmol Fmoc-Tyr (tBu) -ffang Resin (取代度=0. 4mmol/g)用 DMF 溶脹 30 分鐘，抽干溶劑，加入20%六氫吡啶/DMF反應30min，抽干反應液，并用DMF洗滌樹脂6次。稱取Fmoc-Arg (pbf) -OH (9. 732g, 15mmol)、PyBOP (7. 806g, 15mmol)、HOBT (2. 027g, 15mmol)，全部混合后加入DMF (30ml) ,DCM (30ml)攪拌溶解完全。然后加入NMM (3. 33ml，30mmol)，室溫下攪拌20min。將反應液轉移至反應柱中，鼓氮氣反應池。抽干反應液，重復去保護、偶聯操作，依次逐步偶聯合成線性卡培立肽-Wang Resin 47. 695g,樹脂合成收率108. 1%。實施例6、線性卡培立肽-Wang Resin的合成
將 5mmol Fmoc-Tyr (tBu) -ffang Resin (取代度=0. 4mmol/g)用 DMF 溶脹 30 分鐘，抽干溶劑，加入20%六氫吡啶/DMF反應30min，抽干反應液，并用DMF洗滌樹脂6次。稱取Fmoc-Arg (pbf) -OH (9. 732g, 15mmol)、PyBOP (7. 806g, 15mmol)、HOBT (2. 027g, 15mmol)，全部混合后加入DMF (30ml)、DCM (30ml)攪拌溶解完全。然后加入DIPEA (4. 965ml，30mmol)，室溫下攪拌20min。將反應液轉移至反應柱中，鼓氮氣反應池。抽干反應液，重復去保護、偶聯操作，依次逐步偶聯合成線性卡培立肽-Wang Resin 47. 102g,樹脂合成收率105. 8%。實施例7、線性卡培立肽-Wang Resin的合成
將 5mmol Fmoc-Tyr (tBu) -ffang Resin (取代度=0. 4mmol/g)用 DMF 溶脹 30 分鐘，抽干溶劑，加入20%六氫吡啶/DMF反應30min，抽干反應液，并用DMF洗滌樹脂6次。稱取Fmoc-Arg (pbf) -OH(9. 732g, 15mmol)、TBTU (4. 817g, 15mmol)、HOBT (2. 027g, 15mmol)，全部混合后加入DMF (30ml) ,DCM (30ml)攪拌溶解完全。然后加入NMM (3. 33ml，30mmol)，室溫下攪拌20min。將反應液轉移至反應柱中，鼓氮氣反應池。抽干反應液，重復去保護、偶聯操作，依次逐步偶聯合成線性卡培立肽-Wang Resin 46. 936g，樹脂合成收率105. 1%。實施例8、線性卡培立肽-Wang Resin的合成將 5mmol Fmoc-Tyr (tBu) -Wang Resin (取代度=0. 4mmol/g)用 DMF 溶脹 30 分鐘，抽干溶劑，加入20%六氫吡啶/DMF反應30min，抽干反應液，并用DMF洗滌樹脂6次。稱取Fmoc-Arg(pbf)-OH(9. 732g, 15mmol)、TBTU (4. 817g, 15mmol)、HOBT (2. 027g, 15mmol)，全部混合后加入DMF (30ml)、DCM (30ml)攪拌溶解完全。然后加入DIPEA(4. 965ml，30mmol)，室溫下攪拌20min。將反應液轉移至反應柱中，鼓氮氣反應池。抽干反應液，重復去保護、偶聯操作，依次逐步偶聯合成線性卡培立肽-Wang Resin 46. 835g，樹脂合成收率104. 8%。實施例9、卡培立肽-Wang Resin的固相氧化
稱取碘(12. 69g，50mmol),加入DMF(IOOml)，攪拌溶解完全。將溶解好的碘/DMF溶液加入實施例4-8任意一個實施例制備的線性卡培立肽-Wang Resin，鼓氮氣攪拌反應6h。抽干反應液，DMF洗滌樹脂6次，甲醇洗滌樹脂3次，真空干燥，得卡培立肽-Wang Resin。實施例10、卡培立肽-Wang Resin的固相氧化
稱取碘(101. 52g,400mmol),加入DMF (800ml)，攪拌溶解完全。將溶解好的碘/DMF溶液加入實施例4-8任意一個實施例制備的線性卡培立肽-Wang Resin，鼓氮氣攪拌反應1.證。抽干反應液，DMF洗滌樹脂6次，甲醇洗滌樹脂3次，真空干燥，得卡培立肽-WangResin。
實施例11、卡培立肽-Wang Resin的TFA裂解
稱取實施例10所得卡培立肽-Wang Resin至IL圓底燒瓶中，加入500ml裂解液(TFA 苯甲醚水=90:5:5)，室溫反應證。減壓過濾，濾液加入5L的冰凍乙醚沉淀離心。所得粗肽真空干燥后稱重17. 203g，粗肽收率111. 7%。實施例12 卡培立肽反相高效色譜純化
1.樣品處理按照每克粗肽100毫升純水比例溶解，溶解后的溶液用無機濾膜過濾，收集濾液備用。2.純化
條件色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為固定相的色譜柱，柱子直徑和長度為50mm X 300mm。流動相A相0.覬磷酸溶液用三乙胺調pH至2. 5 3. 5 ;B相乙腈。流速70-80 ml/min。檢測波長230 nm。梯度B% 17% 32% (45 min)。進樣量為 1. 3-1. 5 g ο操作將色譜柱用50%以上的乙腈沖洗干凈后平衡上樣，上樣量為1. 3-1. 5g。線性梯度洗脫45min，收集目的峰，將收集的目的肽溶液于觀°C減壓旋蒸濃縮至約10 12mg/ml后備用。3、轉鹽
條件色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為固定相的色譜柱，柱子直徑和長度為50mm X 300mm。流動相A相質量濃度0. 1%的醋酸水溶液；B相色譜純乙腈。流速70-80 ml/min。檢測波長230 nm。梯度B% :6% 36% (30 min)。進樣量為 1. 6-2. Og。操作將色譜柱用50%以上的乙腈沖洗干凈后上樣，上樣量為160_200ml樣品溶液。線性梯度洗脫30min，收集目的峰，將收集的目的肽溶液合并旋蒸濃縮至約50-80mg/ml后轉至合適大小西林瓶。冷凍干燥，得純度大于98. 5%的符合內控標準的卡培立肽，總收率32. 1%。
實施例13 卡培立肽反相高效色譜純化
1.樣品處理按照每克粗肽100毫升純水比例溶解，溶解后的溶液用無機濾膜過濾，收集濾液備用。2.純化
條件色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為固定相的色譜柱，柱子直徑和長度為150mm X 300 mm。流動相A相0. 2%醋酸溶液用氨水調pH至2. 5 3. 5 ;B相乙腈。流
速450-550 ml/min。檢測波長230 nm。梯度B% 17% 32%(60 min)。進樣量為 13-15
g °操作將色譜柱用50%以上的乙腈沖洗干凈后平衡上樣，上樣量為13_15g。線性梯度洗脫60min，收集目的峰，將收集的目的肽溶液于觀°C減壓旋蒸濃縮至約10-12 mg/ml后備用。3、轉鹽
條件色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為固定相的色譜柱，柱子直徑和長度為150mm X 300 mm。流動相A相質量溶度0. 1%的醋酸水溶液；B相色譜純乙腈。流速450-550 ml/min。檢測波長280 nm。梯度B% :6% 36% (60 min)。進樣量為 15_20g。操作將色譜柱用50%以上的甲醇沖洗干凈后上樣，上樣量為1500_2000ml樣品溶液。線性梯度洗脫60min，收集目的峰，將收集的目的肽溶液合并旋蒸濃縮至約50-80mg/ml后轉至合適大小西林瓶。冷凍干燥，得純度大于98. 5%的符合內控標準的卡培立肽，總收率30. 1%。實施例14 卡培立肽反相高效色譜純化
1.樣品處理按照每克粗肽100毫升純水比例溶解，溶解后的溶液用無機濾膜過濾，收集濾液備用。2.純化
條件色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為固定相的色譜柱，柱子直徑和長度為300mm X 300mm 。流動相A相0. 2%醋酸溶液用氨水調pH至2. 5 3. 5 ;B相乙腈。流速1900-2200 ml/min。檢測波長230 nm。梯度B% 17% 32% (120 min)。進樣量為55-75 g ο操作將色譜柱用50%以上的乙腈沖洗干凈后平衡上樣，上樣量為55_75g。線性梯度洗脫120min，收集目的峰，將收集的目的肽溶液觀°C減壓旋蒸濃縮至約10-12 mg/ml后備用。3、轉鹽
條件色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為固定相的色譜柱，柱子直徑和長度為300mm X 300mm 。流動相A相0. 1%醋酸水溶液；B相色譜純乙腈。流速1900-2200ml/min。檢測波長230 nm。梯度B% :6% 36% (90 min)。進樣量為 55_75g。操作將色譜柱用50%以上的甲醇沖洗干凈后上樣，上樣量為5500_7500ml樣品溶液。線性梯度洗脫90min，收集目的峰，將收集的目的肽溶液合并旋蒸濃縮至約50-80mg /ml后轉至合適大小西林瓶。冷凍干燥，得純度大于98. 5%的符合內控標準的卡培立肽，總收率30. 3%ο綜上所述，本發明采用未經報道的Fmoc固相合成策略合成卡培立肽、反相高效色譜純化，具有反應操作簡單、后處理容易、原料投入少、成本低、收率高等特點，全部反應的總收率可達30%。本發明具有可觀的經濟實用價值，同時在多肽藥物設計合成領域具有廣泛的應用前景。
權利要求
1.一種醋酸卡培立肽的制備方法，包括以下步驟由 Fmoc-Tyr (tBu)-OH 禾口替代度為 0. 5mmol/g -1. Ommol/g 的 Wang Resin 反應，得至IjFmoc-Tyr(tBu)-Wang Resin ；將Fmoc-Tyr (tBu)-Wang Resin樹脂采用逐一偶聯的方式合成得到線性卡培立肽-Wang Resin ；3)采用固相氧化法氧化卡培立肽-WangResin ；4)采用TFA裂解，得到粗肽；5)高效液相純化卡培立肽，包括以下步驟第一步純化將合成所得粗肽溶解后用十八烷基硅烷鍵合硅膠為固定相，以磷酸鹽緩沖溶液為A相、色譜純乙腈為B相，進行梯度洗脫純化；第二步轉鹽采用RP-HPLC法將其轉成醋酸鹽。
2.根據權利要求1所述的醋酸卡培立肽的制備方法，其特征在于所述步驟2)逐一偶聯采用偶聯劑，偶聯劑包括TEA、NMM或DIPEA。
3.根據權利要求1所述的醋酸卡培立肽的制備方法，其特征在于所述采用碘固相氧化合成卡培立肽-Wang Resin時，碘的用量以物質量計，是卡培立肽-Wang Resin物質量的10-80倍，氧化時間是4-16小時。
4.根據權利要求2所述的醋酸卡培立肽的制備方法，其特征在于所述采用碘固相氧化合成卡培立肽-Wang Resin時，碘的用量以物質量計，是卡培立肽-Wang Resin物質量的10-80倍，氧化時間是4-16小時。
5.根據權利要求1-4任意一項所述的醋酸卡培立肽的制備方法，其特征在于步驟5)第一步純化以磷酸鹽緩沖溶液為A相，緩沖溶液pH范圍為2. 5-3. 5 ；以色譜純乙腈為B相，B相的梯度為17% 32%，進行梯度洗脫純化45-120min。
6.根據權利要求1-4任意一項所述的醋酸卡培立肽的制備方法，其特征在于步驟5)第二步RP-HPLC法為以濃度為0. 05-0. 1%醋酸鹽緩沖溶液作為A相；緩沖溶液pH為·3.5 4. 4 ；以色譜純乙腈作為B相，梯度為6% 36%，梯度洗脫時間為30-90 min，轉成醋酸鹽。
7.根據權利要求5任意一項所述的醋酸卡培立肽的制備方法，其特征在于步驟5)第二步RP-HPLC法為以濃度為0.05-0. 1%醋酸鹽緩沖溶液作為A相；緩沖溶液pH為3.5 ·4.4;以色譜純乙腈作為B相，梯度為6% 36%，梯度洗脫時間為30-90 min，轉成醋酸鹽。
全文摘要
本發明公開了一種醋酸卡培立肽的制備方法，包括以下步驟1)由Fmoc-Tyr(tBu)-OH和替代度為0.5mmol/g-1.0mmol/g的WangResin反應，得到Fmoc-Tyr(tBu)-WangResin；2)將Fmoc-Tyr(tBu)-WangResin樹脂采用逐一偶聯的方式合成得到線性卡培立肽-WangResin；3)采用固相氧化法氧化卡培立肽-WangResin；4)采用TFA裂解，得到粗肽；5)對卡培立肽粗肽進行反相高效液相色譜法純化，得到高純度精肽。該工藝具有反應操作簡單、后處理容易、收率高、成本低等有益的技術效果。
文檔編號C07K14/58GK102382188SQ20111034796
公開日2012年3月21日 申請日期2011年11月7日 優先權日2011年11月7日
發明者付信, 劉建, 張文治, 袁建成, 馬亞平 申請人:深圳翰宇藥業股份有限公司