技術總結
本發明公開了一種高效合成α?氨基丁酸的單細胞工廠及其構建與應用，屬于微生物技術領域。本發明將L?蘇氨酸脫氨酶、L?氨基酸脫氫酶及提供輔因子NADH循環的脫氫酶基因串聯表達構建重組的大腸桿菌單細胞工廠用于α?氨基丁酸高效合成，通過rbs序列優化控制L?蘇氨酸脫氨酶的表達量，解決中間產物酮丁酸的快速積累而抑制轉化的問題，同時通過啟動子及rbs序列優化控制提供輔因子NADH循環的脫氫酶表達量，增強NADH再生速率最終增加產量。利用單細胞工廠進行全細胞轉化可減少物質進出障礙加快轉化速率，促進輔因子胞內循環而無需外源添加，成本低廉。在20h內，5L發酵罐中重組大腸桿菌單細胞工廠產量為204g/L，時空產率10.2g/L·h，為其工業化生產提供實際有效策略。

技術研發人員：饒志明;周俊平;楊套偉;張顯;徐美娟;張蔡喆;戚云龍;鄭俊賢
受保護的技術使用者：江南大學
文檔號碼：201611006643
技術研發日：2016.11.16
技術公布日：2017.02.15