麻豆精品无码国产在线播放,国产亚洲精品成人AA片新蒲金,国模无码大尺度一区二区三区,神马免费午夜福利剧场

一種檢測豬肺炎支原體的引物對、試劑盒及Syto9熒光定量PCR?HRM檢測方法與流程

文檔序號:11126290閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.用于檢測豬肺炎支原體的熒光定量PCR引物對,其特征在于:所述引物對的核苷酸序列如下所示:

上游引物P1:5’- GWCAAAGTCAAAGTCAGCAAAC -3’;

下游引物P2:5’- AGCTGTTCAAATGCTTGTCC -3’。

2.一種檢測豬肺炎支原體的Syto9熒光定量PCR-HRM方法,包括如下步驟:

(1)提取待測樣品DNA;

(2)以步驟(1)提取的DNA為核酸模板,以Syto9為熒光染料,用權(quán)利要求1所述的用于檢測豬肺炎支原體的熒光定量PCR引物對進(jìn)行PCR擴(kuò)增;

(3)將步驟(2)獲得的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行高分辨率熔解曲線分析;

(4)結(jié)果判定:形成特異性的熔解曲線峰型為陽性,無特異的熔解曲線峰型為陰性。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的檢測豬肺炎支原體的Syto9熒光定量PCR-HRM方法,其特征在于:步驟(2)所述的PCR擴(kuò)增反應(yīng)的25 μL體系中含有2xTaq Plus Master Mix 12.5 μL,P1 和P2引物(100 pmol/μL)各1.0 μL,核酸模板2.0 μL,Syto9 1.0 μL,余量為去離子水。

4.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的檢測豬肺炎支原體的Syto9熒光定量PCR-HRM方法,其特征在于:步驟(2)所述的PCR擴(kuò)增反應(yīng)程序?yàn)槭紫?4℃ 5 min;隨后94℃ 20 s、54.5℃ 20 s、72℃ 20 s,循環(huán)擴(kuò)增45次;最后72℃延伸7 min。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的檢測豬肺炎支原體的Syto9熒光定量PCR-HRM方法,其特征在于:步驟(3)所述的高分辨率熔解曲線分析程序?yàn)?8℃變性2min,40℃雜合2min,74℃~83℃以0.3℃/s的熔解速率運(yùn)行。

6.一種豬肺炎支原體的熒光定量PCR檢測試劑盒,其特征在于:含有權(quán)利要求1所述的用于檢測豬肺炎支原體的熒光定量PCR引物對。

當(dāng)前第2頁1 2 3 
網(wǎng)友詢問留言 已有0條留言
  • 還沒有人留言評論。精彩留言會獲得點(diǎn)贊!
1
主站蜘蛛池模板: 扎囊县| 灌云县| 湟源县| 金湖县| 青河县| 鹤峰县| 阿荣旗| 临澧县| 台中市| 铁岭市| 兰考县| 周至县| 天镇县| 莲花县| 江永县| 拉萨市| 河西区| 徐水县| 延寿县| 云和县| 孝感市| 枣阳市| 横峰县| 鄢陵县| 合山市| 浦北县| 那坡县| 尤溪县| 新乡市| 龙口市| 会同县| 漳平市| 芮城县| 中阳县| 洛南县| 温宿县| 哈巴河县| 湄潭县| 平果县| 洞头县| 江源县|