1.一種沙門氏菌核酸快速檢測試劑盒,其特征在于:包括正向引物invA-F:序列5’-ATTTCTATGTTCGTCATTCCATTACCTACC-3’,反向引物invA-R:序列:5’-ATGTAGAACGACCCCATAAACACCAA-3’,用地高辛和生物素分別標記上、下游引物的5’端,金標抗體,抗金標抗體種屬的抗體,顯色物生物素的配體物質。
2.根據權利要求1所述的沙門氏菌核酸快速檢測試劑盒,其特征在于:還包括擴增體系,所述擴增體系包括10×Annealing Buffer、dNTP、MgSO4、NaCl、Enzyme Mix。
3.根據權利要求1所述的沙門氏菌核酸快速檢測試劑盒,其特征在于:所述金標抗體為地高辛和生物素。
4.根據權利要求1所述的沙門氏菌核酸快速檢測試劑盒,其特征在于:所述顯色物生物素的配體物質鏈霉親合素。
5.根據權利要求1所述的沙門氏菌核酸快速檢測試劑盒,其特征在于:所述金標抗體為鼠抗地高辛抗體,抗金標抗體為羊抗鼠二抗。
6.一種沙門氏菌核酸快速檢測試紙,其特征在于:包括樣品墊、金標墊、硝酸纖維素膜和吸水紙,樣品墊一端與金標墊一端端部重疊,金標墊另一端與硝酸纖維素膜端部重疊硝酸纖維素膜另一端部與吸水紙重疊,在硝酸纖維素膜間隔平行嵌裝有檢測線和質控線,檢測線在金標墊一側,質控線在檢測線與吸水紙端部之間;
所述金標墊上噴涂金標抗體,檢測線上包被顯色物生物素的配體物質,質控線上包被抗金標抗體種屬的抗體。
7.根據權利要求6所述的沙門氏菌核酸快速檢測試紙,其特征在于:所述金標墊上噴涂標抗地高辛抗體的膠體金,檢測線上包被鏈霉親合素,鏈霉親合素濃度為2mg/mL,質控線上包被羊抗鼠二抗。
8.根據權利要求6所述的沙門氏菌核酸快速檢測試紙,其特征在于:所述樣品墊為玻璃纖維,各部分重疊部分為2-10mm,在檢測試紙下部安裝PVC背板。
9.根據權利要求6所述的沙門氏菌核酸快速檢測試紙,其特征在于:快速檢測試紙使用上樣展開液為添加0.1%BSA和0.1%Tween 20的PBS緩沖液pH7.4。
10.一種沙門氏菌核酸快速檢測方法,其特征在于:其包括如下步驟:
⑴將單克隆抗體如鼠抗地高辛抗體作為金標抗體吸附于顯色物質膠體金顆粒上,形成穩定結構的結合體固定在金標墊上;
⑵鏈霉親和素作為標記物生物素的配體物質以線狀形式包被在硝酸纖維素膜上形成檢測線;
⑶選擇抗金標抗體種屬的抗體如羊抗鼠抗體同樣以線狀形式包被在質控線上結合過多的金標抗體;
⑷設計特異性恒溫擴增的上游引物5’和下游引物5’上分別修飾抗原或半抗原物質如地高辛和生物素,當存在待測沙門核酸擴增產物時,在恒溫條件下進行核酸的擴增反應得到同時連接兩種標記物地高辛-目標片段-生物素的擴增產物;
⑸將步驟⑷產生的地高辛-目標片段-生物素首先與金標墊(玻璃纖維)上膠體金顆粒包被的地高辛抗體結合,形成地高辛抗體-地高辛-目標片段-生物素顯色顆粒復合體;
⑹步驟⑸得到的顯色顆粒復合物在上樣緩沖液中通過毛細管作用沿纖維素膜向上移動至檢測線被受體鏈霉親合素捕獲得到地高辛抗體-地高辛-目標片段-生物素-鏈霉親合素復合體,在檢測線上沉降形成肉眼可視的顯色條帶,且未結合擴增產物的膠體金顆粒上包被的金標抗體與質控線上的羊抗鼠抗體結合,出現兩條顯色條帶即為陽性結果;
或者,當不存在沙門核酸擴增產物時,不發生上述步驟⑶-⑹,不能與金標墊(玻璃纖維)上膠體金顆粒包被的地高辛抗體結合,顯色物質膠體金顆粒不能與檢測線上包被的物質結合形成顯色條帶,質控線上的羊抗鼠抗體與膠體金顆粒上包被的金標抗體結合出現一條顯色條帶即為陰性結果。