1.一種水性病毒組合物,其包含:
2.根據權利要求1所述的組合物,其中所述緩沖液以約25mm至約30mm的濃度存在。
3.根據前述權利要求中任一項所述的組合物,其中所述緩沖液以約27.5mm的濃度存在。
4.根據前述權利要求中任一項所述的組合物,其中所述緩沖液是hepes緩沖液。
5.根據前述權利要求中任一項所述的組合物,其中所述緩沖液是l-組氨酸緩沖液。
6.根據前述權利要求中任一項所述的組合物,其中所述蔗糖以約66mm至約80mm的濃度存在。
7.根據前述權利要求中任一項所述的組合物,其中所述蔗糖以約73mm的濃度存在。
8.根據權利要求1至6中任一項所述的組合物,其中所述蔗糖以所述組合物的每體積約2.0重量%至約3.0重量%的濃度存在。
9.根據權利要求1至6中任一項所述的組合物,其中所述蔗糖以所述組合物的每體積約2.5重量%的濃度存在。
10.根據前述權利要求中任一項所述的組合物,其中所述l-脯氨酸以約40mm至約60mm的濃度存在。
11.根據前述權利要求中任一項所述的組合物,其中所述l-脯氨酸以約50mm的濃度存在。
12.根據前述權利要求中任一項所述的組合物,其中所述組合物進一步包含鹽。
13.根據權利要求12所述的組合物,其中所述鹽以約65mm至約85mm的濃度存在。
14.根據權利要求13所述的組合物,其中所述鹽以約75mm的濃度存在。
15.根據權利要求12至14中任一項所述的組合物,其中所述鹽是氯鹽、kcl或nacl。
16.根據前述權利要求中任一項所述的組合物,其中所述組合物進一步包含泊洛沙姆188。
17.根據權利要求16所述的組合物,其中所述泊洛沙姆188以約0.01mg/ml至約1mg/ml的濃度存在。
18.根據權利要求17所述的組合物,其中所述泊洛沙姆188以約0.1mg/ml或約0.3mg/ml的濃度存在。
19.根據前述權利要求中任一項所述的組合物,其中所述組合物包含約6.5至約8的ph。
20.一種水性病毒組合物,其包含:
21.一種水性病毒組合物,其包含:
22.一種水性病毒組合物,其包含:
23.一種水性病毒組合物,其包含:
24.根據權利要求23所述的組合物,其中所述組合物不包含l-脯氨酸。
25.根據權利要求23或權利要求24所述的組合物,其中所述hepes緩沖液以約25mm至約30mm的濃度存在。
26.根據權利要求23至25中任一項所述的組合物,其中所述hepes緩沖液以約27.5mm的濃度存在。
27.根據權利要求23至26中任一項所述的組合物,其中所述蔗糖以約66mm至約80mm的濃度存在。
28.根據權利要求23至27中任一項所述的組合物,其中所述蔗糖以約73mm的濃度存在。
29.根據權利要求23至28中任一項所述的組合物,其中所述蔗糖以所述組合物的每體積約2.0重量%至約3.0重量%的濃度存在。
30.根據權利要求23至29中任一項所述的組合物,其中所述蔗糖以所述組合物的每體積約2.5重量%的濃度存在。
31.根據權利要求23至30中任一項所述的組合物,其中所述鹽以約65mm至約85mm的濃度存在。
32.根據權利要求23至31中任一項所述的組合物,其中所述鹽以約75mm的濃度存在。
33.根據權利要求23至32中任一項所述的組合物,其中所述鹽是kcl或nacl。
34.根據權利要求23至33中任一項所述的組合物,其中所述泊洛沙姆以約0.01mg/ml至約1mg/ml的濃度存在。
35.根據權利要求23至34中任一項所述的組合物,其中所述泊洛沙姆以約0.1mg/ml的濃度存在。
36.根據權利要求23至35中任一項所述的組合物,其中所述泊洛沙姆是泊洛沙姆188(p188)。
37.根據權利要求23至36中任一項所述的組合物,其中所述組合物包含約7至約8的ph。
38.一種水性病毒組合物,其包含:
39.根據前述權利要求中任一項所述的組合物,其中病毒慢載體以約1x108至約2x109tu/ml的滴度存在。
40.根據前述權利要求中任一項所述的組合物,其中所述慢病毒載體選自由以下組成的組:人類免疫缺陷病毒1(hiv-1);人類免疫缺陷病毒2(hiv-2)、維斯納梅迪病毒(visna-maedi?virus,vmv)病毒;山羊關節炎-腦炎病毒(caev);馬傳染性貧血病毒(eiav);貓免疫缺陷病毒(fiv);牛免疫缺陷病毒(biv);以及猿猴免疫缺陷病毒(siv)。
41.根據前述權利要求中任一項所述的組合物,其中所述慢病毒載體源自人類免疫缺陷病毒-1(hiv-1)或人類免疫缺陷病毒2(hiv-2)。
42.根據前述權利要求中任一項所述的組合物,其中所述慢病毒載體源自人類免疫缺陷病毒-1(hiv-1)。
43.根據前述權利要求中任一項所述的組合物,其中所述慢病毒載體被假型化。
44.根據前述權利要求中任一項所述的組合物,其中所述慢病毒載體用來自水皰性口炎病毒的毒株的包膜蛋白進行假型化。
45.根據權利要求44所述的組合物,其中所述水皰性口炎病毒的毒株選自由以下組成的組:印第安納株(indiana)、阿拉戈斯株(alagoas)、新澤西株(new?jersey)、伊斯法罕株(isfahan)、科卡爾株(cocal)、馬拉巴株(maraba)或皮里株(piry)。
46.根據前述權利要求中任一項所述的組合物,其中所述慢病毒載體用水皰性口炎病毒g(vsv-g)蛋白進行假型化。
47.根據前述權利要求中任一項所述的組合物,其中所述慢病毒載體用源自以下的包膜進行假型化:麻疹(measles)包膜蛋白、辛德畢斯(sindbis)包膜蛋白、麻疹病毒(morbillivirus)f蛋白和h蛋白、仙臺病毒(sendai)f蛋白和hn蛋白或副粘病毒科(paramyxoviridae)f蛋白和h蛋白。
48.根據前述權利要求中任一項所述的組合物,其中所述慢病毒載體包含多核苷酸,所述多核苷酸包含轉基因。
49.根據權利要求48所述的組合物,其中所述轉基因編碼治療性蛋白。
50.根據權利要求48或權利要求49所述的組合物,其中所述轉基因或治療性蛋白用于治療單基因疾病、病癥或病狀。
51.根據權利要求48至50中任一項所述的組合物,其中所述轉基因或治療性蛋白是嵌合抗原受體(car)、嵌合共刺激受體(ccr)、αβt細胞受體(αβ-tcr)、γδt細胞受體(γδ-tcr)、經二聚化劑調控的免疫受體復合物(daric)或開關受體。
52.根據權利要求48至51中任一項所述的組合物,其中所述轉基因或治療性蛋白是用于治療血紅蛋白病的治療性珠蛋白或用于治療cald的abcd1基因。
53.根據前述權利要求中任一項所述的組合物,其中所述組合物不包含血清。
54.根據前述權利要求中任一項所述的組合物,其中所述組合物不包含pipes。
55.根據前述權利要求中任一項所述的組合物,其中所述組合物不包含檸檬酸鈉。
56.根據前述權利要求中任一項所述的組合物,其中所述組合物不包含磷酸鈉。
57.根據前述權利要求中任一項所述的組合物,其中所述組合物不包含tris。
58.根據前述權利要求中任一項所述的組合物,其中所述組合物不包含鹽。
59.根據前述權利要求中任一項所述的組合物,其中所述組合物不包含氯鹽。
60.根據前述權利要求中任一項所述的組合物,其中所述組合物不包含nacl。
61.根據前述權利要求中任一項所述的組合物,其中所述組合物不包含kcl。
62.根據前述權利要求中任一項所述的組合物,其中所述組合物不包含海藻糖。
63.根據前述權利要求中任一項所述的組合物,其中相對于在儲存或至少一次凍融循環之前所述組合物中的所述慢病毒載體的感染滴度,所述慢病毒載體在儲存后維持在hos細胞中的大于約75%的感染滴度恢復率。
64.根據前述權利要求中任一項所述的組合物,其中相對于在儲存或至少一次凍融循環之前所述組合物中的所述慢病毒載體的感染滴度,所述慢病毒載體在儲存后維持在hos細胞中的大于約95%的感染滴度恢復率;相對于在儲存或至少一次凍融循環之前所述組合物中的所述慢病毒載體的感染滴度。
65.根據前述權利要求中任一項所述的組合物,其中所述慢病毒載體具有約56°至約62℃的熱展開溫度,如通過差示掃描熒光法(dsf)所測量的。
66.根據前述權利要求中任一項所述的組合物,其中相對于在儲存或至少一次凍融循環之前所述組合物中的所述慢病毒載體的流體動力學直徑,所述慢病毒載體在儲存后維持約150nm至約170nm的流體動力學直徑,如通過在25℃以及0.967厘泊(cp)的粘度值下的動態光散射(dls)所測量的。
67.根據前述權利要求中任一項所述的組合物,其中與參考標準品相比,所述慢病毒載體在儲存后維持至少約78%效力,如通過pbmc中的轉基因表達所測量的。
68.根據前述權利要求中任一項所述的組合物,其中與參考標準品相比,所述慢病毒載體在儲存后維持至少約95%效力,如通過pbmc中的轉基因表達所測量的。
69.根據前述權利要求中任一項所述的組合物,其中在儲存后不存在可見纖維顆粒(束狀纖維)。
70.根據前述權利要求中任一項所述的組合物,其中在儲存后存在5個或更少個可見顆?;蛭⒘?。
71.根據前述權利要求中任一項所述的組合物,其中在儲存后所述組合物中不存在可見顆粒。
72.根據權利要求63至71中任一項所述的組合物,其中所述儲存是在25℃、2-8℃或37℃下。
73.根據權利要求63至72中任一項所述的組合物,其中所述儲存持續24小時、48小時、72小時、96小時、120小時、144小時、168小時或更長時間。
74.根據權利要求63至73中任一項所述的組合物,其中所述儲存包含一次或多次凍融循環。
75.根據任何權利要求74所述的組合物,其中所述一次或多次凍融循環包含將所述組合物在約-65℃或更低溫度下冷凍約1.5小時或更長時間,并且在30℃下解凍1.5小時。
76.根據前述權利要求中任一項所述的組合物,其中所述組合物被冷凍。
77.一種用于儲存病毒載體的方法,所述方法包含:
78.一種用于儲存病毒載體的方法,所述方法包含:
79.一種用于冷凍保存病毒載體的方法,所述方法包含:
80.根據權利要求77至79中任一項所述的方法,其中所述方法包含儲存慢病毒組合物至少約24小時。
81.根據權利要求77至79中任一項所述的方法,其中所述方法包含儲存所述慢病毒組合物至少約168小時。
82.一種在細胞中表達轉基因的方法,所述方法包含使細胞與根據權利要求1至76中任一項所述的組合物接觸。
83.根據權利要求82所述的方法,其中所述細胞是哺乳動物細胞。
84.根據權利要求82或權利要求83所述的方法,其中所述細胞是造血細胞。
85.根據權利要求82至84中任一項所述的方法,其中所述細胞是免疫效應細胞。
86.根據權利要求82至85中任一項所述的方法,其中所述細胞是cd3+、cd4+和/或cd8+細胞。
87.根據權利要求82至86中任一項所述的方法,其中所述細胞是t細胞。
88.根據權利要求82至87中任一項所述的方法,其中所述細胞是αβt細胞。
89.根據權利要求82至87中任一項所述的方法,其中所述細胞是γδt細胞。
90.根據權利要求82至87中任一項所述的方法,其中所述細胞是細胞毒性t淋巴細胞(ctl)、腫瘤浸潤淋巴細胞(til)或輔助t細胞。
91.根據權利要求82至85中任一項所述的方法,其中所述細胞是自然殺傷(nk)細胞或自然殺傷t(nkt)細胞。
92.根據權利要求82至85中任一項所述的方法,其中所述細胞是造血干細胞或祖細胞。
93.根據權利要求82至85中任一項所述的方法,所述細胞是人cd34+造血干細胞或祖細胞。