背景技術(shù)：

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明提供了作為cftr調(diào)節(jié)劑的大環(huán)化合物。因此，本發(fā)明化合物可能適用于治療cftr相關(guān)疾病和病癥(尤其是囊性纖維化)。

2、1)本發(fā)明的第一方面涉及式(i)化合物

3、

4、其中

5、x代表-crx1rx2，其中

6、rx1和rx2與它們所連接的碳原子一起形成環(huán)，該環(huán)為：

7、·c3-6-環(huán)烷-1,1-二基(尤其是環(huán)丙烷-1,1-二基)；

8、·c3-6-環(huán)烷-1,1-二基，其中所述c3-6-環(huán)烷-1,1-二基獨(dú)立地被c1-3-烷氧基、氟或羥基單取代；或被氟雙取代；

9、·c4-6-雜環(huán)烷二基，其中所述c4-6-雜環(huán)烷二基含有一個(gè)環(huán)氮原子，其中所述氮在具有自由價(jià)時(shí)未被取代或被單取代，其中取代基獨(dú)立地選自c1-4-烷基和-coo-c1-3-烷基；或

10、·c4-6-雜環(huán)烷二基，其中所述c4-6-雜環(huán)烷二基含有一個(gè)環(huán)氧原子；或

11、rx1代表氫，且

12、rx2代表

13、·c1-6-烷基(尤其是甲基)；

14、·c1-4-氟烷基(尤其是2,2-二氟乙基或2,2,2-三氟乙基，或此外，2,2-二氟丙基、3,3,3-三氟丙基或3,3-二氟丁基)；

15、·c3-6-環(huán)烷基；

16、·c1-3-烷基，其中所述c1-3-烷基被以下基團(tuán)單取代：

17、羥基；

18、c1-4-烷氧基；或

19、-lx2-arx2，其中-

20、lx2獨(dú)立地代表直接鍵或c1-3-亞烷基(尤其是亞甲基)；且

21、arx2獨(dú)立地代表5至6元雜芳基(尤其是噁二唑基)；其中所述基團(tuán)arx2獨(dú)立地為未經(jīng)取代的、經(jīng)單取代的或經(jīng)雙取代的，其中取代基獨(dú)立地選自c1-4-烷基、c1-3-烷氧基、鹵素、c3-6-環(huán)烷基和c1-3-氟烷基(尤其是三氟甲基)；并且

22、r1代表c1-4-烷基(尤其是甲基)；

23、或片段

24、

25、代表雜環(huán)，其為

26、

27、r2代表c1-4-烷基(尤其是甲基)；

28、r3代表c1-6-烷基(尤其是異丁基)；

29、r4代表5元雜芳基，其中所述5元雜芳基獨(dú)立地為未經(jīng)取代的、經(jīng)單取代的、經(jīng)雙取代的或經(jīng)三取代的，其中取代基獨(dú)立地選自c1-4-烷基；c1-4-烷氧基(尤其是甲氧基)；c1-3-氟烷基；c1-3-氟烷氧基；鹵素(尤其是氟)；氰基；和c3-6-環(huán)烷基(尤其是環(huán)丙基)；

30、ar1代表8至10元雙環(huán)雜芳基(尤其是10元雙環(huán)雜芳基)；其中所述8至10元雙環(huán)雜芳基獨(dú)立地為未經(jīng)取代的、經(jīng)單取代的或經(jīng)雙取代的，其中取代基獨(dú)立地選自c1-4-烷基、c1-3-氟烷基、c1-4-烷氧基c1-3-氟烷氧基、氰基和鹵素(尤其是氟)；

31、[其中應(yīng)理解，在上述基團(tuán)ar1中，所述-co-基團(tuán)和所述氧(即將ar1連接至分子其余部分的基團(tuán))如式(i)所示以鄰位排列連接至ar1的芳環(huán)碳原子]；并且

32、ar2代表

33、苯基或5-至6-元雜芳基(尤其是吡啶基)，其中所述苯基或5-至6-元雜芳基是未經(jīng)取代的、經(jīng)單取代的或經(jīng)雙取代的(尤其是經(jīng)單取代或經(jīng)雙取代的)，其中取代基獨(dú)立地選自c1-4-烷基(尤其是甲基)、c1-3-氟烷基、鹵素(尤其是氟)、氰基、c3-6-環(huán)烷基、c1-6-烷氧基(尤其是甲氧基)和c1-3-氟烷氧基。

34、2)第二方面涉及根據(jù)實(shí)施方案1)所述的式(i)化合物，其中所述化合物是式(ie)化合物：

35、

36、3)另一實(shí)施方案涉及根據(jù)實(shí)施方案1)或2)中任一項(xiàng)所述的化合物，其中

37、x代表-crx1rx2，其中

38、rx1和rx2與它們所連接的碳原子一起形成環(huán)，該環(huán)是c3-6-環(huán)烷-1,1-二基(尤其是環(huán)丙烷-1,1-二基)；或

39、rx1代表氫，并且

40、rx2代表

41、·c1-6-烷基(尤其是甲基)；

42、·c1-4-氟烷基(尤其是2,2-二氟乙基或2,2,2-三氟乙基)；

43、·c3-6-環(huán)烷基；或

44、·-lx2-arx2，其中-

45、lx2獨(dú)立地代表c1-3-亞烷基(尤其是亞甲基)；并且

46、arx2獨(dú)立地代表5元雜芳基(尤其是噁二唑基)；其中所述基團(tuán)arx2獨(dú)立地未經(jīng)取代，或經(jīng)單取代，其中取代基獨(dú)立地選自c1-4-烷基、c1-3-烷氧基、鹵素、c3-6-環(huán)烷基和c1-3-氟烷基(尤其是三氟甲基)；并且

47、r1代表c1-4-烷基(尤其是甲基)；

48、或片段

49、

50、代表雜環(huán)，其為

51、

52、4)另一實(shí)施方案涉及根據(jù)實(shí)施方案1)或2)中任一項(xiàng)所述的化合物，其中

53、x代表-crx1rx2，其中

54、rx1和rx2與它們所連接的碳原子一起形成環(huán)，該環(huán)為c3-6-環(huán)烷-1,1-二基(尤其是環(huán)丙烷-1,1-二基)；或

55、rx1代表氫，且

56、rx2代表

57、·c1-6-烷基(尤其是甲基)；

58、·c1-4-氟烷基(尤其是2,2-二氟乙基或2,2,2-三氟乙基)；或

59、·-lx2-arx2，其中

60、-lx2獨(dú)立地代表亞甲基；且

61、arx2獨(dú)立地代表5元雜芳基(尤其是噁二唑基)；其中所述基團(tuán)arx2獨(dú)立地是經(jīng)單取代的，其中取代基獨(dú)立地選自c1-4-烷基、c1-3-烷氧基、鹵素、c3-6-環(huán)烷基和c1-3-氟烷基(尤其是三氟甲基)；且

62、r1代表c1-4-烷基(尤其是甲基)；

63、或片段

64、

65、代表雜環(huán)，其為

66、

67、5)另一實(shí)施方案涉及根據(jù)實(shí)施方案1)或2)中任一項(xiàng)所述的化合物，其中片段

68、

69、代表以下基團(tuán)：

70、a)

71、

72、b)

73、

74、6)另一實(shí)施方案涉及根據(jù)實(shí)施方案1)至5)中任一項(xiàng)所述的化合物，其中r2代表甲基。

75、7)另一實(shí)施方案涉及根據(jù)實(shí)施方案1)至6)中任一項(xiàng)所述的化合物，其中r3代表異丁基。

76、8)另一實(shí)施方案涉及根據(jù)實(shí)施方案1)至7)中任一項(xiàng)所述的化合物，其中r4代表5元雜芳基，其中所述5元雜芳基獨(dú)立地未經(jīng)取代、經(jīng)單取代或經(jīng)雙取代，其中取代基獨(dú)立地選自c1-4-烷基；c1-4-烷氧基(尤其是甲氧基)；c1-3-氟烷基；鹵素(尤其是氟)；和c3-6-環(huán)烷基(尤其是環(huán)丙基)。

77、9)另一實(shí)施方案涉及根據(jù)實(shí)施方案1)至7)中任一項(xiàng)所述的化合物，其中r4代表5元雜芳基，其中所述5元雜芳基獨(dú)立地經(jīng)單取代或經(jīng)雙取代，其中取代基獨(dú)立地選自c1-4-烷氧基(尤其是甲氧基)；鹵素(尤其是氟)；和c3-6-環(huán)烷基(尤其是環(huán)丙基)。

78、10)另一實(shí)施方案涉及根據(jù)實(shí)施方案1)至7)中任一項(xiàng)所述的化合物，其中r4代表

79、

80、10a)該實(shí)施方案10)的子實(shí)施方案涉及根據(jù)實(shí)施方案1)至7)中任一項(xiàng)所述的化合物，其中r4代表

81、

82、11)另一實(shí)施方案涉及根據(jù)實(shí)施方案1)至10)中任一項(xiàng)所述的化合物，其中ar2代表

83、·苯基，其中所述苯基未經(jīng)取代；或

84、·6元雜芳基(尤其是吡啶基)，其中所述6元雜芳基獨(dú)立地是未經(jīng)取代的、經(jīng)單取代的或經(jīng)雙取代的(尤其是經(jīng)單取代或經(jīng)雙取代的)，其中取代基獨(dú)立地選自c1-4-烷基(尤其是甲基)、c1-3-氟烷基、鹵素(尤其是氟)、c3-6-環(huán)烷基、c1-6-烷氧基(尤其是甲氧基)和c1-3-氟烷氧基。

85、12)另一實(shí)施方案涉及根據(jù)實(shí)施方案1)至10)中任一項(xiàng)所述的化合物，其中ar2代表6元雜芳基(尤其是吡啶基，特別是吡啶-2-基)，其中所述6元雜芳基獨(dú)立地是未經(jīng)取代的、經(jīng)單取代的或經(jīng)雙取代的(尤其是經(jīng)單取代的或經(jīng)雙取代的)，其中取代基獨(dú)立地選自c1-4-烷基(尤其是甲基)、c1-3-氟烷基、鹵素(尤其是氟)和c1-6-烷氧基(尤其是甲氧基)。

86、13)另一實(shí)施方案涉及根據(jù)實(shí)施方案1)至10)中任一項(xiàng)所述的化合物，其中ar2代表選自以下的基團(tuán)：

87、a)

88、

89、b)

90、

91、c)

92、或者，此外，

93、d)

94、

95、e)

96、

97、其中上述組a)、b)、c)、d)和e)各自形成一個(gè)特定的子實(shí)施方案，并且其中上述組a)、b)和c)形成特定的子實(shí)施方案，并且上述組d)和e)形成特定的子實(shí)施方案。

98、13a)該實(shí)施方案13)的另一個(gè)子實(shí)施方案涉及根據(jù)實(shí)施方案1)至10)中任一項(xiàng)所述的化合物，其中ar2代表選自以下的基團(tuán)：

99、b)

100、

101、c)

102、

103、14)另一個(gè)實(shí)施方案涉及根據(jù)實(shí)施方案1)至13)中任一項(xiàng)所述的化合物，其中ar1代表經(jīng)單取代或經(jīng)雙取代的喹啉-二基，其中取代基獨(dú)立地選自c1-4-烷基、c1-3-氟烷基、c1-4-烷氧基c1-3-氟烷氧基、氰基和鹵素(尤其是氟)；

104、[其中應(yīng)理解的是，-co-基團(tuán)和氧(即，將喹啉二基連接到分子其余部分的基團(tuán))以鄰位排列連接到所述喹啉二基上。

105、15)另一實(shí)施方案涉及根據(jù)實(shí)施方案1)至13)中任一項(xiàng)所述的化合物，其中ar1表示

106、此外，

107、其中星號(hào)表示所述基團(tuán)連接到氧(即，將ar1連接到分子其余部分的氧)的鍵。

108、式(i)化合物含有至少三個(gè)立體異構(gòu)或不對(duì)稱中心，它們以(r)-或(s)-構(gòu)型存在，如在定義此類式(i)化合物的相應(yīng)實(shí)施方案中所定義的。此外，式(i)化合物可以含有一個(gè)或多個(gè)其他立體異構(gòu)或不對(duì)稱中心，例如一個(gè)或多個(gè)額外的不對(duì)稱碳原子。因此，式(i)化合物可以作為立體異構(gòu)體的混合物或優(yōu)選作為純立體異構(gòu)體存在。立體異構(gòu)體的混合物可以以本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方式分離。

109、式(i)化合物還可以包括：具有一個(gè)或多個(gè)雙鍵的化合物，這些化合物被允許以z-和e-構(gòu)型存在；和/或在環(huán)系統(tǒng)上具有取代基的化合物，這些取代基被允許相對(duì)于彼此以順式和反式構(gòu)型存在。

110、在特定化合物(或通用結(jié)構(gòu))表示為(r)-或(s)-對(duì)映體的情況下，此類名稱應(yīng)理解為是指富集對(duì)映體形式，尤其基本上純的對(duì)映體形式的相應(yīng)的化合物(或通用結(jié)構(gòu))。同樣，在化合物中的特定不對(duì)稱中心表示為呈(r)-或(s)-構(gòu)型或呈某一相對(duì)構(gòu)型，則此類名稱應(yīng)理解為是指關(guān)于該不對(duì)稱中心的相應(yīng)構(gòu)型而言處于富集形式，尤其基本上純的形式的化合物。類似地，順式或反式名稱應(yīng)理解為是指富集形式(尤其是基本純的形式)的相應(yīng)相對(duì)構(gòu)型的相應(yīng)立體異構(gòu)體。同樣，在特定化合物(或通用結(jié)構(gòu))表示為z-或e-立體異構(gòu)體的情況下(或在化合物中的特定雙鍵表示為呈z-或e-構(gòu)型的情況下)，此類名稱應(yīng)理解為是指富集(尤其是基本純)的立體異構(gòu)形式的相應(yīng)的化合物(或通用結(jié)構(gòu))(或就雙鍵的相應(yīng)的構(gòu)型而言，富集(尤其基本上純)形式的化合物)。

111、在本發(fā)明的上下文中，應(yīng)理解當(dāng)在立體異構(gòu)體的情形下使用時(shí)，術(shù)語“富集”意指相對(duì)于相應(yīng)的其他立體異構(gòu)體/全部相應(yīng)的其他立體異構(gòu)體，該相應(yīng)的立體異構(gòu)體以至少70:30，尤其至少90:10(即純度為至少70重量％，尤其至少90重量％)的比率存在。

112、在本發(fā)明的上下文中，應(yīng)理解當(dāng)在立體異構(gòu)體的情形下使用時(shí)，術(shù)語“基本上純”意指相對(duì)于相應(yīng)的其他立體異構(gòu)體/全部相應(yīng)的其他立體異構(gòu)體，該相應(yīng)的立體異構(gòu)體以至少95重量％，尤其至少99重量％的純度存在。

113、本發(fā)明還包括同位素標(biāo)記，尤其2h(氘)標(biāo)記的根據(jù)實(shí)施方案1)至16)或17)的式(i)化合物，這些化合物除了一或多個(gè)原子各自經(jīng)具有相同原子數(shù)，但原子質(zhì)量與在自然界中通常發(fā)現(xiàn)的原子質(zhì)量不同的原子置換以外，與式(i)化合物相同。同位素標(biāo)記，尤其2h(氘)標(biāo)記的式(i)化合物及其鹽是在本發(fā)明的范圍內(nèi)。在某一取代基具體地指示為表示氫的情況下，應(yīng)理解是指原子“h”的所有同位素，即術(shù)語氫(hydrogen)在用于某一取代基時(shí)應(yīng)理解為包含同位素2h(氘)；優(yōu)選其是指同位素1h(氫(hydrogen))。用較重同位素2h(氘)取代氫可產(chǎn)生較大代謝穩(wěn)定性，使得例如活體內(nèi)半衰期增加或劑量需求降低，或可引起對(duì)細(xì)胞色素p450酶的抑制降低，從而產(chǎn)生例如改善的安全性。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，式(i)化合物未經(jīng)同位素標(biāo)記，或其僅經(jīng)一或多個(gè)氘原子標(biāo)記。在一子實(shí)施方案中，式(i)化合物完全未經(jīng)同位素標(biāo)記。同位素標(biāo)記的式(i)化合物可類似于下文所描述的方法來制備，但使用合適的試劑或起始材料的適當(dāng)同位素變體。

114、在本專利申請(qǐng)案中，繪制為虛線的鍵顯示所繪制的基團(tuán)的連接點(diǎn)。舉例而言，下文繪制的基團(tuán)

115、

116、是5-氟吡啶-2-基。

117、在化合物、鹽、藥學(xué)組合物、疾病及其類似物使用復(fù)數(shù)形式的情況下，這也旨在表示單一化合物、鹽或其類似物。

118、提及的任何根據(jù)實(shí)施方案1)至16)或17)的式(i)化合物應(yīng)理解為是指呈游離堿或鹽形式的化合物，因此，也是指此類化合物的鹽(及尤其藥學(xué)上可接受的鹽)，具體視情況而定。

119、術(shù)語“藥學(xué)上可接受的鹽”是指保持本發(fā)明化合物的所需生物活性且出現(xiàn)極小非所需毒理作用的鹽。視本發(fā)明化合物中存在的堿性及/或酸性基團(tuán)而定，此類鹽包括無機(jī)或有機(jī)酸和/或堿加成鹽。參見例如“handbook?of?pharmaceutical?salts.properties,selection?and?use.”,p.heinrich?stahl,camille?g.wermuth(eds.),wiley-vch,2008；以及“pharmaceutical?salts?and?co-crystals”,johan?wouters?and?luc?quéré(eds.),rsc?publishing,2012。

120、除非以其他方式明確闡述的定義提供更廣泛或更窄的定義，否則本文中提供的定義意圖同等地適用于如實(shí)施方案1)至16)或17)中的任一者及(在細(xì)節(jié)上作必要修改后)本說明書及權(quán)利要求書中所定義的式(i)化合物。應(yīng)充分理解，術(shù)語的定義或優(yōu)選定義獨(dú)立于(及組合)如本文所定義的任何或所有其他術(shù)語的任何定義或優(yōu)選定義來界定且可替換相應(yīng)的術(shù)語。

121、每當(dāng)取代基被表示為可選時(shí)，應(yīng)理解，此類取代基可不存在(即相應(yīng)的殘基相對(duì)于此類可選的取代基為未經(jīng)取代)，在此情況下，所有具有自由價(jià)的位置(此類可選的取代基可能已經(jīng)連接至所述位置；例如在芳環(huán)，具有自由價(jià)的環(huán)碳原子和/或環(huán)氮原子)在適當(dāng)時(shí)經(jīng)氫取代。同樣地，在術(shù)語“任選地”用于(環(huán))雜原子的情況下，則該術(shù)語意指相應(yīng)的可選的雜原子或類似者不存在(即，某一部分不含有雜原子/為碳環(huán)/或類似者)，或相應(yīng)的可選的雜原子或類似者是如所明確定義的那樣存在。

122、術(shù)語“鹵素”意指氟(fluorine/fluoro)、氯(chlorine/氯)或溴(bromine/溴)；優(yōu)選氟(fluorine/fluoro)。

123、單獨(dú)或組合使用，術(shù)語“烷基”是指含有一至六個(gè)碳原子的飽和直鏈或支鏈烴基。術(shù)語“cx-y烷基”(x和y各自為整數(shù))是指如先前所定義的含有x至y個(gè)碳原子的烷基。舉例而言，c1-6烷基含有一個(gè)至六個(gè)碳原子。烷基的代表性示例為甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、叔丁基、3-甲基-丁基、2,2-二甲基-丙基和3,3-二甲基-丁基。為避免任何疑義，在基團(tuán)被稱為例如丙基或丁基的情況下，則其分別意指正丙基、正丁基。在rx2表示c1-6烷基的情況下，該術(shù)語尤其是指c1-4烷基，特別是是指甲基。在r1表示-c1-4烷基的情況下，該術(shù)語尤其意指甲基。對(duì)于表示c1-4烷基的r2而言，該術(shù)語尤其意指甲基。在r3表示-c1-6烷基的情況下，該術(shù)語尤其意指異丁基。

124、單獨(dú)或組合使用的術(shù)語“-cx-y亞烷基-”是指如先前所定義的含有x至y個(gè)碳原子的二價(jià)鍵合烷基。優(yōu)選地，-c1-y亞烷基的連接點(diǎn)呈1,1-二基、1,2-二基或1,3-二基排列。

125、單獨(dú)或組合使用的術(shù)語“烷氧基”是指烷基-o-基團(tuán)，其中該烷基如先前所定義。術(shù)語“cx-y烷氧基”(x及y各自為整數(shù))是指如先前所定義的含有x至y個(gè)碳原子的烷氧基。舉例而言，c1-4烷氧基意指式c1-4烷基-o-的基團(tuán)，其中術(shù)語“c1-4烷基”具有此前給出的意義。烷氧基的代表性示例為甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基、仲丁氧基和叔丁氧基。優(yōu)選為甲氧基。

126、單獨(dú)或組合使用的術(shù)語“氟烷基”是指如先前所定義的含有一至三個(gè)碳原子的烷基，其中一或多個(gè)(以及可能所有)氫原子已經(jīng)氟置換。術(shù)語“cx-y氟烷基”(x和y各自為整數(shù))是指如先前所定義的含有x至y個(gè)碳原子的氟烷基。舉例而言，c1-3氟烷基含有一至三個(gè)碳原子，其中一至七個(gè)氫原子已經(jīng)氟置換。氟烷基的代表性示例尤其包括c1-氟烷基，諸如三氟甲基、以及二氟甲基以及2-氟乙基、2,2-二氟乙基和2,2,2-三氟乙基。在rx2表示c1-4氟烷基的情況下，該術(shù)語尤其意指2,2-二氟乙基或2,2,2-三氟乙基，或者另外指2,2-二氟丙基、3,3,3-三氟丙基或3,3-二氟丁基。

127、單獨(dú)或組合使用的術(shù)語“氟烷氧基”是指如先前所定義的含有一至三個(gè)碳原子的烷氧基，其中一或多個(gè)(以及可能所有)氫原子已經(jīng)氟置換。術(shù)語“cx-y氟烷氧基”(x和y各自為整數(shù))是指如先前所定義的含有x至y個(gè)碳原子的氟烷氧基。舉例而言，c1-3氟烷氧基含有一至三個(gè)碳原子，其中一至七個(gè)氫原子已經(jīng)氟置換。氟烷氧基的代表性示例包括三氟甲氧基、二氟甲氧基、2-氟乙氧基、2,2-二氟乙氧基和2,2,2-三氟乙氧基。優(yōu)選為(c1)氟烷氧基，諸如三氟甲氧基和二氟甲氧基。

128、單獨(dú)或組合使用，術(shù)語“環(huán)烷基”是指含有三個(gè)至六個(gè)碳原子的飽和單環(huán)烴環(huán)。術(shù)語“cx-y環(huán)烷基”(x和y各自為整數(shù))是指如先前所定義的含有x至y個(gè)碳原子的環(huán)烷基。舉例而言，c3-6環(huán)烷基含有三至六個(gè)碳原子。環(huán)烷基的示例為環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基和環(huán)己基。

129、單獨(dú)或組合使用的術(shù)語“-cx-y環(huán)亞烷基-”是指如先前所定義的含有x至y個(gè)碳原子的二價(jià)鍵合環(huán)烷基。優(yōu)選地，任何二價(jià)鍵合環(huán)烷基的連接點(diǎn)呈1,1-二基排列。示例為環(huán)丙-1,1-二基、環(huán)丁-1,1-二基和環(huán)戊-1,1-二基；優(yōu)選為環(huán)丙-1,1-二基。

130、c3-6環(huán)烷-1,1-二基-的示例為環(huán)丙-1,1-二基、環(huán)丁-1,1-二基及環(huán)戊烷-1,1-二基，優(yōu)選環(huán)丙烷-1,1-二基。

131、單獨(dú)或組合使用且如果未以更廣或更窄方式明確定義，則術(shù)語“雜環(huán)烷基”是指含有一個(gè)或兩個(gè)獨(dú)立地選自氮、硫和氧的環(huán)雜原子的飽和單環(huán)烴環(huán)。術(shù)語“cx-y雜環(huán)烷基”是指含有x至y個(gè)環(huán)原子的此類雜環(huán)。示例為四氫呋喃基、四氫吡喃基及哌啶基。雜環(huán)烷基未經(jīng)取代或如明確定義經(jīng)取代。

132、術(shù)語“c4-6雜環(huán)烷-二基，其中該c4-6雜環(huán)烷-二基含有一個(gè)環(huán)氧原子”是指含有一個(gè)環(huán)氧原子及其余環(huán)碳原子的二價(jià)鍵雜環(huán)烷基。術(shù)語“c4-6雜環(huán)烷-二基,其中該c4-6雜環(huán)烷-二基含有一個(gè)環(huán)氮原子”是指含有一個(gè)環(huán)氮原子及其余環(huán)碳原子的二價(jià)鍵雜環(huán)烷基。

133、單獨(dú)或組合使用的術(shù)語“芳基”意指苯基或萘基，尤其為苯基。上文所提及的芳基未經(jīng)取代或如明確定義的經(jīng)取代。

134、應(yīng)理解，例如“含有一個(gè)或兩個(gè)獨(dú)立地選自氧和氮的雜原子”或“含有一個(gè)氧原子”的雜環(huán)含有精確數(shù)目的雜原子及所指示類型的雜原子，如果另外無明確指示，則其余環(huán)原子為碳原子。

135、片段的具實(shí)施例：

136、

137、是喹啉二基，尤其是喹啉-5,6-二基。

138、上文所提及的基團(tuán)ar1未經(jīng)取代或如明確定義的經(jīng)取代。

139、單獨(dú)或組合使用且如果未以更廣或更窄方式明確定義，則術(shù)語“雜芳基”意指含有一個(gè)至最多四個(gè)雜原子的5元至10元單環(huán)或雙環(huán)芳環(huán)，所述雜原子各自獨(dú)立地選自氧、氮和硫。此類雜芳基的代表性示例為5元雜芳基，例如呋喃基、噁唑基、異噁唑基、噁二唑基、苯硫基、噻唑基、異噻唑基、噻二唑基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、三唑基、四唑基；6元雜芳基，諸如吡啶基、嘧啶基、噠嗪基、吡嗪基；以及8元至10元雙環(huán)雜芳基，諸如吲哚基、異吲哚基、苯并呋喃基、異苯并呋喃基、苯并苯硫基、吲唑基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并異噁唑基、苯并噻唑基、苯并異噻唑基、苯并三唑基、苯并噁二唑基、苯并噻二唑基、噻吩并吡啶基、喹啉基、異喹啉基、萘啶基、噌啉基、喹唑啉基、喹喔啉基、酞嗪基、吡咯并吡啶基、吡唑并吡啶基、吡唑并嘧啶基、吡咯并吡嗪基、咪唑并吡啶基、咪唑并噠嗪基及咪唑并噻唑基。上文所提及的雜芳基未經(jīng)取代或如明確定義的經(jīng)取代。

140、對(duì)于表示“5元雜芳基”的取代基r4，該術(shù)語尤其指上述5元基團(tuán)，例如尤其是三唑基、四唑基、異噁唑基或噁二唑基。值得注意的是，該術(shù)語指5元基團(tuán)，例如尤其是異噁唑-5-基、1,2,4-噁二唑-5-基、2h-[1,2,3]三唑-2-基、2h-四唑-2-基。上述基團(tuán)如明確定義的經(jīng)取代。

141、對(duì)于表示“5或6元雜芳基”的取代基ar2，該術(shù)語尤其指吡啶基，特別是吡啶-2-基。取代基ar2未經(jīng)取代或如明確定義的經(jīng)取代。

142、對(duì)于代表5至6元雜芳基的取代基arx2，該雜芳基如前文所定義；其尤其代表5元雜芳基[特別是含有一至三個(gè)選自氧和氮的雜原子的5元雜芳基(尤其是噁二唑基)。代表5至6元雜芳基的取代基arx2的具體示例是3-三氟甲基-[1,2,4]-噁二唑-5-基。

143、術(shù)語“氰基”是指基團(tuán)-cn。

144、當(dāng)使用詞語“在…與…之間”描述數(shù)值范圍時(shí)，應(yīng)理解，所指示范圍的端點(diǎn)明確包括于該范圍中。舉例而言：如果溫度范圍被描述為在40℃與80℃之間，則此意指在該范圍內(nèi)包括端點(diǎn)40℃及80℃；或如果定義變量為1與4之間的整數(shù)，則此意指該變量為整數(shù)1、2、3或4。

145、除非用于溫度，否則位于數(shù)值“x”之前的術(shù)語“約”在本技術(shù)中是指從x減10％?x延伸至x加10％?x的區(qū)間，且優(yōu)選指從x減5％x延伸至x加5％?x的區(qū)間。在溫度的特定情況下，位于溫度“y”之前的術(shù)語“約”在本技術(shù)中是指從溫度y減10℃延伸至y加10℃的區(qū)間，且優(yōu)選指從y減5℃延伸至y加5℃的區(qū)間。此外，如本文所使用的術(shù)語“室溫”是指約25℃的溫度。

146、16)另一實(shí)施方案涉及根據(jù)實(shí)施方案1)所述的式(i)化合物，其選自以下化合物：

147、(3s,7s,10r,13r)-13-苯甲基-20-氟-7-異丁基-n-(2-(4-甲氧基-2h-1,2,3-三唑-2-基)乙基)-6,9-二甲基-1,5,8,11-四氧代-10-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14-十四氫-[1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-3-甲酰胺；

148、(9s,13s,19ar,22r)-5-氟-13-異丁基-n-(2-(3-甲氧基異噁唑-5-基)乙基)-22-((6-甲氧基吡啶-2-基)甲基)-12-甲基-7,11,14,20-四氧代-7,8,9,10,11,12,13,14,17,18,19,19a,20,21,22,23-十六氫-16h-吡啶并[2',1':6,7][1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-9-甲酰胺；

149、(9s,13s,19as,22r)-5-氟-13-異丁基-n-(2-(3-甲氧基異噁唑-5-基)乙基)-22-((6-甲氧基吡啶-2-基)甲基)-12-甲基-7,11,14,20-四氧代-7,8,9,10,11,12,13,14,17,18,19,19a,20,21,22,23-十六氫-16h-吡啶并[2',1':6,7][1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-9-甲酰胺；

150、(9s,13s,19ar,22r)-n-(2-(5-環(huán)丙基-2h-四唑-2-基)乙基)-5-氟-13-異丁基-22-((6-甲氧基吡啶-2-基)甲基)-12-甲基-7,11,14,20-四氧代-7,8,9,10,11,12,13,14,17,18,19,19a,20,21,22,23-十六氫-16h-吡啶并[2',1':6,7][1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-9-甲酰胺；

151、(9s,13s,19ar,22r)-5-氟-13-異丁基-n-(2-(4-甲氧基-2h-1,2,3-三唑-2-基)乙基)-22-((6-甲氧基吡啶-2-基)甲基)-12-甲基-7,11,14,20-四氧代-7,8,9,10,11,12,13,14,17,18,19,19a,20,21,22,23-十六氫-16h-吡啶并[2',1':6,7][1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-9-甲酰胺；

152、(3s,7s,10r,13r)-13-苯甲基-10-(2,2-二氟乙基)-20-氟-7-異丁基-n-(2-(4-甲氧基-2h-1,2,3-三唑-2-基)乙基)-6,9-二甲基-1,5,8,11-四氧代-1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14-十四氫-[1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-3-甲酰胺；

153、(3s,7s,10r,13r)-20-氟-7-異丁基-n-(2-(4-甲氧基-2h-1,2,3-三唑-2-基)乙基)-13-((6-甲氧基吡啶-2-基)甲基)-6,9-二甲基-1,5,8,11-四氧代-10-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14-十四氫-[1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-3-甲酰胺；

154、(3s,7s,10s,13r)-20-氟-7-異丁基-n-(2-(4-甲氧基-2h-1,2,3-三唑-2-基)乙基)-13-((6-甲氧基吡啶-2-基)甲基)-6,9-二甲基-1,5,8,11-四氧代-10-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14-十四氫-[1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-3-甲酰胺；

155、(9s,13s,19ar,22r)-5-氟-13-異丁基-n-(2-(3-甲氧基-1,2,4-噁二唑-5-基)乙基)-12-甲基-7,11,14,20-四氧代-22-(吡啶-2-基甲基)-7,8,9,10,11,12,13,14,17,18,19,19a,20,21,22,23-十六氫-16h-吡啶并[2',1':6,7][1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-9-甲酰胺；

156、(9s,13s,19ar,22r)-5-氟-13-異丁基-n-(2-(4-甲氧基-2h-1,2,3-三唑-2-基)乙基)-12-甲基-7,11,14,20-四氧代-22-(吡啶-2-基甲基)-7,8,9,10,11,12,13,14,17,18,19,19a,20,21,22,23-十六氫-16h-吡啶并[2',1':6,7][1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-9-甲酰胺；

157、(9s,13s,19ar,22r)-5-氟-13-異丁基-n-(2-(3-甲氧基異噁唑-5-基)乙基)-12-甲基-7,11,14,20-四氧代-22-(吡啶-2-基甲基)-7,8,9,10,11,12,13,14,17,18,19,19a,20,21,22,23-十六氫-16h-吡啶并[2',1':6,7][1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-9-甲酰胺；

158、(9s,13s,19ar,22r)-n-(2-(5-環(huán)丙基-2h-四唑-2-基)乙基)-5-氟-13-異丁基-12-甲基-7,11,14,20-四氧代-22-(吡啶-2-基甲基)-7,8,9,10,11,12,13,14,17,18,19,19a,20,21,22,23-十六氫-16h-吡啶并[2',1':6,7][1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-9-甲酰胺；

159、(3s,7s,10r,13r)-20-氟-7-異丁基-n-(2-(3-甲氧基異噁唑-5-基)乙基)-13-((6-甲氧基吡啶-2-基)甲基)-6,9-二甲基-1,5,8,11-四氧代-10-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14-十四氫-[1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-3-甲酰胺；

160、(3s,7s,10r,13r)-20-氟-7-異丁基-n-(2-(3-甲氧基-1,2,4-噁二唑-5-基)乙基)-13-((6-甲氧基吡啶-2-基)甲基)-6,9-二甲基-1,5,8,11-四氧代-10-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14-十四氫-[1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-3-甲酰胺；

161、(3s,7s,10r,13r)-n-(2-(5-環(huán)丙基-2h-四唑-2-基)乙基)-20-氟-7-異丁基-13-((6-甲氧基吡啶-2-基)甲基)-6,9-二甲基-1,5,8,11-四氧代-10-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14-十四氫-[1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-3-甲酰胺；

162、(3s,7s,10r,13r)-20-氟-7-異丁基-n-(2-(3-甲氧基異噁唑-5-基)乙基)-6,9-二甲基-1,5,8,11-四氧代-13-(吡啶-2-基甲基)-10-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14-十四氫-[1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-3-甲酰胺；

163、(3s,7s,10r,13r)-20-氟-n-(2-(4-氟-3-甲氧基異噁唑-5-基)乙基)-7-異丁基-6,9-二甲基-1,5,8,11-四氧代-13-(吡啶-2-基甲基)-10-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14-十四氫-[1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-3-甲酰胺；

164、(3s,7s,10r,13r)-20-氟-7-異丁基-n-(2-(3-甲氧基異噁唑-5-基)乙基)-13-((6-甲氧基吡啶-2-基)甲基)-6,9,10-三甲基-1,5,8,11-四氧代-1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14-十四氫-[1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-3-甲酰胺；

165、(3s,7s,10r,13r)-20-氟-7-異丁基-n-(2-(4-甲氧基-2h-1,2,3-三唑-2-基)乙基)-13-((6-甲氧基吡啶-2-基)甲基)-6,9,10-三甲基-1,5,8,11-四氧代-1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14-十四氫-[1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-3-甲酰胺；

166、(3's,7's,13'r)-20'-氟-7'-異丁基-n-(2-(3-甲氧基-1,2,4-噁二唑-5-基)乙基)-13'-((6-甲氧基吡啶-2-基)甲基)-6',9'-二甲基-1',5',8',11'-四氧代-2',3',4',5',6',7',8',9',11',12',13',14'-十二氫-1'h-螺[環(huán)丙烷-1,10'-[1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉]-3'-甲酰胺；

167、(3's,7's,13'r)-20'-氟-7'-異丁基-n-(2-(3-甲氧基異噁唑-5-基)乙基)-13'-((6-甲氧基吡啶-2-基)甲基)-6',9'-二甲基-1',5',8',11'-四氧代-2',3',4',5',6',7',8',9',11',12',13',14'-十二氫-1'h-螺[環(huán)丙烷-1,10'-[1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉]-3'-甲酰胺；

168、(3's,7's,13'r)-20'-氟-n-(2-(4-氟-3-甲氧基異噁唑-5-基)乙基)-7'-異丁基-13'-((6-甲氧基吡啶-2-基)甲基)-6',9'-二甲基-1',5',8',11'-四氧代-2',3',4',5',6',7',8',9',11',12',13',14'-十二氫-1'h-螺[環(huán)丙烷-1,10'-[1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉]-3'-甲酰胺；

169、(3s,7s,10r,13r)-20-氟-7-異丁基-n-(2-(3-甲氧基-1,2,4-噁二唑-5-基)乙基)-13-((6-甲氧基吡啶-2-基)甲基)-6,9-二甲基-1,5,8,11-四氧代-10-((3-(三氟甲基)-1,2,4-噁二唑-5-基)甲基)-1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14-十四氫-[1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-3-甲酰胺；

170、(3s,7s,10r,13r)-20-氟-7-異丁基-n-(2-(3-甲氧基異噁唑-5-基)乙基)-13-((6-甲氧基吡啶-2-基)甲基)-6,9-二甲基-1,5,8,11-四氧代-10-((3-(三氟甲基)-1,2,4-噁二唑-5-基)甲基)-1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14-十四氫-[1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-3-甲酰胺；

171、(3s,7s,10r,13r)-20-氟-7-異丁基-n-(2-(4-甲氧基-2h-1,2,3-三唑-2-基)乙基)-13-((6-甲氧基吡啶-2-基)甲基)-6,9-二甲基-1,5,8,11-四氧代-10-((3-(三氟甲基)-1,2,4-噁二唑-5-基)甲基)-1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14-十四氫-[1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-3-甲酰胺；

172、(3s,7s,10r,13r)-n-(2-(5-環(huán)丙基-2h-四唑-2-基)乙基)-20-氟-7-異丁基-13-((6-甲氧基吡啶-2-基)甲基)-6,9-二甲基-1,5,8,11-四氧代-10-((3-(三氟甲基)-1,2,4-噁二唑-5-基)甲基)-1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14-十四氫-[1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-3-甲酰胺；

173、((3s,7s,10r,13r)-20-氟-13-((5-氟吡啶-2-基)甲基)-7-異丁基-n-(2-(3-甲氧基異噁唑-5-基)乙基)-6,9-二甲基-1,5,8,11-四氧代-10-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14-十四氫-[1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-3-甲酰胺；

174、(3s,7s,10r,13r)-20-氟-13-((5-氟吡啶-2-基)甲基)-7-異丁基-n-(2-(3-甲氧基-1,2,4-噁二唑-5-基)乙基)-6,9-二甲基-1,5,8,11-四氧代-10-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14-十四氫-[1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-3-甲酰胺；

175、(9s,13s,19ar,22r)-5-氟-13-異丁基-n-(2-(3-甲氧基異噁唑-5-基)乙基)-12-甲基-22-((6-甲基吡啶-2-基)甲基)-7,11,14,20-四氧代-7,8,9,10,11,12,13,14,17,18,19,19a,20,21,22,23-十六氫-16h-吡啶并[2',1':6,7][1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-9-甲酰胺；

176、(9s,13s,19ar,22r)-5-氟-13-異丁基-n-(2-(3-甲氧基-1,2,4-噁二唑-5-基)乙基)-12-甲基-22-(噁唑-4-基甲基)-7,11,14,20-四氧代-7,8,9,10,11,12,13,14,17,18,19,19a,20,21,22,23-十六氫-16h-吡啶并[2',1':6,7][1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-9-甲酰胺；

177、(9s,13s,19ar,22r)-5-氟-22-((5-氟-6-甲基吡啶-2-基)甲基)-13-異丁基-n-(2-(3-甲氧基異噁唑-5-基)乙基)-12-甲基-7,11,14,20-四氧代-7,8,9,10,11,12,13,14,17,18,19,19a,20,21,22,23-十六氫-16h-吡啶并[2',1':6,7][1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-9-甲酰胺；或

178、(9s,13s,19ar,22r)-n-(2-(5-環(huán)丙基-2h-四唑-2-基)乙基)-5-氟-22-((5-氟-6-甲基吡啶-2-基)甲基)-13-異丁基-12-甲基-7,11,14,20-四氧代-7,8,9,10,11,12,13,14,17,18,19,19a,20,21,22,23-十六氫-16h-吡啶并[2',1':6,7][1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-9-甲酰胺；

179、17)除了實(shí)施方案16)中所列出的化合物之外，根據(jù)實(shí)施方案1)的進(jìn)一步的式(i)化合物選自以下化合物：

180、(3s,7s,10r,13r)-20-氟-7-異丁基-n-(2-(3-甲氧基-1,2,4-噁二唑-5-基)乙基)-13-((6-甲氧基吡嗪-2-基)甲基)-6,9-二甲基-1,5,8,11-四氧代-10-((3-(三氟甲基)-1,2,4-噁二唑-5-基)甲基)-1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14-十四氫-[1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-3-甲酰胺；

181、(3s,7s,10r,13r)-20-氟-7-異丁基-n-(2-(3-甲氧基-1,2,4-噁二唑-5-基)乙基)-13-((6-甲氧基吡啶-2-基)甲基)-6,9-二甲基-1,5,8,11-四氧代-10-(3,3,3-三氟丙基)-1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14-十四氫-[1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-3-甲酰胺；

182、(9s,13s,19ar,22r)-22-((4,6-二甲氧基嘧啶-2-基)甲基)-5-氟-13-異丁基-n-(2-(3-甲氧基-1,2,4-噁二唑-5-基)乙基)-12-甲基-7,11,14,20-四氧代-7,8,9,10,11,12,13,14,17,18,19,19a,20,21,22,23-十六氫-16h-吡啶并[2',1':6,7][1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-9-甲酰胺；

183、(3s,7s,10r,13r)-13-((4,6-二甲氧基嘧啶-2-基)甲基)-20-氟-7-異丁基-n-(2-(3-甲氧基異噁唑-5-基)乙基)-6,9-二甲基-1,5,8,11-四氧代-10-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14-十四氫-[1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-3-甲酰胺；

184、(3s,7s,10r,13r)-17-氟-7-異丁基-n-(2-(4-甲氧基-2h-1,2,3-三唑-2-基)乙基)-13-((6-甲氧基吡啶-2-基)甲基)-6,9-二甲基-1,5,8,11-四氧代-10-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14-十四氫-[1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-3-甲酰胺；

185、(3s,7s,10r,13r)-13-((4,6-二甲氧基嘧啶-2-基)甲基)-20-氟-7-異丁基-n-(2-(3-甲氧基-1,2,4-噁二唑-5-基)乙基)-6,9-二甲基-1,5,8,11-四氧代-10-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14-十四氫-[1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-3-甲酰胺；

186、(3s,7s,10r,13r)-13-((4,6-二甲氧基嘧啶-2-基)甲基)-20-氟-7-異丁基-n-(2-(4-甲氧基-2h-1,2,3-三唑-2-基)乙基)-6,9-二甲基-1,5,8,11-四氧代-10-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14-十四氫-[1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-3-甲酰胺；

187、(3s,7s,10r,13r)-13-((4,6-二甲氧基吡啶-2-基)甲基)-20-氟-7-異丁基-n-(2-(3-甲氧基異噁唑-5-基)乙基)-6,9-二甲基-1,5,8,11-四氧代-10-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14-十四氫-[1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-3-甲酰胺；

188、(3s,7s,10r,13r)-13-((4,6-二甲氧基吡啶-2-基)甲基)-20-氟-7-異丁基-n-(2-(3-甲氧基-1,2,4-噁二唑-5-基)乙基)-6,9-二甲基-1,5,8,11-四氧代-10-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14-十四氫-[1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-3-甲酰胺；

189、(3s,7s,10r,13r)-20-氟-7-異丁基-n-(2-(3-甲氧基-1,2,4-噁二唑-5-基)乙基)-13-((6-甲氧基-4-甲基吡啶-2-基)甲基)-6,9-二甲基-1,5,8,11-四氧代-10-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14-十四氫-[1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-3-甲酰胺；

190、(3s,7s,10r,13r)-n-(2-(5-環(huán)丙基-2h-四唑-2-基)乙基)-20-氟-7-異丁基-13-((6-甲氧基-4-甲基吡啶-2-基)甲基)-6,9-二甲基-1,5,8,11-四氧代-10-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14-十四氫-[1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-3-甲酰胺；

191、(3s,7s,10r,13r)-n-(2-(5-環(huán)丙基-2h-四唑-2-基)乙基)-13-((4,6-二甲氧基吡啶-2-基)甲基)-20-氟-7-異丁基-6,9-二甲基-1,5,8,11-四氧代-10-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14-十四氫-[1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-3-甲酰胺；

192、(3s,7s,10r,13r)-13-((4,6-二甲氧基吡啶-2-基)甲基)-20-氟-7-異丁基-n-(2-(4-甲氧基-2h-1,2,3-三唑-2-基)乙基)-6,9-二甲基-1,5,8,11-四氧代-10-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14-十四氫-[1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-3-甲酰胺；

193、(3s,7s,10r,13r)-17-氟-7-異丁基-n-(2-(3-甲氧基-1,2,4-噁二唑-5-基)乙基)-13-((6-甲氧基吡啶-2-基)甲基)-6,9-二甲基-1,5,8,11-四氧代-10-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14-十四氫-[1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-3-甲酰胺；

194、(3s,7s,10r,13r)-20-氟-7-異丁基-n-(2-(3-甲氧基-1,2,4-噁二唑-5-基)乙基)-13-((4-甲氧基吡啶-2-基)甲基)-6,9-二甲基-1,5,8,11-四氧代-10-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14-十四氫-[1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-3-甲酰胺；

195、(3s,7s,10r,13r)-20-氟-7-異丁基-n-(2-(3-甲氧基-1,2,4-噁二唑-5-基)乙基)-13-((4-甲氧基-6-甲基吡啶-2-基)甲基)-6,9-二甲基-1,5,8,11-四氧代-10-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14-十四氫-[1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-3-甲酰胺；

196、(3s,7s,10r,13r)-10-(3,3-二氟丁基)-20-氟-7-異丁基-n-(2-(3-甲氧基-1,2,4-噁二唑-5-基)乙基)-13-((6-甲氧基吡啶-2-基)甲基)-6,9-二甲基-1,5,8,11-四氧代-1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14-十四氫-[1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-3-甲酰胺；

197、(3s,7s,10r,13r)-20-氟-7-異丁基-n-(2-(4-甲氧基-2h-1,2,3-三唑-2-基)乙基)-13-(3-甲氧基苯甲基)-6,9-二甲基-1,5,8,11-四氧代-10-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14-十四氫-[1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-3-甲酰胺；

198、(3s,7s,10r,13r)-20-氟-7-異丁基-n-(2-(3-甲氧基-1,2,4-噁二唑-5-基)乙基)-13-((4-甲氧基吡啶-2-基)甲基)-6,9-二甲基-1,5,8,11-四氧代-10-((3-(三氟甲基)-1,2,4-噁二唑-5-基)甲基)-1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14-十四氫-[1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-3-甲酰胺；

199、(3s,7s,10r,13r)-20-氟-7-異丁基-n-(2-(3-甲氧基-1,2,4-噁二唑-5-基)乙基)-6,9-二甲基-13-((4-甲基吡啶-2-基)甲基)-1,5,8,11-四氧代-10-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14-十四氫-[1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-3-甲酰胺；

200、(3s,7s,10r,13r)-10-(2,2-二氟丙基)-20-氟-7-異丁基-n-(2-(3-甲氧基-1,2,4-噁二唑-5-基)乙基)-13-((6-甲氧基吡啶-2-基)甲基)-6,9-二甲基-1,5,8,11-四氧代-1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14-十四氫-[1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-3-甲酰胺；

201、(3s,7s,10r,13r)-n-(2-(5-環(huán)丙基-2h-四唑-2-基)乙基)-10-(2,2-二氟丙基)-20-氟-7-異丁基-13-((6-甲氧基吡啶-2-基)甲基)-6,9-二甲基-1,5,8,11-四氧代-1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14-十四氫-[1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-3-甲酰胺；

202、(3s,7s,10r,13r)-10-(2,2-二氟丙基)-20-氟-7-異丁基-n-(2-(3-甲氧基異噁唑-5-基)乙基)-13-((6-甲氧基吡啶-2-基)甲基)-6,9-二甲基-1,5,8,11-四氧代-1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14-十四氫-[1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-3-甲酰胺；

203、(3s,7s,10r,13r)-20-氟-7-異丁基-n-(2-(4-甲氧基-2h-1,2,3-三唑-2-基)乙基)-13-((4-甲氧基吡啶-2-基)甲基)-6,9-二甲基-1,5,8,11-四氧代-10-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14-十四氫-[1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-3-甲酰胺；

204、(3s,7s,10r,13r)-7-異丁基-n-(2-(4-甲氧基-2h-1,2,3-三唑-2-基)乙基)-13-(3-甲氧基苯甲基)-6,9,20-三甲基-1,5,8,11-四氧代-10-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14-十四氫-[1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]異喹啉-3-甲酰胺；和

205、(3s,7s,10r,13r)-20-氟-7-異丁基-n-(2-(3-甲氧基-1,2,4-噁二唑-5-基)乙基)-13-(3-甲氧基苯甲基)-6,9-二甲基-1,5,8,11-四氧代-10-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14-十四氫-[1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-3-甲酰胺。

206、為避免疑問，上述所列化合物的相應(yīng)結(jié)構(gòu)如下表3或表4所示，其中，如有疑問，則以所示結(jié)構(gòu)為準(zhǔn)。

207、因此，例如實(shí)施例28的化合物：(3s,7s,10r,13r)-20-氟-13-((5-氟吡啶-2-基)甲基)-7-異丁基-n-(2-(3-甲氧基-1,2,4-噁二唑-5-基)乙基)-6,9-二甲基-1,5,8,11-四氧代-10-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14-十四氫-[1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-3-甲酰胺具有表3所示的結(jié)構(gòu)，其中所述化合物的絕對(duì)構(gòu)型如下圖所示：

208、即同樣，例如實(shí)施例14的化合物：(3s,7s,10r,13r)-20-氟-7-異丁基-n-(2-(3-甲氧基-1,2,4-噁二唑-5-基)乙基)-13-((6-甲氧基吡啶-2-基)甲基)-6,9-二甲基-1,5,8,11-四氧代-10-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14-十四氫-[1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-3-甲酰胺具有表3所示的結(jié)構(gòu)，其中所述化合物的絕對(duì)構(gòu)型如下圖所示：

209、即同樣，例如實(shí)施例47的化合物：(3s,7s,10r,13r)-20-氟-7-異丁基-n-(2-(3-甲氧基-1,2,4-噁二唑-5-基)乙基)-13-((4-甲氧基吡啶-2-基)甲基)-6,9-二甲基-1,5,8,11-四氧代-10-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14-十四氫-[1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-3-甲酰胺具有表4所示的結(jié)構(gòu)，其中所述化合物的絕對(duì)構(gòu)型如下圖所示：

210、即

211、同樣，例如實(shí)施例58的化合物：(3s,7s,10r,13r)-20-氟-7-異丁基-n-(2-

212、(3-甲氧基-1,2,4-噁二唑-5-基)乙基)-13-(3-甲氧基苯甲基)-6,9-二甲基-1,5,8,11-四氧代-10-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14-十四氫-[1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-3-甲酰胺具有表4所

213、示的結(jié)構(gòu)，其中所述化合物的絕對(duì)構(gòu)型如下圖所示：

214、即

215、根據(jù)實(shí)施方案1)至16)或17)的式(i)化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽可用作藥物，例如以藥物組合物的形式用于腸內(nèi)給藥(例如，尤其是口服，例如片劑或膠囊形式)或腸外給藥(包括局部應(yīng)用或吸入)。

216、18)另一實(shí)施方案涉及一種藥物組合物，其包含根據(jù)實(shí)施方案1)至16)或17)中任一項(xiàng)所述的式(i)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，以及至少一種治療惰性賦形劑。

217、通過使所描述的式(i)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽(任選地與其他治療學(xué)上有價(jià)值的物質(zhì)組合)與適合的無毒性、惰性、治療學(xué)上相容的固體或液體載劑材料及(必要時(shí))常用藥學(xué)佐劑共同形成蓋倫給藥劑型(galenical?administration?form)，可以任何本領(lǐng)域技術(shù)人員熟悉的方式實(shí)現(xiàn)藥學(xué)組合物的制備(參見例如remington,the?science?andpractice?of?pharmacy,21st?edition(2005),part?5,“pharmaceutical?manufacturing”[lippincottwilliams&wilkins出版])。

218、本發(fā)明還涉及一種用于預(yù)防/防治或治療本文中提及的疾病或病癥的方法，其包含向受試者施用藥學(xué)活性量的根據(jù)實(shí)施方案1)至16)或17)的式(i)化合物。

219、根據(jù)實(shí)施方案1)至至16)或17)的式(i)化合物可用于治療cftr相關(guān)疾病和病癥，尤其囊性纖維化。

220、cftr相關(guān)疾病和病癥可定義為尤其包括囊性纖維化以及選自以下的其他cftr相關(guān)疾病和病癥：

221、·慢性支氣管炎；鼻竇炎；便秘；胰臟炎；胰臟功能不全；由先天性雙側(cè)輸精管缺乏(congenital?bilateral?absence?of?the?vas?deferens；cbavd)引起的男性不孕癥；輕度肺病；過敏性支氣管與肺的曲菌病(allergic?bronchopulmonary?aspergillosis；abpa)；肝病；凝血-血纖維蛋白溶解不足，諸如蛋白c不足；及糖尿病；

222、·哮喘；copd；吸煙誘發(fā)的copd；以及干眼病；及

223、·特發(fā)性胰臟炎；遺傳性肺氣腫；遺傳性血色素沉著癥；溶酶體貯積病，尤其諸如i-細(xì)胞疾病假賀勒病(hurler)；粘多醣貯積癥；桑多霍夫/塔伊-薩克斯病(sandhoff/tay-sachs)；成骨不全；法布立病(fabry?disease)；休格倫氏病(sjogren's?disease)；骨質(zhì)疏松癥；骨質(zhì)減少；骨愈合及骨生長(zhǎng)(包括骨修復(fù)、骨再生、減少骨骼再吸收及增加骨骼沈積)；氯離子通道病，諸如先天性肌強(qiáng)直病(湯姆森及貝克爾形式(thomson?and?beckerforms))；3型貝特氏綜合征(bartter's?syndrome)；癲癇癥；溶酶體貯積病；原發(fā)性纖毛運(yùn)動(dòng)困難(primary?ciliary?dyskinesia；pcd)-纖毛的結(jié)構(gòu)和/或功能的遺傳性病癥的術(shù)語(包括pcd伴隨內(nèi)臟逆位，也稱為卡塔格內(nèi)氏綜合征(kartagener?syndrome)、pcd無內(nèi)臟逆位及纖毛發(fā)育不全)；全面性癲癇伴隨熱驚厥附加(generalized?epilepsy?with?fibrileseizures?plus；gefs+)；一般癲癇伴隨熱及無熱驚厥；肌強(qiáng)直；先天性肌剛痙病；鉀惡化肌強(qiáng)直；高鉀血周期性麻痹；長(zhǎng)qt綜合征(lqts)；lqts/布魯加達(dá)氏綜合征(brugadasyndrome)；體染色體顯性lqts伴隨耳聾；體染色體隱性lqts；lqts伴隨畸形特征；先天性和后天性lqts；擴(kuò)張型心肌癥；體染色體顯性lqts；骨硬化癥；以及3型貝特氏(bartter)綜合征。

224、術(shù)語“囊性纖維化的治療”是指囊性纖維化的任何治療且尤其包括降低囊性纖維化的嚴(yán)重程度和/或減少囊性纖維化的癥狀的治療。

225、術(shù)語“囊性纖維化”是指任何形式的囊性纖維化，尤其是指與一或多個(gè)基因突變相關(guān)的囊性纖維化。優(yōu)選地，此類囊性纖維化與cftr遷移缺陷(ii類突變)或cftr穩(wěn)定性降低(vi類突變)[特別是，cftr遷移缺陷/ii類突變]相關(guān)，其中應(yīng)理解，此類cftr遷移缺陷或cftr穩(wěn)定性降低可能與相同或任何其他類別的另一致病突變相關(guān)。此類其他致病cftr基因突變包含i類突變(無功能性cftr蛋白)、(另一)ii類突變(cftr遷移缺陷)、iii類突變(cftr調(diào)節(jié)缺陷)、iv類突變(cftr傳導(dǎo)缺陷)、v類突變(歸因于剪接缺陷的較少cftr蛋白)和/或(另一)vi類突變(歸因于cftr穩(wěn)定性降低的較少cftr蛋白)。該一或多個(gè)基因突變可例如包含至少一個(gè)選自以下的突變：f508del、a561e及n1303k，以及i507del、r560t、r1066c及v520f；特別是f508del。除以上列舉的以外，其他cftr基因突變包含例如g85e、r347p、l206w及m1101k。該基因突變可以是雜合的、純合的或復(fù)合雜合的。該基因突變尤其為雜合的，其包含一個(gè)f508del突變。其他cftr基因突變(其尤其為iii和/或iv類突變)包含g551d、r117h、d1152h、a455e、s549n、r347h、s945l及r117c。

226、囊性纖維化/與囊性纖維化相關(guān)的某種基因突變的嚴(yán)重程度以及其校正功效一般可通過測(cè)試由cftr實(shí)現(xiàn)的氯離子運(yùn)輸來測(cè)量。舉例而言，在患者中，汗水中氯離子平均含量可用于此類評(píng)定。

227、術(shù)語“囊性纖維化的癥狀”尤其是指汗水中較高的氯離子濃度；囊性纖維化的癥狀進(jìn)一步包含慢性支氣管炎；鼻竇炎；便秘；胰臟炎；胰臟功能不全；由先天性雙側(cè)輸精管缺乏(cbavd)引起的男性不孕癥；輕度肺病；過敏性支氣管與肺的曲菌病(abpa)；肝病；凝血-血纖維蛋白溶解不足，諸如蛋白c不足；和/或糖尿病。

228、為了避免任何疑問，如果化合物被描述為適用于治療某些疾病，則此類化合物同樣適用于制備用于治療所述疾病的藥物。同樣，此類化合物也適合于用于治療此類疾病的方法，且包含向有需要的受試者施用有效量的此類化合物。

229、如本文所用，術(shù)語“受試者”是指哺乳動(dòng)物，尤其是人類。

230、本發(fā)明進(jìn)一步涉及一種治療囊性纖維化的方法，其包含向有需要的受試者施用有效量的大環(huán)化合物(尤其17元大環(huán)化合物)或其藥學(xué)上可接受的鹽；其中該大環(huán)化合物的環(huán)核心包含一個(gè)芳族部分(諸如8元至10元雙環(huán)亞雜芳基，其中該芳族部分尤其(i)經(jīng)由羰基及(ii)經(jīng)由氧原子與分子的其余部分/該大環(huán)化合物的環(huán)成員結(jié)合，其中該羰基及該氧原子尤其以1,2-二基關(guān)系與該芳族部分連接)、至少一個(gè)β-氨基酸(其中該β-氨基酸尤其經(jīng)由其氨基與羰基結(jié)合，該羰基與該芳族部分連接)及至少一個(gè)n-烷基化的α-氨基酸(其中該n-烷基化的α-氨基酸尤其經(jīng)由其n-烷基化的氨基與該β-氨基酸的羰基結(jié)合，且其中此類α-氨基酸尤其為甘氨酸或攜帶烴取代基的天然或非天然氨基酸)；其中該大環(huán)化合物為人類cftr的ii類突變的校正劑(其中尤其校正該cftr，特別是人類f508del-cftr的折疊、穩(wěn)定性、降解和/或遷移)，其中優(yōu)選地以至少與魯瑪卡托(lumacaftor)可實(shí)現(xiàn)的相同功效來校正該cftr的活性(其中該活性/功效可根據(jù)下文實(shí)驗(yàn)部分中公開的方法測(cè)試)。

231、19)另一實(shí)施方案涉及根據(jù)實(shí)施方案18所述的藥物組合物，其中所述組合物還包含一種或多種作為cftr調(diào)節(jié)劑的治療活性成分；其中所述cftr調(diào)節(jié)劑是一種或多種cftr校正劑(特別是i型校正劑、和/或ii型校正劑、和/或iii型校正劑)和/或cftr增效劑；或其藥學(xué)上可接受的鹽。

232、20)另一實(shí)施方案涉及根據(jù)實(shí)施方案19)所述的藥物組合物，其中一種或多種作為cftr調(diào)節(jié)劑的治療活性成分是選自魯瑪卡托、替扎卡托he加利卡托的i型校正劑；和/或ii型校正劑，其為校正劑4a；和/或選自埃雷沙卡托、巴莫卡托、奧拉卡托和萬扎卡托的iii型校正劑；和/或選自依伐卡托、納沃卡托、艾森卡托、氘替卡托、glpg-1837及glpg2451的cftr增效劑；或其藥學(xué)上可接受的鹽。

233、21)另一實(shí)施方案涉及根據(jù)實(shí)施方案19)或20)所述的藥物組合物，其中該一或多種用作cftr調(diào)節(jié)劑的治療活性成分為選自魯瑪卡托、替扎卡托he加利卡托的i型校正劑；和/或ii型校正劑，其為校正劑4a；和/或選自埃雷沙卡托和萬扎卡托的iii型校正劑；和/或選自依伐卡托、納沃卡托、艾森卡托和氘替卡托；或其藥學(xué)上可接受的鹽。

234、22)另一實(shí)施方案涉及根據(jù)實(shí)施方案19)至21)中任一項(xiàng)所述的藥物組合物，其中該組合物包含該式(i)化合物以及一種用作cftr調(diào)節(jié)劑的治療活性成分，其中該cftr調(diào)節(jié)劑為cftr增效劑；或其藥學(xué)上可接受的鹽。

235、23)另一實(shí)施方案涉及根據(jù)實(shí)施方案19)至22)中任一項(xiàng)所述的藥物組合物，其中所述組合物包含式(i)化合物和一種作為cftr調(diào)節(jié)劑的治療活性成分，其中所述cftr調(diào)節(jié)劑是選自依伐卡托、艾森卡托和氘替卡托的cftr增效劑；或其藥學(xué)上可接受的鹽。

236、24)另一實(shí)施方案涉及根據(jù)實(shí)施方案19)至21)中任一項(xiàng)所述的藥物組合物，其中該組合物包含該式(i)化合物以及兩種用作cftr調(diào)節(jié)劑的治療活性成分，其中所述cftr調(diào)節(jié)劑中的一者為cftr增效劑或其藥學(xué)上可接受的鹽，且第二種cftr調(diào)節(jié)劑為cftr校正劑或其藥學(xué)上可接受的鹽。

237、25)另一實(shí)施方案涉及根據(jù)實(shí)施方案19)至21)或24)中任一項(xiàng)所述的藥物組合物，其中所述組合物包含式(i)化合物和

238、·依伐卡托和替扎卡托或其藥學(xué)上可接受的鹽；或

239、·依伐卡托和魯瑪卡托或其藥學(xué)上可接受的鹽；或

240、·納沃卡托和加利卡托或其藥學(xué)上可接受的鹽。

241、26)另一實(shí)施方案涉及根據(jù)實(shí)施方案19)至21)中任一項(xiàng)所述的藥物組合物，其中該組合物包含該式(i)化合物和三種用作cftr調(diào)節(jié)劑的治療活性成分，其中所述cftr調(diào)節(jié)劑中的一者為cftr增效劑或其藥學(xué)上可接受的鹽，第二種cftr調(diào)節(jié)劑為i型校正劑或其藥學(xué)上可接受的鹽，且第三種cftr調(diào)節(jié)劑為iii型校正劑或其藥學(xué)上可接受的鹽。

242、27)另一實(shí)施方案涉及根據(jù)實(shí)施方案19)至21)或26)中任一項(xiàng)所述的藥物組合物，其中所述組合物包含式(i)化合物和

243、·依伐卡托、替扎卡托和埃雷沙卡托或其藥學(xué)上可接受的鹽；或

244、·氘替卡托、替扎卡托和萬扎卡托或其藥學(xué)上可接受的鹽。

245、根據(jù)實(shí)施方案18)至27)的此類組合藥物組合物尤其適用于預(yù)防或治療如本文所定義的cftr相關(guān)疾病(尤其囊性纖維化)；及用于預(yù)防或治療如本文所定義的cftr相關(guān)疾病(尤其囊性纖維化)的方法中，該方法包含向有需要的個(gè)體(尤其人類)投與藥學(xué)上有效劑量的此類組合藥物組合物。

246、因此，根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案1)至16)或17)中任一項(xiàng)所定義的式(i)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽與如本文所定義的所述其他藥學(xué)活性成分組合(或以共療法形式)使用，所述其他藥學(xué)活性成分為cftr調(diào)節(jié)劑(cftr校正劑和/或cftr增效劑)。

247、除非另外明確闡述的定義提供更廣泛或更狹窄的定義，否則本文所提供的定義意在統(tǒng)一適用于實(shí)施方案1)至30)中的任一項(xiàng)，且在細(xì)節(jié)上作必要修后應(yīng)用于整個(gè)說明書和權(quán)利要求書。應(yīng)充分理解，術(shù)語的定義或優(yōu)選定義獨(dú)立于如本文所定義的任何或所有其他術(shù)語的任何定義或優(yōu)選定義(及與其組合)來定義相應(yīng)的術(shù)語且可替換相應(yīng)的術(shù)語。

248、術(shù)語“作為cftr調(diào)節(jié)劑的治療活性成分”是指已(單獨(dú)和/或組合)顯示治療用途的潛力(在活體外和/或活體內(nèi)模型中，尤其在臨床試驗(yàn)中測(cè)試)和/或經(jīng)指示用于此類治療用途的任何cftr校正劑(尤其i型、ii型或iii型校正劑)和/或cftr增效劑；其中此類治療用途是用于cftr相關(guān)疾病(尤其囊性纖維化)。實(shí)例尤其為cftr增效劑：依伐卡托、納沃卡托、艾森卡托、氘替卡托、glpg-1837及glpg-2451；以及cftr校正劑：i型校正劑(魯瑪卡托、替扎卡托、加利卡托)、ii型校正劑(校正劑4a)及iii型校正劑(埃雷沙卡托、巴莫卡托、奧拉卡托、萬扎卡托；以及abbv-119、abbv-567；以及前面列出的pti-801)。

249、因此，在一個(gè)子實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及如實(shí)施方案1)至16)或17)中任一項(xiàng)所定義的式(i)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其用于防治/預(yù)防或治療如本文所定義的cftr相關(guān)疾病(尤其囊性纖維化)；其中該式(i)化合物將(旨在)與cftr增效劑組合施用/是與cftr增效劑組合施用，該cftr增效劑尤其例如是依伐卡托、納沃卡托、艾森卡托或氘替卡托或其藥學(xué)上可接受的鹽；任選地，另外與cftr校正劑(尤其諸如魯瑪卡托、替扎卡托、加利卡托、埃雷沙卡托或萬扎卡托或其藥學(xué)上可接受的鹽)組合施用。

250、術(shù)語“受試者”是指哺乳動(dòng)物，尤其指人類。

251、聯(lián)合治療(或組合療法)可尤其同時(shí)(以固定劑量形式或以非固定劑量形式)實(shí)現(xiàn)。

252、在本技術(shù)中，在提及施用類型時(shí)，“同時(shí)”意指相關(guān)施用類型在于在大約相同時(shí)間施用兩種或更多種活性成分和/或治療；其中應(yīng)理解，同時(shí)施用將使受試者同時(shí)暴露于兩種或更多種活性成分和/或治療。當(dāng)同時(shí)施用時(shí)，該兩種或更多種活性成分可以固定劑量組合或以非固定劑量組合施用，其中此類非固定組合可為等效于固定劑量組合的非固定劑量組合(例如通過使用在大約相同時(shí)間通過相同施用途徑施用的兩種或更多種不同的藥物組合物)，或使用兩種或更多種不同的施用途徑或給藥方案的非固定劑量組合：其中在各情況下，該施用引起受試者基本上同時(shí)暴露于經(jīng)組合的兩種或更多種活性成分和/或治療。使用在大約相同時(shí)間通過相同施用途徑施用的兩種不同藥物組合物來同時(shí)施用非固定劑量組合的實(shí)例為以下非固定劑量組合：其中如實(shí)施方案1)至16)或17)中任一項(xiàng)中所定義的式(i)化合物是每日施用兩次，且相應(yīng)的一或多種cftr調(diào)節(jié)劑是每日施用兩次。使用兩種不同施用途徑同時(shí)施用非固定劑量組合的另一實(shí)例為以下非固定劑量組合：其中如實(shí)施方案1)至16)或17)中任一項(xiàng)中所定義的式(i)化合物是每日施用一次或者每日施用兩次，且相應(yīng)的一或多種cftr調(diào)節(jié)劑是每日施用三次。使用兩種不同施用途徑同時(shí)施用非固定劑量組合的另一實(shí)例為以下非固定劑量組合：其中如實(shí)施方案1)至16)或17)中任一項(xiàng)中所定義的式(i)化合物每日施用一次，并且相應(yīng)的cftr調(diào)節(jié)劑每日施用兩次。使用兩種不同施用途徑同時(shí)施用非固定劑量組合的另一實(shí)例為以下非固定劑量組合：其中如實(shí)施方案1)至16)或17)中任一項(xiàng)中所定義的式(i)化合物每日施用兩次，且相應(yīng)的一或多種cftr調(diào)節(jié)劑每日施用一次。

253、在本技術(shù)中，在提及施用類型時(shí)，“固定劑量組合”意指相關(guān)施用類型在于施用一種包含兩種或更多種活性成分的單一藥物組合物，尤其諸如實(shí)施方案18)至27)中任一項(xiàng)的藥物組合物，特別是實(shí)施方案19)至27)中任一項(xiàng)的藥物組合物。

254、28)本發(fā)明的另一個(gè)方面涉及如實(shí)施方案1)至16)或17)中任一項(xiàng)所定義的式(i)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其用于治療cftr相關(guān)疾病和病癥(尤其囊性纖維化)；其中該化合物將與一或多種用作cftr調(diào)節(jié)劑的治療活性成分組合使用/將與該一或多種治療活性成分組合施用/是與該一或多種治療活性成分組合施用；其中該cftr調(diào)節(jié)劑為一或多種cftr校正劑(尤其i型校正劑和/或ii型校正劑和/或iii型校正劑)和/或cftr增效劑。

255、29)另一實(shí)施方案涉及如實(shí)施方案1)至16)或17)中任一項(xiàng)所定義的式(i)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其用于根據(jù)實(shí)施方案28)使用，其中所述cftr調(diào)節(jié)劑如實(shí)施方案19)至27)中任一項(xiàng)所定義。

256、30)另一實(shí)施方案涉及如實(shí)施方案1)至16)或17)中任一項(xiàng)所定義的式(i)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其用于根據(jù)實(shí)施方案28)或29)使用，其中所述cftr調(diào)節(jié)劑如實(shí)施方案25)所定義。

257、應(yīng)理解，任何關(guān)于如實(shí)施方案1)至16)或17)中任一項(xiàng)中所定義的式(i)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的實(shí)施方案，其中該式(i)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽被組合用于治療如本文所定義的cftr相關(guān)疾病(尤其囊性纖維化)，其中該式(i)化合物將(旨在)與一或多種cftr調(diào)節(jié)劑組合施用/是與一或多種cftr調(diào)節(jié)劑組合施用，其中該一或多種cftr調(diào)節(jié)劑為一或多種cftr校正劑(尤其i型、ii型、iii型校正劑)和/或cftr增效劑或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中該一或多種cftr調(diào)節(jié)劑尤其如實(shí)施方案19)至27)中任一項(xiàng)中所定義，還涉及：

258、·所述如實(shí)施方案1)至16)或17)中任一項(xiàng)中所定義的式(i)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其系組合用于治療如本文所定義的cftr相關(guān)疾病(尤其囊性纖維化)，其中該式(i)化合物將(旨在)與該一或多種cftr調(diào)節(jié)劑組合施用/是與該一或多種cftr調(diào)節(jié)劑組合施用；

259、·所述一或多種cftr調(diào)節(jié)劑，其為一或多種cftr校正劑和/或cftr增效劑，或其藥學(xué)上可接受的鹽，其被用于治療所述cftr相關(guān)疾病(尤其囊性纖維化)；其中所述一或多種cftr調(diào)節(jié)劑(其為一或多種cftr校正劑和/或cftr增效劑)將(旨在)與所述式(i)化合物組合施用；

260、·所述式(i)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的用途，其被用于制造用于治療所述cftr相關(guān)疾病(尤其囊性纖維化)的藥物/藥物組合物，所述藥物/藥物組合物包含所述式(i)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，以及所述一或多種cftr調(diào)節(jié)劑(其為一或多種cftr校正劑和/或cftr增效劑)或其藥學(xué)上可接受的鹽；

261、·所述式(i)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的用途，其被用于制造用于治療所述cftr相關(guān)疾病(尤其囊性纖維化)的藥物/藥物組合物，所述藥物/藥物組合物包含作為活性成分的所述式(i)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽；其中所述藥物/藥物組合物將(旨在)與所述一或多種cftr調(diào)節(jié)劑(其為一或多種cftr校正劑和/或cftr增效劑)或其藥學(xué)上可接受的鹽組合使用；

262、·所述一或多種cftr調(diào)節(jié)劑(其為一或多種cftr校正劑和/或cftr增效劑)或其藥學(xué)上可接受的鹽的用途，其用于制造用于治療所述cftr相關(guān)疾病(尤其囊性纖維化)的藥物/藥物組合物，所述藥物/藥物組合物包含作為活性成分的所述一或多種cftr調(diào)節(jié)劑(其為一或多種cftr校正劑和/或cftr增效劑)或其藥學(xué)上可接受的鹽；其中所述藥物/藥物組合物將(旨在)與所述式(i)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽組合使用；

263、·藥物組合物的用途，其用于治療所述cftr相關(guān)疾病(尤其囊性纖維化)，所述藥物組合物包含所述式(i)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和所述一或多種cftr調(diào)節(jié)劑(其為一或多種cftr校正劑和/或cftr增效劑)或其藥學(xué)上可接受的鹽；

264、·一種藥物，其用于預(yù)防或治療所述cftr相關(guān)疾病(尤其囊性纖維化)，所述藥物包含所述式(i)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽；其中所述藥物將(旨在)與所述一或多種cftr調(diào)節(jié)劑(其為一或多種cftr校正劑和/或cftr增效劑)或其藥學(xué)上可接受的鹽組合施用；

265、·一種預(yù)防或治療所述cftr相關(guān)疾病(尤其囊性纖維化)的方法，所述方法包含向有需要的受試者(優(yōu)選為人類)施用有效量的所述式(i)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中所述式(i)化合物與有效量的所述一或多種cftr調(diào)節(jié)劑(其為一或多種cftr校正劑和/或cftr增效劑)或其藥學(xué)上可接受的鹽組合施用；其中應(yīng)理解，所述組合施用可以按固定劑量組合形式或非固定劑量組合形式；

266、·一種預(yù)防或治療所述cftr相關(guān)疾病(尤其囊性纖維化)的方法，所述方法包含向有需要的受試者施用有效量的藥物組合物，所述藥物組合物包含所述式(i)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和所述一或多種cftr調(diào)節(jié)劑(其為一或多種cftr校正劑和/或cftr增效劑)或其藥學(xué)上可接受的鹽；以及

267、·一種預(yù)防或治療所述cftr相關(guān)疾病(尤其囊性纖維化)的方法，所述方法包含向有需要的受試者(優(yōu)選為人類)施用有效量的所述一或多種cftr調(diào)節(jié)劑(其為一或多種cftr校正劑和/或cftr增效劑)或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中所述一或多種抗cftr調(diào)節(jié)劑(其為一或多種cftr校正劑和/或cftr增效劑)與有效量的所述式(i)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽組合施用；其中應(yīng)理解，所述組合施用可以按固定劑量組合形式或非固定劑量組合形式。

268、式(i)化合物的制備：

269、可通過公知的文獻(xiàn)方法、下文給出的方法、下文實(shí)驗(yàn)部分中給出的方法或類似方法制備式(i)化合物、式(ie)化合物。雖然最佳反應(yīng)條件可隨著所用特定反應(yīng)物或溶劑而改變，但此類條件可由本領(lǐng)域技術(shù)人員通過常規(guī)優(yōu)化程序來決定。在一些情況下，進(jìn)行以下反應(yīng)方案和/或反應(yīng)步驟的次序可變化以促進(jìn)反應(yīng)或避免非所需要的反應(yīng)產(chǎn)物。在下文所概述的一般反應(yīng)順序中，通用基團(tuán)r1、r2、r3、r4、ar1及ar2如對(duì)于式(i)、式(ie)所定義。本文所用的其他縮寫明確定義，或如實(shí)驗(yàn)部分中定義。在一些情況下，通用基團(tuán)r1、r2、r3、r4、ar1和ar2可能不與以下方案中所說明的組合體兼容且因此將需要使用保護(hù)基(protectinggroup；pg)。保護(hù)基的使用為本技術(shù)領(lǐng)域中公知的(參見例如“protective?groups?inorg.synthesis”,t.w.greene,p.g.m.wuts,wiley-interscience,1999)。出于此論述的目的，將假定此類保護(hù)基根據(jù)需要存在于適當(dāng)位置上。在一些情況下，最終產(chǎn)物可進(jìn)一步例如通過操縱取代基進(jìn)行改性以得到新的最終產(chǎn)物。這種操縱可包括但不限于本領(lǐng)域技術(shù)人員通常已知的還原、氧化、烷基化、酰化、水解和過渡金屬催化的交叉偶聯(lián)反應(yīng)。所得化合物也可以本身已知的方式轉(zhuǎn)變成鹽，尤其藥學(xué)上可接受的鹽。

270、本發(fā)明的式(i)化合物、式(ie)化合物可根據(jù)下文所概述的一般反應(yīng)順序制備。

271、按照以下描繪的方案中的一者制備式(i)化合物。

272、

273、反應(yīng)方案a

274、反應(yīng)方案a：可利用外消旋或?qū)τ丑w富集的氨基酸建構(gòu)嵌段進(jìn)行合成。分別按照文獻(xiàn)中或反應(yīng)方案i及j中充分描述的程序制備的合適保護(hù)的胺建構(gòu)嵌段a及酸b-酸，在溶劑(如thf、dmf或nmp)中，在堿(例如tea或dipea)存在下，在-20℃與+75℃之間的溫度下，優(yōu)選地在室溫，用肽偶聯(lián)劑(例如hatu、comu、t3p、pybop或edci/hobt)處理，產(chǎn)生對(duì)應(yīng)酰胺中間物ab。中間物ab的胺官能基的去保護(hù)根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知方法實(shí)現(xiàn)，例如通過用含4mhcl的二噁烷處理或優(yōu)選地用tfa(在boc保護(hù)基的情況下)處理，或用哌啶或二乙胺(在fmoc保護(hù)基的情況下)處理，或適當(dāng)處理(在其他保護(hù)基，例如cbz或alloc保護(hù)基的情況下)。接著，根據(jù)上文針對(duì)ab中間物的形成已描述的肽偶聯(lián)條件，使去保護(hù)的中間物ab-胺與按照文獻(xiàn)中或?qū)嶒?yàn)部分中描述的程序制備的合適保護(hù)的酸c反應(yīng)。接著，在最終肽偶聯(lián)大內(nèi)酰胺化之前，將所得直鏈中間物abc去保護(hù)。在一些情況下，依序移除保護(hù)基pg1和pg3，但其優(yōu)選在一個(gè)單步中同時(shí)移除。舉例而言，tbu酯及boc保護(hù)基通過用含4m?hcl的二噁烷或優(yōu)選地tfa處理移除，或可替代地烯丙酯及alloc保護(hù)基可通過如文獻(xiàn)中充分報(bào)導(dǎo)的鈀催化劑處理移除。接著，在標(biāo)準(zhǔn)條件下將直鏈abc去保護(hù)的中間物環(huán)化(cylised)，亦即可在稀釋條件，例如小于abc起始材料于溶劑(如dmf或nmp)或溶劑混合物(如dmf/dcm(1:1))中的0.1m溶液中，在堿(例如tea或dipea)存在下，在-20℃與+75℃之間的溫度下，優(yōu)選地在室溫，用偶聯(lián)劑(例如comu、t3p、pybop、edci/hobt，或優(yōu)選地hatu)處理中間物，得到對(duì)應(yīng)大環(huán)cabc。視不同殘基的性質(zhì)而定，可能需要一些其余的去保護(hù)步驟以得到最終產(chǎn)物。通過制備型hplc，用標(biāo)準(zhǔn)反相或(必要時(shí))手性相色譜柱進(jìn)行最終純化，得到呈純立體異構(gòu)體形式的目標(biāo)化合物。

275、反應(yīng)方案b：在反應(yīng)方案a的修改版本中，可逐步地引入c部分，一次一個(gè)氨基酸。根據(jù)上文已描述的肽偶聯(lián)條件處理先前反應(yīng)方案a中所描述的ab中間物和市售或按照文獻(xiàn)中或下文實(shí)驗(yàn)部分中描述的程序制備的第一氨基酸d-1，形成對(duì)應(yīng)肽鍵。abd-1的胺官能基的選擇性去保護(hù)，例如通過用哌啶或二乙胺處理移除fmoc基團(tuán)，或通過在溶劑(如etoac、thf或二噁烷)中在催化劑(例如pd/c或pd(oh)2/c)上氫解移除cbz保護(hù)基，或優(yōu)選地通過用含4m?hcl的二噁烷或用tfa處理移除boc保護(hù)基，分別得到游離胺或其銨鹽，準(zhǔn)備好在類似肽偶聯(lián)步驟中與第二氨基酸d-2偶聯(lián)。三個(gè)所描述的偶聯(lián)/去保護(hù)/偶聯(lián)步驟得到與先前反應(yīng)方案a中所描述相同的直鏈中間物abc。合成得到所需大環(huán)cabc的其余步驟與上文描述相同。

276、

277、反應(yīng)方案b

278、

279、反應(yīng)方案c

280、反應(yīng)方案c：在一替代方法中，可修改建構(gòu)直鏈中間物abc的順序。根據(jù)上文已描述的肽偶聯(lián)條件，在溶劑(如thf、dmf或nmp)中，在堿(例如tea或dipea)存在下，在-20℃與+75℃之間的溫度下，優(yōu)選地在室溫，用試劑(例如hatu、comu、t3p、pybop或edci/hobt)處理分別按照文獻(xiàn)中或反應(yīng)方案k及j中描述的程序制備的合適保護(hù)的建構(gòu)嵌段c及胺b-胺。根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法，例如通過在甲醇水溶液中，在0℃直至50℃范圍內(nèi)的溫度下，用naoh或lioh處理(對(duì)于甲基或乙酯而言)，或優(yōu)選地通過在溶劑(如etoac、thf或二噁烷)中，在催化劑(例如pd/c或pd(oh)2/c)上氫解(對(duì)于苯甲酯而言)，來實(shí)現(xiàn)中間物bc的酸官能基的去保護(hù)，亦即移除pg4。接著，根據(jù)先前已描述的肽偶聯(lián)條件，使去保護(hù)的中間物bc-酸與按照文獻(xiàn)中或反應(yīng)方案i中描述的程序制備的合適保護(hù)的胺建構(gòu)嵌段a反應(yīng)。接著可將所得直鏈abc去保護(hù)且環(huán)化，得到如反應(yīng)方案a中所描述的最終產(chǎn)物cabc。

281、

282、反應(yīng)方案d

283、反應(yīng)方案d：如在從反應(yīng)方案a移動(dòng)至反應(yīng)方案b時(shí)為此種情況，反應(yīng)方案c中的c部分可類似地逐步引入，一次一個(gè)氨基酸。根據(jù)上文已描述的肽偶聯(lián)條件，處理按照文獻(xiàn)中、或?qū)嶒?yàn)部分中或反應(yīng)方案j中描述的程序制備的合適保護(hù)的酸d-1和胺b-胺。bd-1的胺官能基的選擇性去保護(hù)，即移除pg5，例如在酸性條件下移除cbz保護(hù)基，或更優(yōu)選地，用含4mhcl的二噁烷或優(yōu)選地用tfa處理來移除boc保護(hù)基，得到對(duì)應(yīng)銨鹽而無需移除正交保護(hù)基pg4。接著可在類似肽偶聯(lián)步驟中使所得中間物胺與第二氨基酸d-2偶聯(lián)。三個(gè)所描述的偶聯(lián)/去保護(hù)/偶聯(lián)步驟得到與先前反應(yīng)方案c中所描述的物質(zhì)相同的受保護(hù)的中間物bc，在該階段可如上文所描述進(jìn)行合成的其余部分。

284、

285、反應(yīng)方案e

286、反應(yīng)方案e：在反應(yīng)方案c的另一變化形式中，建構(gòu)嵌段a-胺在β-叔丁酯存在下受到2個(gè)羧酸官能基上的合適的正交保護(hù)基(例如α-苯甲酯或α-甲酯)的雙重保護(hù)。接著，按照反應(yīng)方案c中描述的序列，得到對(duì)應(yīng)直鏈中間物abc。使用tfa對(duì)天冬氨酸側(cè)鏈和boc胺進(jìn)行雙重去保護(hù)，且隨后通過先前已描述的方法進(jìn)行環(huán)化，得到仍在a上受到保護(hù)的環(huán)化的中間物cabc。可通過在甲醇/水中，在0℃至50℃范圍內(nèi)的溫度下，用naoh或lioh處理(對(duì)于甲酯或乙酯而言)，或優(yōu)選地通過在溶劑(如etoac、thf或二噁烷)中在催化劑(例如pd/c或pd(oh)2/c)上對(duì)苯甲酯進(jìn)行氫解，來實(shí)現(xiàn)天冬氨酸主鏈羧酸的去保護(hù)，即移除pg6。接著，根據(jù)上文已描述的肽偶聯(lián)條件，使去保護(hù)的中間物cabc-酸與市售或按照文獻(xiàn)中或?qū)嶒?yàn)部分中所描述的程序制備的胺am偶聯(lián)，得到目標(biāo)化合物。該策略對(duì)于制備用于探索am部分的文庫(kù)尤其有效。

287、

288、反應(yīng)方案f

289、反應(yīng)方案f：反應(yīng)方案e中描述的逐步引入a部分的策略可以不同順序施加，得到相同的cabc-酸中間物，如反應(yīng)方案f中所說明。在β-烯丙酯存在下，受2個(gè)羧酸官能基上的合適的正交保護(hù)基(例如α-苯甲酯或α-甲酯)的雙重保護(hù)的受保護(hù)的a-胺可以與反應(yīng)方案a中所描述相同的順序，與所需的b-酸和c建構(gòu)嵌段偶聯(lián)，得到對(duì)應(yīng)直鏈中間物abc。使用tfa(在boc保護(hù)基的情況下)依序?qū)Π繁Ｗo(hù)基pg3去保護(hù)，隨后通過在溶劑(如dcm)中，用1,3-二甲基巴比妥酸(巴比妥酸)及pd(pph3)4處理來移除天冬氨酸側(cè)鏈保護(hù)基pg1(在烯丙基保護(hù)基的情況下)，僅如上文已描述進(jìn)行環(huán)化，得到仍在a上受保護(hù)的中間物cabc，如已在反應(yīng)方案e中描述。合成得到所需大環(huán)cabc的其余步驟與上文已描述相同。

290、

291、反應(yīng)方案g

292、反應(yīng)方案g：在反應(yīng)方案f的變化形式中且與反應(yīng)方案b和d非常相似，部分c可逐步引入，一次一個(gè)氨基酸。此外，氨基酸d-1自身可通過在已經(jīng)組裝的abd1前體上引入所需側(cè)鏈r1來逐步建構(gòu)。根據(jù)已描述的肽偶聯(lián)條件，已在反應(yīng)方案f中描述的胺去保護(hù)的ab中間物可與d-1的未經(jīng)取代的氨基酸前體(例如nh-boc或優(yōu)選地nh-硝基苯磺酰基-氨基酸)偶聯(lián)。接著可通過在堿(例如k2co3)存在下，用所需烷基鹵(例如溴化物或優(yōu)選地碘化物)處理，或優(yōu)選地經(jīng)由根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的標(biāo)準(zhǔn)條件進(jìn)行的與所需醇的光延反應(yīng)(mitsunobureaction)，例如通過在溶劑(例如thf或二噁烷)中，在-80℃直至60℃范圍內(nèi)的溫度下，用dead或diad與磷化氫配體(如三苯膦)處理，來將nh-硝基苯磺酰基官能基烷基化。接著可通過在溶劑(如dmf)中，在堿(例如k2co3)存在下，用硫酚進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)處理來移除硝基苯磺酰基活化/保護(hù)基，得到對(duì)應(yīng)去保護(hù)的中間物。可根據(jù)反應(yīng)方案b中所說明的條件，使氨基酸d-2與此中間物偶聯(lián)。三個(gè)所描述的偶聯(lián)/去保護(hù)/偶聯(lián)步驟得到與先前反應(yīng)方案f中所描述相同的去保護(hù)的直鏈中間物abc。合成得到所需大環(huán)cabc的其余步驟與上文已描述相同。

293、

294、反應(yīng)方案h

295、反應(yīng)方案h：在反應(yīng)方案f的其他改編中，a-胺建構(gòu)嵌段的α-羧酸保護(hù)基可為固相，例如聚合物連接的載體(support)，從而使得能夠根據(jù)聚合物負(fù)載的肽合成領(lǐng)域中的普通技術(shù)人員公知的既定方法，進(jìn)行環(huán)化的大環(huán)前體的逐步固相肽合成。舉例而言，可通過在允許聚合物珠粒的合適膨脹的溶劑混合物(例如dcm/dmf)中，用hobt和dmap以及偶聯(lián)劑(例如dcc或dic)處理，在wang樹脂上引入氨基酸a-酸，其在胺官能基上由例如fmoc保護(hù)基且在β-羧酸官能基上由例如烯丙酯合適的正交保護(hù)。隨后fmoc保護(hù)基的去保護(hù)，之后在聚合物肽合成的標(biāo)準(zhǔn)條件下進(jìn)行肽偶聯(lián)的順序，允許逐步引入不同建構(gòu)嵌段b-酸、d1及最后合適保護(hù)的d2(如例如alloc保護(hù)的d2)，得到聚合物負(fù)載的直鏈肽abc，類似于反應(yīng)方案f中描述的直鏈肽。可通過潛在地在1,3-二甲基巴比妥酸存在下，用鈀催化劑處理，來實(shí)現(xiàn)烯丙酯和n-alloc保護(hù)基的雙重去保護(hù)，得到仍負(fù)載的直鏈肽。可在這些情況下實(shí)現(xiàn)在標(biāo)準(zhǔn)肽偶聯(lián)條件下的環(huán)化而無寡聚物形成的風(fēng)險(xiǎn)。接著可通過酸處理(例如用tfa/h2o(95/5)的混合物)，從聚合物載體釋放出已在反應(yīng)方案f中描述的大環(huán)cabc-酸。接著可使用如上文所描述的偶聯(lián)條件，使釋放的cabc-酸與適當(dāng)am胺偶聯(lián)，得到目標(biāo)化合物。

296、

297、反應(yīng)方案i

298、建構(gòu)嵌段a為市售的，如文獻(xiàn)中所描述來制備，或可如反應(yīng)方案i中所說明來制備。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)肽偶聯(lián)條件，通過在溶劑(如thf、dmf或nmp)中，在堿(例如tea或dipea)存在下，在-20℃與+75℃之間的溫度下，優(yōu)選地在室溫，用comu或t3p、hatu、pybop或另一肽偶聯(lián)劑處理，使合適正交保護(hù)的a-酸，例如n-fmoc的β-叔丁酯或n-boc天冬氨酸的β-烯丙酯與所需am胺偶聯(lián)。接著，所得中間物可在保護(hù)基化學(xué)物質(zhì)領(lǐng)域中充分確立的標(biāo)準(zhǔn)條件下，在胺官能性上選擇地去保護(hù)而無需移除β-酯保護(hù)基pg1。在β-叔丁酯存在下用哌啶或二乙胺特定處理以移除n-fmoc，或在β-烯丙酯存在下用tfa或含4m?hcl的二噁烷處理以移除n-boc，分別獲得呈其游離堿或其銨鹽形式的目標(biāo)建構(gòu)嵌段a。

299、

300、反應(yīng)方案j

301、建構(gòu)嵌段b、b-酸或b-胺如文獻(xiàn)中所描述來制備，或可如反應(yīng)方案j中所說明來制備。在羧酸官能基上作為酯(例如甲酯、乙酯或苯甲酯)保護(hù)的適當(dāng)水楊酸衍生物為市售的或如文獻(xiàn)中所描述來制備，或可如實(shí)驗(yàn)部分中所描述來制備。類似地，胺官能基上由boc或cbz基團(tuán)保護(hù)的氨基醇為市售的或如文獻(xiàn)中所描述容易地由對(duì)應(yīng)氨基酸制備，或也可如實(shí)驗(yàn)部分中所描述來制備。氨基醇的醇官能基可在堿(例如dipea或tea)存在下，用甲磺酰氯或甲苯磺酰氯或類似活化劑處理后活化，且使其在溶劑(例如thf或dmf)中與水楊酸酯衍生物的苯酚官能基反應(yīng)，得到雙重保護(hù)的b建構(gòu)嵌段。替代地，兩個(gè)建構(gòu)嵌段可根據(jù)光延(mitsunobu)方法，通過在溶劑(例如thf或二噁烷)中，在-20℃直至60℃范圍內(nèi)的溫度下，用磷化氫配體(如三苯膦)及dead或diad試劑處理而一起反應(yīng)。接著，所得正交保護(hù)的中間物可在酸官能基上或在胺官能基上選擇地去保護(hù)，以分別獲得對(duì)應(yīng)建構(gòu)嵌段b-酸或b-胺。舉例而言，甲酯用naoh水溶液或lioh溶液皂化或苯甲酯在鈀催化劑(例如炭負(fù)載的pd或pd(oh)2)上進(jìn)行氫解，獲得對(duì)應(yīng)b-酸。替代地，通過用tfa處理進(jìn)行boc去保護(hù)或?qū)bz保護(hù)的胺進(jìn)行氫解(在甲酯的情況下)，得到對(duì)應(yīng)b-胺。

302、

303、反應(yīng)方案k

304、可如反應(yīng)方案k中所說明的由關(guān)鍵中間物d-1胺制備建構(gòu)嵌段c。中間物d-1為市售的或如文獻(xiàn)中所描述來制備，或可如此方案中所說明的來制備。可使合適pg8保護(hù)的溴乙酸酯衍生物(例如甲酯、乙酯或苯甲酯)在溶劑(如mecn、丙酮或dmf)中，在堿(例如k2co3或dipea)存在下，在室溫直至80℃范圍內(nèi)的溫度下，與適當(dāng)胺r1nh2反應(yīng)，得到胺d-1。替代地，可使合適pg8保護(hù)的氨基酸酯衍生物(例如甲酯、乙酯或苯甲酯)在溶劑(例如dcm或thf)中，在催化量的dmap存在下，與氯化硝基磺酰苯反應(yīng)，得到對(duì)應(yīng)n-硝基苯磺酰基保護(hù)的胺。接著，可通過如上文已描述的光延方法，即通過在溶劑(例如thf或二噁烷)中，在0℃直至80℃范圍內(nèi)的溫度下，在所需醇r1oh存在下，與磷化氫配體(如三苯膦)及dead或diad試劑反應(yīng)，來實(shí)現(xiàn)磺酰胺氮的烷基化。隨后，可通過在溶劑(如dmf或dcm)中，在堿(例如k2co3)存在下，用硫酚處理來實(shí)現(xiàn)硝基苯磺酰基的裂解，得到胺建構(gòu)嵌段d-1。與市售，或根據(jù)如上文所描述的標(biāo)準(zhǔn)肽偶聯(lián)方法如文獻(xiàn)中所描述來制備的d-2氨基酸偶聯(lián)。接著，可通過用naoh水溶液或lioh溶液處理(在甲酯或乙酯的情況下)，或通過在鈀催化劑(例如炭負(fù)載的pd或pd(oh)2)上對(duì)苯甲酯進(jìn)行氫解，來實(shí)現(xiàn)酯的去保護(hù)，得到目標(biāo)c建構(gòu)嵌段。

305、提供以下實(shí)施例以說明本發(fā)明。這些實(shí)施例僅為說明性的且不應(yīng)視為以任何方式限制本發(fā)明。

306、實(shí)驗(yàn)部分

307、i.化學(xué)過程

308、所有溫度均以℃為單位陳述。市售起始材料未經(jīng)進(jìn)一步純化即按原樣使用。除非另外規(guī)定，否則所有反應(yīng)均在烘干的玻璃器皿中，在氮?dú)夥諊逻M(jìn)行。化合物通過硅膠急驟色譜柱層析或通過制備型hplc來純化。描述于本發(fā)明中的化合物通過使用列于以下的條件的lc-ms數(shù)據(jù)(滯留時(shí)間tr以min為單位給出；從質(zhì)譜獲得的分子量以g/mol為單位給出)表征。在本發(fā)明化合物呈現(xiàn)為構(gòu)象異構(gòu)體的混合物的情況下，尤其在其lc-ms譜中可見，給出最大量構(gòu)象異構(gòu)體的滯留時(shí)間。

309、分析型lc-ms設(shè)備：

310、hplc泵：二元梯度泵，agilent?g4220a或等效設(shè)備

311、自動(dòng)取樣器：gilson?lh215(具有g(shù)ilson?845z注射器)或等效設(shè)備

312、色譜柱隔室：dionex?tcc-3000rs或等效設(shè)備

313、脫氣器：dionex?srd-3200或等效設(shè)備

314、補(bǔ)充泵：dionex?hpg-3200sd或等效設(shè)備

315、dad檢測(cè)器：agilent?g4212a或等效設(shè)備

316、ms檢測(cè)器：?jiǎn)嗡臉O質(zhì)量分析器，thermo?finnigan?msqplus或等效設(shè)備

317、els檢測(cè)器：sedere?sedex?90或等效設(shè)備

318、在酸性條件下進(jìn)行的lc-ms

319、方法a：色譜柱：zorbax?sb水溶液(3.5μm，4.6×50mm)。條件：mecn[洗脫劑a]；水+0.04％?tfa[洗脫劑b]。梯度：95％?b→5％?b，1.5min(流速：4.5ml/min)。檢測(cè)：uv/vis+ms。

320、方法b：色譜柱：zorbax?rrhd?sb水溶液(1.8μm，2.1×50mm)。條件：mecn[洗脫劑a]；水+0.04％?tfa[洗脫劑b]。梯度：95％?b→5％?b，2.0min(流速：0.8ml/min)。檢測(cè)：uv/vis+ms。

321、方法c：色譜柱：waters?xbridge?c18(5μm，4.6×30mm)。條件：mecn[洗脫劑a]；水+0.04％?tfa[洗脫劑b]。梯度：95％?b→5％?b，1.5min(流速：4.5ml/min)。檢測(cè)：uv/vis+ms。

322、方法d：色譜柱：waters?beh?c18(2.1×50mm，2.5μm)。條件：mecn[洗脫劑a]；水+0.04％?tfa[洗脫劑b]。梯度：95％?b→5％?b，2.0min(流速：0.8ml/min)。檢測(cè)：uv/vis+ms。

323、方法e：色譜柱：waters?xbridge?c18(2.5μm，4.6×30mm)。條件：mecn[洗脫劑a]；水+0.04％?tfa[洗脫劑b]。梯度：95％?b→5％?b，1.5min(流速：4.5ml/min)。檢測(cè)：uv/vis+ms。

324、方法f：色譜柱：waters?xselect?csh?c18(3.5μm，2.1×30mm)。條件：mecn+0.1％甲酸[洗脫劑a]；水+0.1％甲酸[洗脫劑b]。梯度：95％?b→2％?b，1.6min(流速1ml/min)，檢測(cè)：uv/vis+ms。

325、方法g：色譜柱：waters?atlantis?t3(3.0μm，2.1×50mm)。條件：mecn+0.1％甲酸[洗脫劑a]；水+0.1％甲酸[洗脫劑b]。梯度：95％?b→2％?b，5min(流速0.8ml/min)。檢測(cè)：uv/vis+ms。

326、方法h：waters?acquity二元溶劑管理器，ms：waters?sq檢測(cè)器或xevo?tqd或synapt?g2?ms，dad：acquity?uplc?pda檢測(cè)器，elsd：acquity?uplc?elsd。來自waters的色譜柱acquity?uplc?csh?c18?1.7μm?2.1x50?mm，在acquity?uplc色譜柱管理器中恒溫在60℃。洗脫劑：a：h2o+0.05％甲酸；b：mecn+0.045％甲酸。方法：梯度：2％?b→98％?b，2.0min。流速：1.0ml/min。檢測(cè)：uv?214nm及elsd，以及ms，tr以min為單位給出。

327、在堿性條件下進(jìn)行的lc-ms

328、方法i：色譜柱：waters?beh?c18(2.5μm，2.1×50mm)。條件：水nh3[c(nh3)＝13mmol/l][洗脫劑a]；mecn[洗脫劑b]。梯度：5％?b→95％?b，2min(流速0.8ml/min)。檢測(cè)：uv/vis+ms。

329、方法j：色譜柱：waters?xselect?csh?c18(3.5μm，2.1×30mm)。條件：95％?mecn+5％?water/nh4hco3[c(nh4hco3)＝10mmol/l][洗脫劑a]；水/nh4hco3[c(nh4hco3)＝10mmol/l][洗脫劑b]。梯度：95％?b→2％?b，1.6min(流速1ml/min)，檢測(cè)：uv/vis+ms。

330、gc-ms

331、agilent?6890n/色譜柱：rxi-5ms20m，id?180μm，df0.18μm；速度50cm/s，he載氣；100℃→250℃，4.5min；檢測(cè)：ms。

332、制備型hplc設(shè)備：

333、配備有g(shù)ilson?lh215、dionex?srd-3200脫氣器的gilson333/334hplc泵，

334、dionex?iso-3100a補(bǔ)充泵，dionex?dad-3000dad檢測(cè)器，單一四極質(zhì)量分析器ms檢測(cè)器，thermo?finnigan?msq?plus，mra100-000分流器，polymer?laboratories?pl-els1000?els檢測(cè)器

335、在堿性條件下進(jìn)行的制備型hplc

336、色譜柱：waters?xbridge(10μm，75×30mm)。條件：mecn[洗脫劑a]；水+0.5％nh4oh(25％水溶液)[洗脫劑b]；梯度參見制備型hplc表1(流速：75ml/min)，根據(jù)待純化的化合物的極性來決定洗脫劑a的起始百分比(x)。檢測(cè)：uv/vis+ms

337、制備型hplc表1

338、 t(分鐘) 0 0.01 4.0 6.0 6.2 6.6 洗脫劑a(％) x x 95 95 x x 洗脫劑b(％) 100-x 100-x 5 5 100-x 100-x

339、在酸性條件下進(jìn)行的制備型hplc

340、色譜柱：waters?atlantis?t3(10μm，75×30mm)。條件：mecn[洗脫劑a]；水+0.5％hco2h[洗脫劑b]；梯度參見制備型hplc表2(流速：75ml/min)，視待純化的化合物的極性來決定洗脫劑a的起始百分比(x)。檢測(cè)：uv/vis+ms

341、制備型hplc表2

342、 t(分鐘) 0 0.01 4.0 6.0 6.2 6.6 洗脫劑a(％) x x 95 95 x x 洗脫劑b(％) 100-x 100-x 5 5 100-x 100-x

343、用于手性分離的制備型hplc

344、在大多數(shù)情況下，可根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的標(biāo)準(zhǔn)方法，通過標(biāo)準(zhǔn)制備型規(guī)模hplc分離或純化所需的非對(duì)映異構(gòu)體。在一些情況下，建議使用手性層析色譜柱來分離非對(duì)映異構(gòu)體的復(fù)雜混合物。使用手性固定相色譜柱，例如chiralpak?ia、ib或ic色譜柱，基于固定的直鏈淀粉或纖維素手性相，利用基于比率在9:1至1:9變化的mecn與etoh或meoh的混合物的等度洗脫劑，得到最好結(jié)果。為了補(bǔ)償所純化化合物中的可電離官能基的存在，可將調(diào)節(jié)劑添加至溶劑混合物中，該溶劑混合物例如0.1％二乙胺(對(duì)于堿性衍生物而言)或0.1％甲酸(對(duì)于酸性衍生物而言)。在一些情況下，使用超臨界流體層析，其使用與上文所描述相同的手性固定相色譜柱，利用由50％至90％超臨界二氧化碳與etoh、meoh或1:1etoh:mecn混合物構(gòu)成的等度洗脫劑。檢測(cè)：uv/vis。

345、縮寫(如上文或下文中所使用的)：

346、acoh???????????????????????乙酸

347、ac2o????????????????????????乙酸酐

348、alloc??????????????????????烯丙氧基羰基

349、anh.???????????????????????無水

350、aq.????????????????????????水性/水溶液

351、atm????????????????????????氛圍

352、bnbr???????????????????????溴甲苯

353、boc????????????????????????叔丁氧基羰基

354、boc2o????????????????????????二碳酸二叔丁酯

355、bop????????????????????????(苯并三唑-1-基氧基)-三(二甲氨基)-六氟磷酸鏻

356、buli???????????????????????正丁基鋰

357、cdi????????????????????????1,1'-羰基二咪唑

358、cd3i????????????????????????碘甲烷-d3

359、chcl3???????????????????????氯仿

360、comu????????????????????????(1-氰基-2-乙氧基-2-氧代基亞乙基胺氧基)二甲氨基-(n-嗎啉基)-碳正離子六氟磷酸鹽

361、cu(oac)2???????????????????乙酸銅(ii)

362、d??????????????????????????天

363、dbu????????????????????????1,8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯

364、dcc????????????????????????n,n'-二環(huán)己基碳化二亞胺

365、dce????????????????????????1,2-二氯乙烷

366、dcm????????????????????????二氯甲烷

367、dead???????????????????????偶氮二甲酸二乙酯

368、diad???????????????????????偶氮二甲酸二異丙酯

369、dibal/dibal-h??????????????氫化二異丁基鋁

370、dic????????????????????????n,n'-二異丙基碳化二亞胺

371、dipea??????????????????????二異丙基-乙胺，惠尼格氏堿(hünig's?base)

372、dmap???????????????????????4-二甲基氨基吡啶

373、dmf????????????????????????二甲基甲酰胺

374、dmso???????????????????????二甲基甲酰胺

375、dppa???????????????????????二苯基磷酰基迭氮化物

376、dppf???????????????????????1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵

377、edc????????????????????????1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳化二亞胺

378、et?????????????????????????乙基

379、et2o?????????????????????????二乙醚

380、etoac??????????????????????乙酸乙酯

381、etoh???????????????????????乙醇

382、蒸發(fā)(evaporated)???????????真空蒸發(fā)

383、ex.????????????????????????示例

384、fc?????????????????????????硅膠急驟層析

385、fdpp???????????????????????二苯基磷酸五氟苯基酯

386、fmoc???????????????????????9-芴基甲氧基羰基

387、h??????????????????????????小時(shí)

388、hatu????????????????????????六氟磷酸(1-[雙(二甲氨基)亞甲基]-1h-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物

389、hept???????????????????????庚烷

390、hex????????????????????????己烷

391、hobt???????????????????????1-羥基苯并三唑

392、hplc???????????????????????高效液相層析

393、hv?????????????????????????高真空條件

394、ibu????????????????????????異丁基

395、ipr????????????????????????異丙基

396、iprmgcl????????????????????異丙基氯化鎂

397、iproh??????????????????????異丙醇

398、iproac?????????????????????乙酸異丙酯

399、koac???????????????????????醋酸鉀

400、kotbu??????????????????????叔丁醇鉀

401、lah????????????????????????氫化鋰鋁

402、lc-ms??????????????????????液相層析-質(zhì)譜

403、lit.???????????????????????文獻(xiàn)

404、m??????????????????????????mol/l

405、mcpba??????????????????????間氯過氧苯甲酸

406、me?????????????????????????甲基

407、mecn???????????????????????乙腈

408、mei????????????????????????碘甲烷

409、米氏酸(meldrum's?acid)?????2,2-二甲基-1,3-二噁烷-4,6-二酮

410、meoh???????????????????????甲醇

411、ml?????????????????????????毫升

412、min????????????????????????分鐘

413、mix.???????????????????????混合物

414、mom????????????????????????甲氧基甲基

415、mw?????????????????????????微波

416、nabh(oac)3?????????????????三乙酰氧基硼氫化鈉

417、ncs????????????????????????n-氯丁二酰亞胺

418、nmp????????????????????????n-甲基-2-吡咯烷酮

419、nosyl??????????????????????4-硝基苯磺酰基

420、npr????????????????????????正丙基

421、oac????????????????????????乙酸酯基

422、org.???????????????????????有機(jī)

423、pd(tbu3p)2??????????????????雙(三-叔丁基膦)鈀(0)

424、pd(oac)2???????????????????乙酸鈀(ii)

425、pd/c???????????????????????鈀/活性炭

426、pd(oh)2/c?????????????????氫氧化鈀/活性炭(皮爾曼氏催化劑(pearlman'scatalyst))

427、pd2(dba)3???????????????????三(二苯亞甲基丙酮)二鈀(0)

428、pdcl2(pph3)2????????????????雙(三苯基膦)二氯化鈀(ii)

429、pd(dppf)cl2????????????????[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(ii)

430、pd(dppf)cl2·dcm???????????[1,1'-雙(二苯膦基)-二茂鐵]二氯化鈀(ii)與二氯甲烷的絡(luò)合物

431、pd(pph3)4???????????????????四(三苯基膦)鈀(0)

432、ph?????????????????????????苯基

433、phme???????????????????????甲苯

434、pph3???????????????????????三苯基膦

435、prep.??????????????????????制備型

436、ptfe???????????????????????聚四氟乙烯

437、pybop??????????????????????六氟磷酸(苯并三唑-1-基-氧基)-三吡咯烷基-鏻

438、pyclop?????????????????????六氟磷酸氯三吡咯烷鏻

439、rac????????????????????????外消旋

440、rm?????????????????????????反應(yīng)混合物

441、羅謝爾鹽(rochelle's?salt)??酒石酸鈉鉀

442、rt?????????????????????????室溫

443、ruphos?????????????????????2-二環(huán)己基膦基-2',6'-二異丙氧基聯(lián)苯

444、s??????????????????????????秒

445、sat.???????????????????????飽和

446、selectfluor???????????????1-氯甲基-4-氟-1,4-重氮雙環(huán)[2.2.2]辛烷雙(四氟硼酸鹽)

447、sm?????????????????????????起始材料

448、soln.??????????????????????溶液

449、sphos??????????????????????2-二環(huán)己基膦-2′,6′-二甲氧基聯(lián)苯

450、tbaf???????????????????????氟化四丁銨

451、tbdmscl????????????????????叔丁基二甲基硅基氯

452、tbme???????????????????????叔丁基甲基醚

453、tbu????????????????????????叔丁基(tert-butyl/tertiary?butyl)

454、tea????????????????????????三甲基胺

455、tf?????????????????????????三氟甲烷磺酰基

456、tfa????????????????????????三氟乙酸

457、thf????????????????????????四氫呋喃

458、tlc????????????????????????薄層層析

459、tmeda??????????????????????n,n,n',n'-四甲基乙二胺

460、tms????????????????????????三甲基硅基

461、tosyl??????????????????????對(duì)甲苯-磺酰基

462、t3p????????????????????????正丙基膦酸酐

463、tr?????????????????????????滯留時(shí)間

464、triflate???????????????????三氟甲烷磺酸酯

465、ptsoh??????????????????????對(duì)甲苯磺酸

466、xantphos???????????????????4,5-雙(二苯膦基)-9,9-二甲基二苯并吡喃

467、xphos??????????????????????2-二環(huán)己基膦-2',4',6'-三異丙基聯(lián)苯

468、2-(4-甲氧基-2h-1,2,3-三唑-2-基)乙-1-胺鹽酸鹽(am-1)

469、步驟1：將k2co3(22.1g，160mmol)加入到4,5-二溴-2h-1,2,3-三唑(30.2g，133mmol)和叔丁基(2-溴乙基)氨基甲酸酯(33.5g，146mmol)在mecn(300ml)中的室溫懸浮液中，并將所得混合物在50℃下攪拌65小時(shí)。將rm分配在水和etoac之間并分離各層。用etoac(2x)再萃取水相，并將合并的有機(jī)萃取物用鹽水洗滌，干燥(mgso4)，過濾并蒸發(fā)。粗產(chǎn)物通過fc純化(用含20％etoac的庚烷洗脫)，得到叔丁基(2-(4,5-二溴-2h-1,2,3-三唑-2-基)乙基)氨基甲酸酯，為無色油狀物。lc-ms?b:tr＝0.95min；[m+h]+＝370.73。

470、步驟2：將tfa(51.7ml，676mmol)加入到(2-(4,5-二溴-2h-1,2,3-三唑-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(5.0g，13.5mmol)在dcm(75ml)中的室溫溶液中，并將rm攪拌1小時(shí)，然后真空濃縮。將殘余物與dcm(2x)共蒸發(fā)，得到白色固體狀的2-(4,5-二溴-2h-1,2,3-三唑-2-基)乙-1-胺.tfa。lc-ms?i:tr＝0.66min；[m+h]+＝270.94。

471、步驟3：將乙酸鈉(7.0g，85.4mmol)，隨后將苯甲醛(3.83ml，37.6mmol)加入到2-(4,5-二溴-2h-1,2,3-三唑-2-基)乙-1-胺.tfa(6.56g，17.1mmol)在meoh(90ml)中的室溫溶液中，并將所得混合物攪拌1小時(shí)，然后分批加入nabh3cn(2.49g，37.6mmol)。將rm攪拌48小時(shí)，然后濃縮。將殘余物分配在水和dcm之間，并分離各層。用dcm(2x)再萃取水相，用鹽水洗滌合并的有機(jī)萃取物，干燥(na2so4)，過濾，蒸發(fā)，得到黃色固體狀的n,n-二苯甲基-2-(4,5-二溴-2h-1,2,3-三唑-2-基)乙-1-胺。lc-ms?i:tr＝1.38min；[m+h]+＝450.99。

472、步驟4：將iprmgcl(2.0m?thf溶液，13.4ml，26.8mmol)滴加到-78℃的n,n-二苯甲基-2-(4,5-二溴-2h-1,2,3-三唑-2-基)乙-1-胺(6.03g,13.4mmol)在thf(120ml)中的溶液中，并將所得混合物攪拌4小時(shí)。將rm溫?zé)嶂潦覝夭嚢?0分鐘，然后通過小心地加入飽和nh4cl水溶液以淬滅反應(yīng)。蒸發(fā)掉揮發(fā)物并用etoac(3x)萃取剩余的水相。將合并的有機(jī)萃取物用鹽水洗滌、干燥(na2so4)、過濾并蒸發(fā)，得到黃色油狀的n,n-二苯甲基-2-(4-溴-2h-1,2,3-三唑-2-基)乙-1-胺。lc-ms?i:tr＝1.30min；[m+h]+＝373.07。

473、步驟5：將n,n-二苯甲基-2-(4-溴-2h-1,2,3-三唑-2-基)乙烷-1-胺(5.27g，14.2mmol)、雙(頻哪醇)二硼(5.41g，21.3mmol)、sphos(233mg，0.57mmol)、三(二芐亞甲基丙酮)二鈀)二鈀(0)(134mg，0.14mmol)和koac(2.40g，24.2mmol)在二噁烷(110ml)中的混合物脫氣并用氬氣惰性化。然后將rm加熱至100℃并保持3天。將rm冷卻至室溫并通過硅藻土過濾并用etoac沖洗。蒸發(fā)掉揮發(fā)性物質(zhì)，將殘余物分配在水和etoac之間，分離各層。用etoac(2x)再萃取水相，用鹽水洗滌合并的有機(jī)萃取物，干燥(na2so4)，過濾，蒸發(fā)，得到作為主要產(chǎn)物的黃色油狀的(2-(2-(二苯甲基氨基)乙基)-2h-1,2,3-三唑-4-基)硼酸。lc-msi:tr＝0.58min；[m+h]+＝337.22。

474、步驟6：將過硼酸鈉四水合物(4.72g，29.7mmol)加(2-(2-(二苯甲基氨基)乙基)-2h-1,2,3-三唑-4-基)硼酸(5.0g，14.9mmol)在thf:h2o1:1(150ml)中的入室溫溶液中，并將所得懸浮液攪拌16小時(shí)。將rm倒入冰水中，并用etoac(3x)萃取。將合并的有機(jī)萃取物用鹽水洗滌、干燥(mgso4)、過濾并蒸發(fā)。通過fc純化粗產(chǎn)物(用含20％至80％etoac的庚烷洗脫)，得到黃色固體狀的2-(2-(二苯甲基氨基)乙基)-2h-1,2,3-三唑-4-醇，。lc-ms?i:tr＝0.56min；[m+h]+＝309.17.1h?nmr(dmso)δ:10.30(s,1h),7.21-7.31(m,10h),7.02(s,1h),4.29(t,j＝6.3hz,2h),3.55(s,4h),2.80(t,j＝6.3hz,2h)。

475、步驟7：將nah在礦物油中的60％分散液(540mg，11.2mmol)加入到2-(2-(二苯甲基氨基)乙基)-2h-1,2,3-三唑-4-醇(3.15g，10.2mmol)在dmf(85ml)中的室溫溶液中。攪拌10分鐘后，加入mei(0.77ml，12.3mmol)，并將所得混合物攪拌1小時(shí)。將rm倒入水中，并用iproac(3x)萃取。將合并的有機(jī)萃取物用鹽水洗滌，干燥(na2so4)，過濾，蒸發(fā)，得到黃色油狀物n,n-二苯甲基-2-(4-甲氧基-2h-1,2,3-三唑-2-基)乙-1-胺。lc-ms?i:tr＝1.23min；[m+h]+＝323.21。

476、步驟8：將n,n-二苯甲基-2-(4-甲氧基-2h-1,2,3-三唑-2-基)乙-1-胺(3.45g，10.7mmol)在etoh(85ml)中的室溫溶液用n2/真空(3x)惰性化，然后加入10％?pd/c(1.13g，1.1mmol)。再惰性化三次后，連接h2氣球，將所得混合物攪拌24小時(shí)。將rm通過whatman過濾器過濾，濾液用含4m?hcl的二噁烷(8ml，32mmol)酸化，濃縮，得到白色固體狀的標(biāo)題化合物am-1。lc-ms?i:tr＝0.39min；[m+h]+＝143.20.1h?nmr(dmso)δ:8.40(s,3h),7.41(s,1h),4.54(t,j＝6.4hz,2h),3.87(s,3h),3.29-3.23(m,2h)。

477、2-(3-甲氧基-1,2,4-噁二唑-5-基)乙-1-胺鹽酸鹽(am-2)

478、步驟1：向boc-β-ala-oh(5.0g，25.9mmol)、鄰甲基異脲硫酸氫鹽(4.5g，25.9mmol)和dipea(18.1ml，104mmol)于dmf(150ml)中的室溫溶液中添加hatu(11.82g，31.1mmol)，且將rm攪拌1.5小時(shí)。向rm中添加水及etoac，接著分離兩個(gè)層，且將水層用etoac(2x)萃取。將經(jīng)合并的萃取物用鹽水洗滌，干燥(na2so4)，過濾且濃縮，得到粗產(chǎn)物，通過fc(用含20％至100％?etoac的庚烷洗脫)純化該粗產(chǎn)物，得到呈白色固體狀的(3-((亞氨基(甲氧基)甲基)氨基)-3-氧代丙基)氨基甲酸叔丁酯。lc-ms?i：tr＝0.64min；[m+h]+＝246.36。

479、步驟2：向(3-((亞氨基(甲氧基)甲基)氨基)-3-氧代丙基)氨基甲酸叔丁酯(6.19g，24.7mmol)和nbs(10.56g，59.3mmol)于etoac(120ml)中的室溫溶液中添加1,8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯(8.96ml，59.3mmol)，且將rm攪拌5小時(shí)。添加額外的1,8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯(1.85ml，12.4mmol)及nbs(2.2g，12.4mmol)，且持續(xù)攪拌16小時(shí)。過濾懸浮液，且將濾液用水、飽和nahco3水溶液和鹽水洗滌，之后將其蒸發(fā)至干燥。通過fc(用含20％至100％?etoac的庚烷洗脫)純化粗產(chǎn)物，得到呈無色油狀的(2-(3-甲氧基-1,2,4-噁二唑-5-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯。lc-ms?i：tr＝0.75min；[m+h]+＝244.33。

480、步驟3：向(2-(3-甲氧基-1,2,4-噁二唑-5-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(150mg，0.62mmol)于dcm(2ml)中的室溫溶液中添加含4mhcl的二噁烷(0.62ml，2.47mmol)且在室溫下攪拌rm持續(xù)4天，接著在50℃下攪拌6小時(shí)。蒸發(fā)混合物，得到呈白色固體狀的標(biāo)題化合物am-2。lc-ms?i：tr＝0.35min；[m+h]+＝144.21。

481、2-(3-甲氧基異噁唑-5-基)乙-1-胺鹽酸鹽(am-3)

482、步驟1：向3-(3-甲氧基異噁唑-5-基)丙酸(1.0g，5.55mmol)及tea(0.93ml，6.66mmol)于phme(25ml)中的室溫溶液中逐滴添加dppa(1.32ml，6.1mmol)，且將rm加熱至100℃持續(xù)1.5小時(shí)。添加2-甲基丙-2-醇(1.06ml，11.1mmol)，且將rm加熱至回流持續(xù)16小時(shí)。將rm冷卻至室溫且分配于飽和nahco3水溶液與etoac之間，且分離各層。用etoac(2x)再萃取水相且將經(jīng)合并的有機(jī)萃取物用鹽水洗滌，經(jīng)na2so4干燥，過濾且真空蒸發(fā)。通過fc(用含0％至100％?etoac的庚烷洗脫)純化粗產(chǎn)物，得到呈無色油狀的(2-(3-甲氧基異噁唑-5-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯。lc-ms?f：tr＝1.80min；[m+h]+＝243.1。

483、步驟2：將含4m?hcl的二噁烷(13.7ml，54.7mmol)加入到(2-(3-甲氧基異噁唑-5-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(1.33g，5.47mmol)在二噁烷(30ml)中的室溫懸浮液中，將所得混合物加熱至50℃，持續(xù)4小時(shí)。將rm濃縮，并與et2o共蒸發(fā)，得到白色固體狀的標(biāo)題化合物am-3。lc-ms?i:tr＝0.42min；[m+h]+＝143.25。

484、2-(4-氟-3-甲氧基異噁唑-5-基)乙-1-胺鹽酸鹽(am-4)

485、步驟1：在微波管中，向am-3(402mg，2.25mmol)及dipea(0.47ml，2.7mmol)于二噁烷(12ml)中的室溫懸浮液中添加鄰苯二甲酸酐(354mg，2.36mmol)。將管密封且加熱至100℃持續(xù)48小時(shí)。向rm中添加水，且將混合物用1m?hcl酸化，且將產(chǎn)物用etoac萃取，干燥(mgso4)，過濾且濃縮，得到呈白色固體狀的2-(2-(3-甲氧基異噁唑-5-基)乙基)異吲哚啉-1,3-二酮(718mg)。lc-ms?b：tr＝0.85min；[m+h]+＝273.09。

486、步驟2：向2-(2-(3-甲氧基異噁唑-5-基)乙基)異吲哚啉-1,3-二酮(710mg，2.61mmol)于四亞甲基砜(21.7ml，226mmol)中的40℃溶液中添加二環(huán)辛烷雙四氟硼酸鹽(1.07g，2.87mmol)且將rm加熱至120℃持續(xù)18小時(shí)。將所得深褐色溶液冷卻至約50℃，接著將rm倒入預(yù)攪拌的h2o(30ml)中，隨后倒入etoac(10ml)中。分離兩個(gè)層，且將水層用etoac再萃取。將經(jīng)合并的有機(jī)萃取物用鹽水洗滌，干燥(na2so4)，過濾且濃縮。通過制備型hplc(酸性)純化得到呈無色油狀的2-(2-(4-氟-3-甲氧基異噁唑-5-基)乙基)異吲哚啉-1,3-二酮(89mg，12％)。lc-ms?b：tr＝0.90min；[m+h]+＝291.02。

487、步驟3：向2-(2-(4-氟-3-甲氧基異噁唑-5-基)乙基)異吲哚啉-1,3-二酮(85mg，0.293mmol)于etoh(3ml)中的室溫溶液中添加單水合肼(0.222ml，2.93mmol)且將rm加熱至80℃持續(xù)1小時(shí)。將rm冷卻至室溫，且形成白色沉淀。添加乙醚并研磨固體(副產(chǎn)物)，然后過濾并丟棄。將濾液用含4m?hcl的二噁烷酸化并濃縮，得到白色固體狀的標(biāo)題化合物am-4，其可原樣用于下一步驟。lc-ms?b:tr＝0.33min；[m+h]+＝161.08。

488、2-(5-環(huán)丙基-2h-四唑-2-基)乙-1-胺鹽酸鹽(am-5)

489、步驟1：將(2-溴乙基)氨基甲酸叔丁酯(53.2g，233mmol)加入到5-環(huán)丙基-2h-1,2,3,4-四唑(24.0g，211mmol)和k2co3(35.1g，254mmol)在mecn(480ml)中的室溫懸浮液中，并將rm加熱至50℃且保持18小時(shí)。濃縮rm，將殘余物分配在水和etoac之間并分離各層。用etoac(2x)再萃取水相，并用鹽水洗滌合并的有機(jī)萃取物，干燥(mgso4)，過濾并蒸發(fā)。粗產(chǎn)物經(jīng)fc純化(用含20％至80％etoac的庚烷洗脫)，得到無色油狀的(2-(5-環(huán)丙基-2h-四唑-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯。lc-ms?i:tr＝0.80min；[m+h]+＝254.35。

490、步驟2：將含4m?hcl的二噁烷(290ml，1.16mol)加入到(2-(5-環(huán)丙基-2h-四唑-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(29.45g,116mmol)于二噁烷(630ml)中的的室溫懸浮液中，將得到的混合物攪拌4天。將rm濃縮并與et2o共蒸發(fā)，得到白色固體狀的標(biāo)題化合物am-5(1.36g，94％)。lc-ms?i:tr＝0.44min；[m+h]+＝154.25。

491、(r)-(1-羥基-3-(6-甲氧基吡啶-2-基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(al-1)

492、步驟1：將nbuli(1.6m于己烷中，18.2ml，29.1mmol)逐滴加入(s)-2-異丙基-3,6-二甲氧基-2,5-二氫吡嗪(4.70g，24.2mmol)在thf(200ml)中的-78℃溶液中，并將rm攪拌30分鐘，然后逐滴加入2-(溴甲基)-6-甲氧基吡啶(5.0g，24.2mmol)在thf(20ml)中的溶液中。將rm攪拌10分鐘，然后用飽和nh4cl水溶液淬滅。升溫至室溫后，用水稀釋rm并用etoac(3x)萃取。將合并的有機(jī)萃取物用鹽水洗滌，干燥(mgso4)，過濾并蒸發(fā)。將粗產(chǎn)物通過fc純化(用含30％至100％etoac的庚烷洗脫)，得到黃色油狀的(2s,5r)-2-異丙基-3,6-二甲氧基-5-((6-甲氧基吡啶-2-基)甲基)-2,5-二氫吡嗪。lc-ms?b:tr＝0.83min；[m+h]+＝306.03。

493、步驟2：將1m?hcl水溶液(38.2ml，38.2mmol)加入到(2s，5r)-2-異丙基-3,6-二甲氧基-5-((6-甲氧基吡啶-2-基)甲基)-2,5-二氫吡嗪(5.8g，19.1mmol)在mecn(50ml)中的室溫溶液中，并將得到的混合物攪拌16小時(shí)。將rm分配在飽和nahco3水溶液和dcm之間，并分離各層。用dcm(2x)再萃取水相，并用鹽水洗滌合并的有機(jī)萃取物，干燥(na2so4)，過濾并蒸發(fā)。將粗產(chǎn)物通過fc純化(用含80％至100％etoac的庚烷洗脫)，得到黃色油狀的(r)-2-氨基-3-(6-甲氧基吡啶-2-基)丙酸甲酯。lc-ms?b:tr＝0.46min；[m+h]+＝211.26。

494、步驟3：將boc2o(2.61g，12.0mmol)加入到(r)-2-氨基-3-(6-甲氧基吡啶-2-基)丙酸甲酯(2.28g，10.8mmol)和nahco3(4.56g，54.2mmol)在thf(50ml)和h2o(50ml)的混合物中的室溫懸浮液中，并將rm攪拌1小時(shí)。用1m鹽酸水溶液酸化rm并用etoac(3x)萃取。將合并的有機(jī)萃取物干燥(mgso4)、過濾并濃縮，得到無色油狀的(r)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(6-甲氧基吡啶-2-基)丙酸甲酯。lc-ms?b:tr＝0.89min；[m+h]+＝311.25。

495、步驟4：將lah(906mg，22.7mmol)分批加入到(r)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(6-甲氧基吡啶-2-基)丙酸甲酯(3.52g，11.3mmol)在et2o(150ml)中的0℃溶液中，將rm加熱至室溫并攪拌1小時(shí)。將rm冷卻回0℃并非常小心地用h2o淬滅，然后加入etoac。將所得懸浮液加熱至室溫并過濾。分離各層，并用etoac(2x)再萃取水層。將合并的有機(jī)萃取物用鹽水洗滌，干燥(na2so4)，過濾并蒸發(fā)，得到無色油狀的標(biāo)題化合物al-1。lc-ms?b:tr＝0.62min；[m+h]+＝283.35。

496、(r)-(1-(6-溴吡啶-2-基)-3-羥基丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(al-2)

497、按照針對(duì)al-1所述的反應(yīng)順序制備標(biāo)題化合物，在步驟1中用2-溴-6-(溴甲基)吡啶代替2-(溴甲基)-6-甲氧基吡啶。lc-ms?b:tr＝0.76min；[m+h]+＝331.16。

498、(r)-(1-(6-溴-5-氟吡啶-2-基)-3-羥基丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(al-3)

499、按照針對(duì)al-1所述的反應(yīng)順序制備標(biāo)題化合物，在步驟1中用2-溴-6-(溴甲基)-3-氟吡啶代替2-(溴甲基)-6-甲氧基吡啶。lc-ms?i:tr＝0.84min；[m+h]+＝349.05。

500、(r)-(1-羥基-3-(噁唑-4-基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(al-4)

501、按照針對(duì)al-1所述的反應(yīng)順序制備標(biāo)題化合物，在步驟1中用4-(溴甲基)噁唑代替2-(溴甲基)-6-甲氧基吡啶。lc-ms?j:tr＝1.54min；[m+h-tbu]+＝187.0。

502、(r)-(1-(4,6-二甲氧基嘧啶-2-基)-3-羥基丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(al-5)

503、按照針對(duì)al-1所述的反應(yīng)順序制備標(biāo)題化合物，在步驟1中用2-(氯甲基)-4,6-二甲氧基嘧啶代替2-(溴甲基)-6-甲氧基吡啶。lc-ms?i:tr＝0.75min；[m+h]+＝314.11。

504、(r)-(1-(6-溴-4-甲氧基吡啶-2-基)-3-羥基丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(al-6)

505、步驟1：將zn粉(1.77g，26.5mmol)在真空下加熱至140℃并保持30分鐘，然后在氬氣下冷卻至室溫。加入碘(2.02g，7.96mmol)和dmf(10ml)，并將所得混合物攪拌20分鐘，然后加入boc-3-碘-d-ala-ome(3.0g，8.84mmol)并繼續(xù)攪拌另外20分鐘。加入2,6-二溴-4-甲氧基吡啶(3.07g，11.5mmol)和pdcl2(pph3)2(310mg,0.44mmol)，并將rm在50℃下攪拌16小時(shí)。將rm分配在水和etoac之間并過濾。分離各層，并用etoac(2x)再萃取水層。將合并的有機(jī)萃取物用鹽水洗滌，干燥(na2so4)，過濾并蒸發(fā)。粗產(chǎn)物通過fc純化(用含40％?etoac的庚烷洗脫)，得到無色油狀的(r)-3-(6-溴-4-甲氧基吡啶-2-基)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)丙酸甲酯。lc-ms?b:tr＝0.92min；[m+h]+＝389.25。

506、步驟2：按照針對(duì)al-1步驟4中描述的方法，由(r)-3-(6-溴-4-甲氧基吡啶-2-基)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)丙酸甲酯制備標(biāo)題化合物。lc-ms?b:tr＝0.78min；[m+h]+＝361.16。

507、(r)-(1-羥基-3-(6-甲氧基-4-甲基吡啶-2-基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(al-7)

508、按照針對(duì)al-6所述的反應(yīng)順序制備標(biāo)題化合物，在步驟1中用2-溴-6-甲氧基-4-甲基吡啶代替2,6-二溴-4-甲氧基吡啶。lc-ms?i:tr＝0.84min；[m+h]+＝297.22。

509、(r)-(1-(4,6-二甲氧基吡啶-2-基)-3-羥基丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(al-8)

510、按照針對(duì)al-6所述的反應(yīng)順序制備標(biāo)題化合物，在步驟1中用2-溴-4,6-二甲氧基吡啶代替2,6-二溴-4-甲氧基吡啶。lc-ms?b:tr＝0.55min；[m+h]+＝313.24。

511、(r)-(1-(6-溴-4-甲基吡啶-2-基)-3-羥基丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(al-9)

512、按照針對(duì)al-6所述的反應(yīng)順序制備標(biāo)題化合物，在步驟1中用2,6-二溴-4-甲基吡啶代替2,6-二溴-4-甲氧基吡啶。lc-ms?i:tr＝0.84min；[m+h]+＝347.17。

513、(r)-(1-羥基-3-(3-甲氧基苯基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(al-10)

514、按照針對(duì)al-1步驟4所述的程序，由boc-3-甲氧基-d-苯丙氨酸制備標(biāo)題化合物。lc-ms?i:tr＝0.83min；[m+h-tbu]+＝226.26。

515、(r)-(1-羥基-3-(6-甲氧基吡嗪-2-基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(al-11)

516、按照針對(duì)al-1所述的反應(yīng)順序制備標(biāo)題化合物，在步驟1中用2-(氯甲基)-6-甲氧基吡嗪代替2-(溴甲基)-6-甲氧基吡啶。lc-ms?b:tr＝0.70min；[m+h]+＝284.25。

517、(s)-6-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-碘丙氧基)-3-氟喹啉-5-羧酸苯甲酯(im-1)

518、步驟1：將diad(4.41ml,22.4mmol)加入到3-氟-6-羥基喹啉-5-羧酸苯甲酯(4.76g,16.0mmol)、(s)-4-(羥甲基)-2,2-二甲基噁唑烷-3-羧酸叔丁酯(5.0g,21.1mmol)和pph3(6.3g,24.0mmol)在thf(100ml)中的室溫溶液中，并將rm攪拌1小時(shí)。將rm分配在水和etoac之間并分離各層。用etoac(2x)再萃取水相，合并的有機(jī)萃取物用鹽水洗滌，干燥(mgso4)，過濾并蒸發(fā)。粗產(chǎn)物通過fc純化(用含20％至80％etoac的庚烷洗脫)，得到無色油狀的(s)-4-(((5-((芐氧基)羰基)-3-氟喹啉-6-基)氧基)甲基)-2,2-二甲基噁唑烷-3-羧酸叔丁酯。lc-ms?b:tr＝1.22min；[m+h]+＝511.31。

519、步驟2：將含4m?hcl的二噁烷(27ml，108mmol)加入到(s)-4-(((5-((芐氧基)羰基)-3-氟喹啉-6-基)氧基)甲基)-2,2-二甲基噁唑烷-3-羧酸叔丁酯(5.51g，10.8mmol)在二噁烷(60ml)中的室溫溶液中，將rm加熱至50℃，持續(xù)2天。蒸發(fā)混合物，用et2o研磨，得到白色固體狀的(r)-6-(2-氨基-3-羥基丙氧基)-3-氟喹啉-5-羧酸苯甲酯二鹽酸鹽。lc-msb:tr＝0.69min；[m+h]+＝371.26。

520、步驟3：將boc2o(2.81g,12.6mmol)在dcm(5ml)中的溶液逐滴加入(r)-6-(2-氨基-3-羥基丙氧基)-3-氟喹啉-5-羧酸苯甲酯二鹽酸鹽(5.32g,12.0mmol)和tea(8.35ml,60mmol)在dcm(40ml)中的0℃懸浮液中，將rm溫?zé)嶂潦覝夭嚢?小時(shí)。用1m檸檬酸水溶液酸化rm并分離各層。用dcm(2x)再萃取水相，并將合并的有機(jī)萃取物用鹽水洗滌，干燥(na2so4)，過濾并蒸發(fā)，得到黃色油狀的(r)-6-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-羥基丙氧基)-3-氟喹啉-5-羧酸苯甲酯。lc-ms?b:tr＝1.03min；[m+h]+＝471.31。

521、步驟4：將碘珠(1-3mm,2.37g,9.35mmol)分批加入到pph3(2.58g,9.35mmol)和咪唑(637mg,9.35mmol)在dcm(45ml)中的室溫溶液中，并將得到的混合物攪拌15分鐘，然后逐滴加入(r)-6-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-羥基丙氧基)-3-氟喹啉-5-羧酸苯甲酯在dcm(19ml)中的溶液，繼續(xù)攪拌3小時(shí)。將rm分配在飽和nahco3水溶液和dcm之間，分離各層。用dcm(2x)再萃取水相，將合并的有機(jī)萃取物用鹽水洗滌，干燥(na2so4)，過濾并蒸發(fā)。粗產(chǎn)物通過fc純化(用含20％至80％etoac的庚烷洗脫)，得到黃色油狀的標(biāo)題化合物im-1。lc-msb:tr＝1.18min；[m+h]+＝581.19。

522、(s)-3-氨基-4-((2-(4-甲氧基-2h-1,2,3-三唑-2-基)乙基)氨基)-4-氧代丁酸叔丁酯(a-1)

523、步驟1：將hatu(3.20g,8.42mmol)加入到fmoc-l-天冬氨酸β-叔丁基酯(3.54g,8.42mmol)、2-(4-甲氧基-2h-1,2,3-三唑-2-基)乙-1-胺鹽酸鹽(am-1,1.6g,8.42mmol)和dipea(6.34ml,33.7mmol)在dmf(27ml)中的室溫溶液中，并將rm攪拌1小時(shí)。將rm分配在水和etoac之間并分離各層。水相用etoac(2x)再萃取，將合并的有機(jī)萃取物用飽和nahco3水溶液、鹽水洗滌，用na2so4干燥，過濾并蒸發(fā)，得到白色固體狀的(s)-3-((((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-4-((2-(4-甲氧基-2h-1,2,3-三唑-2-基)乙基)氨基)-4-氧代丁酸叔丁酯。lc-ms?i:tr＝1.10min；[m+h]+＝536.28。

524、步驟2：將哌啶(4.29ml，42.9mmol)加入到將(s)-3-((((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-4-((2-(4-甲氧基-2h-1,2,3-三唑-2-基)乙基)氨基)-4-氧代丁酸叔丁酯(5.29g,8.58mmol)在dcm(67ml)中的室溫溶液中，并將rm攪拌3小時(shí)。濃縮rm，殘余物直接通過fc純化(用dcm中的10％?meoh洗脫)，得到黃色油狀的標(biāo)題化合物a-1。lc-ms?i:tr＝0.65min；[m+h]+＝314.27。

525、下表1-a中列出的是構(gòu)建嵌段a，其制備方式類似于上述針對(duì)a-1的2步驟的順序。

526、表1-a

527、

528、

529、(r)-6-(2-氨基-3-苯基丙氧基)-3-氟喹啉-5-甲酸苯甲酯二鹽酸鹽(b-1)

530、步驟1：向3-氟喹啉-6-醇(0.50g，3.06mmol)及naoac(0.30g，3.68mmol)于acoh(20ml)中的室溫溶液中添加br2(0.17ml，3.37mmol)于acoh(8.0ml)中的溶液，且將rm攪拌30分鐘。將rm濃縮至干燥，將殘余物分配于飽和nahco3水溶液與etoac之間并萃取。分離各層，且用etoac(2×)再萃取水層。將經(jīng)合并的有機(jī)萃取物用鹽水洗滌，干燥(na2so4)，過濾且蒸發(fā)，得到呈褐色固體狀的5-溴-3-氟喹啉-6-醇。lc-ms?g：tr＝1.38min；[m+h]+＝239.9。

531、步驟2：向nah在礦物油中的60％分散液(0.17g，4.29mmol)于thf(15ml)中的室溫懸浮液中逐滴添加5-溴-3-氟喹啉-6-醇(0.74g，3.06mmol)于thf(15ml)中的溶液且攪拌所得混合物15分鐘，之后在0℃下逐滴添加甲氧基甲基溴(0.3ml，3.67mmol)。在0℃下攪拌1.5小時(shí)之后，通過添加h2o淬滅rm且用etoac萃取。將有機(jī)層用nahco3、鹽水洗滌，干燥(na2so4)，過濾并蒸發(fā)。通過fc(用含2％至30％?etoac的庚烷洗脫)純化粗產(chǎn)物，得到呈無色油狀的5-溴-3-氟-6-(甲氧基甲氧基)喹啉。lc-ms?j：tr＝2.03min；無電離。

532、步驟3：向5-溴-3-氟-6-(甲氧基甲氧基)喹啉(300mg，1.05mmol)于thf(18ml)中的-78℃溶液中逐滴添加nbuli(1.6m于己烷中，0.98ml，1.57mmol)，且將rm攪拌30分鐘。將rm用新近碾磨的干冰(1.0g，22.7mmol)淬滅，且接著升溫至室溫且攪拌30分鐘。真空濃縮rm且將中間物羧酸鋰溶解于dmf(4ml)中，隨后添加khco3(31.5mg，0.315mmol)及bnbr(0.15ml，1.26mmol)，且將rm在室溫下攪拌16小時(shí)。將rm分配于飽和nahco3水溶液與etoac之間并萃取。分離各層，且用etoac(2x)再萃取水層。將經(jīng)合并的有機(jī)萃取物用鹽水洗滌，干燥(na2so4)，過濾且蒸發(fā)。通過制備型hplc(堿性)純化粗產(chǎn)物，得到呈黃色油狀的3-氟-6-(甲氧基甲氧基)喹啉-5-甲酸苯甲酯。lc-ms?j：tr＝2.08min；[m+h]+＝342.10。

533、步驟4：向3-氟-6-(甲氧基甲氧基)喹啉-5-甲酸苯甲酯(107mg，0.31mmol)于dcm(3ml)中的室溫溶液中添加tfa(0.24ml，3.13mmol)，且攪拌所得混合物2小時(shí)。真空濃縮rm，將殘余物溶解于etoac中，且用飽和nahco3水溶液萃取。用etoac萃取水層且將經(jīng)合并的有機(jī)萃取物用鹽水洗滌，干燥(naso4)，過濾且濃縮，得到呈略微淡褐色油狀的3-氟-6-羥基喹啉-5-甲酸苯甲酯。lc-ms?j：tr＝2.06min；[m+h]+＝298.1。

534、步驟5：向3-氟-6-羥基喹啉-5-甲酸苯甲基酯(93.8mg，0.31mmol)、(r)-(1-羥基-3-苯基丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(82mg，0.33mmol)和pph3(86mg，0.33mmol)于thf(2ml)中的0℃混合物中添加diad(0.064ml，0.33mmol)，且將rm在室溫下攪拌16小時(shí)。濃縮混合物且通過fc(用含20％至60％?etoac的庚烷洗脫)直接純化殘余物，得到呈無色油狀的(r)-6-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-苯基丙氧基)-3-氟喹啉-5-甲酸苯甲酯。lc-ms?j：tr＝2.39min；[m+h]+＝531.2。

535、步驟6：向(r)-6-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-苯基丙氧基)-3-氟喹啉-5-甲酸苯甲酯(94mg，0.18mmol)于二噁烷(3ml)中的溶液中添加含4m?hcl的二噁烷(0.44ml，1.77mmol)，且將rm在室溫下攪拌24小時(shí)。真空移除揮發(fā)物，且將殘余物用et2o(3x)研磨，得到呈白色固體狀的標(biāo)題化合物b-1。lc-ms?j：tr＝2.10min；[m+h]+＝431.2。

536、(r)-6-(2-氨基-3-(6-甲氧基吡啶-2-基)丙氧基)-3-氟喹啉-5-羧酸苯甲酯二鹽酸鹽(b-2)

537、標(biāo)題化合物由3-氟-6-羥基喹啉-5-羧酸苯甲酯(b-1，步驟1-4)和(r)-(1-羥基-3-(6-甲氧基吡啶-2-基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(al-1)按照b-1中描述的步驟5和6制備。lc-ms?b:tr＝0.83min；[m+h]+＝462.29。

538、(r)-6-(2-氨基-3-(6-溴吡啶-2-基)丙氧基)-3-氟喹啉-5-羧酸苯甲酯二鹽酸鹽(b-3)

539、標(biāo)題化合物由3-氟-6-羥基喹啉-5-羧酸苯甲酯(b-1，步驟1-4)和(r)-(1-(6-溴吡啶-2-基)-3-羥基丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(al-2)按照b-1中描述的步驟5和6制備。lc-msb:tr＝0.83min；[m+h]+＝510.17。

540、(r)-6-(2-氨基-3-(6-溴-5-氟吡啶-2-基)丙氧基)-3-氟喹啉-5-羧酸苯甲酯二鹽酸鹽(b-4)

541、標(biāo)題化合物由3-氟-6-羥基喹啉-5-羧酸苯甲酯(b-1，步驟1-4)和(r)-(1-(6-溴-5-氟吡啶-2-基)-3-羥基丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(al-3)按照b-1中描述的步驟5和6制備。lc-ms?i:tr＝1.09min；[m+h]+＝530.06。注意：還含有作為副產(chǎn)物的(r)-6-(2-氨基-3-(6-氯-5-氟吡啶-2-基)丙氧基)-3-氟喹啉-5-羧酸苯甲酯二鹽酸鹽。lc-ms?i:tr＝1.08min；[m+h]+＝484.13。

542、(r)-6-(2-氨基-3-(噁唑-4-基)丙氧基)-3-氟喹啉-5-羧酸酯2,2,2-三氟乙酸苯甲酯(b-5)

543、標(biāo)題化合物由3-氟-6-羥基喹啉-5-羧酸苯甲酯(b-1，步驟1-4)和(r)-(1-羥基-3-(噁唑-4-基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(al-4)按照b-1中描述的步驟5和6，使用tfa代替hcl進(jìn)行boc脫保護(hù)來制備。lc-ms?j:tr＝1.88min；[m+h]+＝422.2。

544、(r)-6-(2-氨基-3-(6-甲基吡啶-2-基)丙氧基)-3-氟喹啉-5-羧酸苯甲酯二鹽酸鹽(b-6)

545、步驟1：將鋅粉(30.0mg,0.45mmol)在真空下加熱至120℃，持續(xù)20分鐘，然后在氬氣下冷卻至70℃。加入碘(2.8mg,0.011mmol)和dmf(1.0ml)，并將所得混合物攪拌20分鐘。冷卻至50℃后，將溶液冷卻至70℃，加入(s)-6-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-碘丙氧基)-3-氟喹啉-5-羧酸苯甲酯(im-1)(130mg,0.22mmol)在dmf(1.0ml)中的溶液，并繼續(xù)攪拌20分鐘。加入2-溴-6-甲基吡啶(33.8μl,0.291mmol)、pd2(dba)3(10.3mg,0.011mmol)和xphos(21.4mg,0.045mmol)，并將rm在50℃下攪拌2小時(shí)。將rm分配在水和etoac之間并通過whatman過濾器過濾。分離各層，并用etoac(2x)再萃取水層。將合并的有機(jī)萃取物用鹽水洗滌，干燥(na2so4)，過濾并蒸發(fā)。粗產(chǎn)物通過制備型hplc(堿性)純化，得到無色油狀的(r)-6-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(6-甲基吡啶-2-基)丙氧基)-3-氟喹啉-5-羧酸苯甲酯。lc-msb:tr＝0.88min；[m+h]+＝546.14。

546、步驟2：將含4m?hcl的二噁烷(1.5ml，1.58mmol)加入到(r)-6-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(6-甲基吡啶-2-基)丙氧基)-3-氟喹啉-5-羧酸苯甲酯(43mg,0.079mmol)在二噁烷(3ml)中的室溫溶液中，將rm在室溫下攪拌16分鐘。蒸發(fā)混合物，得到白色固體狀的標(biāo)題化合物b-6。lc-ms?b:tr＝0.70min；[m+h]+＝446.28。

547、(r)-6-(2-氨基-3-(5-氟-6-甲基吡啶-2-基)丙氧基)-3-氟喹啉-5-羧酸苯甲酯二鹽酸鹽(b-7)

548、標(biāo)題化合物由(s)-6-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-碘丙氧基)-3-氟喹啉-5-羧酸苯甲酯(im-1)和2-溴-5-氟-6-甲基吡啶按照針對(duì)b-6描述的步驟制備。lc-ms?b:tr＝0.84min；[m+h]+＝564.19。

549、(r)-6-(2-氨基-3-(4,6-二甲氧基嘧啶-2-基)丙氧基)-3-氟喹啉-5-羧酸苯甲酯雙(2,2,2-三氟乙酸酯)(b-8)

550、標(biāo)題化合物由3-氟-6-羥基喹啉-5-羧酸苯甲酯(b-1，步驟1-4)和(r)-(1-(4,6-二甲氧基嘧啶-2-基)-3-羥基丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(al-5)按照針對(duì)b-1描述的步驟5和6，使用tfa代替hcl進(jìn)行boc脫保護(hù)來制備。lc-ms?i:tr＝1.02min；[m+h]+＝493.22。

551、(r)-6-(2-氨基-3-(4,6-二甲氧基吡啶-2-基)丙氧基)-3-氟喹啉-5-羧酸苯甲酯雙(2,2,2-三氟乙酸酯)(b-9)

552、標(biāo)題化合物由3-氟-6-羥基喹啉-5-羧酸苯甲酯(b-1，步驟1-4)和(r)-(1-(4,6-二甲氧基吡啶-2-基)-3-羥基丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(al-8)按照針對(duì)b-1描述的步驟5和6，使用tfa代替hcl進(jìn)行boc脫保護(hù)來制備。lc-ms?b:tr＝0.84min；[m+h]+＝492.25。

553、(r)-6-(2-氨基-3-(6-甲氧基-4-甲基吡啶-2-基)丙氧基)-3-氟喹啉-5-羧酸苯甲酯雙(2,2,2-三氟乙酸酯)(b-10)

554、標(biāo)題化合物由3-氟-6-羥基喹啉-5-羧酸苯甲酯(b-1，步驟1-4)和(r)-(1-羥基-3-(6-甲氧基-4-甲基吡啶-2-基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(al-7)按照針對(duì)b-1描述的步驟5和6，使用tfa代替hcl進(jìn)行boc脫保護(hù)來制備。lc-ms?i:tr＝1.07min；[m+h]+＝476.20。

555、(r)-6-(2-氨基-3-(6-溴-4-甲氧基吡啶-2-基)丙氧基)-3-氟喹啉-5-羧酸苯甲酯二鹽酸鹽(b-11)

556、標(biāo)題化合物由3-氟-6-羥基喹啉-5-羧酸苯甲酯(b-1，步驟1-4)和(r)-(1-(6-溴-4-甲氧基吡啶-2-基)-3-羥基丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(al-6)按照針對(duì)b-1描述的步驟5和6制備。lc-ms?i:tr＝1.05min；[m+h]+＝540.24。

557、(r)-6-(2-氨基-3-(4-甲氧基-6-甲基吡啶-2-基)丙氧基)-3-氟喹啉-5-羧酸苯甲酯二鹽酸鹽(b-12)

558、步驟1：將在甲苯(0.36ml,0.72mmol)中的pd(dppf)cl2·dcm(4.0mg,0.005mmol)和znme2?2m加入到(r)-6-(3-(6-溴-4-甲氧基吡啶-2-基)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)丙氧基)-3-氟喹啉-5-羧酸苯甲酯(b-11，步驟-1)(210mg，0.33mmol)在二噁烷(6ml)中的室溫溶液中，將rm加熱至80℃，持續(xù)4小時(shí)。將rm分配在水和etoac之間并通過whatman過濾器過濾。分離各層，并將水層用etoac(2x)再萃取。將合并的有機(jī)萃取物用鹽水洗滌，干燥(na2so4)，過濾并蒸發(fā)。粗產(chǎn)物通過制備型hplc(堿性)純化，得到無色油狀的(r)-6-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-甲氧基-6-甲基吡啶-2-基)丙氧基)-3-氟喹啉-5-羧酸苯甲酯。lc-ms?b:tr＝0.90min；[m+h]+＝576.36。

559、步驟2：標(biāo)題化合物由(r)-6-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-甲氧基-6-甲基吡啶-2-基)丙氧基)-3-氟喹啉-5-羧酸苯甲酯按照針對(duì)b-6步驟2描述的程序制備。lc-ms?b:tr＝0.65min；[m+h]+＝476.30。

560、(r)-6-(2-氨基-3-(6-溴-4-甲基吡啶-2-基)丙氧基)-3-氟喹啉-5-羧酸苯甲酯二鹽酸鹽(b-13)

561、標(biāo)題化合物由3-氟-6-羥基喹啉-5-羧酸苯甲酯(b-1，步驟1-4)和(r)-(1-(6-溴-4-甲基吡啶-2-基)-3-羥基丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(al-9)按照針對(duì)b-1描述的步驟5和6制備。lc-ms?i:tr＝1.09min；[m+h]+＝524.22。

562、(r)-6-(2-氨基-3-(3-甲氧基苯基)丙氧基)-3-氟喹啉-5-羧酸苯甲酯二鹽酸鹽(b-14)

563、標(biāo)題化合物由3-氟-6-羥基喹啉-5-羧酸苯甲酯(b-1，步驟1-4)和(r)-(1-羥基-3-(3-甲氧基苯基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(al-10)按照針對(duì)b-1描述的步驟5和6制備。lc-ms?i:tr＝1.07min；[m+h]+＝461.32。

564、(r)-6-(2-氨基-3-苯基丙氧基)-3-甲基異喹啉-5-甲酸苯甲酯二鹽酸鹽(b-15)

565、步驟1：向2-羥基-4-甲氧基苯甲醛(16g，105mmol)和吡啶(42.5ml，526mmol)于dcm(70ml)中的-10℃溶液中逐滴添加三氟甲烷磺酸酐(26.2ml，158mmol)且將rm攪拌30分鐘。用冰水淬滅rm且用1m?hcl水溶液酸化，之后用etoac(2x)萃取。將經(jīng)合并的有機(jī)萃取物用鹽水洗滌，經(jīng)na2so4干燥，過濾且真空蒸發(fā)，得到呈黃色油狀的三氟甲烷磺酸2-甲酰基-5-甲氧苯酯。1h?nmr(400mhz,cdcl3)δ10.13(s,1h),7.95(d,j＝8.8hz,1h),7.03(dd,j＝8.7,2.3hz,1h),6.88(d,j＝2.3hz,1h),3.93(s,3h)。

566、步驟2：用ar吹掃三氟甲烷磺酸2-甲酰基-5-甲氧基苯酯(19.6g，66.4mmol)和tea(93ml，664mmol)于dmf(400ml)中的室溫溶液30分鐘。依次添加丙-1-炔(1m于dmf中，133ml，133mmol)、cui(1.27g，6.64mmol)和pd(pph3)4(5.0g，4.33mmol)，且將rm封閉攪拌2小時(shí)。經(jīng)由硅藻土墊過濾rm且部分地真空濃縮濾液，之后用etoac稀釋，且依次用1m?khso4溶液及鹽水洗滌且真空濃縮。通過fc(用含0％至30％?etoac的庚烷洗脫)純化粗產(chǎn)物，得到呈黃色固體狀的4-甲氧基-2-(丙-1-炔-1-基)苯甲醛。lc-ms?j：tr＝1.80min；[m+h]+＝175.1。

567、步驟3：在高壓釜中，用ar吹掃4-甲氧基-2-(丙-1-炔-1-基)苯甲醛(10.3g，58.8mmol)于meoh(350ml)中的室溫溶液5分鐘。添加含nh3?7m的meoh(150ml，1050mmol)，且在壓強(qiáng)到達(dá)2巴(bar)的情況下將rm加熱至65℃持續(xù)4小時(shí)。真空濃縮rm，且將殘余物與dcm(2x)共蒸發(fā)，得到呈褐色固體狀的6-甲氧基-3-甲基異喹啉。lc-ms?j：tr＝1.81min；[m+h]+＝174.1。

568、步驟4：向6-甲氧基-3-甲基異喹啉(5.0g，27.7mmol)于dcm(100ml)中的-78℃溶液中逐滴添加bbr3(1m于dcm中，55.4ml，55.4mmol)。移除冷卻浴，且將rm在室溫下攪拌30小時(shí)。將rm小心地淬滅至冷meoh中且真空濃縮。將殘余物與phme、etoac和dcm共蒸發(fā)，得到呈褐色固體狀的3-甲基異喹啉-6-醇。lc-ms?j：tr＝1.10min；[m+h]+＝160.1。

569、步驟5：向3-甲基異喹啉-6-醇(4.67g，19.4mmol)于chcl3(75ml)中的懸浮液中逐滴添加br2(1.3ml，25.3mmol)，且將rm攪拌2小時(shí)。添加etoac，且通過過濾收集固體，用etoac和庚烷洗滌。過濾殘余物通過使其懸浮于飽和nahco3水溶液中來中和且再過濾，接著用h2o和庚烷洗滌。將過濾殘余物懸浮于mecn中且蒸發(fā)，得到呈褐色固體狀的5-溴-3-甲基異喹啉-6-醇。lc-ms?j：tr＝1.02min；[m+h]+＝238.0。

570、步驟6：以與關(guān)于b1步驟5所描述的程序類似的方式，由5-溴-3-甲基異喹啉-6-醇和(r)-(1-羥基-3-苯基丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯制備(r)-(1-((5-溴-3-甲基喹啉-6-基)氧基)-3-苯基丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯。lc-ms?j：tr＝2.21min；[m+h]+＝471.1。

571、步驟7：用ar吹掃(r)-(1-((5-溴-3-甲基異喹啉-6-基)氧基)-3-苯基丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(2.5g，5.30mmol)、苯甲醇(2.76ml，26.5mmol)和dipea(2.78ml，15.9mmol)于phme(20ml)中的室溫溶液10分鐘。接著用co吹掃rm且在co氛圍下加熱至88℃，之后經(jīng)由注射泵(3毫升/小時(shí))添加pd(tbu3p)2(271mg，0.53mmol)于phme(5.5ml)中的溶液。將溫度升高至95℃且將rm在co氛圍下攪拌24小時(shí)。將rm冷卻至室溫且真空濃縮，且將殘余物分配于飽和nahco3水溶液與etoac之間且萃取。分離各層且用etoac(1x)再萃取水相，且將經(jīng)合并的有機(jī)層用鹽水洗滌，經(jīng)na2so4干燥，過濾且真空蒸發(fā)。通過fc(用含5％至65％?etoac的庚烷洗脫)純化粗產(chǎn)物，得到呈無色油狀的(r)-6-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-苯基丙氧基)-3-甲基異喹啉-5-甲酸苯甲酯。lc-ms?j：tr＝2.19min；[m+h]+＝527.2。

572、步驟8：以與針對(duì)b1，步驟6所描述的程序類似的方式，由(r)-6-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-苯基丙氧基)-3-甲基異喹啉-5-甲酸苯甲酯制備標(biāo)題化合物。lc-ms?j：tr＝1.95min；[m+h]+＝427.2。

573、(r)-6-(2-氨基-3-(3-甲氧基苯基)丙氧基)-3-甲基異喹啉-5-羧酸苯甲酯二鹽酸鹽(b-16)

574、以針對(duì)b-15所描述的程序類似的方式，在步驟6中將(r)-(1-羥基-3-苯基丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯替換為(r)-(1-羥基-3-(3-甲氧基苯基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(al-10)來制備標(biāo)題化合物。lc-ms?b:tr＝0.66min；[m+h]+＝457.19。

575、(r)-6-(2-氨基-3-(6-甲氧基吡嗪-2-基)丙氧基)-3-氟喹啉-5-羧酸苯甲酯二鹽酸鹽(b-17)

576、標(biāo)題化合物由3-氟-6-羥基喹啉-5-羧酸苯甲酯(b-1，步驟1-4)和(r)-(1-羥基-3-(6-甲氧基吡嗪-2-基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(al-11)按照針對(duì)b-1描述的步驟5和6制備。lc-ms?b:tr＝0.79min；[m+h]+＝463.30。

577、(r)-6-(2-氨基-3-(6-甲氧基吡啶-2-基)丙氧基)-8-氟喹啉-5-羧酸苯甲酯二鹽酸鹽(b-18)

578、步驟1：將br2(1.72ml,33.4mmol)逐滴加入8-氟-6-甲氧基喹啉(5.91g,33.4mmol)和naoac(3.28g,40mmol)在acoh(43ml)中的懸浮液中，并將rm攪拌30分鐘。通過添加10％的nahso3水溶液猝滅反應(yīng)，并用etoac(2x)萃取。將合并的有機(jī)萃取物用鹽水洗滌，干燥(na2so4)，過濾并濃縮。將黑色殘留物在mecn中加熱至70℃持續(xù)2小時(shí)，然后冷卻至0℃。通過過濾收集所得固體，真空干燥，得到棕色固體狀的5-溴-8-氟-6-甲氧基喹啉。lc-ms?i:tr＝0.86min；[m+h]+＝255.97。

579、步驟2：將bbr3(1m在dcm中,4892mg,19.5mmol)加入5-溴-8-氟-6-甲氧基喹啉(2000mg，7.81mmol)在dcm(35ml)中的室溫溶液中。在室溫下反應(yīng)68小時(shí)后，lcms顯示完全轉(zhuǎn)化為目標(biāo)化合物。小心地加入甲醇，在此淬滅步驟中產(chǎn)生大量熱量并形成固體。該固體通過過濾收集，充分干燥并鑒定為所需化合物：1.26g?5-溴-8-氟喹諾林-6-醇，為淺綠色固體。無需進(jìn)一步純化。lcms?i:tr＝0.28min；無電離no?ionization。

580、步驟3：將diad(1.39ml，6.94mmol)加入5-溴-8-氟喹啉-6-醇(1200mg，4.96mmol)、(r)-(1-羥基-3-(6-甲氧基吡啶-2-基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(al-1，1540mg，5.45mmol)和pph3(1970mg，7.44mmol)在thf(50ml)中的室溫溶液中。攪拌所得混合物并加熱至60℃持續(xù)18小時(shí)。將混合物蒸發(fā)至干，直接通過fc純化(用含10％至40％etoac的庚烷洗脫)，得到仍含有diad副產(chǎn)物的所需產(chǎn)物。化合物通過大規(guī)模制備型hplc(堿性條件)純化，得到750mg淡黃色油狀的(r)-(1-((5-溴-8-氟喹諾林-6-基)氧基)-3-(6-甲氧基吡啶-2-基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯。lc-ms?i?tr＝1.16min；[m+h]+＝505.96。

581、步驟4：將(r)-(1-((5-溴-8-氟喹啉-6-基)氧基)-3-(6-甲氧基吡啶-2-基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(290mg,0.573mmol)、苯甲醇(0.898ml,8.59mmol)和dipea(0.2ml,1.15mmol)溶解于無水thf(5.65ml)中。將所得混合物超聲處理直至完全溶解并用n2脫氣。同時(shí)，在單獨(dú)的密閉小瓶中制備pd(tbu3p)2(108mg,0.206mmol)在無水thf(6.73ml)中的溶液。在室溫下用手?jǐn)嚢枭畛壬芤海⒘⒓词褂盟萌芤海簩煞N溶液以相似的流速(0.313ml/min，p～12巴)泵送通過在vapourtec流動(dòng)化學(xué)系統(tǒng)上的25ml不銹鋼盤管，溫度為140℃，co壓強(qiáng)為～20巴；在不銹鋼盤管中停留40分鐘后，將混合物冷卻并脫氣；將收集的混合物真空濃縮。將殘余物溶解在mecn中，并通過wheatman過濾器過濾以除去任何殘留的鈀(0)。然后，通過fc(用10％至40％的etoac/庚烷洗脫)純化粗物質(zhì)以除去大部分苯甲醇，然后第二次通過大規(guī)模制備型hplc(堿性條件)純化，得到132mg無色油狀的(r)-6-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(6-甲氧基吡啶-2-基)丙氧基)-8-氟喹啉-5-羧酸苯甲酯。lcms?i:tr＝1.21min；[m+h]+＝561.90。

582、步驟5：將hcl(4n在二噁烷中，1.1ml，4.38mmol)加入到(r)-6-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(6-甲氧基吡啶-2-基)丙氧基)-8-氟喹啉-5-羧酸苯甲酯(225mg，0.43mmol)在二噁烷(2ml)中的室溫溶液中，并將所得混合物攪拌18小時(shí)。將反應(yīng)混合物充分蒸發(fā)至干，得到216mg黃色固體狀的(r)-6-(2-氨基-3-(6-甲氧基吡啶-2-基)丙氧基)-8-氟喹啉-5-羧酸苯甲酯二鹽酸鹽。lc-ms?i?tr＝0.97min；[m+h]+＝462.12。

583、(r)-1-(n-(叔丁氧羰基)-n-甲基-l-亮氨酰基)哌啶-2-羧酸(c-1)

584、步驟1：將hatu(7.74g,20.3mmol)分批加入到boc-n-甲基-l-亮氨酸(5.0g,20.3mmol)、(r)-哌啶-2-羧酸甲酯鹽酸鹽(3.73g,20.3mmol)和dipea(10.4ml,61mmol)在dmf(50ml)中的室溫溶液中，并將所得混合物攪拌1小時(shí)。加入水，用etoac(3x)萃取混合物。將合并的有機(jī)萃取物依次用飽和nahco3水溶液、水和鹽水洗滌，干燥(na2so4)，過濾并濃縮。通過fc純化(用含20％至50％etoac的庚烷洗脫)，得到無色油狀的(r)-1-(n-(叔丁氧羰基)-n-甲基-l-亮氨酰基)哌啶-2-羧酸甲酯。lc-ms?b:tr＝1.05min；[m+h]+＝371.51。

585、步驟2：將2m?naoh水溶液(15.0ml,29.7mmol)加入到(r)-1-(n-(叔丁氧羰基)-n-甲基-l-亮氨酰基)哌啶-2-羧酸甲酯(5.51g,14.9mmol)在meoh(45ml)中的室溫溶液中，并將混合物在50℃下攪拌3小時(shí)。真空除去揮發(fā)性物質(zhì)，用2m?hcl水溶液中和有機(jī)相，然后用dcm(3x)萃取。將合并的有機(jī)萃取物干燥(na2so4)、過濾并真空蒸發(fā)，得到白色固體狀的標(biāo)題化合物c-1。lc-ms?b:tr＝0.93min；[m+h]+＝357.51。

586、(s)-1-(2-((叔丁氧羰基)(甲基)氨基)-n,4-二甲基戊酰胺基)環(huán)丙烷-1-羧酸(c-2)

587、步驟1：將nah在礦物油中的60％分散液(2.52g，65.7mmol)加入1-(boc-氨基)環(huán)丙烷羧酸(4.5g,21.9mmol)在thf(250ml)中的0℃溶液中，將rm攪拌10分鐘，然后加入mei(5.51ml,87.7mmol)，在室溫下繼續(xù)攪拌16小時(shí)。用冷h2o淬滅反應(yīng)，用2m?hcl水溶液酸化，然后用dcm(3x)萃取。將合并的有機(jī)萃取物干燥(na2so4)、過濾并真空蒸發(fā)，得到白色固體狀的1-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)環(huán)丙烷-1-羧酸。lc-ms?b:tr＝0.71min；[m+h]+＝216.39。

588、步驟2：將k2co3(4.33g,31.4mmol)加入1-((叔丁氧羰基)(甲基)氨基)環(huán)丙烷-1-羧酸(4.5g，20.9mmol)和苯甲溴(2.79ml，23.0mmol)在mecn(100ml)中的室溫溶液中，并將所得混合物攪拌16小時(shí)。濃縮rm，將殘余物分配在水和dcm之間，并分離各層。用dcm(2x)再萃取水相，并用鹽水洗滌合并的有機(jī)萃取物，干燥(na2so4)，過濾并蒸發(fā)。通過fc純化(用含5％至12％etoac的庚烷洗脫)得到無色油狀的1-((叔丁氧羰基)(甲基)氨基)環(huán)丙烷-1-羧酸苯甲酯。lc-ms?b:tr＝1.02min；[m+h]+＝306.06。

589、步驟3：將含4m?hcl的二噁烷(36.0ml,144mmol)加入到1-((叔丁氧羰基)(甲基)氨基)環(huán)丙烷-1-羧酸苯甲酯(4.4g,14.4mmol)在二噁烷(60ml)中的的室溫溶液中，將得到的混合物加熱至50℃持續(xù)2小時(shí)。將rm濃縮，將殘余物與乙酸異丙酯一起研磨，過濾并在hv下干燥，得到白色固體狀的1-(甲基氨基)環(huán)丙烷-1-羧酸苯甲酯鹽酸鹽。lc-ms?b:tr＝0.54min；[m+h]+＝206.27。

590、步驟4：將hatu(5.06g,13.3mmol)分批加入到boc-n-甲基-l-亮氨酸(5.0g,20.3mmol)、1-(甲基氨基)環(huán)丙烷-1-羧酸苯甲酯鹽酸鹽(3.22g,13.3mmol)和dipea(9.1ml,53.2mmol)在mecn(50ml)中的室溫溶液中，并將所得混合物攪拌16小時(shí)。濃縮rm，將殘余物分配在水和dcm之間并分離各層。用dcm(2x)再萃取水相，用鹽水洗滌合并的有機(jī)萃取物，干燥(na2so4)，過濾并蒸發(fā)。通過fc純化(用含15％至24％?etoac的庚烷洗脫)得到橙色油狀的(s)-1-(2-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-n,4-二甲基戊酰胺基)環(huán)丙烷-1-羧酸苯甲酯。lc-ms?b:tr＝1.12min；[m+h]+＝433.15。

591、步驟5：將(s)-1-(2-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-n,4-二甲基戊酰胺)環(huán)丙烷-1-羧酸苯甲酯(14.2g,34.2mmol)在etoh(50ml)中的溶液用n2/真空(3x)吹掃，然后加入10％?pd/c(603mg,0.57mmol)。再惰性化三次后，連接h2氣球，將rm攪拌3小時(shí)。將混合物濃縮，通過硅藻土塞過濾，用etoh沖洗。將濾液濃縮，得到無色油狀的標(biāo)題化合物c-2。lc-msb:tr＝0.88min；[m+h]+＝343.26。

592、n-(n-(叔丁氧羰基)-n-甲基-l-亮氨酰)-n-甲基-d-丙氨酸(c-3)

593、標(biāo)題化合物由n-(叔丁氧羰基)-n-甲基-d-丙氨酸和boc-n-甲基-l-亮氨酸按照針對(duì)c-1所描述的2步順序來制備。lc-ms?b:tr＝0.88min；[m+h]+＝331.33.1h?nmr(400mhz,dmso)δ5.03–4.46(m,2h),2.95–2.83(m,2h),2.75–2.54(m,4h),1.58–1.44(m,2h),1.41(s,10h),1.31–1.23(m,3h),1.23–1.17(m,1h),0.94–0.84(m,6h)。

594、2-((s)-2-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-n,4-二甲基戊酰胺基)-4,4,4-三氟丁酸(c-4)

595、步驟1：向2-氨基-4,4,4-三氟丁酸甲酯鹽酸鹽(6.81g，31.1mmol)于meoh(20ml)中的室溫溶液中添加naoac(12.78g，0.156mol)、tfa(2.41ml，31.1mmol)和苯甲醛(3.34ml，32.7mmol)，且攪拌所得混合物1小時(shí)。隨后添加nabh3cn(2.27g，34.3mmol)且持續(xù)攪拌45分鐘。將混合物蒸發(fā)至干燥，隨后分配于h2o與dcm之間，且分離各層。用dcm萃取水層且將經(jīng)合并的有機(jī)萃取物干燥(na2so4)，過濾且蒸發(fā)，得到呈褐色油狀的2-(苯甲基氨基)-4,4,4-三氟丁酸甲酯，其按原樣用于下一步驟。lc-ms?i：tr＝0.96min；[m+h]+＝262.37。

596、步驟2：向2-(苯甲基氨基)-4,4,4-三氟丁酸甲酯(8.07g，30.9mmol)于meoh(100ml)中的室溫溶液中添加naoac(12.67g，155mmol)、tfa(2.39ml，30.9mmol)和甲醛(37％于h2o中，2.53ml，34mmol)，且在室溫下攪拌所得混合物1小時(shí)。隨后添加nabh3cn(2.25g，34.0mmol)且繼續(xù)攪拌。1.5小時(shí)之后，添加甲醛(37％于h2o中，0.46ml，6.18mmol)和nabh3cn(409mg，6.18mmol)且在室溫下再攪拌混合物2小時(shí)。將混合物蒸發(fā)至干燥，分配于h2o與dcm之間，且分離各層。用dcm再萃取水層且將經(jīng)合并的有機(jī)萃取物干燥(na2so4)，過濾且蒸發(fā)，得到呈褐色油狀的2-(苯甲基(甲基)氨基)-4,4,4-三氟丁酸甲基酯，其按原樣用于下一步驟。lc-ms?i：tr＝1.13min；[m+h]+＝276.45。

597、步驟3：將2-(苯甲基(甲基)氨基)-4,4,4-三氟丁酸甲酯(6.48g，23.5mmol)于etoh(200ml)中的溶液抽空/用ar(3x)吹掃，接著添加pd/c(1.25g，5mol％)。將rm抽空/用h2(3x)吹掃，且在h2氛圍下攪拌2.5小時(shí)。過濾混合物且用meoh沖洗。添加4m?hcl(5.89ml，23.5mmol)且將混合物蒸發(fā)至干燥，得到呈灰白色固體狀的4,4,4-三氟-2-(甲基氨基)丁酸甲酯鹽酸鹽，其按原樣用于下一步驟。lc-ms?i：tr＝0.60min；[m+h]+＝186.37。

598、步驟4：向boc-n-甲基-l-亮氨酸(6.24g，24.7mmol)、4,4,4-三氟-2-(甲基氨基)丁酸甲酯鹽酸鹽(5.47g，24.7mmol)和dipea(16.9ml，98.7mmol)于dmf(80ml)中的室溫溶液中逐份添加hatu(11.26g，29.6mmol)，且攪拌所得混合物1小時(shí)。添加水且用etoac(3x)萃取混合物。將經(jīng)合并的有機(jī)萃取物依次用飽和nahco3水溶液、h2o和鹽水洗滌，干燥(na2so4)，過濾且濃縮。通過fc(用含15％etoac的庚烷洗脫)純化得到呈淡黃色油狀的甲基-2-((s)-2-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-n,4-二甲基戊酰胺基)-4,4,4-三氟丁酸酯。lc-ms?b：tr＝1.06min；[m+h]+＝413.29。

599、步驟5：向甲基-2-((s)-2-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-n,4-二甲基戊酰胺基)-4,4,4-三氟丁酸酯(2.84g，6.88mmol)于meoh(10ml)中的室溫溶液中添加2m?naoh水溶液(6.9ml，13.8mmol)，且在室溫下攪拌混合物1.5小時(shí)。真空移除揮發(fā)物且用2m?hcl水溶液中和殘余物水溶液，之后用dcm(3x)萃取。將經(jīng)合并的有機(jī)層干燥(na2so4)，過濾且蒸發(fā)，得到呈白色固體狀的標(biāo)題化合物c-4。lc-ms?b:tr＝0.96min；[m+h]+＝399.29。

600、2-((s)-2-((叔丁氧羰基)(甲基)氨基)-n,4-二甲基戊酰胺)-4,4-二氟丁酸(c-5)

601、步驟1：將nah在礦物油中的60％分散液(982mg,25.6mmol)加入到rac-2-((叔丁氧羰基)氨基)-4,4-二氟丁酸(3.15g,12.5mmol)和mei(1.61ml,25.6mmol)在dmf(20ml)中的室溫溶液中。并將rm攪拌1小時(shí)。將rm分配在水和etoac之間并分離各層。用etoac(2x)再萃取水相，并用鹽水洗滌合并的有機(jī)萃取物，干燥(na2so4)，過濾并蒸發(fā)，得到黃色油狀的rac-甲基(r)-2-((叔丁氧羰基)(甲基)氨基)-4,4-二氟丁酸酯。lc-ms?b:tr＝0.88min；[m+h]+＝268.19。

602、步驟2：將tfa(10.0ml，131mmol)加入rac-甲基(r)-2-((叔丁氧羰基)(甲基)氨基)-4,4-二氟丁酸酯(3.34g,12.5mmol)在dcm(20ml)中的室溫溶液中，并將rm攪拌1小時(shí)。真空除去揮發(fā)物，殘余物與dcm(3x)共蒸發(fā)，得到rac-甲基(r)-4,4-二氟-2-(甲基氨基)丁酸酯2,2,2-三氟乙酸酯，其原樣用于下一步。lc-ms?b:tr＝0.28min；[m+h]+＝168.02。

603、步驟3和4：標(biāo)題化合物由rac-甲基(r)-4,4-二氟-2-(甲基氨基)丁酸酯2,2,2-三氟乙酸酯和boc-n-甲基-l-亮氨酸按照針對(duì)c-1描述的2步驟順序制備。lc-ms?b:tr＝0.91min；[m+h]+＝381.13。

604、(r)-2-((s)-2-((叔丁氧羰基)(甲基)氨基)-n,4-二甲基戊酰胺)-3-(3-(三氟甲基)-1,2,4-噁二唑-5-基)丙酸(c-6)

605、步驟1：將苯甲溴(4.71ml，38.8mmol)加入到boc-d-asp-ome(10.0g，38.8mmol)和dipea(26.6ml，155mmol)在dmf(71ml)中的室溫溶液中，并將rm加熱至50℃持續(xù)2小時(shí)。將rm冷卻至室溫，然后加入水和et2o并分離各層。用et2o(1x)萃取水層。用鹽水洗滌合并的有機(jī)層，干燥(mgso4)，過濾并濃縮。通過fc純化(用含0％至30％?etoac的庚烷洗脫)得到無色油狀的4-苯甲基1-甲基(叔丁氧羰基)-d-天冬氨酸。lc-ms?b:tr＝0.97min；[m+h]+＝337.96。

606、步驟2：將含4m?hcl的二噁烷(57.9ml，240mmol)加入到4-苯甲基1-甲基(叔丁氧羰基)-d-天冬氨酸(8.19g，24mmol)在二噁烷(42.3ml)中的的室溫溶液中，并將rm加熱至50℃持續(xù)30分鐘。將混合物冷卻至室溫，然后濃縮，得到黃色固體狀的4-苯甲基1-甲基d-天冬氨酸.hcl，其原樣用于下一步。lc-ms?b:tr＝0.53min；[m+h]+＝238.30。

607、步驟3：將hatu(10.38g，26.5mmol)加入到4-苯甲基1-甲基d-天冬氨酸鹽酸鹽(6.84g，22.1mmol)、boc-n-甲基-l-亮氨酸(5.58g，22.1mmol)和dipea(19.9ml，110mmol)在mecn(83ml)中的室溫溶液中，并將所得混合物攪拌10分鐘。將rm濃縮，并將殘余物分配在水和dcm之間，且分離各層。用dcm(2x)再萃取水相，并將合并的有機(jī)萃取物用鹽水洗滌，干燥(na2so4)，過濾并蒸發(fā)。通過fc純化(用含0％至40％etoac的庚烷洗脫)，得到黃色油狀的4-苯甲基1-甲基n-(叔丁氧羰基)-n-甲基-l-亮氨酰-d-天冬氨酸。lc-ms?b:tr＝1.10min；[m+h]+＝465.03。

608、步驟4：將nah在礦物油中的60％分散液(1.02g，26.5mmol)加入到4-苯甲基1-甲基n-(叔丁氧羰基)-n-甲基-l-亮氨酰-d-天冬氨酸(4.53g，8.83mmol)和mei(2.22ml，35.3mmol)在dmf(73ml)中的-20℃的溶液中。將得到的混合物在-20℃下攪拌15分鐘，然后用1m?hcl水溶液(224毫升)猝滅并用乙酸異丙酯稀釋。分離各層并用乙酸異丙酯(1x)萃取水層。將合并的有機(jī)萃取物干燥(mgso4)、過濾并濃縮。通過fc純化(用含10％至40％etoac的庚烷洗脫)，得到黃色油狀的4-苯甲基1-甲基n-(n-(叔丁氧羰基)-n-甲基-l-亮氨酰)-n-甲基-d-天冬氨酸。lc-ms?b:tr＝1.11min；[m+h]+＝479.16。

609、步驟5：將pd/c(10％,387mg,0.364mmol)加入到4-苯甲基1-甲基n-(n-(叔丁氧羰基)-n-甲基-l-亮氨酰)-n-甲基-d-天冬氨酸(3.89g,7.28mmol)在meoh(34ml)中的室溫溶液中，在室溫下將rm在氫氣氛圍中攪拌1小時(shí)。將rm過濾并濃縮，得到無色油狀的(r)-3-((s)-2-((叔丁氧羰基)(甲基)氨基)-n,4-二甲基戊酰胺)-4-甲氧基-4-氧代丁酸，其原樣用于下一步。lc-ms?b:tr＝0.89min；[m+h]+＝389.33。

610、步驟6：將pybop(9.86g,18.5mmol)加入到(r)-3-((s)-2-((叔丁氧羰基)(甲基)氨基)-n,4-二甲基戊酰胺)-4-甲氧基-4-氧代丁酸(6.0g,15.4mmol)、2,2,2-三氟-n'-羥基乙脒(3.12g,23.2mmol)和dipea(7.93ml,46.3mmol)在dcm(60ml)中的室溫溶液中，并將rm攪拌10分鐘。濃縮rm，將殘余物分配在水和etoac之間，分離各層。用etoac(2x)再萃取水相，并將合并的有機(jī)萃取物用nahco3飽和水溶液洗滌，干燥(na2so4)，過濾并蒸發(fā)，得到中間物，將其重新溶解在二噁烷(120ml)中并加熱至100℃，持續(xù)2天。將rm冷卻至室溫并濃縮，然后通過fc純化(含30％etoac的庚烷洗脫)得到黃色油狀的(r)-2-((s)-2-((叔丁氧羰基)(甲基)氨基)-n,4-二甲基戊酰胺)-3-(3-(三氟甲基)-1,2,4-噁二唑-5-基)丙酸甲酯。lc-ms?b:tr＝1.11min；[m+h]+＝581.08。

611、步驟7：將2m?lioh水溶液(34.5ml，69.1mmol)加入到(r)-2-((s)-2-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-n,4-二甲基戊酰胺)-3-(3-(三氟甲基)-1,2,4-噁二唑-5-基)丙酸甲酯(6.64g,13.8mmol)在meoh(200ml)中的室溫溶液中，并將rm攪拌15分鐘。將rm用dcm(50ml)稀釋，并用2m鹽酸水溶液酸化。分離各層，用dcm萃取水層。將合并的有機(jī)萃取物用鹽水洗滌，干燥(mgso4)，過濾并濃縮，得到白色固體狀的標(biāo)題化合物c-6。lc-ms?b:tr＝1.02min；[m+h]+＝467.11。

612、(r)-2-((s)-2-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-n,4-二甲基戊酰胺)-5,5,5-三氟戊酸(c-7)

613、步驟1：在氬氣下，將(r)-2-氨基-5,5,5-三氟-戊酸(1514mg，8.85mmol)懸浮于thf(25ml)和在h2o(30ml)中的k2co3(3231mg，23.4mmol)溶液的混合物中。將該溶液/懸浮液冷卻至0℃并逐滴加入boc2o(2.69ml，11.7mmol)在thf(5ml)中的溶液。將rm溫?zé)嶂潦覝夭嚢?6小時(shí)。將rm用水稀釋并用et2o萃取一次(丟棄)。通過添加固體檸檬酸將水層的ph調(diào)節(jié)至4，然后用dcm(3x)萃取。將合并的有機(jī)萃取物用鹽水洗滌，用mgso4干燥，過濾并在減壓下濃縮。將殘余物溶解在mecn中并用庚烷洗滌，然后濃縮至干，得到1.36g白色固體狀的(r)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-5,5,5-三氟戊酸；lc-ms?b:tr＝0.79min；[m+h]+＝272.18；1h?nmr(400mhz,dmso)δ:12.28-13.12(m,1h),7.25(d,j＝8.2hz,1h),3.92-4.09(m,1h),2.15-2.46(m,2h),1.73-1.94(m,2h),1.36-1.43(m,9h)

614、步驟2：將nah在礦物油中的60％分散液(285mg，11.5mmol)分批加入到(r)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-5,5,5-三氟戊酸(1360mg，5.01mmol)和mei(0.782ml，12.5mmol)在dmf(32ml)中的冰冷的溶液中。將rm攪拌并從0℃升溫至rt，持續(xù)4小時(shí)。在此階段，將rm冷卻回0℃并添加更多mei(0.344ml,5.52mmol)和nah(60.2mg,2.51mmol)：將所得rm在0℃下攪拌1小時(shí)以達(dá)到完全轉(zhuǎn)化。用飽和nh4cl水溶液淬滅混合物并用etoac(3x)萃取。將合并的有機(jī)萃取物用水和鹽水洗滌，用mgso4干燥，過濾并真空蒸發(fā)。將粗產(chǎn)物通過fc(含0->100％et2o的石油醚)純化，得到1.21g無色油狀的(r)-2-((叔丁氧羰基)(甲基)氨基)-5,5,5-三氟戊酸甲酯；lc-ms?b:tr＝0.97min；[m+h]+＝300.24。

615、步驟3：將tfa(3ml，39.2mmol)加入到(r)-2-((叔丁氧羰基)(甲基)氨基)-5,5,5-三氟戊酸甲酯(1208mg，4.04mmol)在dcm(6ml)中的溶液中。將rm在室溫下攪拌1小時(shí)，以使反應(yīng)完成。用dcm稀釋混合物，真空除去揮發(fā)物；將殘余物與dcm(3x)共蒸發(fā)，以得到1.21g無色油狀的(r)-5,5,5-三氟-1-甲氧基-n-甲基-1-氧代戊烷-2-銨2,2,2-三氟乙酸鹽，其原樣用于下一步。lc-ms?b:tr＝0.40min；[m+h]+＝200.31。

616、步驟4：在氬氣下，在室溫下將hatu(1615mg，4.25mmol)加入到(r)-5,5,5-三氟-1-甲氧基-n-甲基-1-氧代戊烷-2-銨2,2,2-三氟乙酸鹽(1209mg，3.86mmol)、boc-n-甲基-l-亮氨酸(1074mg，4.25mmol)和dipea(2.64ml，15.4mmol)在dmf(12ml)中的溶液中。將rm在室溫下攪拌1小時(shí)以達(dá)到反應(yīng)完成。將混合物分配在水和et2o之間。分離各層并用et2o(2x)進(jìn)一步萃取水相。將合并的有機(jī)萃取物用水和鹽水洗滌，用mgso4干燥，過濾并真空蒸發(fā)。粗產(chǎn)物通過fc純化(含0至80％etoac的庚烷，elsd監(jiān)測(cè))，得到1.51g無色油狀的(r)-2-((s)-2-((叔丁氧羰基)(甲基)氨基)-n,4-二甲基戊酰胺)-5,5,5-三氟戊酸甲酯。lc-ms?b:tr＝1.11min；[m+h]+＝427.36。

617、步驟5：在室溫下將1m?naoh(7ml，7mmol)加入到(r)-2-((s)-2-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-n,4-二甲基戊酰胺)-5,5,5-三氟戊酸甲酯(1505mg,3.52mmol)在二噁烷(14ml)中的溶液中。將rm在室溫下攪拌1小時(shí)以達(dá)到完全轉(zhuǎn)化。通過添加nh4cl中和rm，然后在減壓下除去二噁烷。剩余的水相懸浮液用檸檬酸(ph值約為3)酸化，然后用dcm(3x)萃取。將合并的有機(jī)層用mgso4干燥并在減壓下濃縮，得到1.48g在真空下起泡的無色油狀的標(biāo)題化合物c-7。lc-ms?b:tr＝0.99min；[m+h]+＝413.35。

618、(r)-2-((s)-2-((叔丁氧羰基)(甲基)氨基)-n,4-二甲基戊酰胺)-5,5-二氟己酸(c-8)

619、步驟1：在氬氣下，將nah在礦物油中的60％分散液(224mg，5.61mmol)在0℃下加入到(r)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-5,5-二氟己酸(695mg，2.55mmol)和mei(0.398ml，6.37mmol)在dmf(12ml)中的混合物中。將rm在室溫下攪拌6小時(shí)。在0℃下加入過量的mei(0.0795ml，1.27mmol)和nah(51mg，1.27mmol)，并將混合物進(jìn)一步攪拌1小時(shí)，以完全轉(zhuǎn)化為雙烷基化產(chǎn)物。用飽和nh4cl水溶液淬滅混合物并用etoac稀釋。分離各層，并用etoac(2x)進(jìn)一步萃取水層。將合并的有機(jī)萃取物依次用飽和na2s2o3水溶液、水和鹽水洗滌，用mgso4干燥，過濾并在真空中蒸發(fā)，得到986mg淡黃色油狀的粗的(r)-2-((叔丁氧羰基)(甲基)氨基)-5,5-二氟己酸甲酯，其原樣用于下一步。lc-ms?b:tr＝0.95min；[m+h]+＝296.32。

620、步驟2：將tfa(2ml，26.1mmol)加入(r)-2-((叔丁氧羰基)(甲基)氨基)-5,5-二氟己酸甲酯(836mg，2.15mmol)在dcm(4ml)中的溶液中。將rm在室溫下攪拌4小時(shí)，以使反應(yīng)接近完成。用dcm稀釋混合物，真空除去揮發(fā)物；將殘余物與dcm(3x)共蒸發(fā)，得到665mg淡黃色固體狀的(r)-5,5-二氟-1-甲氧基-n-甲基-1-氧代己烷-2-銨2,2,2-三氟乙酸鹽，其原樣用于下一步驟。lc-ms?b:tr＝0.42min；[m+h]+＝196.37。

621、步驟3：在n2下，在室溫下將hatu(899mg，2.37mmol)加入到(r)-5,5-二氟-1-甲氧基-n-甲基-1-氧代己烷-2-銨2,2,2-三氟乙酸鹽(665mg，2.15mmol)、boc-n-甲基-l-亮氨酸(598mg，2.37mmol)和dipea(1.84ml，10.8mmol)在dmf(10ml)中的混合物中。將rm在室溫下攪拌1小時(shí)以使反應(yīng)完成。將混合物在水和etoac之間分配。分離各層，并用etoac(2x)進(jìn)一步萃取水層。用水和鹽水洗滌合并的有機(jī)萃取物，用mgso4干燥，過濾并真空蒸發(fā)。將粗產(chǎn)物通過fc純化(在庚烷中的0至50％的etoac，elsd監(jiān)測(cè))，得到908mg無色油狀的(r)-2-((s)-2-((叔丁氧羰基)(甲基)氨基)-n,4-二甲基戊酰胺)-5,5-二氟己酸甲酯。lc-ms?b:tr＝1.08min；[m+h]+＝423.35。

622、步驟4：在室溫下將naoh?1m(4.3ml，4.3mmol)加入到(r)-2-((s)-2-((叔丁氧羰基)(甲基)氨基)-n,4-二甲基戊酰胺)-5,5-二氟己酸甲酯(1069mg，2.53mmol)在二噁烷(8.6ml)中的溶液中。將rm在室溫下攪拌30分鐘，以達(dá)到完全轉(zhuǎn)化。通過添加nh4cl中和rm，然后在減壓下除去溶劑。剩余的水相懸浮液用檸檬酸(ph值約為3)酸化，然后用dcm(3x)徹底萃取。將合并的有機(jī)層用mgso4干燥，減壓濃縮，在大量蒸發(fā)后得到1.03g白色泡沫狀的標(biāo)題化合物c-8。lc-ms?b:tr＝0.98min；[m+h]+＝409.43。

623、(rs)-2-((s)-2-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-n,4-二甲基戊酰胺)-4,4-二氟戊酸(c-9)

624、步驟1：在氬氣下，將2-氨基-4,4-二氟戊酸甲酯鹽酸鹽(1000mg，4.67mmol)溶解在thf(10ml)和h2o(10ml)的混合物中。加入nahco3(1960mg,23.3mmol)，然后加入boc2o(1122mg，5.14mmol)。將混合物在室溫下攪拌1小時(shí)以達(dá)到完全。用水稀釋rm并用etoac(4x)徹底萃取。將合并的有機(jī)萃取物用鹽水洗滌，用mgso4干燥，過濾并在減壓下濃縮，得到1.40g淺棕色油狀物的粗的rac-甲基(r)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-4,4-二氟戊酸酯；lc-msb:tr＝0.86min；[m+h]+＝268.26；1h?nmr(400mhz,dmso)δ7.41(d,j＝8.2hz,1h),4.21(m,1h),3.64(s,3h),2.45–2.17(m,2h),1.62(t,j＝19.2hz,3h),1.38(s,9h)。

625、步驟2：在氬氣下，將nah在礦物油中的60％分散液(221mg，5.76mmol)分批加入到粗rac-(r)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-4,4-二氟戊酸甲酯(1400mg，5.24mmol)和mei(0.362ml，5.76mmol)在dmf(10ml)中的室溫溶液中。將rm在室溫下攪拌1小時(shí)以達(dá)到完全轉(zhuǎn)化：混合物用飽和nh4cl水溶液淬滅并用etoac(3x)萃取。用水和鹽水洗滌合并的有機(jī)萃取物，用na2so4干燥，過濾并真空蒸發(fā)，得到m＝1.346g淡黃色油狀的粗的rac-甲基(r)-2-((叔丁氧羰基)(甲基)氨基)-4,4-二氟戊酸酯。粗產(chǎn)物無需純化即可原樣用于下一步驟；lc-msb:tr＝0.93min；[m+h]+＝282.25。

626、步驟3：將tfa(3.74ml，47.8mmol)加入到粗rac-甲基(r)-2-((叔丁氧羰基)(甲基)氨基)-4,4-二氟戊酸酯甲基(r)-2-((叔丁氧羰基)(甲基)氨基)-5,5,5-三氟戊酸酯(1346mg，4.78mmol)在dcm(10ml)中的溶液中。將rm在室溫下攪拌6小時(shí)以使反應(yīng)完成。用dcm稀釋混合物并在真空中除去揮發(fā)物；將殘余物與dcm(3x)共蒸發(fā)以得到1.83g淡橙色油狀的rac-甲基(r)-4,4-二氟-2-(甲基氨基)戊酸酯2,2,2-三氟乙酸酯，其原樣用于下一步驟。lc-ms?b:tr＝0.32-34min；[m+h]+＝182.31。

627、步驟4：在氬氣下，在室溫下將hatu(2593mg，6.82mmol)加入到rac-甲基(r)-4,4-二氟-2-(甲基氨基)戊酸酯2,2,2-三氟乙酸酯(1830mg，6.2mmol)、boc-n-甲基-l-亮氨酸(1568mg，6.2mmol)和dipea(3.18ml，18.6mmol)在dmf(20ml)中的溶液中。將rm在室溫下攪拌1小時(shí)以達(dá)到反應(yīng)完成。將混合物在h2o和etoac之間分配。分離各層，并用etoac(2x)進(jìn)一步萃取水相。用水和鹽水洗滌合并的有機(jī)萃取物，用na2so4干燥，過濾并真空蒸發(fā)。粗產(chǎn)物通過fc純化(在庚烷中的50％至100％的etoac，elsd監(jiān)測(cè))，得到1.66g淺黃色油狀的(rs)-2-((s)-2-((叔丁氧羰基)(甲基)氨基)-n,4-二甲基戊酰胺)-4,4-二氟戊酸甲酯。lc-ms?b:tr＝1.06min；[m+h]+＝409.33。

628、步驟5：在室溫下將1m?naoh(8.1ml，8.1mmol)加入到(rs)-2-((s)-2-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-n,4-二甲基戊酰胺)-4,4-二氟戊酸甲酯(1660mg,4.06mmol)在二噁烷(20ml)中的溶液中。將rm在60℃下攪拌1小時(shí)以達(dá)到完全轉(zhuǎn)化。通過添加nh4cl來中和rm，然后在減壓下除去二噁烷。通過逐滴添加2n?hcl水溶液(ph約為3)使剩余的水相懸浮液酸化，然后用dcm(3x)萃取。將合并的有機(jī)層用mgso4干燥并在減壓下濃縮，得到1.60g淡黃色油狀的標(biāo)題化合物c-9。lc-ms?b:tr＝0.95min；[m+h]+＝395.29。

629、式(i)化合物的合成

630、通用方法：gm-a

631、實(shí)施例1：(3s,7s,10r,13r)-13-苯甲基-20-氟-7-異丁基-n-(2-(4-甲氧基-2h-1,2,3-三唑-2-基)乙基)-6,9-二甲基-1,5,8,11-四氧代-10-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14-十四氫-[1]氧雜[4,7,10,14]四氮雜環(huán)十七烷并[16,17-f]喹啉-3-甲酰胺

632、步驟1：將hatu(1.03g，2.58mmol)添加至b-1(1.24g，2.46mmol)、c-1(980mg，2.46mmol)和dipea(1.26ml，7.38mmol)含在dmf(20ml)中的室溫溶液且攪拌該rm?30分鐘。將該rm分配在水與etoac之間，然后分離各層。以etoac(2x)再萃取該水相且用鹽水洗滌已合并的有機(jī)萃取物，干燥(na2so4)，過濾，然后蒸發(fā)。該粗產(chǎn)物通過制備型hplc(堿性)純化以得到呈白色固體的6-(((6s,9r,12r)-12-苯甲基-6-異丁基-2,2,5,8-四甲基-4,7,10-三氧代-9-(2,2,2-三氟乙基)-3-噁-5,8,11-三氮雜十三烷-13-基)氧基)-3-氟喹啉-5-甲酸芐酯。lc-ms?i：tr＝1.45min；[m+h]+＝811.73。備注：分離出白色固體狀的第2立體異構(gòu)體，6-(((6s,9s,12r)-12-苯甲基-6-異丁基-2,2,5,8-四甲基-4,7,10-三氧代-9-(2,2,2-三氟乙基)-3-噁-5,8,11-三氮雜十三烷-13-基)氧基)-3-氟喹啉-5-甲酸芐酯。lc-ms?i：tr＝1.43min；[m+h]+＝811.66。

633、步驟2：將6-(((6s,9r,12r)-12-苯甲基-6-異丁基-2,2,5,8-四甲基-4,7,10-三氧代-9-(2,2,2-三氟乙基)-3-噁-5,8,11-三氮雜十三烷-13-基)氧基)-3-氟喹啉-5-甲酸芐酯(519mg，0.61mmol)含在etoh(10ml)中的溶液抽真空/用n2(3x)凈化，然后添加10％?pd/c(32mg，5mol％)。將該rm抽真空/用h2(3x)凈化且在h2?atm下攪拌2小時(shí)。將該rm濾過硅藻土墊且在真空中濃縮該濾液以得到呈白色固體的6-(((6s,9r,12r)-12-苯甲基-6-異丁基-2,2,5,8-四甲基-4,7,10-三氧代-9-(2,2,2-三氟乙基)-3-噁-5,8,11-三氮雜十三烷-13-基)氧基)-3-氟喹啉-5-甲酸。lc-ms?i：tr＝0.73min；[m+h]+＝721.58。

634、步驟3：將hatu(134mg,0.35mmol)加入到6-(((6s,9r,12r)-12-苯甲基-6-異丁基-2,2,5,8-四甲基-4,7,10-三氧代-9-(2,2,2-三氟乙基)-3-氧雜-5,8,11-三氮雜十三烷-13-基)氧基)-3-氟喹啉-5-羧酸(244mg,0.34mmol)、a-1(113mg,0.34mmol)和dipea(0.18ml,1.0mmol)在dmf(5ml)中的室溫溶液，將rm攪拌1小時(shí)。然后通過制備型hplc(堿性)直接純化rm，以得到白色固體狀的(s)-3-(6-(((6s,9r,12r)-12-苯甲基-6-異丁基-2,2,5,8-四甲基-4,7,10-三氧代-9-(2,2,2-三氟乙基)-3-氧雜-5,8,11-三氮雜十三烷-13-基)氧基)-3-氟喹啉-5-甲酰胺基)-4-((2-(4-甲氧基-2h-1,2,3-三唑-2-基)乙基)氨基)-4-氧代丁酸叔丁酯。lc-ms?i:tr＝1.33min；[m+h]+＝1017.02。

635、步驟4：將tfa(3.3ml,42.8mmol)加入到(s)-3-(6-(((6s,9r,12r)-12-苯甲基-6-異丁基-2,2,5,8-四甲基-4,7,10-三氧代-9-(2,2,2-三氟乙基)-3-氧雜-5,8,11-三氮雜十三烷-13-基)氧基)-3-氟喹啉-5-甲酰胺基)-4-((2-(4-甲氧基-2h-1,2,3-三唑-2-基)乙基)氨基)-4-氧代丁酸叔丁酯(351mg,0.27mmol)在dcm(9ml)中的室溫溶液中，并將rm攪拌3小時(shí)。將rm真空濃縮，將殘余物重新溶解在dcm中，再次真空濃縮(2x)。將殘余物溶解在dmf(4ml)中，然后加入dipea(0.37ml，2.2mmol)和hatu(123mg，0.32mmol)，將rm攪拌1小時(shí)。將rm分配在水和etoac之間，分離各層。用etoac(2x)再萃取水相，用鹽水洗滌合并的有機(jī)萃取物，干燥(na2so4)，過濾并蒸發(fā)。粗產(chǎn)品通過制備型hplc(堿性)純化，得到白色固體狀的標(biāo)題化合物。lc-ms?i:tr＝1.06min；[m+h]+＝842.65。

636、下表mc-1列出了通式(i)化合物，這些化合物以類似于上述通用方法a(gm-a)中的方式由相應(yīng)的構(gòu)建嵌段a、b和c制備而成。下表中的*表示在合成期間分離的實(shí)施例化合物，由于手性中心的差向異構(gòu)化，該化合物最常通過對(duì)最終合成步驟的制備型hplc純化來分離為次要差向異構(gòu)體。在某些情況下，對(duì)映體或非對(duì)映體純構(gòu)建嵌段在合成期間進(jìn)行差向異構(gòu)化，且分離呈差向異構(gòu)體的混合物形式的實(shí)施例化合物。

637、表mc-1(gm-a)

638、

639、

640、

641、下面的實(shí)施例表中列出了根據(jù)上述方法制備的式(i)化合物的實(shí)施例。

642、實(shí)施例表

643、

644、

645、

646、

647、

648、

649、表3：實(shí)施例1至32的化合物的結(jié)構(gòu)

650、

651、表4：實(shí)施例33至58的化合物的結(jié)構(gòu)

652、

653、ii.生物學(xué)測(cè)定法

654、可使用此項(xiàng)技術(shù)中熟知的常規(guī)測(cè)定法進(jìn)一步表征本發(fā)明的化合物的一般藥代動(dòng)力學(xué)和藥理學(xué)特性，例如針對(duì)其在不同物種(諸如大鼠或狗)中的生物利用度；或使用此項(xiàng)技術(shù)中公知的常規(guī)測(cè)定法表征其關(guān)于藥物安全性的特性和/或毒理學(xué)特性，例如針對(duì)細(xì)胞色素p450酶抑制及時(shí)間依賴性抑制、孕烷x受體(pxr)活化、谷胱甘肽結(jié)合或光毒性。

655、生物學(xué)活體外分析法(in?vitro?assays)

656、化合物ec50和emax值的評(píng)估

657、根據(jù)以下實(shí)驗(yàn)方法測(cè)定式(i)化合物對(duì)cftr的校正劑活性。該方法測(cè)量過夜化合物培育對(duì)重組u2os細(xì)胞株(discoverx，#93-0987c3)中的f508del-cftr細(xì)胞表面表達(dá)的影響。該細(xì)胞株經(jīng)工程改造以共表達(dá)(i)經(jīng)prolink標(biāo)記的人類f508del-cftr(pk＝短β-半乳糖苷酶片段)以及(ii)定位至質(zhì)膜的β-半乳糖苷酶(酶受體；ea)的其余部分。與增加質(zhì)膜處的經(jīng)pk標(biāo)記的f508del-cftr的化合物一起培育將引起ea片段的互補(bǔ)，從而形成功能性β-半乳糖苷酶，通過化學(xué)發(fā)光反應(yīng)來定量該功能性β-半乳糖苷酶。

658、簡(jiǎn)言之，將細(xì)胞于20μl完全培養(yǎng)基(mc?coy's?5a(#36600-021，gibco)+10％?fbsgibco+青霉素/鏈霉素)中以3500個(gè)細(xì)胞/孔接種至384孔低容積盤(corning，#3826)中。將細(xì)胞在培育箱中培育5小時(shí)，隨后添加5微升/孔的化合物稀釋物系列(完全培養(yǎng)基中的5×工作儲(chǔ)備液)。分析法中的最終dmso濃度為0.25％。將細(xì)胞與化合物一起在培育箱中在37℃、5％?co2下共培育16小時(shí)。次日，在室溫下在暗處培育細(xì)胞盤2小時(shí)。接著，添加10微升/孔的閃光(flash)檢測(cè)試劑(discoverx，#93-0247)，在室溫下在暗處再培育盤30分鐘，且測(cè)量化學(xué)發(fā)光。使用化合物固有的最大功效作為上部平線區(qū)來產(chǎn)生濃度-反應(yīng)曲線，且根據(jù)這些crc，測(cè)定化合物固有ec50值。化合物特定emax值是參考校正劑魯瑪卡托的emax(emax魯瑪卡托＝100％)計(jì)算的。

659、所計(jì)算的ec50值可根據(jù)日常測(cè)定性能而波動(dòng)。此類波動(dòng)為本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的。來自若干測(cè)量的ec50值以幾何平均值給出。所計(jì)算的emax值可根據(jù)日常測(cè)定性能而波動(dòng)。此類波動(dòng)為本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的。來自若干測(cè)量的emax值以算術(shù)平均值給出。

660、生物學(xué)數(shù)據(jù)表：

661、

662、

663、評(píng)價(jià)式(i)化合物對(duì)酶cyp450?3a4對(duì)咪達(dá)唑侖羥基化的抑制作用。

664、使用咪達(dá)唑侖1'-羥基化作為標(biāo)記反應(yīng)研究了cyp3a4抑制。使用的咪達(dá)唑侖的單一濃度為5μm，約為其km(michaelis-menten常數(shù))，測(cè)試化合物在八種不同濃度下孵育，最高濃度為50μm。尼卡地平用作陽性對(duì)照。微粒體孵育通過添加nadph再生系統(tǒng)開始，并通過添加過量的冰冷有機(jī)溶劑終止。通過液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(lc/ms-ms)測(cè)量1'-羥基咪達(dá)唑侖的形成，并計(jì)算ic50值。

665、咪達(dá)唑侖cyp4503a4羥基化的抑制(ic50)表：

666、

667、

668、評(píng)價(jià)式(i)化合物對(duì)bsep轉(zhuǎn)運(yùn)通道的抑制作用。

669、使用0.2mm牛磺膽酸(tca，3h-tca和冷tca的混合物)作為模型底物，在囊泡攝取試驗(yàn)中研究了人類bsep抑制潛力。對(duì)于大鼠、狗和猴子的bsep抑制實(shí)驗(yàn)，tca濃度分別為2、0.2和0.2mm(3h-tca和冷tca的混合物)。

670、在5mm?atp或amp存在下孵育表達(dá)bsep/bsep(0.5mg總蛋白/ml)的倒置hek293衍生膜囊泡。孵育在以下條件下進(jìn)行：37℃，在囊泡轉(zhuǎn)運(yùn)緩沖液(2mm?hepes-tris,ph?7.4,50mm蔗糖，100mm?kno3，10mm?mg(no3)2)中，該緩沖液僅含有模型底物或含有模型底物與范圍從0.03mm到100mm的各種濃度的測(cè)試物品(ta)組合。人類、大鼠和猴子bsep/bsep的孵育時(shí)間為5分鐘，而狗bsep的孵育時(shí)間為2分鐘。通過以下方式停止tca的吸收：添加冰冷的洗滌緩沖液(110mm?tris-hcl,ph?7.4,50mm蔗糖和100mm?kno3)并使用快速過濾系統(tǒng)(millipore，瑞士祖格)通過硝酸纖維素膜過濾器(孔徑0.45mm)過濾膜懸浮液。用冰冷的洗滌緩沖液將保留在過濾器上的膜懸浮液洗滌兩次，然后轉(zhuǎn)移到閃爍瓶中。加入3.5ml閃爍混合物filter-count(perkin?elmer，瑞士蘇黎世)后，使用tri-carb?2300tr液體閃爍分析儀(packard?bioscience，瑞士蘇黎世)計(jì)算總放射性。在實(shí)驗(yàn)之前，用1mm?tca飽和硝酸纖維素過濾器。環(huán)孢菌素a(0.03mm至100mm)用作陽性對(duì)照。

671、在篩選試驗(yàn)中，每個(gè)濃度測(cè)試一次，而對(duì)于感興趣的化合物，重復(fù)試驗(yàn)，每個(gè)濃度測(cè)試三次。

672、bsep/bsep介導(dǎo)的凈攝取率計(jì)算為在atp或amp存在下獲得的攝取率之間的差異。凈攝取率以算術(shù)平均值和標(biāo)準(zhǔn)差(sd)表示(如適用)。

673、通過將抑制劑濃度(對(duì)數(shù)刻度)與凈攝取率作圖來評(píng)估抑制實(shí)驗(yàn)的數(shù)據(jù)。然后使用以下方程通過非線性回歸從圖中確定ic50值：

674、

675、其中y是凈攝取率[(pmol/(mg蛋白·min))，x是抑制劑濃度(mm)，s是反轉(zhuǎn)點(diǎn)的斜率，top和bottom是凈攝取率的最大值和最小值。最小值(bottom)被限制為0。對(duì)于所有圖形數(shù)據(jù)評(píng)估，使用graphpad?prism軟件包(版本8.1.1，graphpad?software?inc.,la?jolla,usa)。

676、計(jì)算出的ic50值可能會(huì)根據(jù)每日測(cè)定性能而波動(dòng)。本領(lǐng)域技術(shù)人員已知此類波動(dòng)。來自多次測(cè)量的ic50值以幾何平均值給出。

677、bsep轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抑制表：

678、

679、

680、參考文獻(xiàn)

681、boyle?mp?et?al(2014).lancet?respir?med?2(7):527-538.

682、dalemans?w?et?al(1991).nature?354:526-528.

683、davies?jc?et?al(2018).n?engl?j?med?379(17):1599-1611

684、de?boeck?k(2020).acta?paediatr?109(5):893-895

685、elborn?js(2016).lancet?388:2519-2531.

686、fiedorczuk?k?et?al(2022).cell?185(1):158-168.

687、flores?am?et?al(2016).faseb?j?30(5):1789-1797.

688、galietta?lv?et?al(2001).am?j?physiol?cell?physiol?281(5):c1734-1742.

689、hutt?dm?et?al(2011).acs?med?chem?lett?2(9):703-707.

690、keating?d?et?al(2018).n?engl?j?med?379(17):1612-1620.

691、le?grand?d?et?al(2021).j?med?chem?64(11):7241-7260.

692、marchesin?v?et?al(2023).//doi.org/10.1101/2023.08.15.552928

693、okiyoneda?t?et?al(2013).nat?chem?biol?9(7):444-454.

694、patel?sd?et?al(2020).eur?respir?rev?29(156):190068.

695、stevers?lm?et?al(2022).nat?commun?13:3586.

696、van?goor?f?et?al(2011).proc?natl?acad?sci?u?s?a?108(46):18843-18848.

697、veit?g?et?al(2018).nat?med?24(11):1732-1742.

698、veit?g?et?al(2020).jci?insight?5(18):e139983.