發(fā)明領(lǐng)域本公開內(nèi)容涉及多肽合成領(lǐng)域，更具體地涉及amg416或其藥學(xué)上可接受的鹽的合成。

背景技術(shù)：

0、發(fā)明背景

1、amg?416為合成的鈣敏感受體的八氨基酸選擇性肽拮抗劑。其開發(fā)作為患有慢性腎疾病-礦物質(zhì)和骨病癥(ckd-mbd)的血液透析患者中繼發(fā)性甲狀旁腺功能亢進(jìn)癥(shpt)的靜脈內(nèi)治療。

2、amg416的鹽酸鹽具有化學(xué)結(jié)構(gòu)：

3、

4、主鏈具有7個(gè)氨基酸，均為d-構(gòu)型。側(cè)鏈半胱氨酸殘基為l-構(gòu)型。amg?416(游離堿)的分子式為c38h73n21o10s2，并且具有1048.3da的計(jì)算平均分子量。

5、國際專利出版號(hào)wo?2011/014707中描述了amg?416和用于其制備的方法，所述專利出版通過引用結(jié)合到本文中用于任何目的。如國際專利出版號(hào)wo?2011/014707中所描述的，amg?416可通過固相合成從相應(yīng)的fmoc-保護(hù)的d-氨基酸裝配。從樹脂切割后，物料可用boc-l-cys(npys)-oh處理以形成二硫鍵。boc基團(tuán)可然后用三氟乙酸(tfa)去除，所得產(chǎn)物通過反相高壓液相色譜(hplc)純化并作為tfa鹽形式通過凍干法分離。tfa鹽可通過進(jìn)行后續(xù)的鹽交換程序轉(zhuǎn)換為藥學(xué)上可接受的鹽。這樣的程序?yàn)楸绢I(lǐng)域所熟知并且包括，例如，離子交換技術(shù)，任選隨后純化所得產(chǎn)物(例如通過反相液相色譜或反滲透)。

6、存在對(duì)生產(chǎn)amg?416或其藥學(xué)上可接受的鹽(例如，amg?416hcl)的有效方法，特別地適于商業(yè)規(guī)模制造的方法的需求。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

0、發(fā)明概述

1、鑒于上述問題，除了別的之外，本公開內(nèi)容的一個(gè)目標(biāo)為提供用于制備amg?416，或其藥學(xué)上可接受的鹽的方法。

2、在第一個(gè)方面，提供用于制備amg?416的方法，所述方法包括：提供具有選自fmoc-d-cys(trt)-d-ala-d-arg(pbf)-d-arg(pbf)-d-arg(pbf)-d-ala-d-arg(pbf)-[樹脂](seqid?no:2)和ac-d-cys(trt)-d-ala-d-arg(pbf)-d-arg(pbf)-d-arg(pbf)-d-ala-d-arg(pbf)-[樹脂](seq?id?no:3)的結(jié)構(gòu)的樹脂-結(jié)合的肽；從固體載體切割肽；和活化切割的肽的d-cys殘基的側(cè)鏈。

3、在第一個(gè)方面有關(guān)的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案中，切割和活化步驟在同一容器中發(fā)生。

4、在一個(gè)或多個(gè)進(jìn)一步的實(shí)施方案中，樹脂-結(jié)合的肽與包含水、三氟乙酸、三異丙基硅烷和二吡啶二硫化物的溶液接觸。

5、在第二個(gè)方面，提供用于制備amg?416的方法，所述方法包括：提供具有ac-d-cys(spy)-d-ala-d-arg-d-arg-d-arg-d-ala-d-arg-nh2(seq?id?no:4)結(jié)構(gòu)的肽；和使肽與l-cys接觸以產(chǎn)生綴合產(chǎn)物。

6、在第二個(gè)方面有關(guān)的一些實(shí)施方案中，肽與包含l-cys和三氟乙酸的水溶液接觸。

7、在第二個(gè)方面有關(guān)的一些進(jìn)一步的實(shí)施方案中，所述方法進(jìn)一步包括凍干綴合產(chǎn)物。

8、在又一些進(jìn)一步的實(shí)施方案中，第二個(gè)方面的方法進(jìn)一步包括使綴合產(chǎn)物與包含異丙醇(ipa)和鹽酸(hcl)的水溶液接觸，從而產(chǎn)生包含amg416?hcl的沉淀。

9、在第二個(gè)方面有關(guān)的又一個(gè)或多個(gè)進(jìn)一步的實(shí)施方案中，所述方法進(jìn)一步包括通過高效液相色譜(hplc)純化沉淀。

10、在又第三個(gè)方面提供用于制備amg?416的方法，所述方法包括：提供具有選自fmoc-d-cys(trt)-d-ala-d-arg(pbf)-d-arg(pbf)-d-arg(pbf)-d-ala-d-arg(pbf)-[樹脂](seq?id?no:2)和ac-d-cys(trt)-d-ala-d-arg(pbf)-d-arg(pbf)-d-arg(pbf)-d-ala-d-arg(pbf)-[樹脂](seq?id?no:3)的結(jié)構(gòu)的樹脂-結(jié)合的肽；從固體載體切割肽，即，以提供無支持的肽，和活化無支持的肽的d-cys殘基的側(cè)鏈以產(chǎn)生amg?416?spy中間體(其中spy為2-吡啶亞磺酰基或s-pyr)，在水性0.1％tfa(三氟乙酸溶液)中溶解amg?416?spy中間體，和通過hplc純化amg?416?spy衍生物。

11、在第三個(gè)方面有關(guān)的一些實(shí)施方案中，所述方法進(jìn)一步包括amg?416?spy中間體的共沸蒸餾，從而引起溶劑交換以產(chǎn)生amg?416?spy在新溶劑，例如，水和異丙醇中的溶液。

12、在第三個(gè)方面有關(guān)的又一些額外的實(shí)施方案中，所述方法進(jìn)一步包括使amg?416spy的異丙醇-水溶液，在一些實(shí)施方案中以其三氟乙酸鹽的形式，與包含l-cys的水溶液接觸。

13、在第四個(gè)方面，提供用于制備h-d-arg(pbf)-oh，即用于本文所提供的某些合成方法的合適的起始材料的方法。

14、在第四個(gè)方面有關(guān)的一些實(shí)施方案中，所述方法包括在nai(碘化鈉)存在下將boc-d-arg-oh轉(zhuǎn)化為boc-d-arg(pbf)-oh。在又一些進(jìn)一步的實(shí)施方案中，碘化鈉以約5％mol的濃度存在。

15、在第四個(gè)方面有關(guān)的一些額外的實(shí)施方案中，所述方法進(jìn)一步包括將boc-d-arg(pbf)-oh轉(zhuǎn)化為d-arg(pbf)-oh，并在ipa/水溶劑系統(tǒng)中結(jié)晶d-arg(pbf)-oh。

16、本文所述方法的額外的實(shí)施方案將從下列說明書、實(shí)施例和權(quán)利要求顯而易見。如可從前面和后面的描述理解的，本文所描述的每一個(gè)特征，和兩個(gè)或更多個(gè)這種特征的每一個(gè)組合，包括在本公開內(nèi)容的范圍內(nèi)，只要這種組合中包含的特征不互相矛盾。另外，可從本發(fā)明的任何實(shí)施方案特定排除任何特征或特征的組合。

技術(shù)特征：

1.用于制備seq?id?no:1所示的amg?416的方法：

2.權(quán)利要求1的方法，其中所述切割和所述活化在同一容器中發(fā)生。

3.權(quán)利要求1的方法，其中所述樹脂-結(jié)合的肽與包含水、三氟乙酸、三異丙基硅烷和二吡啶二硫化物的溶液接觸。

4.權(quán)利要求1的方法，其中通過經(jīng)由將boc-d-arg-oh與pbfcl、naoh和nai混合，將boc-d-arg-oh轉(zhuǎn)化為boc-d-arg(pbf)-oh來合成d-arg(pbf)-oh。

5.權(quán)利要求4的方法，其還包括通過將boc-d-arg(pbf)-oh與hcl和ipac混合，將boc-d-arg(pbf)-oh轉(zhuǎn)化為d-arg(pbf)-oh。

6.用于制備amg?416的方法，其包括：

7.權(quán)利要求6的方法，其中所述切割和所述活化在同一容器中發(fā)生。

8.權(quán)利要求6的方法，其中所述樹脂-結(jié)合的肽與包含水、三氟乙酸、三異丙基硅烷和二吡啶二硫化物的溶液接觸。

9.用于制備amg?416的方法，其包括：

10.權(quán)利要求9的方法，其中所述肽與包含l-cys和三氟乙酸的水溶液接觸。

11.權(quán)利要求9的方法，進(jìn)一步包括凍干所述綴合產(chǎn)物。

12.權(quán)利要求9的方法，進(jìn)一步包括使所述綴合產(chǎn)物與包含ipa和hcl的水溶液接觸，從而產(chǎn)生包含amg?416hcl(seq?id?no:1)的沉淀物。

13.權(quán)利要求12的方法，進(jìn)一步包括通過hplc純化所述沉淀物。

14.用于制備amg?416的方法，包括：

15.權(quán)利要求14的方法，其中所述肽與l-cys和水在ipa中的水溶液接觸。

16.權(quán)利要求15的方法，進(jìn)一步包括使所述綴合產(chǎn)物與包含ipa和hcl的水溶液接觸，從而產(chǎn)生包含amg?416hcl(seq?id?no:1)的沉淀物。

17.用于合成d-arg(pbf)-oh的方法，包括：

18.權(quán)利要求17的方法，進(jìn)一步包括：

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及用于制備AMG416的方法。提供用于制備AMG416或其藥學(xué)上可接受的鹽的方法。AMG?416為合成的鈣敏感受體的八氨基酸選擇性肽拮抗劑。其開發(fā)作為患有慢性腎疾病?礦物質(zhì)和骨病癥(CKD?MBD)的血液透析患者中繼發(fā)性甲狀旁腺功能亢進(jìn)癥(SHPT)的靜脈內(nèi)治療。

技術(shù)研發(fā)人員：J·貝澤默,Y·陳,R·克羅克特,K·克羅斯利,S·崔,L·黃,S·瓊斯,A·勞爾,K·蘭加納桑
受保護(hù)的技術(shù)使用者：美國安進(jìn)公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/4/28