本發明屬于微生物降解領域，具體地說，涉及菌株 aureimonas?ureilytica?l12及其應用。

背景技術：

1、草甘膦（glyphosate）在1959年被化學合成，1971年開始用作農業除草劑，因其高效、廣譜、廉價等特點而廣泛應用于去除農作物中的雜草。現已發現它可清除超過上百種一年生雜草和60種多年生雜草，成為世界上應用最廣、產量最大的農藥品種，其年銷售量一直居農藥之首。但是隨著草甘膦在全球的推廣和使用，一些負面作用日趨明顯。大量使用的草甘膦會殘留于環境，而在環境中殘留的草甘膦不僅會對生態系統造成影響，破壞生態平衡，而且可能會對動物、植物和微生物產生不利影響。殘留在食物鏈中的草甘膦，通過生物富集作用進入人體，使人體內的濃度超過環境中濃度，甚至引起人體全身中毒，威脅人類健康。因此，如何消除草甘膦在土壤中的殘留成為人類亟待解決的問題。

2、殘留農藥的降解方法有物理降解、化學降解和生物降解。相比于物理降解和化學降解，微生物降解具有降解效率高、代謝途徑多、無二次污染的優勢，是目前清除土壤、水環境中殘留農藥的主要手段，能有效降低殘留農藥的危害。降解有機磷農藥的微生物有很多，包括細菌、真菌、放線菌和藻類。其中細菌由于其生理生化的多種適應能力，以及容易誘發突變菌株，在降解有機磷農藥的微生物中占有重要地位。利用微生物及其產生的降解酶降解環境中的有機磷農藥殘留已顯示出很好的效果，是近年來研究有機磷農藥降解的主要方向。

3、目前國內外獲得了許多能夠抗草甘膦、或能降解和利用草甘膦的微生物菌株，對消除草甘膦在自然界富集和阻止生態被破壞起到了重要作用，但是目前微生物降解草甘膦也因菌株的不同而產生了不同的效果，且目前的菌株存在退化問題，種類較少，嚴重制約了對草甘膦降解的微生物的研究。本研究從長芒莧草甘膦抗性種群中分離內生菌，并測定其草甘膦降解能力，旨在篩選可降解草甘膦的菌株以豐富菌庫。

技術實現思路

1、本發明的目的是提供一株可降解草甘膦的細菌—菌株 aureimonas?ureilytica?l12及其應用。

2、為了實現本發明目的，第一方面，本發明提供一株從草甘膦抗性長芒莧雄性植株的新鮮葉片中分離出的可降解草甘膦的菌株—冷水橙單胞菌l12，分類命名為 aureimonas? ureilytica，該菌株現已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，地址北京市朝陽區北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所，郵編100101，保藏編號cgmccno.?33169，保藏日期2024年12月23日。

3、第二方面，本發明提供一種微生物制劑，其包含選自所述菌株l12的菌體、菌粉、菌懸液或菌液提取物等中的一種或多種。

4、第三方面，本發明提供所述微生物制劑的制備方法，所述制備方法包括培養所述菌株l12的步驟。

5、進一步地，培養所述菌株l12的條件為：28℃，180rpm搖床黑暗條件下培養。

6、進一步地，利用改良富集培養基培養所述菌株l12。

7、所述改良富集培養基的配方為：葡萄糖1g/l，蛋白胨5g/l，硝酸鉀?1g/l和氯化鈉2g/l，草甘膦（添加至濃度為100mg/l）；ph值6.6-7.6。

8、第四方面，本發明提供所述菌株l12或所述微生物制劑在降解草甘膦中的應用。

9、第五方面，本發明提供一種降解草甘膦的方法，所述方法包括：將所述菌株l12接種到含草甘膦的改良富集培養基中。

10、在本發明的一個具體實施方式中，降解草甘膦的方法包括：將od600值為0.5的菌懸液（菌懸液中的活菌含量約為1.67×107cfu/ml）1ml接種到含100mg/l草甘膦的30ml改良富集培養基中，28℃，180rpm搖床黑暗條件下培養5天。

11、借由上述技術方案，本發明至少具有下列優點及有益效果：

12、本發明提供一株可降解草甘膦的細菌—菌株 aureimonas?ureilytica?l12，將od600值為0.5的菌懸液1ml接種到含100mg/l草甘膦的30ml改良富集培養基中，180rpm?28℃培養5天后，檢測培養上清液(0.5ml)中草甘膦含量，結果顯示該菌對草甘膦的降解率可達到85.44%。本發明提供的菌株l12豐富了農藥降解菌的種質資源庫，通過使用該菌株可以顯著降低草甘膦的環境殘留，減少其對生態系統和人類健康的危害。

技術特征：

1.菌株aureimonas?ureilytica?l12，保藏編號為cgmcc?no.?33169。

2.微生物制劑，其特征在于，包含選自權利要求1所述菌株l12的菌體、菌粉、菌懸液或菌液提取物中的一種或多種。

3.權利要求2所述微生物制劑的制備方法，其特征在于，所述制備方法包括培養所述菌株l12的步驟。

4.根據權利要求3所述的制備方法，其特征在于，培養所述菌株l12的條件為：28℃，180rpm搖床黑暗條件下培養。

5.根據權利要求3或4所述的制備方法，其特征在于，利用改良富集培養基培養所述菌株l12；

6.權利要求1所述菌株l12或權利要求2所述微生物制劑在降解草甘膦中的應用。

7.一種降解草甘膦的方法，其特征在于，所述方法包括：將權利要求1所述菌株l12接種到含草甘膦的改良富集培養基中；

8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，將od600值為0.5的菌懸液1ml接種到含100mg/l草甘膦的30ml改良富集培養基中，28℃，180rpm搖床黑暗條件下培養5天。

技術總結
本發明公開了菌株Aureimonas?ureilytica?L12及其應用。本發明從草甘膦抗性長芒莧雄性植株的新鮮葉片中分離出的可降解草甘膦的菌株—Aureimonas?ureilytica?L12，該菌對草甘膦的降解率高。本發明提供的菌株L12豐富了農藥降解菌的種質資源庫，通過使用該菌株可以顯著降低草甘膦的環境殘留，減少其對生態系統和人類健康的危害。

技術研發人員：張鳳娟,李俊,陳藝笑,劉明明,陳雪,豆二雅,沈志豪
受保護的技術使用者：河北大學
技術研發日：
技術公布日：2025/4/24