本發明涉及基因工程領域,特別是涉及水稻nb-arc蛋白osrpm-l1及其編碼基因在抗病育種中的應用。
背景技術:
1、真菌病害如稻瘟病造成農作物大規模減產,因此培育抗病作物是種植業的主要目標之一。已報道了不少與植物抗病的相關基因,包括效應分子基因和調控基因,他們來源于水稻、小麥、玉米、大豆等農作物以及模式植物擬南芥等。其中一些已作為目的基因用于作物抗病基因工程,成功培育出抗病水稻、小麥、玉米、大豆等。但是由于遺傳背景的差異,導致一些基因的應用障礙,因此仍然需要新的相關基因來滿足育種的需要。
2、水稻作為最重要的糧食作物之一,改善其抗病性,具有重要的理論及現實意義。
技術實現思路
1、本發明的目的是提供水稻nb-arc蛋白osrpm-l1及其編碼基因在抗病育種中的應用,以解決上述現有技術存在的問題,實驗結果表明,osrpm-l1基因敲除植株的感稻瘟病特性無顯著性變化,而osrpm-l1基因過表達植株更加抗稻瘟病,說明osrpm-l1蛋白正調控水稻對稻瘟病的抗性,可作為目的基因用于提高植物抗病性的分子育種。
2、為實現上述目的,本發明提供了如下方案:
3、本發明提供了一種水稻蛋白osrpm-l1在以下任一項中的應用:
4、(1)在調控水稻對稻瘟病抗性中的應用;
5、(2)在培育對稻瘟病抗性提高的轉基因水稻中的應用;
6、(3)在制備提高水稻對稻瘟病抗性的產品中的應用;
7、所述蛋白osrpm-l1的氨基酸序列如seq?id?no.2所示。
8、本發明還提供了一種所述的水稻蛋白osrpm-l1的編碼基因在以下任一項中的應用:
9、(1)在調控水稻對稻瘟病抗性中的應用;
10、(2)在培育對稻瘟病抗性提高的轉基因水稻中的應用;
11、(3)在制備提高水稻對稻瘟病抗性的產品中的應用;
12、所述編碼基因的核苷酸序列如seq?id?no.1所示。
13、本發明還提供了一種包含所述的編碼基因的重組載體在以下任一項中的應用:
14、(1)在調控水稻對稻瘟病抗性中的應用;
15、(2)在培育對稻瘟病抗性提高的轉基因水稻中的應用;
16、(3)在制備提高水稻對稻瘟病抗性的產品中的應用。
17、本發明還提供了一種包含所述的重組載體的工程菌在以下任一項中的應用:
18、(1)在調控水稻對稻瘟病抗性中的應用;
19、(2)在培育對稻瘟病抗性提高的轉基因水稻中的應用;
20、(3)在制備提高水稻對稻瘟病抗性的產品中的應用。
21、優選的是,在水稻中上調所述水稻蛋白osrpm-l1或其編碼基因的表達量,提高所述水稻對稻瘟病的抗性。
22、優選的是,所述在水稻中上調所述水稻蛋白osrpm-l1或其編碼基因的表達量的方法,包括構建所述水稻蛋白osrpm-l1的編碼基因的過表達載體,將所述過表達載體轉化至大腸桿菌,之后再侵染水稻植株的步驟。
23、本發明還提供了一種提高水稻對稻瘟病抗性的方法,包括在水稻中上調水稻蛋白osrpm-l1的編碼基因的表達水平,提高所述水稻對稻瘟病抗性的步驟;
24、所述水稻蛋白osrpm-l1的編碼基因的核苷酸序列如seq?id?no.1所示。
25、優選的是,所述上調水稻蛋白osrpm-l1的編碼基因的表達水平的方法,包括在水稻中過表達水稻蛋白osrpm-l1的編碼基因。
26、優選的是,所述在水稻中過表達水稻蛋白osrpm-l1的編碼基因的方法,包括以下步驟:
27、構建所述水稻蛋白osrpm-l1的編碼基因的過表達載體,將所述過表達載體轉化至大腸桿菌,之后再侵染水稻植株。
28、本發明還提供了一種對稻瘟病抗性提高的水稻的育種方法,包括以下步驟:
29、在水稻細胞中過表達水稻蛋白osrpm-l1的編碼基因,之后培育所述水稻細胞,并利用所述水稻細胞再生水稻,即得所述對稻瘟病抗性提高的水稻;
30、所述水稻蛋白osrpm-l1的編碼基因的核苷酸序列如seq?id?no.1所示。
31、本發明公開了以下技術效果:
32、本發明以kittake水稻為背景,構建了水稻蛋白osrpm-l1的編碼基因的敲除植株和過表達植株。接菌實驗證明,敲除osrpm-l1基因對水稻的抗病性的影響不具備統計學上的顯著性,而osrpm-l1基因的過表達植株比受體植株更加抗病;表明水稻蛋白osrpm-l1正調控植物的抗病性,其編碼基因osrpm-l1可作為目的基因用于提高植物抗病性的分子育種,具有廣闊的應用前景,對培育抗病性提高的水稻品種具有重要意義。
1.一種水稻蛋白osrpm-l1在以下任一項中的應用:
2.一種如權利要求1中所述的水稻蛋白osrpm-l1的編碼基因在以下任一項中的應用:
3.一種包含權利要求2中所述的編碼基因的重組載體在以下任一項中的應用:
4.一種包含權利要求3中所述的重組載體的工程菌在以下任一項中的應用:
5.如權利要求1-4任一項所述的應用,其特征在于,在水稻中上調所述水稻蛋白osrpm-l1或其編碼基因的表達量,提高所述水稻對稻瘟病的抗性。
6.如權利要求5所述的應用,其特征在于,所述在水稻中上調所述水稻蛋白osrpm-l1或其編碼基因的表達量的方法,包括構建所述水稻蛋白osrpm-l1的編碼基因的過表達載體,將所述過表達載體轉化至大腸桿菌,之后再侵染水稻植株的步驟。
7.一種提高水稻對稻瘟病抗性的方法,其特征在于,包括在水稻中上調水稻蛋白osrpm-l1的編碼基因的表達水平,提高所述水稻對稻瘟病抗性的步驟;
8.如權利要求7所述的方法,其特征在于,所述上調水稻蛋白osrpm-l1的編碼基因的表達水平的方法,包括在水稻中過表達水稻蛋白osrpm-l1的編碼基因。
9.如權利要求8所述的方法,其特征在于,所述在水稻中過表達水稻蛋白osrpm-l1的編碼基因的方法,包括以下步驟:
10.一種對稻瘟病抗性提高的水稻的育種方法,其特征在于,包括以下步驟: