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基于InDel標(biāo)記的辣椒‘THI-P×TP023-P’分子身份證構(gòu)建及應(yīng)用

文檔序號:41764061發(fā)布日期:2025-04-29 18:33閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種用于構(gòu)建辣椒‘thi-p×tp023-p’分子身份證的分子標(biāo)記引物組,其特征在于,包括如下12對indel標(biāo)記引物組,分別為:

2.權(quán)利要求1所述的indel分子標(biāo)記引物組在辣椒‘thi-p×tp023-p’種子純度鑒定中的應(yīng)用。

3.權(quán)利要求1所述的indel分子標(biāo)記引物組在辣椒‘thi-p×tp023-p’品種、thi-p和tp023-p真?zhèn)涡澡b定中的應(yīng)用。

4.一種鑒定辣椒‘thi-p×tp023-p’品種雜種純度以及辣椒‘thi-p×tp023-p’品種、thi-p和tp023-p真?zhèn)涡缘姆椒ǎ涮卣髟谟冢ɡ脵?quán)利要求1所述的indel分子標(biāo)記引物組對所述辣椒品種的待測樣本進(jìn)行pcr擴(kuò)增的步驟。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法,其特征在于,所述pcr擴(kuò)增的程序為:94℃預(yù)變性2min;94℃變性15s,52℃退火15s,72℃延伸35s,35次循環(huán);最后72℃繼續(xù)延伸10min。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法,其特征在于,所述pcr擴(kuò)增的體系為:2×magic?greentaq?supermix?5μl,10μm正向引物與反向引物各1.0μl,gdna模板10ng-100ng,加ddh2o至10μl。

7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法,其特征在于,分子標(biāo)記indel-chr01-1在‘thi-p×tp023-p’母本thi-p、‘thi-p×tp023-p’父本tp023-p中各擴(kuò)增出1條特征帶,條帶大小分別為150bp和178bp,‘thi-p×tp023-p’品種同時具有‘thi-p×tp023-p’母本thi-p和‘thi-p×tp023-p’父本tp023-p的兩個特征帶;分子標(biāo)記indel-pepchr02-2在‘thi-p×tp023-p’母本thi-p、‘thi-p×tp023-p’父本tp023-p中各擴(kuò)增出1條特征帶,條帶大小分別為為150bp和196bp,‘thi-p×tp023-p’品種同時具有‘thi-p×tp023-p’母本thi-p和‘thi-p×tp023-p’父本tp023-p的兩個特征帶;分子標(biāo)記indel-pepchr03-1在‘thi-p×tp023-p’母本thi-p、‘thi-p×tp023-p’父本tp023-p中各擴(kuò)增出1條特征帶,條帶大小分別為119bp和147bp,‘thi-p×tp023-p’品種同時具有‘thi-p×tp023-p’母本thi-p和‘thi-p×tp023-p’父本tp023-p的兩個特征帶;分子標(biāo)記indel-pepchr04-3在‘thi-p×tp023-p’母本thi-p、‘thi-p×tp023-p’父本tp023-p中各擴(kuò)增出1條特征帶,條帶大小分別為116bp和147bp,‘thi-p×tp023-p’品種同時具有‘thi-p×tp023-p’母本thi-p和‘thi-p×tp023-p’父本tp023-p的兩個特征帶;分子標(biāo)記indel-pchr05-6在‘thi-p×tp023-p’母本thi-p、‘thi-p×tp023-p’父本tp023-p中各擴(kuò)增出1條特征帶,條帶大小分別為191bp和268bp,‘thi-p×tp023-p’品種同時具有‘thi-p×tp023-p’母本thi-p和‘thi-p×tp023-p’父本tp023-p的兩個特征帶;分子標(biāo)記indel-chr06-4在‘thi-p×tp023-p’母本thi-p、‘thi-p×tp023-p’父本tp023-p中各擴(kuò)增出1條特征帶,條帶大小分別為177bp和150bp,‘thi-p×tp023-p’品種同時具有‘thi-p×tp023-p’母本thi-p和‘thi-p×tp023-p’父本tp023-p的兩個特征帶;分子標(biāo)記indel-pchr07-1在‘thi-p×tp023-p’母本thi-p、‘thi-p×tp023-p’父本tp023-p中各擴(kuò)增出1條特征帶,條帶大小分別為195bp和163bp,‘thi-p×tp023-p’品種同時具有‘thi-p×tp023-p’母本thi-p和‘thi-p×tp023-p’父本tp023-p的兩個特征帶;分子標(biāo)記indel-chr08-2在‘thi-p×tp023-p’母本thi-p、‘thi-p×tp023-p’父本tp023-p中各擴(kuò)增出1條特征帶,條帶大小分別為187bp和167bp,‘thi-p×tp023-p’品種同時具有‘thi-p×tp023-p’母本thi-p和‘thi-p×tp023-p’父本tp023-p的兩個特征帶;分子標(biāo)記indel-pepchr09-7在‘thi-p×tp023-p’母本thi-p、‘thi-p×tp023-p’父本tp023-p中各擴(kuò)增出1條特征帶,條帶大小分別為158bp和182bp,‘thi-p×tp023-p’品種同時具有‘thi-p×tp023-p’母本thi-p和‘thi-p×tp023-p’父本tp023-p的兩個特征帶;分子標(biāo)記indel-pepchr10-6在‘thi-p×tp023-p’母本thi-p、‘thi-p×tp023-p’父本tp023-p中各擴(kuò)增出1條特征帶,條帶大小分別為152bp和186bp,‘thi-p×tp023-p’品種同時具有‘thi-p×tp023-p’母本thi-p和‘thi-p×tp023-p’父本tp023-p的兩個特征帶;分子標(biāo)記indel-pchr11-10在‘thi-p×tp023-p’母本thi-p、‘thi-p×tp023-p’父本tp023-p中各擴(kuò)增出1條特征帶,條帶大小分別為136bp和235bp,‘thi-p×tp023-p’品種同時具有‘thi-p×tp023-p’母本thi-p和‘thi-p×tp023-p’父本tp023-p的兩個特征帶;分子標(biāo)記indel-pchr12-4在‘thi-p×tp023-p’母本thi-p、‘thi-p×tp023-p’父本tp023-p中各擴(kuò)增出1條特征帶,條帶大小分別為196bp和144bp,‘thi-p×tp023-p’品種同時具有‘thi-p×tp023-p’母本thi-p和‘thi-p×tp023-p’父本tp023-p的兩個特征帶。

8.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法,其特征在于,種子純度=檢測到的12種擴(kuò)增產(chǎn)物的帶型均同時具有辣椒雜交種‘thi-p×tp023-p’母本thi-p和父本tp023-p的帶型的個數(shù)/檢測種子總數(shù)×100%。


技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種基于InDel標(biāo)記的辣椒‘THI?P×TP023?P’分子身份證構(gòu)建及應(yīng)用,屬于分子鑒定技術(shù)領(lǐng)域;所述基于InDel標(biāo)記的‘THI?P×TP023?P’分子身份證包括覆蓋12條染色體的12對InDel標(biāo)記。本發(fā)明所述的辣椒‘THI?P×TP023?P’的12對InDel標(biāo)記可用于辣椒‘THI?P×TP023?P’種子純度,‘THI?P×TP023?P’、THI?P、TP023?P真?zhèn)涡澡b定,具有檢測時間短、準(zhǔn)確性高、可重復(fù)性好的優(yōu)點(diǎn),在收集的13個辣椒‘THI?P×TP023?P’近似品種中具有‘THI?P×TP023?P’的專一性。

技術(shù)研發(fā)人員:王飛,高升華,姚明華,李寧,尹延旭,周克貴,張濤,徐凱,王小迪,詹曉慧,袁偉玲,陳衛(wèi)芳
受保護(hù)的技術(shù)使用者:湖北省農(nóng)業(yè)科學(xué)院經(jīng)濟(jì)作物研究所
技術(shù)研發(fā)日:
技術(shù)公布日:2025/4/28
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