本技術涉及百合鱗莖腐爛病防治，具體涉及一種高效拮抗百合鱗莖腐爛病菌的生防細菌及其應用。

背景技術：

1、百合(lilium?brownii)是一種藥用和觀賞植物，其鱗莖具有潤肺止咳、寧心安神的功效。該植物在世界各地均有種植，隨著百合栽種面積的不斷擴大，病害問題日益嚴重。同時常年連作導致大量植株干枯死亡和地下鱗莖腐爛，產量和品質大幅下降，嚴重影響了百合的生產和種植效益。百合鱗莖腐爛病，也稱莖腐病，是引起連作障礙的重要病害，對產量和質量造成不同程度的損失。鐮刀菌(fusarium)和青霉菌(penicillium)是其主要病原菌之一。

2、目前，防控百合鱗莖腐爛病菌的主要方法是化學防控。這種方法見效快，但存在環境污染和可能導致百合鱗莖腐爛病菌產生耐藥性等問題。為克服化學方法的缺陷，可以采用生物防治方法替代。生物防治是一種環保、無污染的措施。用于防治病害的微生物主要包括真菌、細菌和放線菌等，其中細菌的應用最為廣泛。芽孢桿菌屬(bacillus?sp.)是一類重要的生防細菌，對多種病原真菌具有良好的生防效果。例如，解淀粉芽孢桿菌lzn01對尖孢鐮刀菌西瓜?；偷囊种坡蕿?7.1％；蠟樣芽孢桿菌(bacillus?cereus)mh778713能夠高效抑制番茄鱗莖腐爛病原菌鐮刀菌，使番茄鱗莖腐爛的發病比例從96％降至12％，同時對番茄的生長具有促進作用；萎縮芽孢桿菌(bacillus?atrophaeus)nx-12產生的fengycin可以高效抑制鐮刀菌黃瓜?；偷逆咦用劝l，并造成細胞壁損傷。不同的生防細菌在拮抗范圍上存在差異，因此需要根據具體的致病菌篩選其對應的生防細菌。然而，目前尚未見有針對龍牙百合鱗莖腐爛病原菌的生防細菌的開發和應用。

3、由此可見，具有成本低、繁殖快、無污染等特性的細菌制劑，已成為國內外拮抗百合鱗莖腐爛病菌的重要生物防控措施。針對百合鱗莖腐爛病菌的危害，篩選拮抗效果更好且更穩定的菌株，以及制備微生物制劑，對百合產業的健康發展至關重要。

技術實現思路

1、本發明的目的在于，提供一種高效拮抗百合鱗莖腐爛病菌的生防細菌及其應用，能夠高效抑制百合鱗莖腐爛病病原菌，例如鐮刀菌和青霉菌，該菌株可通過直接菌體灌根或發酵液灌根的方式進行應用。

2、本發明采取的第一種技術方案是：一種高效拮抗百合鱗莖腐爛病菌的生防細菌，所述生防細菌為一種能夠抑制百合鱗莖腐爛病病原菌的貝萊斯芽孢桿菌；所述貝萊斯芽孢桿菌為bacillus?velezensis?r12菌株，菌種保藏編號為cctcc?no：m?20241785。

3、進一步地，所述bacillus?velezensis?r12菌株的16s?rdna序列為：tgccttgcggctg?ctatacatgcaagtcgagcggacagatgggagcttgctccctgatgttagcggcggacgggtgagtaacacgtgggtaacctgcctgtaagactgggataactccgggaaaccggggctaataccggatgcttgtttgaaccgcatggttcagacataaaaggtggcttcggctaccacttacagatggacccgcggcgcattagctagttggtgaggtaacggctcaccaaggcaacgatgcgtagccgacctgagagggtgatcggccacactgggactgagacacggcccagactcctacgggaggcagcagtagggaatcttccgcaatggacgaaagtctgacggagcaacgccgcgtgagtgatgaaggttttcggatcgtaaagctctgttgttagggaagaacaagtgccgttcaaatagggcggcaccttgacggtacctaaccagaaagccacggctaactacgtgccagcagccgcggtaatacgtaggtggcaagcgttgtccggaattattgggcgtaaagggctcgcaggcggtttcttaagtctgatgtgaaagcccccggctcaaccggggagggtcattggaaactggggaacttgagtgcagaagaggagagtggaattccacgtgtagcggtgaaatgcgtagagatgtggaggaacaccagtggcgaaggcgactctctggtctgtaactgacgctgaggagcgaaagcgtggggagcgaacaggattagataccctggtagtccacgccgtaaacgatgagtgctaagtgttagggggtttccgccccttagtgctgcagctaacgcattaagcactccgcctggggagtacggtcgcaagactgaaactcaaaggaattgacgggggcccgcacaagcggtggagcatgtggtttaattcgaagcaacgcgaagaaccttaccaggtcttgacatcctctgacaatcctagagataggacgtccccttcgggggcagagtgacaggtggtgcatggttgtcgtcagctcgtgtcgtgagatgttgggttaagtcccgcaacgagcgcaacccttgatcttagttgccagcattcagttgggcactctaaggtgactgccggtgacaaaccggaggaaggtggggatgacgtcaaatcatcatgccccttatgacctgggctacacacgtgctacaatggacagaacaaagggcagcgaaaccgcgaggttaagccaatcccacaaatctgttctcagttcggatcgcagtctgcaactcgactgcgtgaagctggaatcgctagtaatcgcggatcagcatgccgcggtgaatacgttcccgggccttgtacacaccgcccgtcacaccacgagagtttgtaacacccgaagtcggtgaggtaaccttttaggagccagccgccgaaggtgaccc。

4、進一步地，所述百合鱗莖腐爛病病原菌包括鐮刀菌和青霉菌。

5、本發明采取的第二種技術方案是：如第一種技術方案所述的一種高效拮抗百合鱗莖腐爛病菌的生防細菌在防治百合鱗莖腐爛病中的應用。

6、進一步地，使用所述bacillus?velezensis?r12菌株菌體或所述bacillusvelezensis?r12菌株的發酵液制成防治制劑，進行百合鱗莖腐爛病的防治。

7、進一步地，使用所述bacillus?velezensis?r12菌體制備防治制劑，進行百合鱗莖腐爛病的防治的方法為：

8、s1：將活化的bacillus?velezensis?r12菌株接種于牛肉膏蛋白胨培養基中，在37℃、200r/min條件下震蕩培養24h，獲得發酵液；

9、s2：使用無菌生理鹽水稀釋成濃度od600＝0.8的菌懸液，按照重量比0.5～1.5％施加到含有百合鱗莖腐爛病病原菌的土壤中。

10、進一步地，使用所述bacillus?velezensis?r12菌株的發酵液制備防治制劑，進行百合鱗莖腐爛病的防治的方法為：將所述bacillus?velezensis?r12菌株在含有4g/lcacl2、12g/l玉米粉和15g/l豆粕的培養基發酵36h，離心去除菌體，過濾除菌，濾液按照重量比0.3～1％施加到含有百合鱗莖腐爛病病原菌的土壤中。

11、本發明的有益效果在于：本發明提供的bacillus?velezensis?r12菌株的作用譜廣泛，能夠高效拮抗鐮刀菌和青霉菌這兩種引起百合鱗莖腐爛病的主要病原菌，對fusarium?foetens?l1、fusarium?oxysporum和penicillium?janthinellum?f7的抑菌率分別為59.62％、55.3％和54.39％；bacillus?velezensis?r12菌劑環保、安全，可替代化學藥劑的使用。操作方法簡單，可采用bacillus?velezensis?r12菌體或者bacillusvelezensis?r12菌株發酵液進行灌根，以拮抗百合鱗莖腐爛病主要病原菌生長。