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一種脂肪酶突變體、編碼基因、載體及應用

文檔序號:41755516發布日期:2025-04-29 18:24閱讀:來源:國知局

技術特征:

1.一種脂肪酶calb突變體,其特征在于,所述突變體由序列如seq?id?no.1所示氨基酸經定點突變而來,所述突變的位點為以下一個:(1)第154位纈氨酸突變為異亮氨酸。

2.一種核酸分子,其特征在于,所述核酸分子編碼權利要求1所述的脂肪酶calb突變體。

3.一種重組載體,其特征在于,所述重組載體含有權利要求1所述的脂肪酶calb突變體的編碼序列。

4.一種重組基因工程菌,其特征在于,所述重組基因工程菌含有權利要求3所述的重組載體。

5.根據權利要求4所述的一種重組基因工程菌,其特征在于,所述重組基因工程菌以大腸桿菌為表達宿主。

6.如權利要求1所述的脂肪酶calb突變體在制備(s)-3-環己烯-1-甲酸中的應用。

7.根據權利要求6所述的應用,其特征在于,所述的應用為:將磷酸鹽緩沖溶液、3-環己烯-1-羧酸甲酯、含脂肪酶calb突變體編碼基因的重組基因工程菌經發酵培養獲得的濕菌體或濕菌體經超聲破碎后提取的粗酶液混合均勻,進行催化反應,得到(s)-3-環己烯-1-甲酸。

8.根據權利要求7所述的應用,其特征在于,催化反應的反應溫度為0~40℃,反應時間為2~12h。


技術總結
本發明屬于生物制藥和生物轉化領域,具體涉及一種脂肪酶突變體、編碼基因、載體及應用。本發明的脂肪酶CALB突變體是將如SEQ?ID?NO.1所示氨基酸序列第40位、134位、154位、189位、278位、281位采取單點突變或者組合突變獲得的。該突變體相比于野生型在催化外消旋3?環己烯?1?甲酸甲酯生產(S)?3?環己烯?1?甲酸反應時的立體選擇性大大提高。相比較于傳統化學法制備(S)?3?環己烯?1?甲酸,本發明提供的脂肪酶CALB突變體立體選擇性高,反應條件溫和,對環境友好,且對設備要求降低,大大減少了生產成本,在工業化應用中顯示出廣泛的應用前景。

技術研發人員:柳志強,蔡雪,崔杰,鄭裕國
受保護的技術使用者:浙江工業大學
技術研發日:
技術公布日:2025/4/28
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