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一種線粒體靶向的粘度熒光探針及其制備方法和應(yīng)用與流程

文檔序號(hào):11106343閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.一種線粒體靶向的粘度熒光探針,其特征在于,該探針?lè)肿拥姆肿邮綖椋篊37H43N4O3+,其結(jié)構(gòu)式如下所示:

2.一種權(quán)利要求1所述的粘度熒光探針的制備方法,其特征在于,它包括以下步驟:

1)將1eq的N,N-二乙基水楊醛,1eq的米氏酸溶于50mL乙醇中,攪拌過(guò)程中加入0.5mL哌啶,常溫反應(yīng)20min,然后90℃加熱回流反應(yīng)2h,用TCL板檢測(cè)反應(yīng),反應(yīng)完全后,冷卻至室溫,減壓過(guò)濾,真空干燥,得到粗產(chǎn)品,然后二氯甲烷溶解后通過(guò)柱色譜進(jìn)行分離純化得到化合物1-1;所述化合物1-1結(jié)構(gòu)式如下所示:

2)將1eq的化合物1-1溶于5mLDMF中,然后依次加入1eq的N-羥基琥珀酰亞胺,1.1eq的EDCI,常溫反應(yīng)12h,反應(yīng)完全后,將反應(yīng)液倒入100mL冰水中,有固體析出,減壓過(guò)濾,水洗,真空干燥,得到粗產(chǎn)品,用二氯甲烷溶解,通過(guò)柱色譜分離得到化合物1-2;所述化合物1-2結(jié)構(gòu)式如下所示:

3)將1eq的化合物1-2溶于10mLDCM中,然后依次加入1.5eq的3-溴丙胺氫溴酸,1.5eq的TEA,黑暗條件下,常溫反應(yīng)6h,反應(yīng)完全后,減壓旋干溶劑得粗產(chǎn)品,并通過(guò)柱色譜分離得到化合物1-3;所述化合物1-3的結(jié)構(gòu)式如下所示:

4)將1eq的化合物1-3和1eq的2,3,3,-三甲基吲哚溶于1mLDMF中,氮?dú)獗Wo(hù),100℃加熱回流反應(yīng)12h,反應(yīng)完全后,二氯甲烷萃取2次,飽和食鹽水洗滌2-3次,無(wú)水硫酸鈉干燥,減壓旋干溶劑得粗產(chǎn)品,并通過(guò)柱色譜分離得到化合物1-4;所述化合物1-4的結(jié)構(gòu)式如下所示:

5)將1eq的化合物1-4和1eq的4-二甲氨基苯甲醛溶于10mL乙醇中,氮?dú)獗Wo(hù),90℃加熱回流反應(yīng)10h,反應(yīng)完全后,二氯甲烷萃取2次,飽和食鹽水洗滌2-3次,無(wú)水硫酸鈉干燥,減壓旋干溶劑得粗產(chǎn)品,并用通過(guò)柱色譜分離得到目標(biāo)探針化合物。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法,其特征在于,所述步驟1)中柱色譜分離用洗脫劑配比為甲醇/二氯甲烷=1:20。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法,其特征在于,所述步驟2)中柱色譜分離用洗脫劑配比為甲醇/二氯甲烷=1:50。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法,其特征在于,所述步驟3)中柱色譜分離用洗脫劑配比為甲醇/二氯甲烷=1:30。

6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法,其特征在于,所述步驟4)中柱色譜分離用洗脫劑配比為甲醇/二氯甲烷=1:20。

7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法,其特征在于,所述步驟5)中柱色譜分離用洗脫劑配比為甲醇/二氯甲烷=1:15。

8.一種權(quán)利要求1所述的線粒體靶向的粘度熒光探針的應(yīng)用,其特征在于,該熒光探針可以應(yīng)用于水環(huán)境和生物細(xì)胞體系中粘度變化的傳感檢測(cè);所述的傳感檢測(cè)包含熒光檢測(cè),目視定性檢測(cè),細(xì)胞成像檢測(cè)。

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