巨桉組培苗的培育方法
【專利摘要】本發明公開了一種巨桉組培苗的培育方法，包括以巨桉組培苗葉片為外植體，對巨桉葉片進行愈傷組織誘導，對葉片愈傷組織進行不定芽分化培養以及進行生根培養的操作步驟，其特征在于在紅光和藍光照射條件下對巨桉葉片進行愈傷組織誘導；在紅光或藍光照射條件下對葉片愈傷組織進行不定芽分化培養；在綠光照射條件進行不定芽生長培養，再轉移到LED黃光下進行生根培養。本發明根據巨桉葉片在不同組培階段對光的需求差異及時調整光源，有效提高了愈傷組織誘導率、不定芽分化率及生根率。此外，本發明耗能低，且與傳統組培法相比能大幅度提高巨桉組培苗的產量并有效縮短出苗時間。
【專利說明】巨桉組培苗的培育方法
【技術領域】
[0001]本發明屬于植物栽培領域，具體涉及一種巨桉組培苗的培育方法。
【背景技術】
[0002]巨桉(Ellcalyplus grandis Hill ex Maid)原產于澳大利亞，為高大喬木,具有速生、豐產、抗鹽堿、耐寒等特點，是用材林、沿海防護林、生態林建設的主要樹種之一，近年在我國南方各省已建有一定規模的短輪伐期工業用材林基地，現在隨著西部大開發及長江、珠江防護林工程的實施，退耕還林的進展加快，巨桉種植面積逐步擴大，其種苗供應市場前景廣闊。巨桉種苗的繁殖多采用組織培養的方法，且技術成熟。
[0003]目前，白熾燈是組織培養的主要光源，但白熾燈能耗高，壽命短，含汞，易造成環境污染，且光質單一，不能滿足植物在組培不同生長階段對光質的需求差異。發光二級管(LED)是一種能發光的半導體電子原件，通過化學修飾方法，調整材料的能帶結構和禁帶寬度，可實現紅黃綠藍橙多色發光，滿足植物在組培不同階段對光質的需求差異，同時，LED消耗能量較同效的白熾燈減少80%，無有害金屬汞，使用壽命可達10萬小時，《國家基本公共服務體系“十二五”規劃》指出要大力支持發展LED產業，在規劃期間LED燈將大量替代傳統日光燈在各行各業廣泛推廣應用。

【發明內容】

[0004]為了解決上述問題，本發明提供一種既能滿足巨桉葉片組培不同階段對光質的需求差異，又能提高愈傷組織誘導率、不定芽分化率及有效苗得率的LED組培光源調控方法。為了實現本發明的目的，擬采用如下技術方案:
[0005]本發明一方面涉及一.種巨桉組培苗的培育方法，包括以巨桉組培苗葉片為外植體，對巨桉葉片進行愈傷組織誘導，對葉片愈傷組織進行不定芽分化培養以及進行生根培養的操作步驟，其特征在于在紅光和藍光照射條件下對巨桉葉片進行愈傷組織誘導；在紅光或藍光照射條件下對葉片愈傷組織進行不定芽分化培養；在綠光照射條件進行不定芽生長培養，再轉移到LED黃光下進行生根培養。
[0006]在本發明的一個優選實施方式中，所述紅光的光譜波長為620?760nm，所述藍光的光譜波長為435?492nm，所述黃光的光譜波長為520?650nm。
[0007]在本發明的另一個優選實施方式中，采用紅光和藍光共同照射條件下對巨桉葉片進行愈傷組織誘導，優選的，所述紅光和藍光的強度比為70-80: 30-20。
[0008]在本發明的一個優選實施方式中，所述的光源部分或者全部采用LED光源。
[0009]在本發明的另一個優選實施方式中，所述的光量均在90-120 μ mol *m-2 *s_1左右，光周期為14_18h.cf1，優選的，培養室相對濕度70% ±5%，溫度(24±1)°C。
[0010]本發明的組培光調控方法能有效地提高巨桉葉片的愈傷組織誘導率、不定芽分化率及有效苗得率，而且能有效縮短出苗時間，此外，本發明耗能低，平均成本增加少。【具體實施方式】
[0011]以下實施例用于說明本發明，但不用來限制本發明的范圍。
[0012]實施例1
[0013]選擇成熟種子于50-55°C溫水浸泡后自然冷卻，4-6h后無菌水沖洗2次，20%(體積比)NaClO消毒15min，無菌水沖洗3-4次，接種于1/2MS培養基上。
[0014]取上述組培苗葉片(葉寬0.5-Icm)為外植體，在葉片上剪3-4道傷口，且深達主脈。將處理好的葉片接入WPM+6-BAlmg -L+NAA0.2mg -1培養基中，暗培養5d后放置7個不同光質LED光源下培養誘導愈傷，每個光下放9個規格為90*15mm的培養皿，每個培養皿中接種12片葉。調節LED燈控軟件以及光源和植株的距離，使光量均在105 μ mol.π2 -s1左右，光周期為16h.cf1，培養40天。培養室相對濕度70% ±5%，溫度(24±1)°C。
[0015]其中，光源為購自杭州漢徽光電科技有限公司的LED燈。具體技術參數見表I。
[0016]表I不同光質LED光源的主要技術參數
[0017]
【權利要求】
1.一種巨桉組培苗的培育方法，包括以巨桉組培苗葉片為外植體，對巨桉葉片進行愈傷組織誘導，對葉片愈傷組織進行不定芽分化培養以及進行生根培養的操作步驟，其特征在于在紅光和/或藍光照射條件下對巨桉葉片進行愈傷組織誘導；在紅光或藍光照射條件下對葉片愈傷組織進行不定芽分化培養；在綠光照射條件進行不定芽生長培養，再轉移到LED黃光下進行生根培養。
2.根據權利要求1所述的巨桉組培苗的培育方法，所述紅光的光譜波長為620?760nm，所述藍光的光譜波長為435?492nm，所述黃光的光譜波長為520?650nm。
3.根據權利要求1或2所述的巨桉組培苗的培育方法，采用紅光和藍光共同照射條件下對巨桉葉片進行愈傷組織誘導，優選的，所述紅光和藍光的強度比為70-80: 30-20。
4.根據權利要求1-3任意一項所述的巨桉組培苗的培育方法，所述的光源部分或者全部采用LED光源。
5.根據權利要求1-4任意一項所述的巨桉組培苗的培育方法，所述的光量均在90-120 μ mo I.π 2.s—1左右，光周期為14_18h.cf1，優選的，培養室相對濕度70% +5%,--度(24±1)°C。
【文檔編號】A01H4/00GK103430839SQ201310331391
【公開日】2013年12月11日 申請日期:2013年8月1日 優先權日:2013年8月1日
【發明者】黃華宏, 林二培, 程龍軍, 童再康, 李許可 申請人:浙江農林大學